光合细菌在茎瘤芥根肿病防治中的应用及茎瘤芥根肿病防治剂的制作方法
【专利摘要】本发明提供光合细菌在茎瘤芥根肿病防治中的应用及茎瘤芥根肿病防治剂，具体应用时将光合细菌用水配制成1~2×108 cfu/mL的菌悬浮液，在茎瘤芥幼苗移栽到大田中培育之前，将茎瘤芥幼苗截根处理，按照每100 mL所述菌悬浮液处理10~20株茎瘤芥幼苗的方式，对截根后的茎瘤芥幼苗进行浸根处理30~60 min；所述茎瘤芥根肿病防治剂组分包括沼泽红假单胞菌光合细菌，所述沼泽红假单胞菌光合细菌作为防治茎瘤芥根肿病的主要活性成分。实验结果证明应用光合细菌采用本发明具体应用方法对幼苗进行处理，可以使茎瘤芥收割时成菜率提高了16.5%，根肿病病情指数下降27.1%，对根肿病的防治率达到了35%。
【专利说明】
光合细菌在茎瘤芥根肿病防治中的应用及茎瘤芥根肿病防治剂
技术领域
[0001]本发明属于根肿病防治技术领域，具体涉及光合细菌在茎瘤芥根肿病防治中的应用及茎瘤芥根肿病防治剂。
【背景技术】
[0002]“涪陵榨菜”已经成为我国重庆的特色农业，涪陵区榨菜的种植面积和产量均居全国第一位。自1994年在涪陵地区发现榨菜根肿病，目前该病已成为榨菜的主要病害(高明泉，彭洪江，王旭，等.涪陵榨菜根肿病的危害与产量损失测定.植物保护，2002，28
(6): 31-33;肖崇刚，郭向华，韩海波，等.涪陵榨菜根肿病病菌鉴定及主要特性.西南农业大学学报，2002,24(4): 539-541)，涪陵地区榨菜连作年限达10-20年，有的地块根肿病发病十分严重，出现多处弃种田块，对榨菜产业持续发展及农民收入带来了极大的影响。
[0003]光合细菌具有一定的固氮能力(周茂洪，邹邻邻，陈再廖.水稻根系血色红假单胞菌的分离及生理生态特性研究[J].浙江农业学报2002 14(1):28 -33)，还能提高根瘤菌在豆科植物上的结瘤率，同时具有促进根系和植株发育、花蕾和果实的形成、促进植物早熟、促进土壤有机物的有效化等作用(李秋芬，陈碧鹃，曲克明.鱼虾混养生态系中细菌动态变化研究[[J].应用生态学报2002 13 6(6)731-734.)，光合细菌作为一种生物肥料，在农业上的应用越来越广泛。国内外已有一些厂家生产光合细菌、菌肥并已投入市场，国际上对光合细菌菌肥也制订相应的标准，其作为微生物肥料在农业上将有很大的发展前景(王秋菊.光合细菌在植物上的研究现状与展望[J].黑龙江八一农垦大学学报，2006，18(5): 25-29)ο
[0004]除此之外，光合细菌能促进有益微生物的增殖，具有抑制病原菌的能力，还可有效降解土壤中残留农药、H2S、过剩氨氮等，是无污染、无公害净化土壤的良好的土壤调节剂(王强.光合细菌综合利用技术[J].中国国防科技信息1997 4 (4): 79-80)。目前，光合细菌已在大豆、水稻、玉米等作物的生产中得到应用，而光合细菌在茎瘤芥的生产和抗病害中的应用未见报道。
【发明内容】
[0005]针对现有技术存在的上述不足，本发明所要解决的技术问题是:提供光合细菌在茎瘤芥根肿病防治中的应用，使茎瘤芥根肿病发病率降低、成菜率显著提高，并提供了一种茎瘤芥根肿病防治剂，拓宽了光合细菌的应用范围。
[0006]实现上述目的，本发明采用如下技术方案:光合细菌在茎瘤芥根肿病防治中的应用，所述光合细菌为沼泽红假单胞菌。
[0007]进一步，具体应用时将所述光合细菌用水配制成I?2X 18 cfu/mL的菌悬浮液，在茎瘤芥幼苗移栽到大田中培育之前，将茎瘤芥幼苗截根处理，按照每100 mL所述菌悬浮液处理50?100株茎瘤芥幼苗的方式，对截根后的茎瘤芥幼苗进行浸根处理30?60 min。
[0008]—种茎瘤芥根肿病防治剂，其组分包括沼泽红假单胞菌光合细菌，所述沼泽红假单胞菌光合细菌作为防治茎瘤芥根肿病的主要活性成分。
[0009]相比现有技术，本发明具有如下有益效果:
1、本发明通过实验验证光合细菌具有防治茎瘤芥根肿病的效果，并研究了具体应用时的最佳使用方法，实验结果证明在茎瘤芥幼苗大田栽种前，应用光合细菌采用本发明具体应用方法对幼苗进行处理，可以使光合细菌与根肿菌竞争寄生位点，利用光合细菌的分泌物杀死根肿菌，利用光合细菌的分泌物改善土壤微生物群落，使抗拮微生物数量增加抑制根肿菌生长，最终可以使茎瘤芥收割时成菜数由23株提高至32.7株，成菜率提高16.5%，根肿病病情指数由77.5%下降至50.4%，病情指数下降27.1%，对根肿病的防治率达到了 35%，取得了意想不到的技术效果。
[0010]2、在本发明验证光合细菌具有防治茎瘤芥根肿病的基础上，本发明还提供了一种茎瘤芥根肿病防治剂，所述根肿病防治剂中以沼泽红假单胞菌光合细菌作为防治主要活性成分，还可以包括其他营养成分，本发明通过研究发现当根肿病防治剂中光合细菌的浓度为2X 18 cfu/mL时，对根肿病的防治效果最好，防治率可达35%。
[0011]3、本发明拓宽了光合细菌的应用范围，为茎瘤芥根肿病的防治提供了新的解决方案，该防治茎瘤芥根肿病的方法成本低，易于操作，具有良好的市场应用前景。
【附图说明】
[0012]图1为接种沼泽红假单胞菌后的茎瘤芥成菜率；
图2为接种沼泽红假单胞菌后的茎瘤芥根肿病病情指数分析。
【具体实施方式】
[0013]下面结合具体实施例和说明书附图对本发明作进一步详细说明。本实施案例在以本发明技术为前提下进行实施，现给出详细的实施方式和具体的操作过程来说明本发明具有创造性，但本发明的保护范围不限于以下的实施例。
[0014]实施例1沼泽红假单胞菌菌株及培养
沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas faecal is)编号:I.2176，购买自中国普通微生物菌种保藏管理中心。沼泽红假单胞菌培养基采用0925培养基(由中国普通微生物菌种保藏管理中心提供)配方如下:
0925培养基(成分及终浓度):磷酸二氢钾1.00g/L，氯化钙0.lg/L，碳酸氢钠3.00g/L，乙酸钠1.00g/L，氯化镁0.5g/L，氯化铵1.00g/L，氯化钠1.0g/L，微量元素溶液1.00ml/L，维生素溶液I.0ml/L，琥珀酸钠1.00g/L，酵母提取物1.50g/L，蛋白胨0.5g/L，pH6.8。
[0015]其中，微量元素溶液的成分及终浓度如下:四水氯化铁1.8g/L，六水氯化钴0.25g/L，六水氯化镍0.01 g/L，二水氯化铜0.01 g/L，四水氯化锰0.70 g/L，氯化锌0.10 g/L,二水钼酸钠0.03 g/L，五水砸酸钠0.01 g/L ο
[0016]维生素溶液的成分及终浓度如下:生物素0.10g/L，烟酸0.35 g/L，盐酸硫胺素
0.3 g/L，对氨基苯甲酸0.20 g/L，泛酸钙0.10 g/L，维生素B12 0.05 g/L。
[0017]实施例2接种方法
选择根肿病发病重的茎瘤芥地块进行，以涪陵区常用栽培品种永安小叶为试验品种，在移栽时，将茎瘤芥幼苗截根处理，将100 mL沼泽红假单胞菌悬浮液(I XlO9 Cfu.mL—O加水至500 mL并混合均匀(终浓度2 X 18 cfu/mL)，对60棵截根处理后的幼苗进行浸根处理，浸泡30 min，做3次重复平行操作试验。以清水为空白对照，小区随机排列，管理同一般大田，在采收时期分别在处理区和对照区调查田间病株率和病情指数及成菜数，测算处理区菌株的防治效果。
[0018]实施例3病害统计
1、统计方法:
将茎瘤芥根肿病严重度分级定为5级，其标准为(高明泉，2012):
O级:健株。
[0019]I级:侧根发病，肿瘤小而少，呈白色，对植株生长无或轻微影响，产量损失为O?5%。
[0020]2级:肿瘤主要在主根中部、上、下侧根多，或侧根上肿瘤大而多，呈白色或米黄色，对植株生长有一定影响，但地上部分无明显症状，产量损失6?20%。
[0021]3级:主根肿瘤大且变黑，表面粗糙龟裂，有少量侧根，地上部分生长受阻，中心叶片变为深绿色，在阳光下出现轻度萎蔫，产量损失21?35%。
[0022]4级:主根肿瘤龟裂或腐烂变黑，几乎无侧根，地上部分生长严重受阻，株型矮小，叶色暗绿，菜头小且皮厚筋多，在阳光下，整株严重萎蔫，极易拔起，产量损失(不包括无实际收获价值的病株)在36%以上。
[0023]病情指数=Σ(各级病株数X该病级值)/ (调查总株数X最高级值)X 100 茎瘤芥成菜标准:以茎瘤在150g以上的为成菜标准，低于150g的计为不成菜。
[0024]2、按照上述统计方法对实施例2浸根处理后大田栽培的茎瘤芥进行测算处理，分析结果如下:
2.1、茎瘤芥成菜数分析:
将沼泽红假单胞菌接种于大田栽种的茎瘤芥幼苗，收割时统计根成菜茎瘤芥数量。结果如图1所示:接种沼泽红假单胞菌的茎瘤芥的成菜数为32.7株，成菜率为54.5%，显著高于对照的成菜数23株，成菜率为38%，使茎瘤芥成菜数率从38%提高到54.5%，证明沼泽红假单胞菌对茎瘤芥的成菜株数提高16.5%。
[0025]2.2、茎瘤芥根肿病病情指数分析:
将沼泽红假单胞菌接种于大田栽种的茎瘤芥幼苗，收割前统计根肿病病情指数。结果如图2所示:接种沼泽红假单胞菌的茎瘤芥根肿病病情指数为50.4%，显著低于对照的根肿病病情指数77.5%，使茎瘤芥根肿病的病情指数下降27.1%，对根肿病的防治率为35%。
[0026]实施例4茎瘤芥根肿病防治剂下面给出三种茎瘤芥根肿病防治剂的配方:
1、茎瘤芥根肿病防治剂，为一种液体，以沼泽红假单胞菌(在根肿病防治剂中的浓度为2X108 cfu/mL)作为防治茎瘤芥根肿病的主要活性成分，还包括生物素0.20 g/L，烟酸
0.70 g/L，盐酸硫胺素0.45 g/L，对氨基苯甲酸0.30 g/L，泛酸钙0.20 g/L，维生素BI 20.10 g/L0
[0027]2、茎瘤芥根肿病防治剂，为一种液体，以沼泽红假单胞菌(在根肿病防治剂中的浓度为IXlO8 Cfu/mL)作为防治茎瘤芥根肿病的主要活性成分，还包括生物素0.10 g/L，烟酸0.35 8/1，盐酸硫胺素0.3 g/L，对氨基苯甲酸0.20 8/1，泛酸钙0.10 g/L，维生素B12
0.05 g/L。
[0028]3、茎瘤芥根肿病防治剂，为一种液体，以沼泽红假单胞菌(在根肿病防治剂中的浓度为1.5X108 cfu/mL)作为防治茎瘤芥根肿病的主要活性成分，还包括生物素0.15 g/L,烟酸0.53 g/L，盐酸硫胺素0.45 g/L，对氨基苯甲酸0.30 g/L，泛酸钙0.15 g/L，维生素B12
0.08 g/L。
[0029]采用上述茎瘤芥根肿病防治剂对茎瘤芥幼苗进行浸根处理，都可以使大田栽种的茎瘤芥成菜率提高、根肿病病情指数降低。
[0030]最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
【主权项】
1.光合细菌在茎瘤芥根肿病防治中的应用，其特征在于，所述光合细菌为沼泽红假单胞菌。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，具体应用时将所述光合细菌用水配制成I?2 X 18 cfu/mL的菌悬浮液，在茎瘤芥幼苗移栽到大田中培育之前，将茎瘤芥幼苗截根处理，按照每10mL所述菌悬浮液处理10?20株茎瘤芥幼苗的方式，对截根后的茎瘤芥幼苗进行浸根处理30~60 min。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，具体应用时将所述光合细菌用水配制成2XlO8 cfu/mL的菌悬浮液，在茎瘤芥幼苗移栽到大田中培育之前，将茎瘤芥幼苗截根处理，按照每10mL所述菌悬浮液处理12株茎瘤芥幼苗的方式，对截根后的茎瘤芥幼苗进行浸根处理30 min。4.一种茎瘤芥根肿病防治剂，其特征在于，其组分包括沼泽红假单胞菌光合细菌，所述沼泽红假单胞菌光合细菌作为防治茎瘤芥根肿病的主要活性成分。5.根据权利要求4所述茎瘤芥根肿病防治剂，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌光合细菌在所述茎瘤芥根肿病防治剂中的浓度为I?2 X 18 cfu/mL。6.根据权利要求5所述茎瘤芥根肿病防治剂，其特征在于，所述沼泽红假单胞菌光合细菌在所述茎瘤芥根肿病防治剂中的浓度为2 X 18 cfu/mL。7.根据权利要求4所述茎瘤芥根肿病防治剂，其特征在于，还包括在所述茎瘤芥根肿病防治剂中终浓度如下的组分:0.10?0.20 g/L生物素、0.30~0.70 g/L烟酸、0.30~0.50 g/L盐酸硫胺素、0.2(M).30 g/L对氨基苯甲酸、0.1(M).20 g/L泛酸钙和0.05?0.10 g/L维生素Bl2o
【文档编号】A01N63/00GK105875649SQ201610304884
【公开日】2016年8月24日
【申请日】2016年5月10日
【发明人】王殿东, 潘丽梅, 田美子, 王旭祎, 李昌满, 张超, 刘欢, 杨霞, 杨银平
【申请人】长江师范学院