本发明属于农药技术领域，具体涉及一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药及其制备方法。
背景技术：
黄瓜起源于印度北部地区，是葫芦科属一年生的草本植物，黄瓜不仅便于食用，且富含多种对人体有益的维生素和矿物质，营养价值较高，是我国蔬菜生产的主要作物之一。近年来，伴随我国经济的高速发展，黄瓜的种植面积不断增加，种植品种多样化，且通过设施农业实现了全年种植，但是黄瓜枯萎病的危害也越来越严重，已经引起人们高度重视。
黄瓜枯萎病，又名萎蔫病、死秧病、蔓割病，是一种病原菌通过土壤，由黄瓜的根或根颈部侵入，寄生在黄瓜维管束内对黄瓜产生危害的系统性病害。黄瓜枯萎病是影响黄瓜生产的最主要病害之一，其病原菌为尖孢镰刀菌黄瓜专化型(fusariumoxysporiumf.sp.cucumeris)，一般发病率达到20～30％，重者达80～90％，减产50～60％，经济损失非常严重。目前对该病的防治方法主要有药剂防治、农业防治(合理栽培措施、嫁接、选用抗病品种、轮作与套种等)、生物防治(生防微生物、植物源活性物质等)。其中，药剂防治是最常用、防效较好的防治方法，但是，长期使用化学药剂易造成残留，不仅污染土壤和地下水，危害人畜健康，而且随着内吸性杀菌剂大量使用，病菌易产生抗药性，防效逐渐降低。在农业防治方法中，嫁接是最为有效的防治措施，培育和应用抗病品种是最经济的措施。但是，嫁接技术难度高、后期管理繁琐，且易使黄瓜品质下降，所以嫁接措施在黄瓜生产中难以推广；其次，中国黄瓜枯萎病抗源相对匿乏，并且由于病原菌的变异和抗病品种的单一，导致抗病品种抗性下降，造成选育抗病品种防控黄瓜枯萎病存在局限性。
因此，研发高效、低毒、不易产生抗药性的防治方法，实现黄瓜生产的经济效益与环境保护的生态效益相统一，具有重要的经济和社会价值。
技术实现要素：
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种高效、低毒、不易产生抗药性，且生产成本较低的防治黄瓜枯萎病的植物源农药，以缓解使用化学农药杀菌造成的病原菌产生抗药性、植物和土壤中化学物质残留超标、环境污染等问题。
本发明通过以下技术方案来实现：
一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：水葫芦5～25份、西芹5～25份、大蒜1～12份、问荆1～12份、浒苔10～40份。
优选地，一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：水葫芦10～20份、西芹10～20份、大蒜4～9份、问荆4～9份、浒苔20～30份。
优选地，一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：水葫芦16份、西芹15份、大蒜7份、问荆6份、浒苔28份。
优选地，一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：表面活性剂5～20份、渗透剂15～25份、防冻剂5～10份。
优选地，一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：表面活性剂13份、渗透剂20份、防冻剂7份。
优选地，一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，所述表面活性剂为月桂基硫酸钠、烷基硫酸钠、吐温中的一种或几种。
优选地，一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，所述渗透剂为月桂氮酮、环氧大豆油、桐油中的一种或几种。
优选地，一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，所述防冻剂为乙二醇、丙二醇、丙三醇中的一种或几种。
本发明所述各植物成分作用机理如下：
水葫芦：水葫芦又名凤眼莲，为雨久花科凤眼莲属浮水草本植物，原产南美洲热带、亚热带地区。全草含硅、钙、镁、铜、铁等矿质元素，叶含胡萝卜素、烟酸、蛋白质、脂肪及多种维生素，总黄酮含量丰富，渗出液含可溶性糖、游离脂肪酸、氨基酸等。研究表明，水葫芦提取液具有较强的抑菌活性，能够有效抑制黄瓜枯萎病病菌孢子萌发，从而抑制病菌生长繁殖。
西芹：西芹为伞形科一年生或二年生草本植物，营养丰富，富含蛋白质、碳水化合物、矿物质及多种维生素等营养物质。研究表明，西芹种子、挥发物、干根、鲜根和根际区物的水、乙醇、丙酮三种浸提液中含有丰富的酯类、酸类、醇类、酚类、酮类、醚类等化合物，可通过抑制病菌菌体内保护酶活性及分泌的细胞壁降解酶活性，使病菌体内活性氧大量积累，细胞膜被破坏，致病力减弱。
大蒜：大蒜又称胡蒜、葫、独蒜等，属百合科葱属。大蒜提取液及其中的含硫活性成分对许多人体、动物和植物病原细菌、真菌有拮抗活性。大蒜所含有效成分大蒜素能够很快的渗透进入细胞膜与生物体内的半胱氨酸、谷胱氨酸等含巯基化合物及含巯基的酶结合，使与酶相关的细胞代谢受到抑制，从而抑制病菌生长繁殖；其次，大蒜提取液还可有效抑制病菌菌丝生长及孢子萌发，从而抑制病菌生长繁殖。
问荆：问荆属木贼科木贼属，别名节节草、接续草、马草、笔头草，为多年生草本植物，广泛分布于我国的大部地区，为农田杂草，也是一种常用中药。问荆含有酚酸类、黄酮类、糖苷及生物碱等多种化学成分。研究表明，问荆提取液具有较强的抑菌活性，能够有效抑制黄瓜枯萎病病菌菌丝生长和孢子萌发，从而抑制病菌生长繁殖，是新型植物源农药的有效来源。
浒苔：浒苔为绿藻门、石莼目石莼科浒苔属的藻类植物，俗称苔条、青海苔等，在东南沿海一带分布广泛。浒苔中含有丰富的生物活性物质，如浒苔多糖、挥发性组分、蛋白质、脂肪酸、脂类、甾醇等，具有抑菌、促生长的作用。研究表明，浒苔多糖可显著改善黄瓜生物性状、提高黄瓜产量。近年来，由于全球变暖，海水升温，近海岸工业废水和城市生活污水排放入海等，为浒苔的生长提供了有利的条件，世界各海域均有不同程度的浒苔爆发与蔓延，既影响人们正常生活和城市旅游业的发展，同时造成了严重的生态恶化。因此，本发明将浒苔作为原材料之一，不仅原材料来源丰富，有效解决了浒苔造成的生态恶化，使浒苔得到有效利用，而且使所制得的植物源农药具有促进黄瓜生长，改善黄瓜生物性状的功效。
本发明还提供一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药的制备方法，包括以下步骤：
(1)按重量份称取水葫芦、西芹、大蒜、问荆和浒苔，粉碎，混合；
(2)按质量体积比为1：6～8的比例向步骤(1)所得混合料中加入体积浓度为75～85％的乙醇，浸泡60～120min，然后在40～55℃、功率150w条件下超声处理30min，过滤取滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5～10％，得到植物源农药乙醇提取液；
(3)将步骤(2)所得的植物源农药乙醇提取液与表面活性剂、渗透剂及防冻剂混合，在调制釜中将混合物搅拌均匀，即得本发明的植物源农药。
本发明的有益效果：
1、本发明的植物源农药具有较强的渗透性，能够很快的渗透进入病菌细胞膜与菌体内的相关酶结合，使与酶相关的细胞代谢受到抑制，从而抑制病菌生长繁殖；其次，本发明的植物源农药还可有效抑制病菌菌丝生长及孢子萌发，从而抑制病菌生长繁殖；
2、本发明采用天然植物作为主要功效成分，用量小，分解快，从而避免了环境污染，且比传统农药具有更低的哺乳毒性；
3、本发明主要功效成分水葫芦、西芹、大蒜、问荆和浒苔含有丰富的营养物质，能提供一些黄瓜生长发育所需的营养因子，改善黄瓜生物性状、提高黄瓜产量。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：水葫芦25份、西芹5份、大蒜1份、问荆12份、浒苔20份、烷基硫酸钠5份、月桂氮酮15份、乙二醇10份。
上述一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药的制备方法，包括如下步骤：
(1)按重量份称取水葫芦、西芹、大蒜、问荆和浒苔，粉碎，混合；
(2)按质量体积比为1：6的比例向步骤(1)所得混合料中加入体积浓度为85％的乙醇，浸泡60min，然后在55℃、功率150w条件下超声处理30min，过滤取滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的5％，得到植物源农药乙醇提取液；
(3)将步骤(2)所得的植物源农药乙醇提取液与烷基硫酸钠、月桂氮酮、乙二醇混合，在调制釜中将混合物搅拌均匀，即得本发明的植物源农药。
实施例2
一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：水葫芦10份、西芹20份、大蒜12份、问荆4份、浒苔40份、吐温10份、桐油18份、丙二醇8份。
上述一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药的制备方法，包括如下步骤：
(1)按重量份称取水葫芦、西芹、大蒜、问荆和浒苔，粉碎，混合；
(2)按质量体积比为1：8的比例向步骤(1)所得混合料中加入体积浓度为70％的乙醇，浸泡100min，然后在40℃、功率150w条件下超声处理30min，过滤取滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的10％，得到植物源农药乙醇提取液；
(3)将步骤(2)所得的植物源农药乙醇提取液与吐温、桐油、丙二醇混合，在调制釜中将混合物搅拌均匀，即得本发明的植物源农药。
实施例3
一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：水葫芦16份、西芹15份、大蒜7份、问荆6份、浒苔28份、月桂基硫酸钠13份、环氧大豆油20份、丙二醇7份。
上述一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药的制备方法，包括如下步骤：
(1)按重量份称取水葫芦、西芹、大蒜、问荆和浒苔，粉碎，混合；
(2)按质量体积比为1：7的比例向步骤(1)所得混合料中加入体积浓度为80％的乙醇，浸泡90min，然后在47℃、功率150w条件下超声处理30min，过滤取滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的7％，得到植物源农药乙醇提取液；
(3)将步骤(2)所得的植物源农药乙醇提取液与月桂基硫酸钠、环氧大豆油、丙二醇混合，在调制釜中将混合物搅拌均匀，即得本发明的植物源农药。
实施例4
一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：水葫芦20份、西芹10份、大蒜4份、问荆9份、浒苔10份、月桂基硫酸钠20份、桐油18份、丙三醇10份。
上述一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药的制备方法，包括如下步骤：
(1)按重量份称取水葫芦、西芹、大蒜、问荆和浒苔，粉碎，混合；
(2)按质量体积比为1：8的比例向步骤(1)所得混合料中加入体积浓度为75％的乙醇，浸泡120min，然后在50℃、功率150w条件下超声处理30min，过滤取滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的10％，得到植物源农药乙醇提取液；
(3)将步骤(2)所得的植物源农药乙醇提取液与月桂基硫酸钠、桐油、丙三醇混合，在调制釜中将混合物搅拌均匀，即得本发明的植物源农药。
实施例5
一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药，包括下述重量份的原材料：水葫芦5份、西芹25份、大蒜9份、问荆1份、浒苔30份、吐温15份、环氧大豆油25份、乙二醇5份。
上述一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药的制备方法，包括如下步骤：
(1)按重量份称取水葫芦、西芹、大蒜、问荆和浒苔，粉碎，混合；
(2)按质量体积比为1：7的比例向步骤(1)所得混合料中加入体积浓度为70％的乙醇，浸泡80min，然后在55℃、功率150w条件下超声处理30min，过滤取滤液，滤液用旋转蒸发仪，在40℃、130r/min条件下蒸发至膏状物占乙醇溶液体积的7％，得到植物源农药乙醇提取液；
(3)将步骤(2)所得的植物源农药乙醇提取液与吐温、环氧大豆油、乙二醇混合，在调制釜中将混合物搅拌均匀，即得本发明的植物源农药。
试验例1
本发明的一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药对黄瓜枯萎病菌的抑制作用
试验对象：黄瓜枯萎病菌尖孢镰刀菌(fusariumoxysporiumf.sp.cucumeris)。
试验样品：试验组：本发明实施例1～5所制备的植物源农药；空白对照组：1％乙醇溶液；参考对照组：50％多菌灵可湿粉剂。
试验方法：将试验样品用无菌去离子水稀释成50、100、300、600倍，加入到定量的灭菌后冷却至50℃左右的pda培养基中，充分摇匀，制成含药平板，每处理重复3次。用直径5mm的打孔器打取生长良好的菌柄，将菌柄菌丝面向下接种于含药平板中央，置于28℃恒温培养，每天观察菌丝生长情况，待空白对照长满皿后测量菌落直径，计算菌丝生长抑制率。计算公式如下：
抑菌率(％)＝[(空白对照菌落直径-处理菌落直径)/(空白对照菌落直径-5)]×100％
测定结果：检测结果如下表1所示。
表1对黄瓜枯萎病菌尖孢镰刀菌的抑制作用
由表1可知，本发明实施例1～5制备的一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药稀释至50倍、100倍、300倍时，对黄瓜枯萎病菌尖孢镰刀菌的抑菌率均达到100％。当稀释至600倍时，实施例1～5制备的农药抑菌率分别较参考对照(50％多菌灵)提高24.58％、26.53％、27.57％、26.79％、25.36％。
上述测定结果表明，本发明的植物源农药对黄瓜枯萎病菌具有极强的体外抑制作用，抑菌效果显著。
试验例2
本发明的一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药的田间试验
试验品种：新泰密刺。
试验样品：试验组：本发明实施例3所制备的植物源农药300倍、500倍、800倍稀释液；参考对照组：50％多菌灵可湿粉剂300倍、500倍、800倍稀释液；空白对照组：清水。
试验方法：试验在日光温室进行，采用完全随机区组设计，每块试验小区面积为3.5m2。试验共设7个处理，每个处理3次重复。处理1为清水，处理2～4分别为50％多菌灵可湿粉剂300倍、500倍、800倍稀释液，处理5～7分别为本发明实施例3所制备的植物源农药300倍、500倍、800倍稀释液。黄瓜种植前，将试验样品按每亩80kg的施用量分别均匀地喷施于地表，然后翻耕入土；在黄瓜苗中期，按每亩40kg的施用量分别均匀地喷施于叶面；在黄瓜成株初期，按每亩60kg的施用量分别均匀地喷施于叶面。试验田其他的基肥、追肥、灌溉、及其他田间管理等条件均一致。
于黄瓜盛果期采收取样，每组采用“z”字形5点取样，每点随机调查黄瓜6株，记载黄瓜枯萎病数量，计算防治枯萎病效果，并测定各处理黄瓜产量(单瓜重、瓜条数和单株产量)及品质(可溶性糖含量、维生素c含量和可溶性蛋白含量)。计算公式如下：
发病率(％)＝(病株数/调查总株数)×100％；
防治效果(％)＝[(空白对照组发病率－处理组发病率)/空白对照组发病率]×100％。
1、对黄瓜枯萎病发病率和防治效果的影响
表2对黄瓜枯萎病发病率和防治效果的影响
由表2可知，与空白对照相比，50％多菌灵可湿粉剂和本发明实施例3所制备的植物源农药均能有效防治黄瓜枯萎病的发生。当50％多菌灵可湿粉剂和本发明实施例3所制备的植物源农药稀释倍数为300倍时，对黄瓜枯萎病的防治效果均达到100％；当稀释倍数为500倍时，防治效果均达到82％以上；当稀释倍数为800倍时，本发明实施例3所制备的植物源农药防治效果为63.6％，较50％多菌灵可湿粉剂提高32.5％。
2、对黄瓜产量和品质的影响
表3对黄瓜产量和品质的影响
由表3可知，与清水相比，本发明实施例3制备的一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药稀释至300倍、500倍、800倍时，均能有效提高黄瓜产量，改善黄瓜品质，且稀释至300倍时，作用效果最佳，其黄瓜单瓜重、瓜条数和单株产量分别较清水提高35.66％、93.11％、89.76％，可溶性糖含量、维生素c含量和可溶性蛋白含量分别较清水提高86.31％、73.97％、64.71％。
与清水相比，当50％多菌灵可湿粉剂稀释至500倍和800倍时，对黄瓜产量的提高和品质的改善有一定的促进作用，但稀释至300倍时，使黄瓜产量降低，品质下降。
3、结论
本发明所述的一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药不仅可有效抑制黄瓜枯萎病菌的生长繁殖，显著降低黄瓜枯萎病发病率，还可显著促进黄瓜生长，提高黄瓜产量，改善黄瓜品质。其次，本发明的一种防治黄瓜枯萎病的植物源农药完全取用纯天然活性成分，具有来源广泛、成本低廉、无残留副作用等优点，有望成为已有化学杀菌剂的理想替代品，具有广泛的应用前景。