一种定量测量心脏肌钙蛋白I的侧流测试片和试剂盒的制作方法

本实用新型涉及检测检验
技术领域：
，具体地涉及一种定量测量待测物的侧流测试片和试剂盒。
背景技术：
：免疫检测领域中，胶体金免疫层析法(GICA)快速、简便、成本低廉、无需仪器，非专业人士也可操作，只需肉眼观察即可，使急诊、基层医院、病人床边和现场等远离大型实验室的地方开展相关检测成为可能，所以应用范围相当广泛。完整的心脏组织中，心脏肌钙蛋白I(cTnI)的胞内水平变化可以用作心脏损伤存在的指示。以急性心肌梗塞AMI为例，其发病后1-6小时是介入手术治疗的黄金时间，快速诊断发病6小时内的早期AMI是治疗的关键环节，因此，心肌损伤生化标志物的检测显得尤为重要。其中，肌钙蛋白I(cTnI)是常用的心肌损伤标志物之一，cTnI不能透过细胞膜进入血循环，故健康人血内不含或含极低量的cTnI。由于cTnI对心肌细胞损伤有高度的敏感性和特异性，被人们认为是诊断AMI的“金标准”。而现有的胶体金免疫层析方法只用于定性或半定量检测(根据检测线灰度深浅定量)，灵敏度偏低，不能有效地在发病早期即做出有效判断，导致错过黄金抢救时间。因此，本领域急需对现有的胶体金层析方法进行变革，在保持其诸如快捷、简便、成本低廉等原有的一切优势的前提下，又赋予其高灵敏度和定量准确的新优势，进一步深入而广泛地扩展其应用领域。技术实现要素：本实用新型提供了一种用于定量检测样品中的人血清肌钙蛋白I的侧流测试片，以及定量检测人血清肌钙蛋白I的装置。本实用新型第一方面，提供一种定量测量心脏肌钙蛋白I的侧流测试片，所述侧流测试片包括：(i)基片；(ii)一加样区，所述加样区位于所述基片的一个主表面之上且位于所述侧流测试片一端并用于加入待测样品；(iii)一样品吸收区，所述样品吸收区位于所述基片的所述主表面之上且位于所述侧流测试片另一端并用于吸收待测样品；(iv)一心脏肌钙蛋白I结合区，所述心脏肌钙蛋白I结合区位于所述基片的所述主表面之上且与所述加样区相邻且位于流动方向下游的心脏肌钙蛋白I结合区，并且所述心脏肌钙蛋白I结合区为负载有被吸光物质标记的抗所述人血清肌钙蛋白I的第一单克隆抗体Ab1；(v)一心脏肌钙蛋白I的荧光测试区，所述的荧光测试区位于所述基片的所述主表面之上且与所述心脏肌钙蛋白I结合区相邻且位于流动方向下游，并且所述荧光测试区设有用于捕获心脏肌钙蛋白I与第一单克隆抗体Ab1的复合物且负载抗所述人血清肌钙蛋白I的第二单克隆抗体Ab2的检测线；以及(vi)一对照区，所述对照区位于所述基片的所述主表面之上且位于所述荧光测试区和样品吸收区之间。在另一优选例中，所述的荧光测试区还设有位于荧光测试区上表面的荧光涂层。在另一优选例中，所述的荧光测试区还设有位于荧光测试区与所述基片之间的荧光涂层。在另一优选例中，所述的基片的厚度为0.1-5mm。在另一优选例中，所述的侧流测试片的总厚度为0.3-20mm。在另一优选例中，所述的侧流测试片的总厚度为0.5-15mm。在另一优选例中，所述的侧流测试片的长度为2-20cm，较佳地3-15cm，更佳地5-10cm。在另一优选例中，所述的侧流测试片的宽度为0.4-5cm，较佳地0.6-4cm，更佳地0.8-2.5cm。在另一优选例中，所述的测试线设置于所述的心脏肌钙蛋白I的荧光测试区的中部。在另一优选例中，所述的测试线的宽度为1-5mm，较佳地1-3mm。在另一优选例中，所述侧流测试片包括：(vii)一标准荧光采集区，所述标准荧光采集区位于所述基片的所述主表面之上且位于荧光测试区中，并且，所述标准荧光采集区位于所述测试线与样品吸收区之间。在另一优选例中，所述的荧光测试区可以是自带荧光的基材构成，或额外地负载有荧光物质、或额外地施涂荧光涂层而可以在未测试前，在激发光照射下，在所述检测线的上游区域、所述检测线以及所述检测线下游区域发出均匀荧光。在另一优选例中，所述结合剂的数量大于所述人血清肌钙蛋白I的数量；和/或，所述检测剂的数量大于含有吸光物质的复合物的数量。在另一优选例中，所述结合剂和人血清肌钙蛋白I或其等同物、检测剂和复合物的结合为特异性结合。在另一优选例中，所述的人血清肌钙蛋白I或其等同物是抗原，且所述的结合剂和检测剂是可同时结合于所述抗原的抗体；或者所述的人血清肌钙蛋白I或其等同物是抗体，且所述的结合剂和检测剂是可同时结合于所述抗体的抗原或所述抗体的抗体(抗抗体)。在另一优选例中，所述荧光测试区发出的均匀荧光为所述侧流测试片的自有荧光。在另一优选例中，所述荧光测试区均匀分布荧光物质，能够发出均匀荧光。在另一优选例中，所述荧光测试区上的荧光物质的激发或发射光谱与所述吸光物质的吸收光谱全部或部分重叠。在另一优选例中，所述荧光物质选自下组：荧光素、羧基荧光素、2-甲氧基荧光素、4，5-二甲氧基荧光素、罗丹明、藻红蛋白、量子点、或稀土元素离子或其螯合物。在另一优选例中，所述的吸光物质选自下组：胶体金、纳米金棒、纳米银棒、或其组合。在另一优选例中，所述的吸光物质为纳米金棒。在另一优选例中，所述的纳米金棒的纵横比为1.5-10，较佳地为1.5-5。在另一优选例中，所述的纳米金棒的长度为10-200nm，较佳地为20-100nm。在另一优选例中，所述的胶体金是平均粒径为10-70nm的胶体金颗粒。在另一优选例中，所述对照区用于控制人血清肌钙蛋白I的检测结果的有效性。本实用新型第二方面，提供一种用于定量测量心脏肌钙蛋白I的试剂盒，所述试剂盒包含：一容器；位于所述容器内的侧流测试片卡位；以及位于所述容器中并且在所述卡位内的本实用新型第一方面所述定量测量心脏肌钙蛋白I的侧流测试片。本实用新型第三方面，提供一种定量检测待测物的荧光测量装置，所述的装置包括：(a)一本实用新型第一方面所述的侧流测试片；(b)一用于检测荧光强度的检测器。在另一优选例中，所述的装置还包括描述使用方法的使用说明。在另一优选例中，所述装置还包括光源和计算机。在另一优选例中，所述光源通过光导纤维照射到检测线处，激发出的荧光通过光导纤维进入检测器，由计算机进行数据处理和分析。应理解，在本实用新型范围内中，本实用新型的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附图说明图1是侧流测试片示意图。图2是待测样品在测线处的平均荧光强度与荧光测试区基准荧光值的比值的对数值标准曲线图。具体实施方式本实用新型人通过长期而深入的研究，发现了一种用于定量检测样品中的人血清肌钙蛋白I的侧流测试片，以及定量检测人血清肌钙蛋白I的装置，所述侧流测试片可以通过测量荧光测试区与对照区的中间处以及荧光测试区的荧光强度来定量检测人血清肌钙蛋白I，不仅快速、简便、成本低廉，而且灵敏度高，定量准确。在此基础上，发明人完成了本实用新型。侧流测试片现在更详细地描述用于制造本实用新型侧流测试片的方法和材料。应注意，侧流测试片的具体构造可以变化，这取决于意图用侧流测试片来进行的具体测试。在实施例之外制造侧流测试片的变动方法，也落于本实用新型范围之中。如图1所示，侧流测试片1可包括背衬片2，其长度与侧流测试片相同。加样区3位于侧流测试片的一端，样品垫片31位于加样区，可通过粘合剂粘贴于加样区。样品吸收区7位于侧流测试片的另一端，在加样区的远端，吸水垫片71位于样品吸收区。心脏肌钙蛋白I结合区4位于加样区和样品吸收区之间，在加样区的近端和样品吸收区的远端，结合垫片41位于心脏肌钙蛋白I结合区。荧光测试区5(包含检测线)所述心脏肌钙蛋白I结合区相邻且位于流动方向下游，通常荧光测试区设置在膜片56上，通过所述膜片连接结合垫和吸水垫。优选地，所述膜片上还设置有对照区6(包含质控线)，对照区位于荧光测试区和样品吸收区之间，也可以位于荧光测试区和心脏肌钙蛋白I结合区之间，并与荧光测试区之间有/无适当的空间。侧流测试片制造方法，优选地，如图1所示，分别将样品垫片、结合垫片、膜片、吸水垫片通过粘合剂粘贴于背衬板上，即得所述侧流测试片。背衬片可以用任何稳定的、无孔的材料制成，其强度应足以支承材料和粘于其的侧流测试片。因为许多测定用水作为扩散介质，因此背衬片较佳地是基本上不透水的。在一个优选例中，背衬片是用聚合物膜制成的，更佳地是用聚氯乙烯膜制成的(如PVC胶板)。样品垫片可用任何吸收性材料制成。可使用的材料例子包括：纤维素、硝酸纤维素、乙酸纤维素、玻璃纤维、尼龙、聚电解质离子交换膜、丙烯共聚物/尼龙、和聚醚砜。结合垫片或膜片可以用任何材料制成，只要该材料有足够孔隙度从而允许在表面和内部发生流体的毛细管作用。结合垫片或膜片应有足够的孔隙度，从而允许涂有抗体或抗原的颗粒移动。结合垫片或膜片还可被含待检测分析物的样品中所用的液体润湿(例如，对于水性液体具有亲水性，对于有机溶剂具有疏水性)。通过例如在美国专利No.4,340,482或No.4,618,533中所述的方法(这些方法描述了将疏水表面转变成亲水表面)，可以改变其疏水性从而使其具有亲水性以便用于水性液体。可用于制造结合垫片或膜片的材料例子包括：聚脂膜、纤维素、硝酸纤维素、乙酸纤维素、玻璃纤维、尼龙、聚电解质离子交换膜、丙烯共聚物/尼龙、和聚醚砜(polyethersulfone)。在一个优选例中，结合垫片是用聚脂膜制成的，膜片是用硝酸纤维素制成的。吸收垫片可以用任何能吸收作为样品和缓冲液的液体的材料制成。吸收垫片的吸收能力应足够大，以便吸收添加至侧流测试片的液体。适用于吸收垫片的材料的例子包括纤维素和玻璃纤维。检测方法本实用新型侧流测试片可用于大量不同的侧流分析方法，而这些分析方法涉及使用一种或多种可流动的结合剂和一种固定化的检测剂。其中，所述结合剂中至少一种是被吸光物质标记，所述结合剂能与人血清肌钙蛋白I或其等同物结合形成含有吸光物质的“血清肌钙蛋白I-Ab1”二元复合物；所述检测剂包括抗所述人血清肌钙蛋白I的单克隆抗体Ab2，所述检测剂用于捕获从心脏肌钙蛋白I结合区移动至荧光测试区的含有吸光物质的复合物，从而形成含有吸光物质的“Ab2-血清肌钙蛋白I-Ab1”三元复合物。在未测试前，所述的荧光测试区在激发光照射下，在所述检测线的上游区域、所述检测线以及所述检测线下游区域发出均匀荧光。当所述吸光物质影响(部分淬灭或全部淬灭)荧光强度时，本实用新型的检测方法即可通过检测荧光强度来测定人血清肌钙蛋白I的数量。如本文所用，术语“人血清肌钙蛋白I”、“其等同物”或“分析物”指待用侧流测试片检测以及可任选地被定量测定的、样品中的任何组份，人血清肌钙蛋白I或其等同物或分析物的例子包括：蛋白质，如激素或其他分泌蛋白质、酶和细胞表面蛋白；糖蛋白；肽；小分子；多糖；抗体(包括单克隆抗体或多克隆抗体及其片段)；核酸；药物(包括地高辛等强心甙类药物)；毒素；病毒或病毒颗粒；细胞壁组份；或其他具有表位的化合物。结合剂本实用新型所用的结合剂可以是任何能够结合于人血清肌钙蛋白I或其等同物的物质。具体地，为特异性结合人血清肌钙蛋白I或其等同物的物质。有各种不同类型的分子可用作分析物结合剂，其中包括例如：寡核苷酸、抗体、工程化蛋白、肽、半抗原、或含有抗原(该抗原具有分析物结合位点)的异源混合物的裂解物。P.Holliger等人,TrendsinBiotechnology13:7-9(1995)；S.M.Chamow等人,TrendsinBiotechnology14:52-60(1996)。如果待检测分析物是配体，那么可使用结合于该配体的受体，反之亦然。检测剂本实用新型所用的检测剂可以是任何能结合从心脏肌钙蛋白I结合区移动至荧光测试区的含有吸光物质的复合物的物质，包括例如：抗体、工程化蛋白、肽、半抗原、或含有抗原(该抗原具有分析物结合位点)的异源混合物的裂解物。优选地，可以通过抗原和抗体的结合或寡核苷酸与互补核酸单链特异性结合的方式将含有荧光标记的物质与含有吸光物质标记的物质结合；还可以通过生物素(biotin)和链亲和素(Streptavidin，SA)的结合方式，从而将含有荧光标记的物质与含有吸光物质标记的物质结合。标记物质连于结合剂或检测剂的可检测标记物包括大量不同物质，只要标记物能够被检测。可检测标记物的例子包括(但并不限于)：颗粒、发光标记物；比色标记物、荧光标记物；化学标记物；酶；放射性标记物；或射频标记物；金属胶体；和化学发光标记物。常用检测方法的例子包括(但并不限于)：光学方法，如测量光散射、单反射、光度计或光电倍增管；放射性(用盖革计数器等进行测量)；导电性或电介质(电容)；电化学法检测所释放的电活性物质，如铟、铋、镓、碲离子[如用Hayes等人(AnalyticalChem.66:1860-1865(1994)所述的方法]，或亚铁氰化物[如用Roberts和Durst(AnalyticalChem.67:482-491(1995)所提出的方法。其中通过在荧光测试区滴加洗涤剂，使包裹在脂质体中的亚铁氰化物被释放出，然后用电化学法检测释放的亚铁氰化物]。其他常规方法只要合适，也可使用。在一个优选例中，可检测标记物是颗粒。可使用的颗粒例子包括(但并不限于)：胶体金颗粒；胶体硫颗粒；胶体硒颗粒；胶体硫酸钡颗粒；胶体硫酸铁颗粒；金属碘酸盐颗粒；卤化银颗粒；二氧化硅颗粒；胶体(水合)金属氧化物颗粒；胶体金属硫化物颗粒；胶体硒化铅颗粒；胶体硒化镉颗粒；胶体金属磷酸盐颗粒；胶体金属铁酸盐颗粒；涂有有机或无机层的上述任一种胶体颗粒；蛋白质或肽分子；脂质体；或有机聚合物乳胶颗粒，例如聚苯乙烯乳胶珠。用于检测剂的标记物，本实用新型优先选用荧光标记物(简称荧光物质)，用于结合剂的标记物，本实用新型优先选用吸光物质标记物(简称吸光物质)。当荧光标记物和吸光标记物通过特定的方式结合后，当荧光物质的激发或发射光谱与吸光物质的吸收光谱部分或完全重叠时，吸光物质会影响(部分淬灭或全部淬灭)荧光物质的荧光，从而通过检测荧光物质的荧光强度来测定人血清肌钙蛋白I的数量。荧光物质和吸光物质本实用新型中，在另一优选例中，所述荧光测试区均匀分布荧光物质，能够发出均匀荧光。在另一优选例中，用于本实用新型标记的荧光物质和吸光物质应配合使用，基本原则是荧光物质的激发或发射光谱与吸光物质的吸收光谱部分或完全重叠。最优的是完全重叠，如此会有较高的检测灵敏度。在另一优选例中，代表性的荧光物质包括(但并不限于)：荧光素、羧基荧光素、2-甲氧基荧光素、4，5-二甲氧基荧光素、罗丹明、藻红蛋白(Phycoerythrin，PE)、量子点、稀土元素离子(如Eu3+)及其螯合物等组合，只要所选荧光物质的激发或发射光谱与所选吸光物质的吸收光谱有重叠即可。在另一优选例中，代表性的吸光物质包括(但并不限于)：胶体金、纳米金棒、纳米银棒等组合，只要所选吸光物质的吸收光谱与所选荧光物质的激发或发射光谱重叠即可。胶体金颗粒可用任何常规方法制造，例如总结于G.Frens,1973NaturePhysicalScience,241:20(1973)中的方法。其他方法描述于美国专利No.5,578,577、5,141,850、4,775,636、4,853,335、4,859,612、5,079,172、5,202,267、5,514,602、5,616,467、5,681,775。如本文所用，术语“纳米金棒”指具有一定纵横比、且横轴和纵轴处于5-200纳米范围的金颗粒。一种特别优选的吸光物质是胶体金，尤其是粒径为20-40nm的胶体金。优选地，本领域技术人员常用荧光标记物质包括PE，PE的吸收光谱在550～650nm之间，最大发射波长为575nm，而30nm胶体金的吸收光谱在300～800nm，较宽泛，最大吸收峰为525～530nm处，与PE的发射光谱有部分重叠，所以选择30nm胶体金作为相应的吸光物质。工作原理现结合图1和具体实施例说明本实用新型检测方法的技术原理：(1.1)将待测样品加在玻璃纤维样品垫片上，待测样品中的人血清肌钙蛋白I(cTnI)在毛细作用下向吸水垫片方向移动，途经载有被吸光物质标记的抗所述人血清肌钙蛋白I的单克隆抗体Ab1的结合垫片后，将所述结合剂完全复溶，形成含有吸光物质的“血清肌钙蛋白I-Ab1”二元复合物，被检测线处的捕获抗体，即抗所述人血清肌钙蛋白I的单克隆抗体Ab2所捕获，形成含有吸光物质的“Ab2-血清肌钙蛋白I-Ab1”三元复合物；(1.2)多余的游离抗所述人血清肌钙蛋白I的单克隆抗体Ab1继续前移，被固定在质控线处的对照剂(抗金标抗体的抗体)捕获，呈现红色，说明检测有效。(1.3)测定所述检测线的荧光强度F2和所述荧光测试区的基准荧光强度F1，并基于所述F2和F1的比值，定量测定待测样品中人血清肌钙蛋白I的浓度，值越大说明抗原浓度越高，反之则越低；如待测样品中无抗原时，不能形成二元复合物，则F1/F2≈1。检测装置本实用新型的检测装置：可以包括：侧流测试片、检测器、光源、光导纤维和计算机。还可以包括一份检测方法的使用说明。其中侧流测试片的工作原理如上所述，荧光强度的检测方法可以如下所述(但不仅限于此)，任何可用于检测荧光强度的方法均可用于本实用新型的检测装置。荧光强度的检测光源通过光导纤维照射到检测线处，激发出的荧光通过光导纤维进入检测器，所得到的数据由计算机进行处理和分析。所述光导纤维可以是Y型的，分别连接于光源、检测线和检测器。本实用新型中，光源用于提供某一发射波长的光线，从而激发荧光物质发出荧光。可选用任何可以提供合适波长的光源，包括(但不限于)：LED、氙灯、卤钨灯、激光等。一种优选的光源是激光光源，激光光源可用本领域常规的方法和设备(如激光器)产生。代表性的激光器包括(但并不限于)：半导体激光器、氦氖激光器、氩离子激光器、还包括波长可选的激光器、多波长激光器和双波长激光器等。激光器产生的激光波长与激光介质有关，常见的激光波长见下表1：表1激光种类波长(纳米)氩氟激光(紫外光)193氪氟激光(紫外光)248氙氯激光(紫外光)308氮激光(紫外光)337氩激光(蓝光)488氩激光(绿光)514氦氖激光(绿光)543氦氖激光(红光)633罗丹明6G染料(可调光)570-650红宝石(CrAlO3)(红光)694钕-钇铝石榴石(近红外光)1064本实用新型中的检测器可以是(但不限于)光电倍增管、CCD或光电池等。标准曲线在本实用新型中，可以直接通过测定检测线处的荧光强度，确定所述人血清肌钙蛋白I的数量。在优选例中，可通过与标准曲线进行比较，从而获得定量结果。标准曲线可用以下方法获得：将已知的不同浓度(C)的人血清肌钙蛋白I样品通过上述检测方法后，分别测量其在检测线处的荧光强度(F)，将各浓度的对数值(logC)和相应的荧光强度的对数值(logF)作图，得到标准曲线。本实用新型的主要优点有：本实用新型提供了一种上述侧流测试片的检测方法，所述方法基于荧光淬灭原理，通过测量荧光物质的荧光强度从而测定人血清肌钙蛋白I的数量，尤其是血清中肌钙蛋白I的含量较低时，本实用新型的方法更为敏捷、快速、灵敏度高、定量准确。下面结合具体实施，进一步阐述本实用新型。应理解，这些实施例仅用于说明本实用新型而不用于限制本实用新型的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(NewYork:ColdSpringHarborLaboratoryPress,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。实施例试剂和设备：针对人血清肌钙蛋白I(cTnI)的1对单克隆抗体(Ab1和Ab2)，市售品；cTnI抗原购自Biodesign；30nm的胶体金，市售品；羊抗鼠IgG多抗购自Biodesign；小牛血清白蛋白(BSA)，市售品；检测器：USB4000-FL(美国海洋光学公司)；光源：532nm激光光源。实施例1：人血清肌钙蛋白I的检测1、金标抗体的制备1.1胶体金-抗体保存液胶体金-抗体保存液成分如表2所示表2四硼酸钠0.1g小牛血清白蛋白(BSA)0.25gNaN30.025g加水溶解后用6NHCl调节pH至7.4，补水至250ml，用0.45μm滤膜过滤后，4～8℃保存。1.2工作液工作液成分如表3所示表3加水溶解后用6NHCL调节pH至7.0～7.5补水至1000ml，用0.45μm滤膜过滤后，4～8℃保存。1.3金标抗体(Gold-Ab1)的制备1.3.1取20～30nm颗粒胶体金液20ml，在磁力搅拌下缓慢加入已纯化的Ab1抗体1.0ml(0.6mg/ml)，在室温下搅拌30min；1.3.2加10％的BSA0.8ml(终浓度0.4％)，室温搅拌5min；1.3.3加10％的PEG0.4ml(终浓度0.2％)，室温搅拌5min；1.3.412000～1500r/min离心60～40min，小心吸离心上清，沉淀溶于0.5ml保存液中，金标抗体的光密度(O.D)约为100O.D，其中Ab1抗体的浓度为1mg/ml，置4℃保存备用；4、检测线，质控线的制作与上载Gold-Ab1取Ab2为1mg/ml的磷酸盐缓冲液(pH7.2)0.5μl点在图1检测线位置，取羊抗鼠IgG(1mg/ml)的磷酸盐缓冲液(pH7.2)0.5μl点在图1质控线位置避光室温干燥；取Gold-Ab10.5μl滴加在图1的结合垫片上。5、标准曲线制备5.1用工作液配制人血清肌钙蛋白I(cTnI)系列标准溶液(浓度见表4)；5.2取6只侧流测试片，水平放置，分别在各样品垫上加6种浓度的50μl标准溶液；5.310min后，选取各侧流测试片上检测线处4个点，分别测定该4个点在575nm的荧光强度F21-F24，计算选取荧光测试区4个点，分别测定该4个点在575nm的基准荧光强度F11-F14，待测样品的结果如表4所示，标准曲线如图2所示：表4cTnI标准系列浓度与相应荧光强度6、待测样品检测用血清待测样品替代标准系列溶液，重复5.2、5.3步骤，测得6个待测样品的cTnI值见表5。表5本实用新型方法检测结果与罗氏电化学发光法检测结果本实用新型方法的检测结果的相关性良好，R2＝0.9994。对比例1同实施例1，选取同样批次的标准系列浓度待测样品，采用不同批次的侧流测试片，不同之处在于，选取各侧流测试片上检测线上中心处1个点，测定该点在575nm的荧光强度F21；选取荧光测试区1个点，测定该点在575nm的基准荧光强度F11。结果表明，相关性R2＝0.982，说明本实用新型的方法检测结果的相关性良好，效果显著，尤其当待测样品中所含人血清肌钙蛋白I的浓度较低时，灵敏度更高。在本实用新型提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本实用新型的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本实用新型作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。当前第1页1 2 3