一种蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法及其应用，属于微生态制剂领域。该微生态制剂是将植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌菌种经发酵罐增菌培养后，与含有果胶、吐温80、甘油、甘露醇、海藻糖和碳酸氢钠的水溶液混合均匀，通过喷雾干燥技术制成微胶囊化活菌粉，将此菌粉与硒化卡拉胶、蛋氨酸锌及辅料混合均匀后制成。上述微生态制剂可在常温条件下储存，产品具有良好的肠溶性与生物粘附性。蛋鸡在饲喂正常日粮的基础上，添加该微生态制剂，不仅可以提高机体的抗氧化能力，使产蛋后期蛋鸡的输卵管受损程度降低，还可以抑制组织内炎性因子的过度释放，减轻炎症反应造成的损伤，从而保证机体组织与细胞的活力与完整性，维持机体健康并提高生产性能。
【专利说明】—种蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法及其应用
【技术领域】
[0001]本发明具体涉及一种蛋鸡饲用微生态制剂及其制备方法，属于微生态制剂领域。【背景技术】
[0002]鸡蛋是人类获得蛋白质的重要来源，深受国内外消费者的喜爱。长期以来，蛋鸡饲养者为提高鸡蛋产量，实现经济效益最大化，普遍采用高密度的笼养饲喂方式，使蛋鸡缺乏运动、免疫抵抗力下降、应激增加，且日粮的能量、蛋白比例不平衡，极易使蛋鸡组织器官发生病理性变化。而蛋鸡的健康是其发挥生产性能、实现效益最大化的根本。
[0003]相关研究表明，在蛋鸡产蛋过程中常会发生过氧化作用，如脂质过氧化破坏细胞膜结构和功能的完整，不良应激刺激机体产生大量的活性氧，引发脂质过氧化、蛋白质及DNA的氧化损伤等。同时炎症反应也是开产蛋鸡临床中常见的一种病理变化，在机体不同部位的组织和器官均可发生，尤以输卵管等部位发生最为常见。炎性相关因子的过度释放会导致组织细胞的损伤，进而破坏相应组织器官的完整性，使之无法发挥其正常生理功能，严重影响蛋鸡的健康，并降低其生产性能。
[0004]针对上述蛋鸡生产中存在的问题，目前国内外均无较好的解决方案。
【发明内容】
[0005]本发明为了控制蛋鸡生产中存在的上述难题，从健康家禽肠道内分离筛选出具有提高蛋鸡的抗氧化能力，抑制组织内炎性因子的过度释放，减轻炎症反应的益生菌菌种，通过复配加工制成高效活菌制剂，达到有效维护蛋鸡健康安全，提高生产性能的目的。本发明的目的是提供一种蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法及其应用，用于提高蛋鸡的抗氧化能力，使产蛋后期的输卵管受损程度降低，提高生产性能；用于抑制组织细胞内炎性相关因子的过度释放，减轻炎症反应，维护蛋鸡健康，提高禽产品的品质和产量。
[0006]本发明的目的是通过以下技术方案实现的，一种蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法，包括以下步骤:
(1)将植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌菌种分别经发酵罐增菌培养后混合，得到混合菌
液；
(2)将所述混合菌液与含有果胶、吐温80、甘油、甘露醇、海藻糖和碳酸氢钠的水溶液按相同体积充分混合均匀，经喷雾干燥后制成微胶囊化活菌粉；所述水溶液中果胶、吐温80、甘油、甘露醇、海藻糖、碳酸氢钠的质量百分数分别为0.5-1%,0.8-1.5%、0.8-1.2%、0.5-1%,3-6%、2-3.5% ；
(3)将所述微胶囊化活菌粉与硒化卡拉胶、蛋氨酸锌及辅料均匀混合，制得蛋鸡饲用微生态制剂。
[0007]禽源植物乳杆菌CCTCC 2012079 (LP1002)、禽源枯草芽孢杆菌CCTCC 2012078(BS0903)，是从历年来收集、保存的若干株益生菌菌种中，经多年反复筛选后获得的。禽源植物乳杆菌CCTCC 2012079(LP1002)已于2012年3月14日送中国典型培养物保藏中心(中国.武汉.武汉大学)保藏，名称及鉴别特征:植物乳杆菌(Lacto如CiBy1S p Iemtarum) ,I号:LP1002，保藏编号 CCTCC NO:M2012079 ;禽源枯草芽孢杆菌 CCTCC 2012078 (BS0903)已于2012年3月14日送中国典型培养物保藏中心(中国.武汉.武汉大学)保藏，名称及鉴别特征:枯草芽孢杆菌(ガsubtilis\l号:BS0903，保藏编号 CCTCC NO:M2012078。
[0008]每克所述蛋鸡饲用微生态制剂含有植物乳杆菌的个数为2.5-5亿。
[0009]每克所述蛋鸡饲用微生态制剂含有枯草芽孢杆菌的个数为10-25亿。
[0010]所述蛋鸡饲用微生态制剂中硒化卡拉胶的质量百分数为0.05-0.12%。
[0011]所述蛋鸡饲用微生态制剂中蛋氨酸锌的质量百分数为0.15-0.3%。
[0012]步骤(3)中所述辅料为葡萄糖。
[0013]上述蛋鸡饲用微生态制剂的应用，将所述蛋鸡饲用微生态制剂按1%的比例加入蛋鸡基础日粮中，经充分搅拌后给开产蛋鸡饲喂。
[0014]与现有技术相比，本发明具有以下有益效果:
第一，该微生态制剂所采用的禽源植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌为家禽益生菌，具有抑制病原菌生长、刺激机体的免疫反应、增强机体抗应激能力和为机体提供营养等作用。另夕卜，枯草芽孢杆菌还具有预防和治疗急性痢疾、降低胆固醇、抗辐射和抗氧化等益生活性。
[0015]第二，该微生态制剂采用果胶、甘露醇、海藻糖、碳酸氢钠等作为包被材料，利用微胶囊技术使所制得的活菌制剂能够保持其生物活性，并且更加稳定，可在常温下贮存，同时提高了资源的利用率。另外，选用碳酸氢钠作为包被剂，同时可提高胃内PH值，促进消化吸收并改善胃肠内微生物正常内环境；也具有抑制或杀害肠道致病菌，増殖益生菌，改善肠道内微生物菌群，促进动物生长。上述包被材料具有良好的生物相容性和生物黏附性，不受体内因素影响、具有控释缓释等优点。微生态制剂采用了碳酸氢钠与果胶作为肠溶性包被材料及海藻糖与甘露醇作为耐高温稳定剂，有效提高了益生菌的活性与稳定性。
[0016]第三，本发明的微生态制剂采用硒化卡拉胶作为硒源。研究发现无机硒(如亚硒酸钠)具有过氧化特性、毒性较大而生物利用率较低，对动物和环境可造成不良影响，而生物源性有机硒的活性超过无机硒，且动物胃肠道对有机硒的吸收效率要高于无机硒。
[0017]第四，本发明的微生态制剂在制备时将有机硒和有机锌与益生菌通过包被技术隔离开，可使硒、锌进入机体后既可作为益生元与益生菌相配合，又能直接被机体吸收，发挥其作用。
[0018]第五，通过实验与应用发现，本发明微生态制剂应用于蛋鸡饲料添加剂中，可有效提高蛋鸡的抗氧化能力，使产蛋后期蛋鸡的输卵管受损程度降低，同时抑制组织内炎性细胞因子的过度释放，减轻炎症反应造成的损伤，从而保证组织与细胞的活力与完整性，维护蛋鸡的健康并提高生产性能。
[0019]第六，本发明微生态制剂含有的益生元物质不仅可以提高蛋鸡的抗氧化能力，使产蛋后期输卵管受损程度降低，还可以抑制组织内炎性因子的过度释放，减轻炎症反应造成的损伤，从而保证机体组织与细胞的活力与完整性，維持机体健康并提高生产性能。
[0020]第七，本发明微生态制剂可在常温条件下储存，产品具有良好的肠溶性与生物粘附性。蛋鸡在饲喂正常日粮的基础上，添加该微生态制剂，不仅可以提高机体的抗氧化能力，使产蛋后期蛋鸡的输卵管受损程度降低，还可以抑制组织内炎性因子的过度释放，减轻炎症反应造成的损伤，从而保证机体组织与细胞的活力与完整性，維持机体健康并提高生产性能。
【专利附图】
【附图说明】
[0021]图1是实施例3停喂微生态制剂15天对产蛋后期蛋鸡笼养蛋鸡各组织IL-1 ^表达的影响对比图；
图2是实施例3停喂微生态制剂15天对产蛋后期蛋鸡笼养蛋鸡各组织IL-2表达的影响对比图；
图3是实施例3停喂微生态制剂15天对产蛋后期蛋鸡笼养蛋鸡各组织TNF- a表达的影响对比图；
图4是实施例3停喂微生态制剂45天对产蛋后期蛋鸡笼养蛋鸡各组织IL-1 3表达的影响对比图；
图5是实施例3停喂微生态制剂45天对产蛋后期蛋鸡笼养蛋鸡各组织IL-2表达的影响对比图；
图6是实施例3停喂微生态制剂45天对产蛋后期蛋鸡笼养蛋鸡组织IL-4表达的影响对比图；
图7是实施例3停喂微生态制剂45天对产蛋后期蛋鸡笼养蛋鸡组织TNF- a表达的影响对比图；
图8是实施例3停喂微生态制剂45天对产蛋后期蛋鸡笼养蛋鸡组织INF-r表达的影响对比图；
图9是本发明制得的微胶囊化 活菌粉扫描电镜照片图。
【具体实施方式】
[0022]实施例1
一种蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法，包括以下步骤:
(1)将植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌菌种分别经发酵罐增菌培养后混合，得到混合菌
液；
(2)将所述混合菌液与含有果胶、吐温80、甘油、甘露醇、海藻糖和碳酸氢钠的水溶液按相同体积充分混合均匀，经喷雾干燥后制成微胶囊化活菌粉(见图9);所述水溶液中果胶、吐温80、甘油、甘露醇、海藻糖、碳酸氢钠的质量百分数分别为0.5-1%、0.8-1.5%、
0.8-1.2%、0.5-1%, 3-6%, 2-3.5% ；
(3)将所述微胶囊化活菌粉与硒化卡拉胶、蛋氨酸锌及辅料均匀混合，制得蛋鸡饲用微生态制剂。
[0023]每克所述蛋鸡饲用微生态制剂含有植物乳杆菌的个数为2.5-5亿。
[0024]每克所述蛋鸡饲用微生态制剂含有枯草芽孢杆菌的个数为10-25亿。
[0025]所述蛋鸡饲用微生态制剂中硒化卡拉胶的质量百分数为0.05-0.12%。
[0026]所述蛋鸡饲用微生态制剂中蛋氨酸锌的质量百分数为0.15-0.3%。
[0027]步骤(3)中所述辅料为葡萄糖。
[0028]上述蛋鸡饲用微生态制剂的应用，将所述蛋鸡饲用微生态制剂按1%的比例加入蛋鸡基础日粮中，经充分搅拌后给开产蛋鸡饲喂。[0029]实施例2 将发酵罐培养后的植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌的液体发酵物按比例混合后，与含有
0.5%果胶、0.8%吐温80、0.8%甘油、0.5%甘露醇、6%海藻糖和3.5%碳酸氢钠的溶液按相同体积充分混匀后，经喷雾干燥后制成活菌粉，再将菌粉与硒化卡拉胶、蛋氨酸锌及葡萄糖混合均匀，得到蛋鸡饲用微生态制剂。检测后表明，每克微生态制剂含有植物乳杆菌2.5亿，枯草芽孢杆菌10亿，硒化卡拉胶和蛋氨酸锌的含量分别为0.5%和3%。将制备得到的微生态制剂按1%的比例加入基础日粮中，经充分搅拌后给开产蛋鸡饲喂。
[0030]实验选取两栋笼养开产蛋鸡，每栋10000只，分为对照组(C)和实验组(E)，两组在饲喂正常日粮的基础上添加微生态制剂。450日龄时C组停喂微生态制剂。停喂15、45d后两组分别随机选取十只，处死并收集血液及器官等样品进行相关指标的測定。
[0031]MDA即丙二醛，是脂质过氧化反应的主要产物，MDA的測定常常与SOD的測定相互配合，SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力，而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。SOD (超氧化物歧化酶)对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，其可以清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受伤害。
[0032]总抗氧化能力(T-AOC)是对机体抗氧化能力评价的一个总体指标。机体防御体系的抗氧化能力的強弱与健康程度存在着密切联系，该防御体系有酶促与非酶促两个体系，许多酶是以微量元素为活性中心，例如:超氧化物歧化酶(S0D)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)等，非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。例如:VE、胡萝卜素、V。、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、葡萄糖、酮兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。对抗氧化而言，上述体系通过消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化；并分解过氧化物，阻断过氧化链；同时除去起催化作用的金属离子。
[0033]对15天两组蛋鸡血清和各组织进行抗氧化能力检测，结果如下表所示:
表1停喂微生态制剂15天对产蛋后期蛋鸡血清和组织抗氧化能力的影响
【权利要求】
1.一种蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法，其特征是，包括以下步骤: (1)将植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌菌种分别经发酵罐增菌培养后混合，得到混合菌液； (2)将所述混合菌液与含有果胶、吐温80、甘油、甘露醇、海藻糖和碳酸氢钠的水溶液按相同体积充分混合均匀，经喷雾干燥后制成微胶囊化活菌粉；所述水溶液中果胶、吐温80、甘油、甘露醇、海藻糖、碳酸氢钠的质量百分数分别为0.5-1%,0.8-1.5%、0.8-1.2%、0.5-1%,3-6%、2-3.5% ； (3)将所述微胶囊化活菌粉与硒化卡拉胶、蛋氨酸锌及辅料均匀混合，制得蛋鸡饲用微生态制剂。
2.根据权利要求1所述的蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法，其特征是，每克所述蛋鸡饲用微生态制剂含有植物乳杆菌的个数为2.5-5亿。
3.根据权利要求1所述的蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法，其特征是，每克所述蛋鸡饲用微生态制剂含有枯草芽孢杆菌的个数为10-25亿。
4.根据权利要求1所述的蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法，其特征是，所述蛋鸡饲用微生态制剂中硒化卡拉胶的质量百分数为0.05-0.12%。
5.根据权利要求1所述的蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法，其特征是，所述蛋鸡饲用微生态制剂中蛋氨酸锌的质量百分数为0.15-0.3%。
6.根据权利要求1所述的蛋鸡饲用微生态制剂的制备方法，其特征是，步骤(3)中所述辅料为葡萄糖。
7.权利要求1所述的蛋鸡饲用微生态制剂的应用，将所述蛋鸡饲用微生态制剂按1%的比例加入蛋鸡基础日粮中，经充分搅拌后给开产蛋鸡饲喂。
【文档编号】A23K1/00GK103518980SQ201310188155
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年5月21日 优先权日:2013年5月21日
【发明者】苗晋锋, 龚建森, 石明明, 马子力, 郑六海, 代斌 申请人:南京农业大学