本发明属于功能材料技术领域，具体涉及一种木聚糖试纸及其制备方法。
背景技术：
木聚糖是植物细胞中半纤维素的主要成分，占植物细胞干重的35％，是一种丰富的生物质资源，是自然界中除纤维素之外含量最丰富的多糖。然而自然界中很大一部分木聚糖未被有效利用，造成很大的资源浪费。
对木聚糖含量的测定实验室常用酸水解法和酶解法，但都会受到一定条件的限制。木聚糖酶是可将木聚糖降解为单糖和寡糖的水解酶。一直以来，其在造纸、食品、饲料、能源等工业都有着较为重大的应用价值，因而引起科研工作者的广泛关注。随着对木聚糖的研究和发展，如何更加便捷地检测木聚糖含量成为一个十分重要的课题。
试纸，指用化学药品浸渍过的、可通过其颜色变化检验液体或气体中某些物质存在的一类纸。各种试纸已经深入到各个领域中，并因便利性及廉价性被广泛认同和接受。但是木聚糖试纸的制备工艺仍在探索中。
技术实现要素：
为解决现有技术的缺点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种木聚糖试纸的制备方法。
本发明的另一目的在于提供一种由上述制备方法制得的木聚糖试纸。
本发明目的通过以下技术方案实现：
一种木聚糖试纸的制备方法，包括以下制备步骤：
(1)配制DNS显色剂及pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，在此基础上配制木聚糖标准溶液；并在上述pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和木聚糖标准溶液的基础上，配制不同浓度梯度的木聚糖溶液；
(2)标定木聚糖酶标准品酶活力，并配制一定浓度的木聚糖酶溶液；
(3)选取中速定性滤纸为基纸，将步骤(2)所配制的一定浓度的木聚糖酶溶液涂覆在中速定性滤纸上，在室温下晾干，裁切成10mm×50mm大小，得到木聚糖试纸I；
(4)将DNS显色剂浸润到另一张中速定性滤纸上，并且在40℃条件下进行避光干燥，完全干燥后，表面涂覆一定量的氧化钙，裁切成10mm×50mm大小，制备出木聚糖试纸II；木聚糖试纸I和木聚糖试纸II叠合使用，即为木聚糖试纸；
(5)将多张木聚糖试纸I分别浸泡在不同浓度梯度的木聚糖溶液(优选2.00mL)中，反应5min后取出；分别将木聚糖试纸II置于反应后的木聚糖试纸I下方，反应5min，根据试纸的颜色，制备试纸比色卡；
(6)根据对比比色卡来确定步骤(4)所述木聚糖试纸的测定范围。
优选地，步骤(1)所述DNS显色剂配制方法如下：称取3,5-二硝基水杨酸(10.0土0.10)g，置于约600mL水中，逐渐加入氢氧化钠10.0g，在50℃水浴中(磁力)搅拌溶解，再依次加入酒石酸甲钠200.0g、苯酚(重蒸)2.0g和无水亚硫酸钠5.0g，待全部溶解并澄清后，冷却至室温，用水定容至1000mL，过滤。贮存于棕色试剂瓶中，于暗处放置7d后使用。
优选地，步骤(1)所述pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制方法如下：称取三水乙酸钠23.14g，加入冰乙酸1.70mL。再加水溶解，定容至2000mL。测定溶液的pH，如果pH偏离5.50，再用0.1mol/L的乙酸溶液或者0.1mol/L的乙酸钠溶液调节至5.50。乙酸-乙酸钠缓冲溶液的浓度为0.1mol/L。
步骤(1)所述木聚糖标准溶液的配制方法如下：称取木聚糖1.000g，加入0.32g氢氧化钠，再加入90mL水，磁力搅拌，同时加热，直至木聚糖完全溶解；然后停止加热，继续搅拌30min，加入0.5mL冰乙酸；继续磁力搅拌，同时测定其pH；如果pH为5.50，用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至100mL，如果pH偏离5.50，再用甲液或乙液调节至pH＝5.50，然后再用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至100mL，得到所述木聚糖标准溶液，浓度为10mg/mL。
步骤(1)所述不同浓度梯度木聚糖溶液的配制方法如下：用移液管精确移取10mL 100mg/mL木聚糖标准溶液，用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液稀释至100mL，定容摇匀，得到10mg/mL的木聚糖溶液。用移液管精确移取10mL10mg/mL木聚糖溶液，用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液稀释至100mL，定容摇匀，得到1mg/mL的木聚糖溶液。
优选地，步骤(2)标定木聚糖酶标准品酶活力的方法参照《GBT23874-2009饲料添加剂木聚糖酶活力的测定——分光光度法》。
步骤(2)所述木聚糖酶标准溶液的配制方法如下：确定木聚糖酶标准品酶活力之后，计算配制1000U/mL所需标准品的用量，称量精确至0.001g。加入pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，磁力搅拌30min，再用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至，4℃避光保存1h，1000g离心5min，取上清液。
优选地，步骤(4)所述的中速定性滤纸的直径为7cm，表面涂覆的氧化钙为0.10g/面；氧化钙为粉末状。
优选地，步骤(5)所述检测木聚糖试纸比色卡通过纸数码相机进行拍摄显色反应后的试纸来制备。
一种木聚糖试纸，通过以上方法制备得到。使用时将木聚糖试纸I浸泡在待测木聚糖溶液中，反应5min后取出；然后将木聚糖试纸II置于反应后的木聚糖试纸I下方，反应5min，将试纸与比色卡对比，即可确定待测木聚糖溶液的浓度范围。
与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：
(1)本发明的检测碱性木聚糖的试纸其制备方法制备工艺简单，易于操作，适于工业化生产；
(2)本发明制得的木聚糖试纸能够对样品中木聚糖含量做半定量检测，具有良好的应用前景。
附图说明
图1为实施例1的试纸结构示意图。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1：
以商品木聚糖酶CAS#9025-57-4为例，该木聚糖酶标示酶活力为1800万U/g。
(1)配制DNS显色剂，pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲液，并在此基础上配制木聚糖标准溶液及不同浓度梯度的木聚糖溶液；
DNS显色剂的配制方法如下：称取3,5-二硝基水杨酸(10.0土0.10)g，置于约600mL水中，逐渐加入氢氧化钠10.0g，在50℃水浴中(磁力)搅拌溶解，再依次加入酒石酸甲钠200.0g、苯酚(重蒸)2.0g和无水亚硫酸钠5.0g，待全部溶解并澄清后，冷却至室温，用水定容至1000mL，过滤。贮存于棕色试剂瓶中，于暗处放置7d后使用。
pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液的配制方法如下：称取三水乙酸钠23.14g，加入冰乙酸1.70mL。再加水溶解，定容至2000mL。测定溶液的pH，如果pH偏离5.50，再用0.1mol/L的乙酸溶液或者0.1mol/L的乙酸钠溶液调节至5.50。
木聚糖标准溶液的配制方法如下：称取木聚糖1.000g，加入0.32g氢氧化钠，再加入90mL水，磁力搅拌，同时加热，直至木聚糖完全溶解；然后停止加热，继续搅拌30min，加入0.5mL冰乙酸；继续磁力搅拌，同时测定其pH；如果pH为5.50，用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至100mL，如果pH偏离5.50，再用甲液或乙液调节至pH＝5.50，然后再用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至100mL，得到所述木聚糖标准溶液，浓度为100mg/mL。
不同浓度梯度木聚糖溶液的配制方法如下：用移液管精确移取10mL100mg/mL木聚糖标准溶液，用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液稀释至100mL，定容摇匀，得到10mg/mL的木聚糖溶液。用移液管精确移取10mL 10mg/mL木聚糖溶液，用pH＝5.50的乙酸-乙酸钠缓冲溶液稀释至100mL，定容摇匀，得到1mg/mL的木聚糖溶液。
(2)依据《GBT23874-2009饲料添加剂木聚糖酶活力的测定——分光光度法》标定样品木聚糖酶的活力，得到的结果为1650万U/g。准确称取0.6061g样品，用pH＝5.50乙酸-乙酸钠缓冲液稀释至1000mL，定容摇匀。此溶液中木聚糖酶活性为10000U/mL。用移液管移取10.0mL 10000U/mL木聚糖酶溶液，用pH＝5.50乙酸-乙酸钠缓冲溶液定容至100mL，此溶液中木聚糖酶活性为1000U/mL。
(3)将1000U/mL的木聚酶糖溶液涂覆在中速定性滤纸上，并且在室温下晾干，完全干燥后裁切成10mm×50mm大小，制备出试纸I，如图1所示；
(4)将DNS显色剂浸润到另一张直径为7cm的中速定性滤纸上，并且在40℃条件下进行避光干燥，完全干燥后，滤纸的每面涂覆0.10g的氧化钙，裁切成10mm×50mm大小，制备出试纸II，如图1所示；
(5)将多张试纸I分别浸泡在2.00mL不同浓度梯度的木聚糖溶液中，反应5min后取出；分别将木聚糖试纸II置于取出的木聚糖试纸I下方，如图1所示，反应5min，通过数码相机拍照得到木聚糖试纸比色卡；
(7)依据比色卡，木聚糖浓度＞100mg/mL，100mg/mL～10mg/mL，10mg/mL～1mg/mL，＜1mg/mL范围内可以通过比色卡较易辨别，因此此工艺制备得到的木聚糖试纸测试范围为＞100mg/mL，100mg/mL～10mg/mL，10mg/mL～1mg/mL，＜1mg/mL。将木聚糖试纸I浸泡在待测木聚糖溶液中，反应5min后取出；然后将木聚糖试纸II置于反应后的木聚糖试纸I下方，反应5min，将试纸与比色卡对比，即可确定待测木聚糖溶液的浓度范围。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。