一种半合成药物的红外光谱分析方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及药物分析技术领域，尤其是涉及一种半合成药物的红外光谱分析方 法。
【背景技术】
[0002] 半合成药物是指在天然药物提取物的基础上，进行化合结构改造，所获得药物的 统称。而天然药物提取物的质量对最后成药的质量至关重要。
[0003] 天然药物指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在天然药物化学 成分系统研究的基础上，主要用于评价天然药物及其提取物质量的真实性、优良性和稳定 性。
[0004] 近几年来，生物技术迅猛发展，生命科学与色谱分离技术的交叉形成了一种新的 综合技术-生物色谱法，这为天然药物效应物质基础研究另辟蹊径。该法是应用最早的生 物指纹图谱技术，包括分子生物色谱、生物膜色谱和细胞生物色谱等，其基本原理是以各种 具有生物活性的材料作为固定相，将活性生物大分子或者活性细胞膜固着在色谱担体上作 为靶标。根据天然药物与酶、受体或细胞膜等靶标的相互作用的强弱不同而将不同的成分 分离开来，能够对天然药物的多种活性成分进行快速筛选，弥补了目前化学指纹图谱控制 天然药物质量会与药效脱钩的不足，具有一定的药理学或生理学意义。
[0005] 在半合成药物的制备过程中，需要对有关物质的含量进行测定，以保证产品的质 量和批次的稳定。目前，常规采用HPLC法测定相关物质的含量，即对每批次的天然药物提 取物进行称量、溶解、稀释、HPLC进样等步骤，再与对照品通过峰面积归一化法计算含量，得 到每批天然药物提取物指标成分含量值。这种测定方法除流动相与对照品在短期内可连续 使用外，每次样品含量测定时均要重复以上3个操作，因此，HPLC含量测定方法繁琐，周期 较长，无法快速地预测提取物中相关成分的含量。因此急需一种快速、有效、可行的分析方 法用于半合成药物的质量监控。
[0006] 红外光谱是鉴别物质和分析物质化学结构的有效手段，已被广泛应用于物质的定 性鉴别、物相分析和定量测定，并用于研究分子间和分子内部的相互作用。此外，红外光谱 还具有测试迅速，操作方便，重复性好，灵敏度高，试样用量少，仪器结构简单等特点，它已 成为现代药物分析领域不可或缺的工具。所以将红外光谱图与色谱图相关联，建立模型，分 析预测天然药物提取物中相关成分的含量，解决了现有技术中存在的问题。
[0007]
【发明内容】
[0008] 本发明所要解决的技术问题是：提供一种半合成药物的红外光谱快速分析方法， 将红外光谱的宏观指纹特性应用于半合成药物的质量监控，从整体上对半合成药物的 质量进行控制，不仅快速、有效、可行，而且安全、绿色、环保，能够为半合成药物走向国际提 供技术支撑。
[0009] 为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：一种半合成药物的红外光谱分析方 法，包括以下步骤： a. 取不同批次的天然药物提取液经高效液相色谱法检测，得到药物的指纹图谱，其中 用于提取药物的溶剂选自水X1-C 5的醇、乙酸乙酯、乙醚、氯仿、石油醚中的一种或几种的混 合溶剂； b. 将天然药物提取液分别经过减压浓缩以及冷冻干燥后，对其进行红外谱图扫描，并 对红外光谱进行预处理； c. 将高效液相方法获得有效成分数据同该样品的红外光谱相关联，建立校正模型，分 析各红外光谱图中主要特征峰的归属，即可对各提取部位样品的主体成分进行分析鉴定。 [0010] 优选的，在步骤b中，减压浓缩采用的是旋转蒸发仪。
[0011] 优选的，在步骤b中，先进行平滑处理，再进行自动基线校正。
[0012] 优选的，在步骤b中，红外图谱扫描采用ATR法。
[0013] 采用了上述技术方案，本发明的有益效果为：本发明采用以下原理，单一化合物的 红外光谱是分子中各个基团所有吸收峰的整体体现，具有指纹特性，混合物的红外光谱则 是所有化合物特征吸收峰的集合，且主体成分特征峰掩盖少量或微量成分特征峰，即混合 物的红外光谱具有宏观指纹特性。基于红外光谱本身丰富的指纹性及利用主体成分特征峰 的峰位置、峰形状、峰强度及其变化，即可对混合物进行分析鉴定。而当不同物质特征峰重 叠严重或差异较小无法区分时，可借助分辨率较高的导数谱图进行对比鉴定。通过建立定 量分析模型，实际应用本方法进行样品测定时，只需扫描一张红外光谱图带入模型即可预 测出含量值，采用本发明提出的红外光谱快速分析方法，即可直接、快速、简便、无损的对半 合成药物进行分析、鉴定，不失半合成药物的原本性和整体性，进而对其质量进行控制。
【具体实施方式】
[0014] 以下通过实施例，进一步说明本发明，但不作为对本发明的限制。
[0015] 实施例1 利用HPLC法测定丹参中丹参素的含量 色谱条件及系统适用性实验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以冰醋酸：水 (1:50)为流动相A相，以冰醋酸：甲醇（1:100)为流动相B相，按以下线性梯度洗脱： 0min(10%)B, 30min(60%B), 50min(70%B);柱温 30°C ;检测波长为 254nm。
[0016] 对照品溶液的制备：精密称取丹参素对照品，加甲醇溶解并稀释成每1ml含 0. 05mg丹参素溶液，即得。
[0017] 供试品溶液的制备：准确量取10批丹参提取物各2g至于圆底烧瓶中，加冰醋 酸-甲醇（5:1)的混合溶液IOml和石油醚20ml，置水浴中加热回流1小时，放冷，分取有机 相，水相再用石油醚提取3次，每次20min，至石油醚层近无色，合并石油醚提取液，回收石 油醚至干，残渣用甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
[0018] 测定法：分别精密量取对照品溶液2μ1，供试品溶液20μ1，注入色谱仪，测定，即 得。
[0019] 对这10批的丹参进行红外光谱（ATR)扫描 实验采用NIC0LET6700傅立叶变换红外光谱仪（Thermo Fisher，USA)辅以ATR衰减全 反射附件，DTGS检测器，分辨率为4cm \测量范围4000~650cm \
[0020] 取冷冻干燥的各提取部位样品各适量，置红外光谱仪衰减全反射ATR附件上， 扫描32次累加获谱，实时扣除水和CO 2的干扰。
[0021] 将各光谱图进行平滑和基线校正处理，具体为：先进行13点平滑处理，再进行自 动基线校正。
[0022] 将HPLC所得到的含量值和红外谱图谱相关联，经过分析研究引入结合含量纯物 质选取特征波段的方法，结合丹参素的特征峰，选取特征表征最强的C-C双键吸收波段 1300-600cm-l，确定最佳建模波段，进行建模，结果模型拟合率达到0. 9908,接近于1，达到 定量分析的要求。
[0023] 将一批盲样丹参素进行ATR扫描，将所得图谱代入上述所建模型，其预测值和真 实值分别为21. 25和21. 35。
【主权项】
1. 一种半合成药物的红外光谱分析方法，其特征在于，包括以下步骤： a. 取不同批次的天然药物提取液经高效液相色谱法检测，得到药物的指纹图谱，其中 用于提取药物的溶剂选自水X1-C 5的醇、乙酸乙酯、乙醚、氯仿、石油醚中的一种或几种的混 合溶剂； b. 将天然药物提取液分别经过减压浓缩以及冷冻干燥后，对其进行红外谱图扫描，并 对红外光谱进行预处理； c. 将高效液相方法获得有效成分数据同该样品的红外光谱相关联，建立校正模型，分 析各红外光谱图中主要特征峰的归属，即可对各提取部位样品的主体成分进行分析鉴定。2. 根据权利要求1所述的半合成药物的红外光谱分析方法，其特征在于，在步骤b中， 减压浓缩采用的是旋转蒸发仪。3. 根据权利要求1所述的半合成药物的红外光谱分析方法，其特征在于，在步骤b中， 先进行平滑处理，再进行自动基线校正。4. 根据权利要求1所述的半合成药物的红外光谱分析方法，步骤b中红外图谱扫描采 用ATR法。
【专利摘要】本发明涉及一种半合成药物的检测方法，将药物的红外光谱图与色谱图相关联，建立模型，分析预测药物中相关成分的含量，该方法从整体上对半合成药物的质量进行控制。
【IPC分类】G01N21/35
【公开号】CN105092507
【申请号】CN201410214664
【发明人】严洁, 李轩
【申请人】天津市汉康医药生物技术有限公司
【公开日】2015年11月25日
【申请日】2014年5月21日