专利名称：一种用两步发酵法生产d－核糖工艺方法
技术领域：
本发明涉及一种用两步发酵法生产D-核糖工艺方法，属于生物化工技术领域。
目前生产D-核糖的工艺方法存在的主要缺点是工艺方法复杂，发酵周期长，转化率低，制造成本高。
本发明的目的是发明一种用两步发酵法生产D-核糖工艺方法，它通过长菌和发酵两个过程来进行，使工艺简化，发酵周期缩短，发酵过程稳定。
本发明是这样实现的用发酵法生产D-核糖是通过长菌和发酵两个过程来进行；在长菌阶段，培养基的PH值控制在7.0～8.0，使菌体在较短时间内达到生长的平衡期；当菌体生长达到平衡期后，通过控制培养基的PH值在5.0～6.0，完成D-核糖积累为特征的发酵过程。
本发明的优点是工艺方法简单实用，发酵周期缩短，转化率高，生产过程稳定。
下面结合附图
，对本发明做进一步说明研究发现菌体的生长及状态是影响D-核糖发酵的关键，采用二步发酵工艺可显著减少发酵时间，克服发酵过程不稳定，提高发酵转化率。
本发明所使用的微生物属于芽孢杆菌属的枯草杆菌(B.Subtilis)或短小芽孢杆菌(B.pumilus)是由肌苷产生菌经化学和物理诱变而获得，其遗传特征是不能利用阿拉伯糖或葡萄糖酸为唯一碳源，其生长因子为苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸或莽草酸。
作为培养基，使用各种营养成份即碳源、氮源等，碳源主要有D-葡萄糖、D-山梨醇、淀粉水解物、糖蜜和淀粉等；氮源主要有玉米浆、酵母膏、酵母粉、蛋白胨、酪蛋白水解物，以及其它含氮的有机物，氨水、硫酸铵，磷酸铵和氯化铵等无机物，此外还有尿素和氨基酸等有机含氮物。
培养基中除加入以上碳源和氮源外，还适当添加对所使用微生物所必须的各种金属离子、维生素和氨基酸等。
发酵采用二步发酵工艺进行，先采用丰富的培养基，控制培养基的PH值7.0～8.0，温度36～38℃，通风量0.2～0.5vvm，使菌种在较短时间内达到平衡期，之后调整培养基PH值5.0～6.0，温度35～38℃，通风量0.5～1vvm，直至菌种完成D-核糖的发酵过程。具体实例为1、培养基配制(1)种子培养基(％)葡萄糖2.0，玉米浆2.0，磷酸二氢钾0.1，磷酸氢二钾0.3，酵母浸出粉0.1，PH值7.2，共600ml，0.1MP灭菌15分钟。(2)发酵培养基(％)，葡萄糖16，玉米浆2.6，硫酸铵0.5，碳酸钙2.0，硫酸亚铁0.004，硫酸镁0.01，硫酸锰0.001，PH值7.2～7.8，共6000ml，0.1MP灭菌10分钟。2、培养条件(1)种子培养条件37℃18～20小时，120rpm,100ml/500ml三角瓶。(2)发酵培养条件接种量10％，温度37℃。3、发酵过程10升发酵罐装液量6升，1～30小时为长菌期，PH控制在7.0～8.0，转速500rpm，通风量0.3vvm，30～60小时为发酵期，PH控制在5.0～6.0，转速800rpm，通风量0.8vvm，发酵结束后，培养液中含D-核糖为64.5mg/ml。
权利要求
1.一种用两步发酵法生产D-核糖工艺方法，其特征是用发酵法生产D-核糖是通过长菌和发酵两个过程来进行；在长菌阶段，培养基的PH值控制在7.0～8.0，使菌体在较短时间内达到生长的平衡期；当菌体生长达到平衡期后，通过控制培养基的PH值在5.0～6.0，完成D-核糖积累为特征的发酵过程。
全文摘要
一种用两步发酵法生产D－核糖工艺方法,用发酵法生产D－核糖是通过长菌和发酵两个过程来进行;在长菌阶段,培养基的pH值控制在7.0～8.0,使菌体在较短时间内达到生长的平衡期;当菌体生长达到平衡期后,通过控制培养基的pH值在5.0～6.0,完成D－核糖积累为特征的发酵过程。
文档编号C12P19/02GK1299874SQ0013566
公开日2001年6月20日 申请日期2000年12月16日 优先权日2000年12月16日
发明者王树庆 申请人:王树庆