一种水基胶中乙酰柠檬酸三丁酯的测定方法与流程

本发明属于分析技术领域，具体涉及一种水基胶中乙酰柠檬酸三丁酯含量的测定方法。

背景技术：

增塑剂是一种能降低高分子化合物玻璃化温度和熔融温度，改善胶层脆性，增进熔融流动性的物质。在胶粘剂组分中加入适量增塑剂，可以提高剪切强度和不均匀扯离强度，增加胶膜的柔软性。乙酰柠檬酸三丁酯是一种新型绿色、无毒增塑剂，ld50＝4000mg/kg，可用作聚氯乙烯、纤维素树脂和合成橡胶的增塑。用于无毒pvc造粒，食品包装容器，儿童玩具制品，医用制品，薄膜、板材、纤维素涂料等制品，同样水基胶产品的生产中也会添加此类物质。

目前，我国还没有检测胶粘剂中乙酰柠檬酸三丁酯的国家标准或行业标准，因此建立水基胶中乙酰柠檬酸三丁酯的测定方法对于水基胶生产企业的质量监控以及采购方的原料监控都有重要的意义。

技术实现要素：

本发明的目的旨在建立一种简单、快速的水基胶中乙酰柠檬酸三丁酯的测定方法，利用uplc作为仪器分析手段，并配套建立相应的样品前处理方法，以期获得干净的上机溶液，减小基质对测定目标物的干扰。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种水基胶中乙酰柠檬酸三丁酯含量的测定方法，包括如下步骤：

步骤一)用乙腈萃取水基胶样品中的乙酰柠檬酸三丁酯，加入c18分散固相萃取剂，涡旋振荡后离心分离，取上清液过滤膜，得到待测样液；

步骤二)配制乙酰柠檬酸三丁酯标准曲线溶液；

步骤三)用超高效液相色谱仪以乙腈和水为流动相梯度洗脱分析待测样液和标准曲线溶液，外标法定量测定乙酰柠檬酸三丁酯；根据测定结果计算水基胶中乙酰柠檬酸三丁酯的含量。

进一步的改进，所述步骤三)中色谱条件为：色谱柱为atlantist33mm×100mm；梯度洗脱程序：0～15min，乙腈与水比例由20:80线性升至100％乙腈；15～20min，100％乙腈；

柱温：20～40℃；流速：0.3～0.6ml/min；进样量：1～5μl；检测器为二极管阵列检测器，检测波长为212nm。

进一步的改进，所述柱温为30℃，流速为0.6ml/min，进样量为2μl。

进一步的改进，所述步骤一)中称取0.5～1g水基胶样品置于锥形瓶，加入5～20ml的乙腈溶液，涡旋振荡5min，取少量萃取液离心分离后，用0.22μm有机滤膜过滤得到水基胶待测样品溶液。

进一步的改进，所述步骤一)中离心分离温度为20～25℃，转速为10000～15000rpm，时间为5～10min。

进一步的改进，外标法定量时可按常规方式制作标准曲线，但优选按下述过程制作：配制如下5个浓度的乙酰柠檬酸三丁酯标准工作溶液(0.01mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.5mg/ml和1mg/ml)，以峰面积为纵坐标，以乙酰柠檬酸三丁酯标准工作溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线。每次试验应制作标准曲线，每20次样品测定后应加入一个中等浓度的标准溶液，如果测得的值与原值相差超过5％，则应重新进行标准曲线的绘制。

本发明中，水基胶样品中乙酰柠檬酸三丁酯含量按式(1)进行计算：

式中：

c—由标准曲线得出的水基胶样品中乙酰柠檬酸三丁酯的浓度，单位为微克每毫升(μg/ml)；

c0—由标准曲线得出的空白样品中的乙酰柠檬酸三丁酯浓度，单位为微克每毫升(μg/ml)；

v—萃取液体积，单位为毫升(ml)；

k-稀释倍数；

m-样品质量，单位为克(g)。

以两次平行测定的平均值为最终测定结果，精确至0.1mg/kg。

平行测量结果其相对平均偏差应小于10％。

若待测试样溶液的浓度超出标准工作曲线的浓度范围，则改变萃取液的稀释倍数后重新测定。

本发明提供了一种简单、快速、高效的水基胶中乙酰柠檬酸三丁酯的测定方法，具有如下优势：1)针对uplc仪器管路死体积小、灵敏度高的特点，有针对性地开发了样品前处理方法，通过加入c18键合硅胶作为分散固相萃取剂以及一定比例的溶剂稀释，极大地降低了基质中非目标物的干扰；2)根据目标化合物特点，通过对uplc色谱条件的优化，建立了快速分析新方法，测定时间小于20min。

①发明方法的检测限

选择最低浓度的标准溶液(0.01mg/ml)平行测定10次，计算其标准偏差，以3倍标准偏差为测定的检出限。研究表明方法检测限为0.005mg/ml。

②发明方法的回收率和重复性

采用标准加入法测定方法的回收率。称取0.5g样品，加入与其含量相当的混合标准溶液，按照本方法的前处理条件进行提取，重复6次，测定其加标回收率和重复性，结果如表1所示。平均回收率为101.5％，重复性实验rsd为4.8％，可以满足定量分析需要。

表1回收率和重复性

附图说明

图1：本发明实例1色谱条件下0.1mg/ml标准工作溶液色谱图；

图2：本发明实例1色谱条件下水基胶样品色谱图。

具体实施方式

本发明以下结合实例做进一步描述，但并不是限制本发明。

实施例1：

1.仪器与试剂：

乙酰柠檬酸三丁酯[纯度大于97％，梯希爱(上海)化成工业发展有限公司]、色谱纯级乙腈。

acquityuplci-class超高效液相色谱仪(waters公司)、pda检测器(waters公司)、empower3色谱工作站(waters公司)；bp221s电子天平(感量0.0001g，德国sartorius公司)；vx-2500型涡旋振荡器(美国henrytroemnerllc公司)；milli-q超纯水机(美国millipore公司)；微孔有机滤膜(0.22μm，上海安谱科学仪器有限公司)。

2.样品处理：

称取0.5g水基胶样品置于锥形瓶，加入10ml乙腈溶液，后加入150mgc18分散固相萃取剂，涡旋振荡5min，取少量萃取液离心分离后，用0.22μm有机滤膜过滤得到待测样品溶液。

3.标准工作溶液：

配制如下5个浓度的乙酰柠檬酸三丁酯标准工作溶液(0.01mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.5mg/ml和1mg/ml)。

4.样品测定：

测定采用的色谱条件为：色谱柱：atlantist33mm×100mm；柱温：30℃；柱流速：0.6ml/min；进样量：2μl；检测波长：212nm。流动相a：水；流动相b：乙腈；梯度洗脱程序：0～15min，乙腈与水比例由20:80线性升至100％乙腈；15～20min，100％乙腈。梯度洗脱20min。

各取0.5ml不同浓度的标准工作溶液，按照浓度由低到高的顺序分别进行uplc-uv测定，将测得的uv峰面积(y)与标准溶液的质量浓度(x，mg/l)进行线性回归分析，得到目标化合物的标准曲线方程为：y＝752.93x+8365.3，相关系数r²为0.9995。

对提取后的样品进行测定，以保留时间定性，以测得目标物峰面积值，代入标准曲线方程，求得样品中乙酰柠檬酸三丁酯的含量。(样品测定色谱图参见图2)

表2样品a中目标物的检测结果

实施例2：

具体检测步骤如实施例1所述，选择另一水基胶样品b，结果表3。

表3样品b中目标物的检测结果

实施例3：

具体检测步骤如实施例1所述，选择另一水基胶样品c，结果表4。

表4样品c中目标物的检测结果