出 检测数据。
[0019]步骤1中，发射绿色荧光的gQDs水溶液和发射红色荧光的rQDs水溶液的制备方法 为：称取0 . 〇638g蹄粉和0.0449g硼氢化钠置入10mL比色管中，加入4mL超纯水，通N2除氧 15min后置于4 °C冰箱中反应得到上清液呈紫色透明的碲氢化钠(NaHTe)溶液;将0.1142g CdCl2 ? 2.5H20和75yL巯基丙酸加入到含50mL二次水的三颈瓶中，氮气氛下磁力搅拌5min， 用用2M NaOH调节溶液pH至8.5，迅速加入上述制备的恥1^溶液21^，继续搅拌3〇1^11，10〇1€ 下回流0.5h和12h，回流0.5h后得到gQDs，回流12h后得到rQDs;停止反应恢复至室温，加入 100mL乙醇搅拌然后静置15min，离心后，将沉淀物避光自然干燥，再重新分散得到10mg ml/1 的gQDs水溶液和10mg ml/1的rQDs水溶液，4°C避光保存，备用。
[0020] 步骤2中，单分散Si02纳米球分散液的制备方法为：取一个经过严格清洗的250mL 单口烧瓶，分别加入80mL乙醇，4.85mL二次水和3.6mL的氨水（28wt % )，55°C下搅拌反应 1 〇min，然后将3. lmL正硅酸四乙酯(TE0S)与8mL乙醇的混合溶液迅速加入，55°C下搅拌反应 4h后，停止反应;产物离心水洗后，干燥，将干燥的产物转移至水中，制得浓度为10mg ml/1的 Si02纳米球分散液。
[0021] 步骤3中，Fe3〇4@Si〇2磁珠(mSi〇2)分散液的制备方法为：将10mL乙二醇，10mL-缩 乙二醇，和0.5536g FeCl3 ? 6H20加入到烧杯中，搅拌30min后，向其中加入1.5g醋酸钠和lg 聚乙二醇并使其分散均匀，随后将其转移至25mL的反应釜中，200°C下反应2h;冷却后，将混 合物移至小烧杯中，磁分离、乙醇洗涤5次，避光干燥后，将干燥后的产物转移至水中，制得 浓度为20mg mL-1的Fe3〇4纳米球分散液；
[0022]取5mL Fe3〇4纳米球分散液加入到100mL的柠檬酸钠溶液（1M)中，室温下搅拌反应 3h，随后70°C下回流2h，磁分离去除清液，得到柠檬酸根修饰的Fe3〇4(C-F e3〇4);向制得的C-Fe3〇4加入0.5mL 3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTS)，搅拌反应3h，磁分离去除清液后，加入 0.15mL TE0S，1 OmL氨水（28wt % )和80mL乙醇，机械搅拌12h，磁分离、水洗多次，将制得的 mSi02重新分散在二次水中，得到mSi02的分散液，其质量浓度为10mg ml/1。
[0023]步骤4中，制备Si02@gQDs纳米球分散液时，所用的Si02纳米球分散液、聚二烯丙基 二甲基氯化铵溶液、gQDs水分散液的体积比为5:30:3;所用的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶 液的浓度为〇 . 4wt %，所制得的Si02@gQDs纳米球水分散液的浓度为1 Omg ml/1;所述的搅拌 反应均为3h。
[0024] 步骤5中，制备mSi〇2@rQDs分散液时，所用的mSi〇2、聚二稀丙基二甲基氯化铵、rQDs 水溶液的体积比为5:50:2;所用的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液的浓度为0.4wt%，所制得 的mSi02@rQDs分散液的浓度为10mg ml/1;加入聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液后的机械搅拌 反应为lh，加入rQDs水溶液后的机械搅拌反应为3h。
[0025] 步骤6中，制备Si02@gQDS-Aptamer荧光探针分散液时，所用的Si02@gQDs分散液、 EDC水溶液、NHS水溶液、Aptamer储备液的体积比为250 : 2 :1:1;所用的EDC溶液的浓度为 400mM，NHS溶液的浓度为200mM，所用的Aptamer储备液的浓度为100yM，所制得的Si0 2@ gQDs-Aptamer荧光探针分散液的浓度为10mg ml/1，所述的振荡反应时间为2h;Tris-HCl溶 液pH=7.4，浓度为1 OmM。
[0026] 步骤7中，制备mSi02@rQDs-cDNA磁性-荧光探针分散液时，所用的mSi02@rQDs的水 分散液、EDC水溶液、NHS水溶液、cDNA储备液的体积比为250: 2:1:1;所用的EDC溶液的浓度 为400mM，NHS溶液的浓度为200mM，所用的cDNA储备液的浓度为100yM，所制得的mSi0 2@ rQDs-cDNA磁性-荧光探针分散液的浓度为10mg mL-S所述的振荡反应时间为2h;Tris-HCl 溶液pH=7.4，浓度为1 OmM。
[0027] 步骤8中，制备磁控比率荧光传感器时，所用的Si02@gQDS-Aptamer荧光探针分散 液和mSi02@rQDs-cDNA磁性-荧光探针分散液的体积比为1:1，所制得mSi02@rQDs-cDNA/ Aptamer-gQDS@Si02纳米生物复合物分散液的浓度为10mg ml/1;第一次恒温振荡孵育的温 度为37°C，时间为2h;第二次恒温振荡孵育的温度为37°C，时间为60min;Tris-HCl缓冲溶液 A pH=7.4,浓度为 10mM，Tris-HCl缓冲溶液A中含有 120mM NaCl，20mM CaCl2,20mM MgCh和 5mM KCl;Tris-HCl缓冲溶液A pH=7.4,浓度为 10mM;
[0028] 在样品检测过程中，所用的mSi〇2@rQDs-cDNA/Aptamer-gQDs@Si〇2纳米生物复合 物、FBI标准品溶液、磁性分离后重新分散的纳米生物复合物的体积比为1:1:40,所用的FBI 标准品溶液浓度为0~20000pg ml/1。
[0029] 所用的Aptamer序列为：5，-NH2-ATA CCA GCT TAT TCA ATT AAT CGC ATT ACC TTA TAC CAG CTT ATT CAA TTA CGT CTG CAC ATA CCA GCT TAT TCA ATT AGA TAG TAA GTG CAA TCT-3'；cDNA序列为：5'-NH2-AGA TTG CAC TTA CTA TCT AAT TGA ATA AGC TGG TAT GTG CAG ACG TAA TTG AAT AAG CTG GTA TAA GGT AAT GCG ATT AAT TGA ATA AGC TGG TAT-3,。
[0030]四、有益效果：
[0031] (1)本发明结合磁性微球、CdTe量子点（QDs)荧光信标以及适配体分子识别技术， 构建比率荧光适配体传感器，对FBI快速识别、富集、分离及高灵敏检测等优势。
[0032] (2)本发明构建的比率荧光传感器可以提供内部校正以消除环境因素，激发强度 变化和探针浓度等因素的干扰，大大减少误差，提高检测的准确性。
[0033] (3)本发明构建的磁控比率荧光传感器为FBI的高灵敏靶向富集检测提供简便、快 捷、可靠的新手段，为公共卫生安全提供一种快速侦检的锐利工具，具有快速、灵敏和操作 简便、检测灵敏度高等特点。
[0034] (4)本发明所提出检测方法实现了FBI的比率检测，在50pg mL-1~ling mL-1的浓 度区间内，l〇g((Ig/Ir)Alg/I r)o)与FBI浓度呈现良好的线性关系，线性相关系数R2 = 0.9983,检出限为 16.7pg mL-1。
【附图说明】
[0035] 图1为实施例1中所制得的mSi〇2@rQDs-cDNA/Aptamer-gQDs@Si〇2纳米生物复合物 的焚光光谱图；
[0036]图2为实施例1中对FBI的检测数据图，其中（A)与为不同浓度FBI (自下而上:0(曲 线 a)，50(曲线 b)，100(曲线 c)，500(曲线 d)，1000(曲线 e)，2000(曲线 f)，4000(曲线 g)，7000 (曲线h)，11000 (曲线i)，15000 (曲线j)，20000(曲线k)pg ml/1)对应的适配体传感体系的荧 光光谱；（B)为ag/Ir)/(I g/Ir)Q与FBI浓度之间的对应关系，插图为FBI标准品检测的标准曲 线。
【具体实施方式】
[0037] 下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：
[0038] 实施例1
[0039] (1 )gQDs水溶液和rQDs水溶液的制备：
[0040] 按照现有的方法制备gQDs和rQDs，具体如下：称取0.0638g碲粉和0.0449g硼氢化 钠置入10mL比色管中，加入4mL超纯水，通N2除氧15min后置于4°C冰箱中反应得到蹄氢化钠 (NaHTe)溶液。将0.1142g CdCl2 ? 2.5H20和75yL巯基丙酸加入到含50mL二次水的三颈烧瓶， 氮气保护下磁力搅拌5min，用2M NaOH调节溶液pH至8.5,迅速加入上述制备的NaHTe溶液 2mL，继续搅拌30min，100°C下回流0.5h和12h，回流0.5h后得到gQDs，回流12h后得到rQDs。 停止反应恢复至室温，加入100mL乙醇搅拌然后静置15min。离心后，将沉淀物避光自然干 燥，再重新分散得到l〇mg ml/1的gQDs水溶液和10mg ml/1的rQDs水溶液，4°C避光保存，备 用。
[0041 ] (2)Si02@gQDs-Aptamer荧光探针分散液的制备：
[0042]按照现有的方法制备Si02纳米球，具体如下:单分散Si02纳米球水分散液的制备方 法为:取一个经过严格清洗的的250mL单口烧