专利名称：一种红细胞表面抗原和凝集素的检测方法
技术领域：
本发明属于医学领域用于检测红细胞表面抗原物质和血浆里凝集素的方法。
红细胞凝集技术很早以前即用于检测红细胞表面抗原物质和血浆里凝集素。如血型抗原，特异性受体和血型抗体等。近年来发展出多种直接或间接的红细胞凝集方法，用于多种临床检测。经典的方法是将红细胞与凝集素安一定比例混合在玻璃板上或试管里，通过轻微的晃动，观察红细胞的凝集情况，凝集与未凝集的细胞处于同一夜相之中，要凭人的肉眼观察，很容易搞错。
本发明的目的在于克服经典检测红细胞抗原和凝集素的方法中，凝集与未凝集的细胞处于同一夜相不便于观察，很容易搞错的缺点，根据固相层析的原理，发明一种将凝集与未凝集的红细胞分开，以便于直观判断的方法。
本发明主要靠如下手段实现。
它由试纸条(一)、试纸条(二)、和展开液组成，试纸条(一)、在试纸条(二)、下方，并相连；将以知的凝集素或抗原试样和被测样分别加在或混合后加在试纸条(一)中间位置，称反应区，然后在其下方滴加展开液或将试纸条(一)下方末端浸于展开液中，开始时反应物与，展开液不相混合，在展开液对试纸条(一)反应区内反应物的推进作用和试纸条(二)对试纸条(一)，反应区内反应物的吸附作用，使反应区内液体移到试纸条(二)。层析结果，在试纸条(一)反应区呈本底白色，说明被测试样的抗原与已知凝集素无关，没有被凝集，判断为阴性。若试纸条(一)反应区呈红色，说明被测试样的抗原与已知凝集素有关，被凝集，判断为阳性。
按照上述的检测方法，也可将已知的凝集素预先加在展开液中，然后将加滴有被测样品的下方加滴展开液或将未端浸于展开液中，得出检测结果。按照上述的检测方法，其中所使用的试纸条(一)为能使细胞以毛细管虹吸作用通过的吸湿材料构成；其中所使用的试纸条(二)是一种具有强吸湿材料构成，其吸湿强度是试纸条(一)的3-5倍；其中所使用的展开液是一种不使红细胞破裂和凝集的溶液，如生理盐溶液和多种PH缓冲溶液。
下面结合
本检测方法。
如附图所示(1)试纸条(一)，(2)试纸条(二)，(3)展开液，(4)展开液曹或滴液瓶，(5)反应区。
1、测定红细胞表面抗原预先将凝集素以液体或脱水形式(采用冻干或干燥方法)附着在试纸条(一)的中段也称反应区，将待检测的血样品加在凝集素附近，然后在血样品及凝集素的下方滴加展开液或把试纸条(一)的下方末端浸于展开液中，展开液以毛细管虹吸作用推动反应区内红细胞与凝集素混合并推向试纸条(二)，试纸条(二)靠其自身的强吸湿作用，吸收反应区内的液体，若发生凝集，以凝集的红细胞由于体积远大于单个细胞，而滞留在试纸条(一)上使该部分即反应区保留红色，属阳性结果。没有发生凝集其红细胞随展开液全部进入试纸条(二)，使反应区即呈试纸条(一)本底色即白色，属阴性。
2、测定样品的未知凝集素将未知的凝集素样品与已知抗原的红细胞分别加于试纸条(一)的中段也称反应区，然后在未知凝集素样品和已知抗原的红细胞下方滴加展开液或把试纸条(一)下方末端浸于展开液中，展开液以毛细管虹吸作用推动未知凝集素样品和已知抗原的红细胞混合并推向试纸条(二)。如未知凝集素恰能凝集已知抗原的红细胞，凝集的红细胞滞留在反应区，使反应区呈红色，属阳性结果。如未知的凝集素不能凝集已知抗原的红细胞，红细胞则随展开液全部进入试纸条(二)，使反应区呈试纸条(一)本底色即白色，属阴性。
本发明的检测方法，在具体操作时，也可将已知的凝集素或已知抗原的红细胞与待检血样品预先混合后，再滴加于试纸条(一)中段即反应区，然后在其下方滴加展开液或将试纸条(一)下方末端浸于展开液中进行检测反应。也可将已知的凝集素预先滴加在展开液中，再按检测方法，将待检血样品帝加在试纸条(一)中段即反应区，然后在其下方滴加含有已知凝集素的展开液或将试纸条(一)下方末端浸入含有已知凝集素的展开液中进行检测反应。
综上所述，用本发明的方法可实现，用已知的凝集素检测相应的红细胞表面的抗原；用已知抗原的红细胞检测相应的凝集素。本发明所述的试纸条(一)是一种能使细胞以毛细管虹吸作用通过的吸湿材料构成。如特殊性质的滤纸、玻璃纤维、硝酸纤维薄膜等。试纸条(二)是由强力吸湿物质构成，其吸湿强度应大于试纸条(一)，一般是试纸条(一)的3-5倍。如纸浆板、滤纸、吸湿剂等，它用于吸收试纸条(一)的液体和未凝集的红细胞。所谓的展开液，是一种不使红细胞发生溶血和凝集的溶液，具有高的渗透力。但它本身不使红细胞破裂或凝集。
本发明的检测方法与常规的或经典的方法相比具有简便、快速、结果确切等优点。
权利要求
1.一种红细胞表面抗原和凝集素的检测方法，其特征在于由试纸条(一)、试纸条(二)、和展开液组成；试纸条(一)在试纸条(二)下方并相连；将已知的凝集素或抗原试样和被测试样分别加在或混合后加在试纸条(一)中间位置称反应区，然后在其下方滴加展开液，或把试纸条(一)下方末端浸于展开液中；层析结果在试纸条(一)反应区呈本底白色判断为阴性，反应区呈红色为阳性。
2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于可将已知的凝集素预先加在展开液中，然后将加滴有被测样品的试纸条(一)下方滴加展开液或将末端浸于展开液中，得出检测结果。
3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所使用的试纸条(一)为能使未凝集的细胞以毛细管虹吸作用通过的吸湿材料构成。
4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所使用的试纸条(二)是由具有吸湿性的材料构成，其吸湿强度是试纸条(一)的3-5倍。
5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于所使用的展开液是一种不使红细胞破裂和凝集的溶液。
全文摘要
本发明属于医学领域用于检测红细胞表面抗原物质和血浆里凝集素的方法红细胞凝集技术用于检测,属旧有技术,但凝集与未凝集的细胞处于同一液相之中,要凭人的肉眼观察易搞错。本发明根据细胞固相层析的原理,设计一种方法将其分开,便于观察、判断。由试纸条(一)、试纸条(二)和展开液组成,试纸条(一)在试纸条(二)下方并相联,将已知的凝集素或抗原和被测试样加在试纸条(一)上,然后在其下方滴加展开液或将试纸条(一)下方末端浸于展开液中。层析结果试纸条(一)呈本底白色判定为阴性,若呈红色,判定阳性。
文档编号G01N33/50GK1244661SQ98117210
公开日2000年2月16日 申请日期1998年8月6日 优先权日1998年8月6日
发明者范启修, 李洲 申请人:范启修, 李洲