谱中各色谱峰的分离情况确定了 8个指纹共有峰，通 过与对照品对照，确认7号峰为苯甲酸钠。见图9，10批强力枇杷露的供试品溶液，分别按照 供试品溶液的制备方法获得，然后按照UPLC条件进行分析，见表11。标定了共有峰8个，各共 有峰相对保留时间依次为：1.264、2.161、4.539、5.266、7.373、7.609、12.281、17.075。并通 过与药材的保留时间比较，确认了其中5个主要峰，其中1号峰为桔梗药材，2号峰为白前药 材，3号峰为百部药材，5号峰为桑白皮药材，7号峰为苯甲酸钠。
[0072] 色谱条件:ACQUITY UPLC BEH &8(2.1\100臟，1.7以!11)色谱柱；以甲醇为流动相八， 〇. 1 %甲酸为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，见表11;柱温为35°C ;流速为0.2ml/ min;详见表1〇
[0073] 参照物溶液的制备:精密称取苯甲酸钠对照品适量，加甲醇配制成每lml含有苯甲 酸钠0.2mg的参照物溶液。
[0074] 供试品溶液的制备:取强力枇杷露样品离心，精密量取1ml，上于SPE固相萃取小柱 (Welchrom C18E 500mg/6ml)，水洗脱定容至5ml容量瓶中，摇匀，0.22μπι微孔滤膜滤过，取续 滤液，即得。
[0075] 测定法:分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各?μL，注入超高效液相色谱仪， 记录色谱图，即得。
[0076] 按中药色谱指纹图谱相似度评价系统，供试品指纹图谱与对照片指纹图谱经相似 度计算，相似度不得低于〇. 90。
[0077] 本发明的无糖型强力枇杷露指纹图谱的建立方法与现有技术相比，具有以下优 占 .
[0078] 通过对指纹图谱检测条件的考察和获取过程的方法学验证以及对多批样品的测 试，最终建立了强力枇杷露的指纹图谱。通过对成品、药材、中间体相关性的考察，对成品指 纹图谱中的色谱峰进行了追踪和确认。这样，通过稳定的指纹图谱和提高后的质量标准，使 强力枇杷露的质量得以更好的控制。
【附图说明】
[0079] 图Η ;波长210nm对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0080] 图1-2;波长237nm对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [00811图1-3;波长245nm对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [0082]图1-4;波长254nm对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [0083]图1 -5;波长286nm对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [0084]图1-6;波长300nm对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [0085]图1-7;波长330nm对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0086]图2-1;流动相为甲醇-0.1 %甲酸对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0087]图2-2;流动相为甲醇-0.2 %冰醋酸对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0088]图2-3流动相为乙腈-0.1 %甲酸对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0089]图2-4流动相为甲醇-水对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0090]图2-5流动相为甲醇-0.2 %三氟乙酸对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0091]图3-1 ACQUITY UPLC BEH (：18(2.1\10〇111111，1.7以111)色谱柱对强力枇杷露分析的 UPLC色谱图
[0092] 图3-2ACQUITYUPLCBEHPhenyll·7μm2·lX100mm色谱柱对强力枇杷露分析 的UPLC色谱图
[0093] 图3-3ACQUITYUPLCBEHPhenyll·7μm2·lX100mm色谱柱对强力枇杷露分析 的UPLC色谱图
[0094]图4-1柱温30°C对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [0095]图4-2柱温35°C对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [0096]图4-3柱温40 °C对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [0097]图5-1流速0.2ml/min对强力枇杷露分析的UPLC色谱图 [0098] 图5-2流速0.3ml/min对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0099] 图5-3流速0.4ml/min对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0100]图6-1强力枇杷露直接稀释进样对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0101]图6-2强力枇杷露乙酸乙酯萃取进样对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0102]图6-3强力枇杷露乙酸乙酯萃取后水液进样对强力枇杷露分析的UPLC色谱图
[0103]图6-4强力枇杷露D101型大孔吸附树脂柱水洗液进样对强力枇杷露分析的UPLC色 谱图
[0104] 图6-5强力枇杷露D101型大孔吸附树脂柱50 %乙醇液进样对强力枇杷露分析的 UPLC色谱图
[0105] 图6-6强力枇杷露D101型大孔吸附树脂柱95 %乙醇液进样对强力枇杷露分析的 UPLC色谱图
[0106] 图6-7强力枇杷露上SPE固相萃取小柱后水洗液进样对强力枇杷露分析的UPLC色 谱图
[0107] 图6-8强力枇杷露上SPE固相萃取小柱后水洗液进样
[0108] 图7苯甲酸钠的UPLC色谱图 [0109]图8强力枇杷露样品UPLC色谱图 [0110]图9 10批强力枇杷露指纹图谱
[0111] 图10-1枇杷叶药材UPLC色谱图
[0112] 图10-2枇杷叶药材与中间体UPLC色谱图对比
[0113] 图10-3枇杷叶药材与强力枇杷露成品UPLC色谱图对比对比
[0114] 图11-1百部药材UPLC色谱图
[0115] 图11-2百部药材与中间体对比
[0116] 图11-3百部药材与成品对比
[0117] 图12-1白前药材
[0118] 图12-2白前药材与中间体对比
[0119] 图12-3白前药材与成品对比 [0120]图13-1桑白皮药材
[0121] 图13-2桑白皮药材与中间体对比
[0122] 图13-3桑白皮药材与成品对比
[0123] 图14-1桔梗药材
[0124] 图14-2桔梗药材与中间体对比
[0125] 图14-3桔梗药材与成品对比
[0126] 现结合附图和实施例对本发明作进一步说明：
【具体实施方式】
[0127] 实施例1样品测定
[0128]对10批强力枇杷露样品，依照本研究确定的UPLC指纹图谱条件进行了测定，强力 枇杷露的主要色谱峰相对保留时间如表2所示，相对峰面积如表2所示，将UPLC色谱图以* .ARW格式导出，并将其导成TXT格式，导入相似度评价系统进行比较分析。
[0129]以编号1的样品为参照图谱，以上述确定的8个共有峰作为校正点，采用"中位数 法"进行相似度的评价分析。参照图谱及10批强力枇杷露样品指纹图谱匹配图，匹配结果见 表 2-4。
[0130] 表2 10批强力枇杷露指纹图谱测定结果(相对保留时间）
[0131]
[0132]表3 10批强力枇杷露指纹图谱测定结果(相对峰面积）
[0135]表4 10批强力枇杷露相似度计算结果
[0136]
[0137] 从以上数据结果可看出，10批强力枇杷露样品的相似度大于0.90,强力枇杷露样 品间有显著差异，色谱峰面积RSD为26.87%~45.26%。
[0138] 实施例2强力枇杷露药材与成品、中间体相关性
[0139] 强力枇杷露的生产工艺除薄荷脑外，其余枇杷叶等六味药材加水煎煮两次，每次 2h，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约750ml，得强力枇杷露的中间体，强力枇杷露的中间体加 苯甲酸钠2.5g，搅拌使溶解，加甜菊素2g，继续加热至沸，保持20分钟，静置，滤过，加枸橼酸 〇.5g，用乙醇溶解的香精适量及薄荷脑，搅拌，均匀，静置，滤过，加水至1000ml，混匀，即得 成品强力枇杷露样品。
[0140] 供试品的制备按强力枇杷露生产工艺和"溶液的制备"项下操作，自制枇杷叶、百 部、白前、桑白皮和桔梗药材的制备参照按强力枇杷露生产制备工艺进行水煎制备。
[0141] 指纹图谱的测定取强力枇杷露成品、单味药材的水煎液、中间体均上于SPE固相萃 取小柱上(Waters S印-Pak Vac C18-500mg)，水洗置5ml量瓶中混匀，即得。
[0142] 色谱条件:ACQUITY UPLC BEH (：18(2.1\10〇111111，1.7以111)色谱柱；以甲醇为流动相 A，0.1 %甲酸为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱，见下表；柱温为35°C;流速为 0.2ml/min;梯度如下表
[0143] U