刺五加甘草制剂的检测方法及其应用与流程

文档序号:13222307阅读:来源:国知局
技术特征:
1.一种刺五加甘草制剂的检测方法,所述刺五加甘草制剂包括刺五加和甘草,其特征在于,所述方法通过薄层色谱法分别鉴定刺五加和甘草来对刺五加甘草制剂进行定性检测,通过高效液相色谱法分别测定紫丁香苷和甘草酸的含量来对刺五加甘草制剂进行定量检测。2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述薄层色谱法中以异嗪皮啶为对照,以三氯甲烷-甲醇-水为展开剂来鉴定刺五加甘草制剂中的刺五加,所述三氯甲烷-甲醇-水的体积比比例为(18-20):(0.8-1.2):(0.08-0.12),优选为19:1:0.1。3.根据权利要求1或2所述的检测方法,其特征在于,所述薄层色谱法中以甘草为对照,以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂来鉴定刺五加甘草制剂中的甘草,所述乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水的体积比比例为(12-18):(0.8-1.2):(0.8-1.2):(1.8-2.3),优选为15:1:1:2。4.根据权利要求1-3中任意一项所述的检测方法,其特征在于,所述薄层色谱法包括如下步骤来对刺五加甘草制剂中的刺五加进行定性检测:1)向1-5g、优选1.5-3g、更优选2.5g刺五加甘草制剂中加甲醇10-100ml,优选为50ml,加热回流并滤过,蒸干滤液,残渣加水10ml使溶解,用三氯甲烷提取1-5次,每次3-25ml,优选用三氯甲烷提取2次,每次10ml,然后合并三氯甲烷液,蒸干,向残渣加甲醇0.5-3.0ml,优选1ml使溶解,作为供试品;2)取异嗪皮啶对照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品;3)取供试品和对照品各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷-甲醇-水为展开剂展开,所述三氯甲烷-甲醇-水的体积比比例为(18-20):(0.8-1.2):(0.08-0.12),优选为19:1:0.1,然后取出,晾干,置于365nm紫外波长下检视。5.根据权利要求1-4中任意一项所述的检测方法,其特征在于,所述薄层色谱法包括如下步骤来对刺五加甘草制剂中的甘草进行定性检测:1)向0.5-5g、优选1-3g、更优选1.6g刺五加甘草制剂中加水10-100ml、优选40ml使溶解,用正丁醇振摇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,每次20ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇5ml使溶解,作为供试\t品;2)取甘草对照药材,加乙醚40ml,加热回流并滤过,弃去醚液,向药渣加甲醇30ml,加热回流并滤过,滤液蒸干,残渣加水40ml使溶解,用正丁醇振摇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用水洗涤3次,每次20ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇5ml使溶解,作为对照品;3)取供试品和对照品各2μl,分别点于同一用1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水为展开剂展开,所述乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水的体积比比例为(12-18):(0.8-1.2):(0.8-1.2):(1.8-2.3),优选为15:1:1:2,然后取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,置于365nm紫外波长下检视。6.根据权利要求1-5中任一项所述的检测方法,其特征在于,通过所述高效液相色谱法来测定紫丁香苷的含量是以乙腈为流动相A,以水为流动相B,并且按如下规定进行梯度洗脱:当时间为0~7分钟时,流动相A的体积百分比为8-12%,流动相B的体积百分比为92~88%,当时间为8~13分钟时,流动相A的体积百分比为35-45%,流动相B的体积百分比为65-55%,当时间为14~20分钟时,流动相A的体积百分比为8-12%,流动相B的体积百分比为92~88%,优选按如下规定进行梯度洗脱,当时间为0~7分钟时,流动相A的体积百分比为11%,流动相B的体积百分比为89%,当时间为8~13分钟时,流动相A的体积百分比为40%,流动相B的体积百分比为60%,当时间为14~20分钟时,流动相A的体积百分比为11%,流动相B的体积百分比为89%,并且检测波长为265nm;优选的,理论板数按紫丁香苷峰计算不低于5000;优选的,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。7.根据权利要求1-6中任一项所述的检测方法,其特征在于,通过所述高效液相色谱法来测定甘草酸的含量是以体积比比例为(65~70):(30~35):(0.5~1.5)\t的甲醇-醋酸铵溶液-冰醋酸为流动相,其中所述醋酸铵溶液中醋酸铵的浓度为0.2mol/L,优选体积比比例为(67:33:1)的甲醇-醋酸铵溶液-冰醋酸为流动相,并且检测波长为250nm;优选的,理论板数按甘草酸峰计算不低于2000;优选以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。8.根据权利要求1-7中任一项所述的检测方法,其特征在于,通过所述高效液相色谱法来测定紫丁香苷的含量包括如下步骤:1)制备对照品:取紫丁香苷对照品并加入甲醇制成每1ml含36~44μg紫丁香苷的溶液,制得对照品;2)制备供试品:取刺五加甘草制剂0.45~0.55g,用50%甲醇20ml溶解,超声处理30min,冷却后加50%甲醇定容至25ml体积,摇匀,过滤,取续滤液,制得供试品,其中所述超声处理的功率为200W~300W,优选为250W,频率为40~60KHz,优选为50kHz;3)分别精确吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定。9.根据权利要求1-8中任一项所述的检测方法,其特征在于,通过所述高效液相色谱法来测定甘草酸的含量包括如下步骤:1)制备对照品:取甘草酸铵对照品9~11mg,加流动相40~45ml,超声处理使溶解,冷却后,加流动相定容至50ml体积,摇匀,制得对照品。2)制备供试品:取刺五加甘草制剂0.36~0.44g,加流动相,超声处理30分钟,取出,放冷,加流动相稀释至50ml体积,摇匀,即供试品,其中所述超声处理的功率优选为200W~300W,优选为250W,频率为40~60KHz,优选为50kHz。3)分别精确吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定。10.根据权利要求1-9中任意一项所述的检测方法,其特征在于,刺五加甘草制剂中刺五加的含量为每g刺五加甘草制剂中不少于2.1mg刺五加,甘草的含量为每g刺五加甘草制剂中不少于30mg甘草,所述刺五加甘草制剂优选为粉剂、丸剂、喷雾剂、颗粒剂、软膏剂、液剂和吸入剂中任意一种或多种形式。11.根据权利要求1-10中任意一项所述的检测方法在制备刺五加甘草制剂过程中进行的质量控制中的应用。
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