直接免疫组织化学测定的制作方法

文档序号:11141999阅读:来源:国知局

技术特征:

1.用于检测组织中的目标分析物的方法,其包括:

(a)使包含所述目标分析物的所述组织与包含含有多个酶分子和识别所述目标分析物的抗体的聚合的-酶/抗体缀合物的聚合的-酶/抗体缀合物接触以形成包含所述目标分析物和所述聚合的-酶/抗体缀合物的复合体;

(b)基本上移除不形成所述复合体的所述聚合的-酶/抗体缀合物;

(c)使所述组织与所述多个酶分子的底物接触,从而检测所述目标分析物。

2.权利要求1所述的方法,进一步包括在步骤(a)之前的封闭步骤,其中所述封闭步骤包括使所述组织与封闭剂接触。

3.权利要求1或2所述的方法,其中所述组织在包含醛的固定液中固定。

4.权利要求3所述的方法,其中所述固定液包括福尔马林。

5.权利要求1-4中任一项所述的方法,其中所述组织被石蜡包埋。

6.权利要求1-2中任一项所述的方法,其中所述组织是冷冻的组织。

7.权利要求1-6中任一项所述的方法,其中所述组织是组织切片、临床涂片或培养的细胞或组织。

8.权利要求7所述的方法,其中所述组织切片选自哺乳动物的如下器官的组织切片:脑、肾上腺、结肠、小肠、胃、心脏、肝脏、皮肤、肾脏、肺、胰腺、睾丸、卵巢、前列腺、子宫、甲状腺和脾脏。

9.权利要求1-8中任一项所述的方法,其中所述酶分子选自:β-D-半乳糖苷酶、葡萄糖氧化酶、辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、β-内酰胺酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、脲酶、尿酸酶、超氧化物歧化酶、荧光素酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶、半乳糖氧化酶、乙酰胆碱酯酶、肠激酶、酪氨酸酶和黄嘌呤氧化酶。

10.权利要求1-9中任一项所述的方法,其中所述聚合的-酶/抗体缀合物包括每个聚合的-酶/抗体缀合物至少6个酶分子。

11.权利要求10所述的方法,其中所述聚合的-酶/抗体缀合物包括每个聚合的-酶/抗体缀合物大约6个和大约80个之间的酶分子。

12.权利要求1-11中任一项所述的方法,其中步骤(a)在大约15℃和大约37℃之间的孵育温度下进行。

13.权利要求1-12中任一项所述的方法,其中步骤(a)进行大约3分钟和大约30分钟之间的孵育周期。

14.权利要求13所述的方法,其中所述孵育周期在大约5分钟和大约15分钟之间。

15.权利要求2所述的方法,其中所述封闭剂包括脱脂乳、BSA、冷的鱼皮明胶、酪蛋白或动物血清。

16.制造聚合的-酶/抗体缀合物的方法,其包括:

(a)将包含多个酶分子的聚合的-酶缀合至抗体。

17.权利要求16所述的方法,其中所述抗体是治疗性抗体。

18.利用试剂治疗患有疾病的个体的方法,其包括a)使用根据权利要求1-17中任一项所述的方法的包含缀合至识别目标分析物的抗体的多个酶分子的聚合的-酶/抗体缀合物检测所述目标分析物的存在。

19.权利要求18所述的方法,其中所述试剂是治疗性抗体。

20.权利要求19所述的方法,其中特异性地结合所述目标分析物的所述抗体和所述治疗性抗体是相同的。

21.聚合的-酶/抗体缀合物,其包括多个酶分子和治疗性抗体。

22.试剂盒,其包括

(a)权利要求21所述的聚合的-酶/抗体缀合物。

23.权利要求22所述的试剂盒,进一步包括所述多个酶分子的底物。

24.权利要求22或23所述的试剂盒,进一步包括根据权利要求1-20中任一项的使用说明书。

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