一种用于草莓种植的复合益生菌的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种用于草莓种植的复合益生菌。该益生菌可通过土壤治理、制作微生物菌肥、浇灌、叶面喷施、地面喷施及空气雾化除菌等应用，提高草莓产量、品质及抗病性。
【专利说明】一种用于草莓种植的复合益生菌
【技术领域】
[0001]本发明属于微生物【技术领域】，更具体地，涉及一种用于草莓种植的复合益生菌。
【背景技术】
[0002]草莓性喜水、喜日照，适合种植于疏水性好、透气性佳的富含有机质的沙质土壤，土壤通气不良时根系生长受阻。草莓喜中性或微酸性土壤，较适宜PH值为5.5^7.0的土壤种植。
[0003]现有草莓种植多为大棚种植，草莓种植土地大多存在连作情况，加之过多的使用化学肥料和未腐熟的农家肥，其土壤理化性质往往发生变化，一些有益微生物的生长受到抑制，而一些有害微生物迅速得到增殖；土壤微生物的自然平衡遭到破坏，这样不仅导致肥料分解过程的障碍，而且病虫害发生多、蔓延快，且逐年加重，特别是一些常见的叶霉病、灰霉病、霜霉病、枯萎病、根腐病等根部疾病，造成草莓严重减产、品质下降。出现这些情况，可以通过使用复合益生菌，对草莓进行合理有效的种植管理。
[0004]通过施用复合益生菌发酵农家肥，再配合一定浓度配比的复合益生菌进行灌溉，可以将土壤维持在草莓适应的微酸性，而且利用微生物的保水性保持土壤湿润，以保障其生长的基本条件。
【发明内容】
[0005]一.复合益生菌在种植中的作用
1.植物在地表上的部分是茎叶，它进行着光合作用，进行着能量转换。
[0006]a.将含有乳酸菌的复合益生菌作为叶面肥，喷洒在植物叶片及枝干上，乳酸菌可以增加光合成菌的作用，而光合成菌可以促进植物的光合成作用，强化植物本体对维他命C及E的形成，因此将以乳酸菌为主的复合益生菌喷洒在植物叶片及枝干上，可以促进植物的光合作用，产生大量叶绿素，保证了植物的繁茂及健康。
[0007]b.作为病原菌和病毒的天敌，乳酸菌还是农作物病虫害最安全的灭菌及杀虫剂。将含有乳酸菌的复合益生菌按照一定比例稀释后，喷洒在植物叶片及枝干上，喷洒了乳酸菌后的茎叶表面程微酸性，驱使害虫逃避，也就断了害虫可食的食物，害虫无法在茎叶环境生存，达到杀虫驱虫的效果；从而实现杀灭一些致病微生物及杀死有些害虫，如夜盗虫幼虫(学名:斜纹夜蛾)、土螨虫(蜱)、各种叶蜱虫、以大叶草为食的幼虫等等。避免了大量使用化学杀虫剂，保证食品安全。
[0008]2.植物在地表下的部分主要是根系，它使植物从土壤中汲取各种所需营养，进行着物质和能量转换。 [0009]a.将已经被腐败菌等造成腐败的土壤、进行种植前的杀菌处理；将一定比例的含有乳酸菌的复合益生菌进行喷洒、翻耕，从而抑制腐败菌的生长，使其无生存空间，防止烂根病。这是乳酸菌的“土壤消毒剂”功能。
[0010]b.利用以乳酸菌为主的复合益生菌进行堆肥处理，制作微生物有机肥，对种植前的土壤进行微生物有机肥追肥，可通过施肥提高作物产量，改善产品品质，维持和提高土壤肥力。增加土壤养分，避免过多的施用化肥。
[0011]c.按一定比例的含有乳酸菌的复合益生菌加水灌溉，改善土壤微生物环境和根系分泌物环境，使其均衡，使植物根部更容易吸收养分；对植物的分茎期起着很重要的作用。
[0012]d.由于乳酸菌含糖及乳酸，而蚯蚓味觉灵敏，喜甜食和酸味，因此作为土壤中的蚯蚓可以大量繁殖，而蚯蚓可以使得土壤疏松，使水分和肥料易于进入而提高土壤的肥力，有利于植物的生长。
[0013]e.土壤保温功能:由于乳酸菌在土表下厌氧繁殖，带动了一系列有益微生物的活动，这些微生物生长代谢是土壤温度提高1_2°C。在北方能起着保护着植物根部的功能。
[0014]f.土壤保水功能:由于乳酸菌是微生物细菌，其体内细胞之中水分为约70%，有大量乳酸菌时，可保持土壤水分。好气性菌生存在土壤表层，嫌气性菌生存在地表下，使得腐败菌无法在地表下生存，保证植物种子在安全的环境下发芽生根、成长，逐渐形成地表植物，进而达到水土不流失。
[0015]g.营养作用:以乳酸菌为主的复合益生菌在生长代谢过程中，产生多种维生素，有机氮，可溶性磷酸盐，氨基酸等，能提供植物根部营养的同时，还能明显增加食品蛋白质、糖、维生素以及芳香物质的含量，增加鲜嫩食品的干物质比重，从而使食品品质、风味、耐贮藏性提高，色泽、外观等明显改善，这种特殊作用是化肥所不能替代的。
[0016]h.将含有乳酸菌的复合益生菌与其他纤维性物质结合后加入到土壤中，翻土入地表下，进行自然发酵，可以逐渐降低硝酸离子浓度，解决土地酸化问题。
[0017]在含有乳酸菌的复合益生菌的作用下，植物根际环境良性化后，植物茎叶也就健康成长，害虫从根部无法侵食；对依赖于植物的养殖业也是很有益的，植物作为养殖链的开始部分，对养殖业病原菌及病毒的预防，不需再使用抗生素等药物，保证了植物的纯天然性，同时，也减少环境污染及农药的残留给人们的健康带来的危害，从而能够实现自然益生菌与人类生命共生的世界。
[0018]二、不同用途的复合益生菌构成
1.土壤治理使用的“复合益生菌”:含乳酸菌、酵母菌、放线菌菌、光合细菌、芽孢杆菌
坐寸O
[0019]2.制作微生物菌肥使用的“复合益生菌”:含乳酸菌、酵母菌、放线菌菌、芽孢杆菌等复合益生菌。
[0020]3.浇灌使用的“复合益生菌”:含乳酸菌、酵母菌、硝化细菌、芽孢杆菌等复合益生菌。
[0021]4.茎叶喷施使用的“复合益生菌”:光合细菌、乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等复合益生菌。
[0022]5.地面喷施使用的“复合益生菌”:乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等复合益生菌。
[0023]6.空气雾化除菌使用的“复合益生菌”:乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等复合益生菌。
[0024]三.微生物种植技术在草莓种植的具体功能如下:
1.提高土壤肥力、疏松土壤、保持土壤水分，形成良好的根际环境，促进根部吸收氮磷钾外，同时吸收铁、锌、镁、锰等，促使植物叶片更健康的进行光合作用。
[0025]2.增加果实的抗逆性、可有效的杀死土壤里的腐败菌、防治根腐病以及病虫害；如草莓的常见的叶霉病、灰霉病、霜霉病、枯萎病等的防治等。
[0026]3.促进光合作用、使果实生长的更加枝繁叶茂。
[0027]4.改善果实品质、延长保鲜期。
[0028]5.增产增收。
[0029]6.减少重茬连作障碍。
【具体实施方式】
[0030]复合益生菌的获取方式。
[0031]乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌、光合细菌、放线菌、硝化细菌菌种均购自市场。
[0032]首先分别生产乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌、光合细菌、放线菌、硝化细菌的发酵液，然后将上述发酵液按比例复合而成。
[0033]乳酸菌的生产方法为:
于Ikg水中加入红糖0.05~1.0kg,配置成溶液后,加入5g~IOg乳酸菌菌种，于厌氧发酵罐中密闭发酵，控制发酵温度33~38°C， 发酵时间3~7天，将活化好的液体菌种加入二级发酵罐密闭发酵，二级发酵液配比为:糖蜜10%，氨基酸0.1%~0.5%，维生素0.059Tl%控制发酵温度33~38°C，发酵时间3~7天，接种量5%~10%，发酵期间不断加入糖蜜，待菌种浓度达到3亿个/ml，pH为4.2时，停止发酵。
[0034]酵母菌的生产方法为:
将酵母菌中接种到菌种扩大发酵液中，发酵液的配方为:葡萄糖50g/L，尿素(NH4)2SO4lg/L, KH2PO4 2.5g/L Na2HPO4 0.5g/L，MgSO4 lg/L, FeSO4 0.lg/L，酵母膏 0.5g/L，孟加拉红0.03g/L，pH4.5-5.0，于好气发酵罐中密闭发酵，控制发酵温度25-28°C，发酵时间2-3天，将活化好的液体菌种加入二级好气发酵罐发酵，二级发酵液配比为:黄豆芽100g/L，葡萄糖50g/L，pH自然，控制发酵温度25-28°C，发酵时间3~5天，接种量5%~10%，发酵期间不断加入葡萄糖，待菌种浓度达到3亿个/ml时，停止发酵。
[0035]枯草芽孢杆菌的生产方法为:将枯草芽孢杆菌接种至培养基中，培养基配方为:蛋白胨I %，酵母浸出物0.5 %，氯化钠I %，自然pH，置于种子发酵罐中37°C培养1-2天后，接入发酵培养基，培养基配方为:蔗糖I %，蛋白胨I %，磷酸氢二钠0.2 %，磷酸二氢钠
0.2 %，于自然pH，接种量5%~10%，温度35~37°C，发酵期间不断加入蔗糖，待菌种浓度达到3亿个/ml时,停止发酵。
[0036]其特征在于所述光合细菌的生产方法为:将光合细菌接种至酵母膏蛋白胨培养基中，基本配方为=CaCL2 0.3g，MgSO4WH2O 0.5g，酵母膏3g，蛋白胨3g，蒸馏水1000ml，调整pH 6.8，于培养温度:25°C~30°C，光照强度:2000LX~5000LX，下培养3天，之后于好气发酵罐中以15%的接种量，温度25°C~30°C，光照强度:2000LX~5000LX，pH:7.5~8.5条件下培养，发酵过程中定期测定PH并用150g/L硫代硫酸钠来中和发酵液，待菌种浓度达到3亿个/ml以上时，停止发酵。
[0037]放线菌的生产方法为:将菌种接种于高氏I号培养基(GA)中，主要成分为:可溶性淀粉 20g，KNO3 Ig，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H20 0.5g，NaCl 0.5g，FeSO4.7H20
0.01g，pH=7.4-7.6，水1000ml扩大培养，之后于相同培养基以5%~10%的接种量于好气发酵罐中控制温度28~30°C，pH7.0-7.6发酵培养，待菌种浓度达到3亿个/ml以上时，停止发酵。
[0038]硝化细菌的生产方法为:将硝化细菌接种在培养基中，培养基配方为:硫酸铵
0.5g ,氯化钠0.3g,硫酸亚铁0.03g,磷酸二氢钠Ig,硫酸镁0.03g ,CaCl2 7.5g ,蒸懼水1000ml，于pH 7.5~8.0，温度28~30°C条件下扩大培养3天，之后以5%~10%的接种量于相同培养基好气大型发酵罐中控制温度28~30°C, pH7.5-8.0发酵培养，待菌种浓度达到3亿个/ml以上时，停止发酵。
[0039]复合益生菌的组成:
1.土壤治理使用的“复合益生菌”:乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌、光合细菌、放线菌按重量复合比例为:(5~8):(1~3):(0~I): (I~2): (O~1)，优选的是(5~6): (I~2): (O~I): (I~2):(0~1)，最优选的比例为5:1:1: 2:1。
[0040]2.制作微生物菌肥使用的“复合益生菌”:乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌、放线菌按重量的复合比例为:(3~5):(1~2):(3~5):(1~2)，优选的是(3~4): (I~2): (4~5):(1~2)，最优选的比例是3:1:4:1。
[0041]3.浇灌使用的“复合益生菌”:乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌、硝化细菌按重量复合比例为:(5~8):(1~3): (I~2): 1，优选的是(6~7): (I~2): (I~2): 1，最优选的比例是:6:2: 1:1。
[0042]4.茎叶喷施使用的“复合益生菌”:乳酸菌、酵母菌、光合细菌、芽孢杆菌按重量复合比例为:(5~8):(1~3):(0~I):(1~2)，优选的是(5~6): (I~2):1: (I~2)，最优选的比例是5:2:1: 2。
[0043]5.地面喷施使用的“复合益生菌”:乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌按重量复合比例为:(5~8): (I~3): (I~2)，更有选的是(6~8):(1~2):1，最优选的比例是8:1:1。
[0044]6.空气雾化除菌使用的“复合益生菌”:乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌按重量复合比例为:(5~7):(2~3): (I~2)，更有选的是(6~7): (2~3): 1，最优选的比例是:6:3: I
含有乳酸菌的复合益生菌以嗜酸乳杆菌为主导，它靠摄取光合菌、酵母菌产生的糖类进行生长代谢，产生乳酸，乳酸菌具有很强的杀菌能力，能有效抑制有害微生物的活动和有机物的急剧腐败分解。它能够分解常态下不易分解的木质素和纤维素，并使有机物发酵分解。
[0045]根据草莓种植园现土壤的状况，按照如下步骤进行治理:
1.如果土壤中存在腐败菌导致的病害，则需要用含有乳酸菌的复合益生菌灭菌及结合灌溉方式、对现有土壤进行灭菌处理(实施方法详见实施例一)。
[0046]2.在对土壤处理后， 在种植中施用微生物有机农家肥，对土壤进行有机改良，增加土壤中益生菌的含量及肥力，形成良好的根际环境及丰富的营养质，增加植物根部健康，提高根系吸收能力，提高植物免疫力，防止病害(实施方法详见实施例二)。一般草莓种植每亩地施用微生物有机肥200(T2500kg。
[0047]3.微生物添加灌溉，为补充根部益生菌及营养质，在灌溉时加入复合益生菌液(实施方法详见实施例三)。
[0048]4.叶面喷施，增加植物叶绿素的合成，催使叶面光合成，提高抗病防虫能力，并提高果实的营养质(实施方法详见实施例四)。[0049]5.地面喷洒驱虫，防止从地面的外来虫、菌对草莓苗的侵蚀(实施方法详见实施例五)。
[0050]6.空气雾化灭菌除虫，可抑制杀灭空气中的有害微生物，预防病虫害(实施方法详见实施例六)。
[0051]种植应用实施例 实施例1.土地灭菌治理 种植土地腐败治理方法
如果土地没有腐败及造成烂根病，则不需要进行此项操作。也可在草莓下苗前进行此项操作。
[0052]1.土壤处理使用含乳酸菌、酵母菌、放线菌菌、光合细菌、芽孢杆菌等的合益生菌原液:每100平米使用5kg复合益生菌原液用水稀释20倍后，可用喷雾器均匀喷洒在要治理土地上。
[0053]2.将复合益生菌均匀喷洒在要治理土地后，用旋耕机翻耕一遍，草本植物种植翻耕15~20cm，木本植物种植深翻30cm，然后再喷洒一次乳酸菌，用旋耕机横向翻耕一次，再喷洒复合益生菌后搂平。一段时间后土壤里的有害细菌大部分被杀死，逐渐恢复土壤的自然生态平衡。
[0054]3.此方法结合以下实施例3的方法随后使用，也会有很好的效果。
[0055]实施例2.堆肥生产 微生物有机肥制作方法
1.堆肥使用含乳酸菌、酵母菌、放线菌菌、芽孢杆菌等复合益生菌原液。使用比例为5%即每吨堆肥使用50kg含有乳酸菌的复合益生菌原液，用喷雾器喷洒撒，堆肥材质湿度大小可以根据情况适当加水稀释益生菌原液，以保证堆肥的正常发酵。
[0056]2.采用人工或机械翻抛式加菌搅拌方法:翻撒一层薄薄的肥土，然后再均匀撒上复合益生菌搅拌，随后一边翻撒肥土一边撒菌。翻抛撒菌结束后，堆肥底部边缘，重新人工搅拌，洒向粪堆中上部，以求益生菌在粪堆中的均匀分布。然后把粪堆表面块状的粪土拍碎，盖上一层塑料布进行发酵腐熟。
[0057]如果条件允许可以按以下配方进行堆肥:鸡粪I立方、牛粪I立方(也可使用落叶秸杆代替或加入秸杆，但是必须粉碎成5-10mm左右大小)、复合益生菌5%、糖渣5%、磷矿粉3%、草炭粉3%、也可加入很少量0.5-1%的微量元素、如苦土 (氧化镁)，铁矿粉末及锰矿粉末等，做成的成品有机肥约850kg，湿度以手捏可以刚刚团住的程度，约50~65%左右。使用搅拌机可以使喷洒乳酸菌及加入其他附料更加均匀，更有利于肥料发酵，缩短发酵时间等。
[0058]3.温度在20°C以上的天气，覆膜厌氧发酵温度上升至55飞(TC以上，维持2~3天后即可以翻开肥堆，进行二次复合益生菌喷洒堆肥处理。翻一层肥土喷洒一遍益生菌，具体用量为每吨用量5-10kg，然后露天堆放。2~3天后再进行一次翻堆，补菌，露天堆放一段时间后即可以使用(如条件允许，可每3天翻堆补菌一次，有利于有机肥的腐熟)。
[0059]4.堆肥最好在每年的4月初开始，天气温度升高，处理1-2个月即可做底肥使用。
[0060]5.如果使用购买的成品有机肥作为底肥，可以直接按照每IOOkg有机肥加入2kg含有乳酸菌等的复合益生菌，加水5kg搅拌均匀，施入种植土地内做底肥。
[0061]6.为了保证堆肥的效果，使用本品时不要与其他发酵剂之类产品混用。[0062]实施例3.灌根治理 复合益生菌添加灌溉方法
1.灌根添加:栽草莓苗之前，含乳酸菌、酵母菌、硝化细菌、芽孢杆菌等复合益生菌用水稀释500~1000倍，每个穴坑施用200ml稀释液、水渗后栽入草莓苗。然后栽上草莓苗，这样可以促进草莓根系的生长，抑制土壤里的有害菌繁殖，草莓育苗时也可按此方法使用。
[0063]2.滴灌添加:滴灌时候加在水里，直接渗透到根部。每个大棚(400平米)每次使用1000ml复合益生菌原液添加在水里直接滴灌，每半个月加复合益生菌滴灌一次。
[0064]实施例4.叶面喷施 复合益生菌叶面喷施法
叶面喷施:草莓“缓苗期”后就可以进行茎叶喷施稀释含光合细菌、乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等的复合益生菌。益生菌中的乳酸菌可以增加光合成菌的作用，而光合成菌可以直接促进植物的光合成作用。把按比例稀释的复合益生菌喷洒在叶片上，产生大量的叶绿素，保证植物的繁茂和健康。复合益生菌的代谢活性可提供氨基酸和各种维生素为植物茎叶增加营养的吸收，促进植物生长。并可以起到杀菌的作用(盛花期可以不喷)，结果后仍可喷施，根据情况可以每10天喷施一次。
[0065]实施例5.地面灭虫驱虫处理` 复合益生菌地面喷施法
使用含有乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等复合益生菌原液，在苗周围I~2米的直径范围内，以每平米50~100毫升的用量进行喷洒，可根据病害虫量加大使用量。
[0066]开始每周喷洒一次，逐渐减少，直至情况减轻或消失后停止。根据病虫害的程度确定复合益生菌的喷洒量和喷洒频率。
[0067]实施例6.空气雾化灭菌除虫 复合益生菌空气雾化
由于草莓多为大棚种植，空气中的有害病菌及其孢子无法及时清除，会导致大棚密闭空间内病害的交叉感染。使用含乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等复合益生菌原液进行雾化后对空气进行喷施，每周雾化喷施一次。此方法结合茎叶喷施和地面喷施，主要对空气中的白粉病等菌类孢子进行抑制，抑制灭杀空气中、土表、叶面及果实上的细菌及螨虫等，提高植物抗病能力。
[0068]实验结果比较
由市场上购买常用复合益生菌作为对照菌剂，市售产品I为北京某公司销售的益生菌，含有以光合菌、乳酸菌、酵母菌为主的益生菌及代谢产物；市售产品2为宜春某生物科技有限公司销售的以乳酸菌为主的复合益生菌。
[0069]实验用草莓品种为红颜。
[0070]在同等实验条件下以本公司生产的复合益生菌(实验组I)、市售产品I (实验组
2)、市售产品2 (实验组3)以及未使用复合益生菌(对照组)对草莓进行种植处理，在种植管理方式完全一致的情况下，对草莓果实进行检测，结果如下:
1.实验组I草莓产量较对照组提高17.2%，较实验组2提高10.4%，较实验组3提高8.9%
2.草莓果实较对照组外观更鲜红，大小更均一，单果重平均较对照组高5.7%，较实验组I提高3.5%，较实验组2提高2.7%。[0071]3.实验组白粉病较对照组明显减少。
[0072]4.挂果期实验组较对照组平均延长5~7天。
[0073]5.草莓口感较实验组2、实验组3、对照组更浓郁香甜，品质有明显改善，蛋白质、可溶性固形物、维C含量都有显著提高，详细数据见下表，表1为实验组I与对照组品质检测对比表，表2为实验组I与实验组2品质检测对比表，表3为实验组I与实验组3品质检测对比表。
[0074]表1实验组I与对照组品质检测对比
【权利要求】
1.一种用于草莓种植的复合益生菌，主要由乳酸菌组成。
2.权利要求1所述的益生菌，其特征在于是可用于土壤治理使用的复合益生菌，含乳酸菌、酵母菌、放线菌菌、光合细菌、芽孢杆菌等。
3.权利要求1所述的益生菌，其特征在于是可用于制作微生物菌肥使用的复合益生菌:含乳酸菌、酵母菌、放线菌菌、芽孢杆菌等。
4.权利要求1所述的益生菌，其特征在于是可用于浇灌使用的复合益生菌:含乳酸菌、酵母菌、硝化细菌、芽孢杆菌等。
5.权利要求1所述的益生菌，其特征在于是可用于茎叶喷施使用的复合益生菌:含光合细菌、乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等。
6.权利要求1所述的益生菌，其特征在于是可用于地面喷施使用的复合益生菌:含乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等。
7.权利要求1所述的益生菌，其特征在于是可用于空气雾化除菌使用的复合益生菌:含乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌等。
8.权利要求1-7所述益生菌在草莓种植中的应用，其特征在于通过土地灭菌治理、堆肥生产、灌根治理、叶面喷施、地面灭虫驱虫处理和空气雾化灭菌除虫等方式进行应用。
9.权利要求1-7所述益生菌的制备方法，其特征在于:首先分别生产乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌、光合细菌、放线菌的发酵液，然后将上述发酵液按重量比复合而成。
10.权利要求书9所述的复合益生菌制备方法，其特征在于: 所述乳酸菌的生产方法为:于Ikg水中加入红糖0.05~1.0kg,配置成溶液后，以1%~.5%的接种量加入乳酸菌菌种，于厌氧发酵罐中密闭发酵，控制发酵温度33~38°C，发酵时间3~7天，将活化好的液体菌种加入二级发酵罐密闭发酵，二级发酵液配比为:糖蜜10%，氨基酸0.1%~0.5%，维生素0.059Tl%控制发酵温度33~38°C，发酵时间3~7天，接种量5%~10%，发酵期间不断加入糖蜜，待菌种浓度达到3亿个/ml，pH为4.2时，停止发酵； 所述酵母菌的生产方法为: 将酵母菌中接种到菌种扩大发酵液中，发酵液的配方为:50g/L，尿素(NH4)2SO4 Ig/L，KH2PO4 2.5g/L Na2HPO4 0.5g/L，MgSO4 lg/L, FeSO4 0.lg/L，酵母膏 0.5g/L，孟加拉红.0.03g/L, pH4.5-5.0，于好气发酵罐中密闭发酵，控制发酵温度25_28°C，发酵时间2-3天，将活化好的液体菌种加入二级好气发酵罐发酵，二级发酵液配比为:黄豆芽100g/L，葡萄糖50g/L，pH自然，控制发酵温度25-28°C，发酵时间3~5天，接种量5%~10%，发酵期间不断加入葡萄糖，待菌种浓度达到3亿个/ml时，停止发酵； 所述枯草芽孢杆菌的生产方法为:将枯草芽孢杆菌接种至培养基中，培养基配方为:蛋白胨I %，酵母浸出物0.5 %，氯化钠I %，自然pH，置于种子发酵罐中37°C培养1-2天后，接入发酵培养基，培养基配方为:蔗糖I %，蛋白胨I %，磷酸氢二钠0.2 %，磷酸二氢钠.0.2 %，于自然pH，接种量5%~10%，温度35~37°C，发酵期间不断加入蔗糖，待菌种浓度达到3亿个/ml时，停止发酵； 所述光合细菌的生产方法为:将光合细菌接种至酵母膏蛋白胨培养基中，基本配方为:CaCL2 0.3g，MgSO4.7H20 0.5g，酵母膏 3g，蛋白胨 3g，蒸馏水 1000ml，调整 pH 6.8，于培养温度:25 V~30°C，光照强度:2000LX~5000LX，下培养3天，之后于好气发酵罐中以15%的接种量，温度25°C~30°C，光照强度:2000LX~5000LX，pH:7.5~8.5条件下培养，发酵过程中定期测定PH并用150g/L硫代硫酸钠来中和发酵液，待菌种浓度达到3亿个/ml以上时，停止发酵；所述放线菌的生产方法为:将菌种接种于高氏I号培养基(GA)中，主要成分为:可溶性淀粉 20g，KNO3 Ig，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H20 0.5g，NaCl 0.5g，FeSO4.7H200.01g，pH=7.4-7.6，水1000ml扩大培养，之后于相同培养基以5%~10%的接种量于好气发酵罐中控制温度28~30°C，pH7.0-7.6发酵培养，待菌种浓度达到3亿个/ml以上时，停止发酵；所述硝化细菌的生产方法为:将硝化细菌接种在培养基中，培养基配方为:硫酸铵0.5g ,氯化钠0.3g,硫酸亚铁0.03g,磷酸二氢钠Ig,硫酸镁0.03g ,CaCl2 7.5g ,蒸懼水1000ml，于pH 7.5~8.0，温度28~30°C条件下扩大培养3天，之后以5%~10%的接种量于相同培养基好气大型发酵罐中控制温度28~30°C, pH7.5-8.0发酵培养，待菌种浓度达到3亿个/ml以上时， 停止发酵。
【文档编号】A01P21/00GK103725635SQ201310747377
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2013年12月31日 优先权日:2013年12月31日
【发明者】陈爱家, 其他发明人请求不公开姓名 申请人:陕西万源生物农业科技有限公司