一种测定水产品接触材料中芳香胺的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及水产品中有害化学成分分析测定技术领域，具体涉及一种测定水产品 接触材料中芳香胺的方法。
【背景技术】
[0002] 芳香胺（Aromaticamine)是一种重要的化工原料，被广泛应用于化学染料和包装 材料中，是一类被人们熟知的有毒有害物质。芳香胺及其衍生物具有诱变因子，可以通过吸 入、食入或透过皮肤吸收而导致中毒，能通过形成高铁血红蛋白，造成人体血液系统损害， 也可以直接作用于肝细胞，引起中毒性肝损害，其中一些芳香胺衍生物还具有致癌和致突 变的作用，即使在低浓度下，对动物和人体都具有致癌性。
[0003] 水产品中芳香胺的主要来源是与之接触的材料，接触材料中若存在芳香胺类物 质，很容易在特定条件下迁移至水产品中，对消费者的身体健康带来非常大的安全隐患。 近年来，国际上对芳香胺的污染问题越来越重视，欧盟规定使用芳香族异氰酸酯为原料和 偶氮染料的食品接触材料不可释放出芳香胺类物质（以苯胺计），2007年颁布的新指令 2007/19/EC中更新其检出限为0. 01mg/kg(以苯胺计）。目前，芳香胺迁移量的检测技术主 要为气相色谱法、离子交换色谱法、高效液相色谱法、色谱质谱联用、毛细管电泳法等。气相 色谱和高效液相色谱法灵敏度较高，对芳香胺进行分离检测可以实现自动化操作，简便易 行，而色谱质谱联用技术则使检测的灵敏度更上了一个台阶。但是，由于采用上述方法对芳 香胺进行检测时，通常需要进行衍生化，过程非常繁琐，不易进行。毛细管电色谱检测技术 则主要应用电渗流或电渗流结合压力流来推动流动相可以说是HPLC(高效液相色谱法）和 HPCE(高效毛细管电泳）的有机结合，它不仅克服了HPLC中压力流本身流速不均匀引起的 峰扩展，而且柱内无压降，使峰扩展只与溶质扩散系数有关，从而获得了接近于HPCE水平 的高柱效，同时还具备了HPLC的选择性。
【发明内容】
[0004] 本发明所要解决的技术问题是针对现有技术而提供一种简便、快速且灵敏度高的 测定水产品接触材料中芳香胺的方法。
[0005] 本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种测定水产品接触材料中芳香 胺含量的方法，其特征在于包括以下步骤：
[0006] ( 1)水产品接触材料洗净，晾干后称重，根据接触材料重量，将接触材料按照0. 5g 接触材料/1〇〇~ll〇ml水的比例放入水中浸泡，密封后放入89°C~90°C水浴内，lh后根据 需要取出适量浸泡液，待冷却至室温后备用；
[0007] (2)将上述浸泡液的pH值调至6~10,接着将浸泡液以0. 8~1. 2ml/min的流速， 匀速通过活化后的固相萃取柱，该浸泡液从固相萃取柱流出后，用超纯水进行清洗，抽干后 再加入2~10ml洗脱溶剂进行洗脱，收集适量洗脱液，用氮吹仪吹至近干，定容至lml，过 0. 22iim滤U旲后，直于样品瓶中备用；
[0008] (3)上述样品采用加压毛细管电色谱仪进行检测，其中所用毛细管电色谱柱为 EP-100-20/45-3-C18,柱温为常温，流动相为甲醇和磷酸氢二钾水溶液，该流动相的pH值 为4~8,流动相中磷酸氢二钾浓度为5mmol/L~50mmol/L;
[0009] 梯度洗脱条件为：0~6min，流动相中甲醇含量65%~70%，6~30min，流动相中 甲醇含量70%~90%，流动相的流速均为0. 04ml/min;
[0010] 其他检测条件：同时紫外检测波长为240nm，外加分离电压范围为2~10kv。
[0011] 上述芳香胺为苯胺（Aniline)、2, 6-二甲基苯胺（2, 6-Dimethylaniline)、邻甲 氧基苯胺（〇-Methoxyaniline)、对氯苯胺（p-Chloroaniline)以及3,3'-二甲基联苯胺 (3, 3' -DimethvlbenzidineF)〇
[0012] 由于芳香胺中带有氨基，因此浸泡液的pH值会对固相萃取中芳香胺的吸附效果 产生影响，本发明中浸泡液的pH值为9。
[0013] 所述固相萃取柱为EnviTM-ChromP柱，由于EnviTM-ChromP柱采用苯乙烯二乙 烯基苯作为填料，有较大数量的比表面积和较低的表面活性，能够提供一种理想的液液分 配的支撑表面，使得芳香胺类物质有最大程度的回收率。
[0014] 固相萃取中浸泡液的流速大小会对芳香胺的吸附和回收产生影响，作为优选，浸 泡液在固相萃取柱中的流速为lml/min。
[0015] 固相萃取中洗脱溶剂的选择关系到能否将吸附在固相萃取柱上的芳香胺完全洗 脱下来，所以洗脱溶剂的选择十分重要，本发明中洗脱溶剂为甲醇，且甲醇的用量为6ml，甲 醇不仅能将上述5种芳香胺很好地洗脱下来，而且为第三步加压毛细管电色谱中的流动相 之一，因此固相萃取中选用甲醇作为洗脱溶剂，进一步，选用的洗脱溶剂的用量为6ml，6ml 的甲醇不仅能使5种芳香胺较好地洗脱下来，且在氮吹过程中损失较小。
[0016] 所述流动相pH值为8,该流动相中磷酸氢二钾的浓度为20mmol/L，由于芳香胺为 弱碱性物质，所以流动相的pH值对芳香胺的带电情况和电渗流有很大影响，pH值为8时，5 种芳香胺均能较好地分离；缓冲盐对于毛细管电色谱系统的稳定以及目标化合物的分离起 着重要作用，因此本发明中流动相中磷酸氢二钾的浓度选为20mmol/L。
[0017] 分离电压产生的电渗流推动力是加压毛细管电色谱中目标分析物分离的主要动 力之一，分离电压增大使得电渗流增大，目标分析物的保留时间减少，但分离电压过大，5中 芳香胺的分离与基线的稳定情况受到影响，毛细管电色谱柱内焦耳热效应增加，使得分离 效率降低，综上，本发明中外加分离电压为6kv。
[0018] 与现有技术相比，本发明的优点在于：本发明中利用固相萃取-加压毛细管电色 谱相结合的方法测定水产品接触材料中5种芳香胺类化合物的含量，其中，固相萃取能对 五种芳香胺进行较好地回收和吸附，而加压毛细管电色谱中由于结合了HPLC的分离选择 性和电渗流的推动力，5种芳香胺能够较好地分离，该方法线性关系良好，R2>0. 99, 5种芳香 胺的检出限在1. 0-4. 0mg/L之间，方法的回收率大于70. 1%，相对标准偏差（RSD)〈5. 7%，因 此该方法简便、快速且灵敏度高，可用于水产品接触材料中芳香胺含量的快速检测。
【附图说明】
[0019] 图1为实施例2中不同固相萃取小柱对五种芳香胺回收率的影响；
[0020] 图2为实施例2中不同固相萃取洗脱溶剂的体积对五种芳香胺回收率的影响；
[0021] 图3为实施例3中磷酸氢二钾pH值变化与