本发明涉及三聚氰胺的测定方法，特别是基于甲基蓝采用分光光度法测定三聚氰胺的方法。
背景技术：
三聚氰胺(Melamine，MEL)是一种重要的化工原料，可用于纺织助剂、皮革柔润剂、上光剂、抗水剂、黏合剂等的生产中，但它对身体有害，不可作为食品添加剂加到食品中。文献报道测定三聚氰胺的方法主要有色谱法、电化学法、荧光光谱法、分光光度法等。分光光度法由于仪器设备简单，操作简便，已广泛应用于无机物和有机物的分析中，但用于测定三聚氰胺的报道不多。甲基蓝(MB)是一种芳香杂环化合物，在酸性溶液中，其分子中含有的磺酸基可离解而带负电荷，三聚氰胺在酸性溶液中可质子化而带正电荷，带正电的三聚氰胺与带负电的甲基蓝可通过静电引力发生离子缔合反应，使甲基蓝颜色变浅而使吸光度降低，，据此建立了一种分光光度法测定三聚氰胺的新方法。此方法尚未见文献报道。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种甲基蓝分光光度法测定三聚氰胺的方法。
具体步骤为：
(1)于7支10mL比色管中依次加入0.0、0.02、0.1、0.3、0.4、0.5、0.6mL浓度为50 mg/L的三聚氰胺溶液，再在每支管中分别加入1.0mL pH3.4的HCl和1.0mL浓度为0.5g/L 的甲基蓝，以不加三聚氰胺的溶液为试剂空白，用超纯水定容至刻度，摇匀，在40℃的水浴中反应20分钟后，于分光光度计上，用1cm比色皿，在598nm处分别测定试剂空白的吸光度A0和加有三聚氰胺溶液的吸光度A，计算吸光度差值ΔA＝A0-A。其吸光度差值ΔA与三聚氰胺质量浓度ρ在0.10～3.0mg/L范围内成线性关系，线性回归方程为：ΔA＝0.2423ρ +0.1019(ρ的单位为mg/L)，相关系数0.9981，检出限为0.0991mg/L。
(2)取1.0mL牛奶于离心管中，依次加入5mL质量百分比浓度为1％三氯乙酸和2.0mL 分析纯乙腈，超声20分钟，静置，取部分溶液于10mL离心管中，离心10分钟，取上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，收集滤液，即得样品待测液。
(3)取0.05mL步骤(2)处理后的牛奶待测液，依步骤(1)的方法测定吸光度值，计算出牛奶中三聚氰胺的含量。
本发明方法操作简便、仪器价廉。
附图说明
图1为本发明实施例空白与1.0mg/L三聚氰胺的吸收光谱图。
图中标记：a：空白；b：空白-1.0mg/L MEL。
具体实施方式
实施例：
(1)于7支10mL比色管中依次加入0.0、0.02、0.1、0.3、0.4、0.5、0.6mL浓度为50 mg/L的三聚氰胺溶液，再在每支比色管中分别加入1.0mL pH3.4的HCl溶液和1.0mL浓度为0.5g/L的甲基蓝溶液，以不加三聚氰胺的溶液为试剂空白，然后用超纯水将7支比色管定容至刻度，摇匀，在40℃的水浴中反应20分钟后，于分光光度计上，用1cm比色皿，在波长598nm处，分别测定不加三聚氰胺的空白溶液的吸光度A0和加有三聚氰胺溶液的吸光度 A，计算吸光度的差值
ΔA＝A0-A。其吸光度差值ΔA与三聚氰胺质量浓度ρ在0.10～3.0mg/L范围内成线性关系，线性回归方程为：ΔA＝0.2423ρ+0.1019(ρ的单位为mg/L)，相关系数0.9981，检出限为0.0991mg/L。
(2)取1.0mL牛奶于离心管中，依次加入5mL质量百分比浓度为1％三氯乙酸和2.0mL 乙腈，超声20分钟，静置，取部分溶液于10mL离心管中，离心10分钟，取上清液用0.45 μm微孔滤膜过滤，收集滤液，即得样品待测液。
(3)取0.05mL步骤(2)处理后的牛奶待测液，依步骤(1)的方法测定吸光度值，计算出牛奶中三聚氰胺的含量。同时做了加标回收实验，结果见表1。
表1：牛奶中三聚氰胺测定结果(n＝5)