022] (3)T98S携带温敏不育基因tms5为检验控制T98S的不育基因是否与已发现的光 温敏不育基因p/tms3或温敏不育tms5等位，利用自然低温条件配制T98S与培矮64S(携 带p/tms3)、温敏不育系Y58S(携带tms5)的杂交组合，利用长沙的自然高温条件观察F1植 株的花粉育性和结实率。结果发现，T98S与培矮64S杂交的F1植株在高温下表现为正常 可育，而T98S与Y58S的杂交F1植株全为不育，特推断T98S应与Y58S等位，而与PA64S不 等位。由于Y58S的温敏不育受tms5控制，因此，T98S因TMS5位点（0s02g0214300)突变 而引发温敏不育。为了证实这一推断，对T98S和T98B的TMS5位点进行了测序和分析，结 果发现，在T98S中该基因起始密码子"ATG"下游的第71位碱基处发生了一个由"C"至"A" 的单核苷酸突变，该位点突变的分子机制恰好与温敏不育系Y58S-致，都是由tms5的该位 点突变导致转录提前终止，不能形成功能蛋白，引发温敏不育。
[0023] (4)温敏不育系T98S的背景检测为检测T98S是否为T98B的真实突变，而非串粉 引起，参照农业行业标准NY/T1433 2007水稻品种鉴定DNA指纹方法，使用了 48对SSR引物 检测T98S和T98B基因组，发现每对引物在T98S和T98B中的带型完全相同，由此证实T98S 为T98B突变。
[0024] T98S属于感温性强的早籼类型不育系；不论是春播还是夏播，T98S与T98A的播始 历期一致，都较T98B长4d左右，这是由于雄性不育导致包颈，延迟抽穗（表1)。
[0025] 在植株形态上，T98S株型与T98B-致，松散适中，叶较长（剑叶长25-32cm)，分 蘖力为11-13个，株高75-80cm，穗偏长且着粒密度适中（主穗穗长23cm，颖花数130粒左 右），千粒重约为24g，长粒，柱头、稃尖、叶鞘均无色。
[0026] 表1温敏核不育系T98S的基本农艺特性观察
[0027]
[0028] i千粒重：为三亚数据。
[0029] 实施例2
[0030] T98S属于早籼中熟类型，其与不携带野败恢复基因的早稻常规稻湘早45、116所 配组合的生育期与对照株两优819相当，都为108d;T98S/湘早45、T98S/116的分蘖力中 等，每穗粒数高于对照，结实特性较好，都显著高于对照；T98S/116与T98S/湘早45的产量 优势明显，实收单株产量分别较对照增加9. 96和6. 47%。
[0031] 在品质性状上，相比，T98S/湘早45与T98S/116两个组合的出糙率和总精米率与 对照株两优819持平，T98S/116的整精米率高于对照；两个T优组合的长宽比增加，垩白度 显著降低，外观品质提高；两个T优组合的胶稠度略有下降，直链淀粉在22-24%之间，与对 照没有显著差异。
[0032] 表2T98S与非野败型恢复系湘早45、116所配组合的产量评价
[0033]
[0034]表3T98S与非野败型早籼恢复系湘早45、116所配组合的米质分析
[0036]T98S与非野败恢恢复系所配组合T98S/P143的生育期与中稻对照组合岳优9113 号相当，除有效穗数略有下降外，其余产量要素均有提高，特别是每穗粒数显著增加，导致 单株产量比对照增加6. 61 %。
[0037] 表4T98S与非野败型中籼恢复系P143所配组合的产量评价
[0038]
\J./ * ? ?4 一，
[0039]T98S与非野败恢恢复系14T21所配组合T98S/14T21的生育期与晚稻对照组合岳 优9113相当，都为114d;除有效穗数略有下降外，每穗粒数、千粒重和结实率都高于对照， 特别是每穗粒数显著增加，导致单株产量比对照增加6. 73%。
[0040] 表5.T98S与非野败型晚籼恢复系14T21所配组合的产量评价
[0041]
[0042] 上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟 悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因 此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完 成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
【主权项】
1. 一种杂交水稻育种方法，包括以下步骤：1)将保持系T98B的成熟种子经过6tlCo-Y 射线处理，获得光温敏不育系T98S;2)以T98S作为母本，以非野败恢复系R作为父本进行 配组，筛选增产3%以上的强优势杂交组合T98S/R。2. 如权利要求1所述方法，其特征在于，所述6tlCo-Y射线的剂量为300Gy，所使用的辐 射剂量率为5. 5Gy/min，处理时间为54. 5min。3. 如权利要求1所述方法，其特征在于，所述T98B为野败不育系T98A的保持系，T98A 的品种权号为CNA20030224. 8。4. 如权利要求1所述方法，其特征在于，所述T98S为温敏性不育，在气温高于28°C条 件下，T98S以无花粉败育形式为主，彻底败育；在低于23. 5°C时，花粉育性恢复，正常结实。5. 如权利要求1所述方法，其特征在于，所述T98S与T98A具有一致的遗传背景，即参 照农业行业标准NY/T1433 2007水稻品种鉴定DNA指纹方法，使用48对SSR引物检测T98S 和T98B基因组，每对引物在T98S和T98B中的带型完全相同。6. 如权利要求1所述方法，其特征在于，所述R选自不携带野败恢复基因的恢复系，所 述R选自早稻恢复系湘早45,中稻恢复系P143,晚稻恢复系14T21中的一种。7. 如权利要求1所述方法，其特征在于，所述强优势杂交组合是指在同等种植条件下， T98S/R比相同熟期的区试对照组合增产3%以上。
【专利摘要】本发明提供一种杂交水稻育种方法，包括以下步骤：1)将保持系T98B经过60Co-γ射线处理，获得光温敏不育系T98S；2)以T98S作为母本，以非野败恢复系R作为父本配制增产3％以上的杂交组合，筛选强优势杂交组合T98S/R。本发明通过人工诱变将优良保持系快速转变为光温敏不育系，突破了三系的恢保制约，提高了恢复系利用效率，加快了强优杂交组合的选育。
【IPC分类】A01H1/06, A01H1/02
【公开号】CN104904591
【申请号】CN201510291861
【发明人】谭炎宁, 袁定阳, 段美娟, 袁隆平, 邓华凤, 杨震, 许可, 何强, 孙志忠, 余东, 孙学武, 袁光杰, 袁贵龙
【申请人】湖南杂交水稻研究中心
【公开日】2015年9月16日
【申请日】2015年6月2日