本发明涉及一种桑根醇l标准物质的检测方法,更具体地说,它涉及一种反相高效液相色谱法检测桑根醇l标准物质的检测方法。
背景技术:
桑根醇l分子式为:c25h26o6,分子量422.47,cas号为329319-20-2,存在于桑白皮等植物中,属于二氢黄酮类成分,其结构如图:
目前未有桑根醇l相关检测方法的文献报道,因此有必要探索出更易操作、准确的桑根醇l含量测定方法。
技术实现要素:
针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供一种反相高效液相色谱法检测桑根醇l标准物质的检测方法。
为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:一种反相高效液相色谱法检测桑根醇l标准物质的检测方法,该方法包括以下步骤,
(1)将样品用80%甲醇溶液溶解;
(2)使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的液相色谱柱;
(3)高效液相色谱仪设置如下:以乙腈-0.1%磷酸溶液(66:34)为流动相;流速为1.0ml/min;柱温35℃;检测波长283nm;进样量20μl。
作为优选的,步骤(1)中,所用的溶剂为hplc级别甲醇及超纯水,样品配制浓度为0.1mg/ml~1.0mg/ml。
作为优选的,步骤(2)中,所用的固定相是十八烷基硅烷键合硅胶。
作为优选的,步骤(3)中,所用的流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液。
作为优选的,步骤(3)中,所用的流动相比例可以为60%乙腈~70%乙腈,最佳比例为乙腈:0.1%磷酸溶液=66:34。
作为优选的,步骤(3)中,流动相的流速为1.0ml/min。
作为优选的,步骤(3)中,柱温可以为25℃~35℃,也可以为室温。
作为优选的,步骤(3)中,所用检测器可以是vwd检测器或dad检测器,检测波长为283nm。
作为优选的,步骤(3)中,样品的进样量可以是1~20μl之间。
本发明相对现有技术相比具有以下优点:(1)高效液相色谱响应值高,检测误差小,精密度和准确性都较高;(2)方法操作简便、实用性强,适合于桑根醇l的含量测定。
附图说明
图1为本发明反相高效液相色谱法检测桑根醇l标准物质的检测方法实施例1的样品和空白对照图谱;
图2为本发明反相高效液相色谱法检测桑根醇l标准物质的检测方法实施例2的样品和空白对照图谱。
具体实施方式
下面对本发明反相高效液相色谱法检测桑根醇l标准物质的检测方法实施例做进一步说明。
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的详细描述,但本发明不仅限于所述实施例。
实施例1:
色谱条件与系统适应性:色谱柱使用agilentzorbaxsb-c18(4.6×150mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(66:34);流速1.0ml/min;dad检测器,检测波长283nm;柱温为35℃;进样量20μl;
供试品溶液的制备:精密称定桑根醇l0.7mg,精密加入80%甲醇1ml溶解,即得。
测定法:精密吸取供试品溶液20μl,注入高效液相色谱仪,测定,即得。
结果:测得桑根醇l的归一化法含量为98.9%,峰形对称。样品和空白对照图谱见图1。
实施例2:
色谱条件与系统适应性:色谱柱使用agilentzorbaxsb-c18(4.6×150mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(64:36);流速1.0ml/min;dad检测器,检测波长283nm;柱温为30℃;进样量10μl;
供试品溶液的制备:精密称定桑根醇l1.0mg,精密加入80%甲醇1ml溶解,即得。
测定法:精密吸取供试品溶液10μl,注入高效液相色谱仪,测定,即得。
结果:测得桑根醇l的归一化法含量为97.9%,峰形对称。样品和空白对照图谱见图2。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例,凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。