一种药代动力学早期成药性评估方法与流程

文档序号:12657487阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种药物的药代动力学早期成药性评估方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1.先建立待评估药物的UHPLC-MS/MS分析方法,再建立MDR1-MDCKII细胞筛选模型,考察P-gp抑制剂对待评估药物的转运影响;

S2.建立并验证UHPLC-MS/MS测定大鼠血浆中药物浓度的分析方法,并测定药物在大鼠体内的绝对生物利用度,计算药代动力学参数;

S3.采用超滤法分离药物,结合UHPLC-MS/MS测定药物的体内外血浆蛋白结合率;

S4.通过“cocktail”法测定药物对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶亚型活性的影响;

S5.采用肝微粒法以及UHPLC-MS/MS分析药物的生物转化情况。

2.根据权利要求1所述药物的药代动力学早期成药性评估方法,其特征在于,包括如下步骤:

S1.先建立待评估药物及阳性药的UHPLC-MS/MS分析方法,再建立并通过阳性药来验证MDR1-MDCKII细胞筛选模型,考察P-gp抑制剂对待评估药物的转运影响;

S2.建立并验证测定大鼠血浆中待评估药物浓度的UHPLC-MS/MS分析方法,通过灌胃或/和静脉给药测定待评估药物在大鼠体内的绝对生物利用度,用非房室模型法计算动代动力学参数;

S3.采用超滤法分离药物,结合UHPLC-MS/MS测定待评估药物的体内外血浆蛋白结合率;

S4.建立并验证体外肝微粒体探针药物的UHPLC-MS/MS分析方法,结合阳性药考察待评估药物对六种大鼠肝微粒体细胞色素P450酶亚型活性的影响;

S5.将待评估药物的体外肝微粒体孵育样本和大鼠静脉注射给药后的生物样本经固相萃取后进行UHPLC-MS/MS分析,测定待评估药物的结构及其代谢产物,研究分析待评估药物的生物转化。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤S1所述阳性药为地高辛。

4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤S1所述P-gp抑制剂为维拉帕米。

5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,当待评估药物为靶向抗肿瘤Aurora激酶抑制剂Ly-7u时:

步骤S1或S2所述UHPLC-MS/MS分析方法中,:内标均为Ly-7z,质谱条件为:离子源ESI,选择反应监测模式,监测离子为ESI+:m/z 410→353(Ly-7u),m/z 457→368(Ly-7z);

步骤S1所述UHPLC-MS/MS分析方法中,液相条件为:分离柱XTerra MS C18色谱柱;流动相为:体积比1:9的0.1%甲酸水-甲醇,流速为300 μL/min,柱温为室温,分析时间为3.0min;

步骤S2所述UHPLC-MS/MS分析方法中,液相条件为:分析柱hypersil gold C18 色谱柱;流动相为甲醇(A)-水(B),水(B)中含0.1%甲酸和5mM的乙酸铵,A相、B相百分比之和为100%;流动相梯度洗脱条件为:以A相的百分比计,0~1 min,5%~90% A;1~4 min,90%~90% A;4~4.1 min,90%~5% A;4.1~5 min,90%~90% A;流速为 300 µL/min;柱温为室温,分析时间为5.0 min。

6. 根据权利要求2所述的方法,其特征在于,当待评估药物为8-羟基喹啉衍生物83b1时,步骤S1或S2所述UHPLC-MS/MS分析方法为:以氯雷他定为内标,质谱条件为:离子源ESI,选择反应监测模式,监测离子为ESI+:m/z 321.96→m/z 162.84(83b1);m/z 383.02→m/z 259.12(氯雷他定);液相条件为:色谱柱C18 XTerra MS;流动相:体积比为9:1的乙腈-1%甲酸水;流速0.3 mL·min-1;进样量5 μL;柱温40 ℃,分析时间为2.0 min。

7. 根据权利要求2所述的方法,其特征在于,当待评估药物为靶向抗肿瘤Aurora激酶抑制剂Ly-7u或8-羟基喹啉衍生物83b1时,步骤S4所述UHPLC-MS/MS分析方法的条件为:质谱条件:离子源ESI,选择反应监测模式(SRM),监测离子为ESI+:m/z 152→110(扑热息痛),m/z 287→171(4-羟基甲苯磺丁脲),m/z 362→214(5-羟基奥美拉唑);m/z 258→157(氧去甲基右美沙芬),m/z 345→284(氧化硝苯地平),m/z 383→262(氯雷他定);ESI-:m/z 184→120(6-羟基氯唑沙宗);液相条件:分离柱C18 XTerra MS 分析柱(5 μm, 100×2.1mm. Waters, USA);流动相为:甲醇:水(含0.1%甲酸)(70:30,v/v),流速为300μL/min,柱温为室温,分析时间为3.5 min。

8.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤S4所述阳性药为VX-680。

9.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤S4所述六种大鼠肝微粒体细胞色素P450酶亚型分别为CYP2E1、CYP2C9、CYP1A2、CYP2C19、CYP2D1和CYP3A4。

10.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,步骤S4所述外肝微粒体探针药物为扑热息痛、4-羟基甲苯磺丁脲、5-羟基奥美拉唑、氧去甲基右美沙芬、氧化硝苯地平、氯雷他定和6-羟基氯唑沙宗。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1