本发明涉及药物代谢研究方法领域，具体为一种基于分子和细胞水平研究药物代谢的方法。
背景技术：
药物代谢是指药物在体内经药物代谢酶的生物转化。药物经代谢后，理化性质发生了变化，从而引起了其药理和毒理活性的改变。因此，研究药物代谢和明确其代谢途径，对制定合理的临床用药方案、剂型设计及新药开发工作都具有重要的指导意义，也是临床药理学、毒理学、高通量药物筛选等领域的研究热点。当前，国内外对药物代谢的研究主要集中在代谢产物的生成和确定代谢途径。在分子生物学技术的推动下，药物代谢酶领域的研究因其对临床药物间相互作用的研究有着积极的意义，已得到广泛的重视。体外代谢研究可以排除体内因素的干扰，直接观察酶对底物的选择代谢性，为整体试验提供了可靠的理论依据；体内代谢转化率低，对于毒性大及缺乏灵敏检测手段的药物来说，体外代谢研究成为了良好的研究手段。肝脏是药物代谢的重要器官，是机体进行生物转化的主要场所，富含参与药物代谢的一个庞大的依赖细胞色素p450的混合功能氧化酶系统，大多数药物的i相及ii相反应都依赖于肝脏酶系统而发生。药物代谢研究策略一般是药物离线或在线经代谢酶生物转化为药物代谢物，一方面药物代谢物可分离检测，获取其分子结构信息，进而研究其代谢途径；另一方面药物代谢物与细胞(如肝细胞)孵化，考察药物经代谢后的毒副作用或者药物的相互作用。目前常用的方法操作不便、成本更高、劳动强度大。
技术实现要素：
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种基于分子和细胞水平研究药物代谢的方法，具备操作方便的优点，解决了目前常用的方法操作不便、成本更高、劳动强度大的问题。
(二)技术方案
为实现良好的表面品质，无需任何后续辅助处的目的，本发明提供如下技术方案：一种基于分子和细胞水平研究药物代谢的方法，包括以下步骤：
s1：取若干只成年体小白鼠，将其放入两个容器内，分为对照组和药物组，对照组和药物组内小白鼠的数量相等；
s2：将所要测试药物配成所需浓度，再将其混入生理盐水中，静脉注射入药物组小白鼠体内，空白组小白鼠体内注入等量的生理盐水；
s3：待药物注射入药物组小白鼠后的4-12h后，取不同时间点的药物组的小白鼠，用毛细玻璃管从小白鼠眼球后静脉取血，对照组与4-12h同法取样备用；
s4：将对照组和药物组不同时间点取样的血液编号，对其进行离心后，取其上清液并进行hplc分析。
优选的，所述s1步骤中，待加工基板首先根据制备需求对其进切割，将其切割至所需规格后，再对其进行超声水浴清洗。
优选的，所述s1步骤中，对照组和药物组小白鼠性别相同，体积相同。
优选的，所述s2步骤中，小白鼠注射后，将其放入单独的带盖鼠笼，防止惊厥小白鼠乱窜。
优选的，所述s3步骤中，药物组小白鼠注射药物后的4h，6h，8h，10h，12h时间点将药物组小白鼠和对照组小白鼠取出，并取眼球后静脉血。
优选的，所述s4步骤中，使用离心机对血液样本进行离心，离心机转速为12500转/min，离心后静止2min，然后取其上清液，将其进行hplc分析，并进行表格登记。
优选的，所述s2步骤中，根据被分析药物的性质选择溶剂溶解或萃取。
优选的，所述s3步骤后，分别取对照组和药物组皮下细胞进行切片分析。
优选的，所述s1-s5步骤中，保持安静，禁止吵闹惊吓小白鼠，影响实验结果。
(三)有益效果
与现有技术相比，本发明提供了一种基于分子和细胞水平研究药物代谢的方法，具备以下有益效果：
该基于分子和细胞水平研究药物代谢的方法，选用小白鼠作为药物代谢研究的对象，通过优化的实验分组方法，保证实验结果的准确性，尤其是对药物给药后不同时间点的样本进行取样提取和分析方法的优选，整个实验方法可操作性强，客观的反应药物在体内的真实代谢情况，实验结果准确度高，更加方便，且所需受试药物量少，成本低，劳动强度低，应用范围广泛。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种基于分子和细胞水平研究药物代谢的方法，包括以下步骤：
s1：取若干只成年体小白鼠，将其放入两个容器内，分为对照组和药物组，对照组和药物组内小白鼠的数量相等；
s2：将所要测试药物配成所需浓度，再将其混入生理盐水中，静脉注射入药物组小白鼠体内，空白组小白鼠体内注入等量的生理盐水；
s3：待药物注射入药物组小白鼠后的4-12h后，取不同时间点的药物组的小白鼠，用毛细玻璃管从小白鼠眼球后静脉取血，对照组与4-12h同法取样备用；
s4：将对照组和药物组不同时间点取样的血液编号，对其进行离心后，取其上清液并进行hplc分析。
选用小白鼠作为药物代谢研究的对象，通过优化的实验分组方法，保证实验结果的准确性，尤其是对药物给药后不同时间点的样本进行取样提取和分析方法的优选，整个实验方法可操作性强，客观的反应药物在体内的真实代谢情况，实验结果准确度高，更加方便，且所需受试药物量少，成本低，劳动强度低，应用范围广泛。
s1步骤中，对照组和药物组小白鼠性别相同，体积相同，并对各小鼠的体积进行测量登记，取样前1min再对待取样小白鼠的体积进行再次测量登记，对其进行对比分析结果。
s2步骤中，小白鼠注射后，将其放入单独的带盖鼠笼，防止惊厥小白鼠乱窜，同时也防止小白鼠因惊厥互相伤害，从而影响实验结果。
s3步骤中，药物组小白鼠注射药物后的4h，6h，8h，10h，12h时间点将药物组小白鼠和对照组小白鼠取出，并取眼球后静脉血，采血时用一手抓住鼠尾并提起，放在表面较粗糙的台面或笼具盖上，用另一手食指和拇指抓住小鼠尾巴移交给无名指和小指夹住，再用拇指和食指捏住双耳及头颈部皮肤固定，提起小鼠，当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。一手持硬质毛细玻璃管，将毛细玻璃管与鼠眼球成约45°从眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180°使斜面对着眼眶后界。刺入深度约2-3mm，当感到阻力时即停止推进，同时将针向后略退，若穿刺适当，血液即自动顺着玻璃管流入离心管中，得到所需的血量后即可拔出玻璃管，眼眶后静脉丛采血法方法简单，便于掌握，血流较快，采血量多，能在较短时间内采到3-5ml血，伤口较小，愈合较快，成功率高，死亡率低。
s4步骤中，使用离心机对血液样本进行离心，离心机转速为12500转/min，离心后静止2min，然后取其上清液，将其进行hplc分析，并进行表格登记，每次对样本进行离心时先对离心机使用蒸馏水进行清理风干。
s2步骤中，根据被分析药物的性质选择溶剂溶解或萃取。
s3步骤后，分别取对照组和药物组皮下细胞进行切片分析。
s1-s5步骤中，保持安静，禁止吵闹惊吓小白鼠，影响实验结果。
综上，选用小白鼠作为药物代谢研究的对象，通过优化的实验分组方法，保证实验结果的准确性，尤其是对药物给药后不同时间点的样本进行取样提取和分析方法的优选，整个实验方法可操作性强，客观的反应药物在体内的真实代谢情况，实验结果准确度高，更加方便，且所需受试药物量少，成本低，劳动强度低，应用范围广泛。
需要说明的是，术语“包括”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。