大花萱草适于工厂化繁殖的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物组织培养技术领域，更具体地说，特别涉及一种大花萱草适于工厂化繁殖的方法。
【背景技术】
[0002]大花萱草属百合科多年生草本花卉，叶丛生，花形大，色艳丽，是一种重要的宿根花卉。
[0003]目前，大花萱草的繁殖主要采用分株、扦擂等方法，由于繁殖系数低，限制了其在生产上的大规模栽培。应用组织培养提高聋草的繁殖技术已有一些报道，但这些研究多着重于外源激素对形态发生过程的调节和器官发生。而对萱草在继代培养繁殖过程中新梢的快速增殖及其影响因素以及降低生产成本则尚少报道。
【发明内容】
[0004](一)技术问题
[0005]本发明的目的是提供一条低成本、高效率的大花萱草试管苗生产程序。
[0006]( 二)技术方案
[0007]本发明提供了一种大花萱草适于工厂化繁殖的方法，包括步骤:
[0008]S1、获取活体组织，选取大花萱草开花植株幼嫩的花茎或大花萱草块茎的嫩芽作为活体组织，并对活体组织进行洗净消毒处理；
[0009]S2、细化切割，将洗净后的活体组织切割细化；
[0010]S3、调制母液制备培养基，制备第一母液:分别称取40.0-45.0g的ΝΗ4Ν03、45.0-50.0g 的 ΚΝ03、5.0-10.0g 的 MgS04.7H20 和 1.0-5.0g 的腿孑04置于 500mL 烧杯中加入蒸馏水定容；
[0011]制备第二母液:分别称取1.0-5.0g的Na2EDTA和1.0-5.0g的FeS04.7H20置于500mL烧杯中加入蒸馈水定容；
[0012]制备第三母液:称取0.1-0.5g的氨基乙酸置于500mL的烧杯中加入蒸馏水定容；
[0013]制备第四母液:称取20-25g的CaCl2.2H20或者15.0-20.0g的无水CaCl2置于500mL烧杯中加入蒸馈水定容；
[0014]制备第五母液:分别称取0.01-0.05g的烟酸、0.01-0.05g的VB^ 0.01-0.05g的VB:置于500mL烧杯中加入蒸馈水定容；
[0015]制备第六母液:分别称取10.0-15.0g 的 MnS04.4Η20、1.0-5.0g 的 H3B03、1.0-5.0g的 ZnS04.7Η20、0.1-0.5g 的 Na2Mo04.2Η20、0.01-0.05g 的 CuS04.5H20 和 0.01-0.05g 的CoCl2.6H20置于500mL烧杯中加入蒸馈水定容；
[0016]制备第七母液:称取0.1-0.5g的KI置于500mL烧杯中加入蒸馏水定容；
[0017]将七种母液混合制成混合母液，称取25_30g/L的食用蔗糖、0.1-0.5g/L的肌醇、6-6.5g/L的琼脂粉加入到混合母液中并加热，然后加入5MNa0H调PH至5.0-6.0，之后分装高压灭菌25min制成培养基；
[0018]S4、组织培养，将活体组织置于培养基中进行培养，培养温度23°C_27°C;每天照光12h、光强 22001x。
[0019]优选地，在步骤S2中，将洗净后的活体组织切割细化制成0.5-1.0cm长度的块状活体组织。
[0020](三)有益效果
[0021]本发明对大花萱草获取的活体组织进行多道杀菌操作，并且，对用于组织培养的培养基进行了配方优化，本发明的优点为:提高了大花萱草不定芽的增殖率，降低了生产成本，提高了经济效益。
【附图说明】
[0022]图1为本发明实施例中花萱草适于工厂化繁殖的方法的流程图。
【具体实施方式】
[0023]下面结合附图和实施例对本发明的实施方式作进一步详细描述。以下实施例用于说明本发明，但不能用来限制本发明的范围。
[0024]在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上；术语“上”、“下”、“左”、“右”、“内”、“外”、“前端”、“后端”、“头部”、“尾部”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
[0025]在本发明的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
[0026]请参考图1，图1为本发明实施例中花萱草适于工厂化繁殖的方法的流程图。
[0027]制备第一母液(大量元素20mL/L):分别称取NH4N03(40.0-45.0g)、ΚΝ03(45.0-50.0g)、MgS04.7H20(5.0-10.0g)和 KH2P04(1.0-5.0g)置于 500mL 烧杯中加入蒸馏水定容。
[0028]制备第二母液(螯合铁10mL/L):分别称取Na2EDTA (1.0-5.0g)和FeS04.7H20(1.0-5.0g)置于500mL烧杯中加入蒸馏水定容。
[0029]制备第三母液(甘氨酸10mL/L):称取氨基乙酸(0.1-0.5g)置于500mL的烧杯中加入蒸馈水定容。
[0030]制备第四母液(CaCl2.2H20 10mL/L):称取 CaCl2.2H20(20_25g 或者 15.0-20.0g无水CaCl2)置于500mL烧杯中加入蒸馈水定容。
[0031]制备第五母液(烟酸lmL/L):分别称取烟酸(0.01-0.05g)、VB6 (0.01-0.05g)和VBj (0.01-0.05g)置于500mL烧杯中加入蒸馈水定容。
[0032]制备第六母液(微量元素lmL/L):分别称取MnS04.4Η20(10.0-15.0g)、Η3Β03(1.0-5.0g)、ZnS04.7 H20 (1.Ο - 5.0 g)、Na^oOi.2H20 (0.1-0.5 g)、CuS04 *5H20(0.01-0.05g)和 CoCl2.6Η20(0.01-0.05g)置于 500mL 烧杯中加入蒸馏水定容。
[0033]制备第七母液(KIlmL/L):称取KI (0.1-0.5g)置于500mL烧杯中加入蒸馏水定容。
[0034]MS培养基制备方法为:分别取大量元素、螯合铁、甘氨酸、CaCl2.2H20、烟酸、微量元素KI七种母液定容到加热容器内，称取食用蔗糖(25-30g/L)、肌醇(0.1-0.5g/L)、琼脂粉(6-6.5g/L);打开加热装置后分别加入蔗糖、肌醇和琼脂粉，搅拌，沸腾后关闭电源，将培养基倒入量杯中定容，不足加水，搅拌均匀，然后加入5MNa0H调PH至5.0-6.0，之后分装高压灭菌25min。
[0035]然后将灭菌后的活体组织置于上述的培养基中进行培养，培养温度23°C_27°C;每天照光12h、光强22001x。
[0036]本发明的优点为:提高了大花萱草不定芽的增殖率，降低了生产成本，提高了经济效益。
[0037]本发明的实施例是为了示例和描述起见而给出的，而并不是无遗漏的或者将本发明限于所公开的形式。很多修改和变化对于本领域的普通技术人员而言是显而易见的。选择和描述实施例是为了更好说明本发明的原理和实际应用，并且使本领域的普通技术人员能够理解本发明从而设计适于特定用途的带有各种修改的各种实施例。
【主权项】
1.一种大花萱草适于工厂化繁殖的方法，其特征在于， 步骤一、选取大花萱草开花植株幼嫩的花茎或大花萱草块茎的嫩芽作为活体组织，并对活体组织进行洗净消毒处理； 步骤二、将洗净后的活体组织切割细化； 步骤三、 制备第一母液:分别称取 40.0-45.0g 的 NH4N03、45.0-50.0g 的 KN03、5.0-10.0g 的MgS04.7H20和1.0-5.0g的腿#04置于500mL烧杯中加入蒸馏水定容； 制备第二母液:分别称取1.0-5.0g的Na2EDTA和1.0-5.0g的FeS04.7H20置于500mL烧杯中加入蒸馏水定容； 制备第三母液:称取0.1-0.5g的氨基乙酸置于500mL的烧杯中加入蒸馏水定容；制备第四母液:称取20-25g的CaCl2.2H20或者15.0-20.0g的无水CaCl2置于500mL烧杯中加入蒸馏水定容； 制备第五母液:分别称取0.01-0.05g的烟酸、0.01-0.05g的VB6^P 0.01-0.05g的VB工置于500mL烧杯中加入蒸馈水定容； 制备第六母液:分别称取 10.0-15.0g 的 MnS04.4H20、1.0-5.0g 的 H3B03、1.0-5.0g的 ZnS04.7Η20、0.1-0.5g 的 Na2Mo04.2Η20、0.01-0.05g 的 CuS04.5H20 和 0.01-0.05g 的CoCl2.6H20置于500mL烧杯中加入蒸馈水定容； 制备第七母液:称取0.1-0.5g的KI置于500mL烧杯中加入蒸馏水定容； 将七种母液混合制成混合母液，称取25-30g/L的食用蔗糖、0.1-0.5g/L的肌醇、6-6.5g/L的琼脂粉加入到混合母液中并加热，然后加入5MNaOH调PH至5.0-6.0，之后分装高压灭菌25min制成培养基； 步骤四、将活体组织置于培养基中进行培养，培养温度23°C -27°C ;每天照光12h、光强22001x。2.根据权利要求1所述的大花萱草适于工厂化繁殖的方法，其特征在于， 在所述步骤二中，将洗净后的活体组织切割细化制成0.5-1.0cm长度的块状活体组织。
【专利摘要】一种大花萱草适于工厂化繁殖的方法，包括步骤：S1、获取活体组织，选取大花萱草开花植株幼嫩的花茎或大花萱草块茎的嫩芽作为活体组织，并对活体组织进行洗净消毒处理；S2、细化切割，将洗净后的活体组织切割细化；S3、调制母液制备培养基；S4、组织培养，将活体组织置于培养基中进行培养，培养温度23℃-27℃；每天照光12h、光强2200lx。本发明对大花萱草获取的活体组织进行多道杀菌操作，并且，对用于组织培养的培养基进行了配方优化，本发明的优点为：提高了大花萱草不定芽的增殖率，降低了生产成本，提高了经济效益。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105340754
【申请号】CN201510880558
【发明人】张鑫, 樊起国, 王迪, 于福满
【申请人】定州市绿谷农业科技发展有限公司
【公开日】2016年2月24日
【申请日】2015年12月4日