专利名称：一种北虫草纳豆制品的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种北虫草纳豆制品的制备方法，属于微生物领域。
背景技术：
北虫草与冬虫夏草为虫草属的同属异种真菌，两者的化学成分、营养成分和药用功能均非常相似。北虫草的主要药用成分虫草素等含量远高于野生冬虫夏草，而且比冬虫夏草更易于人工栽培，因此被选为冬虫夏草的最佳替代品而进行大量的人工培育。人工栽培的北虫草是虫草菌生长在死亡的有机物上发育而形成的真菌子实体，通常是以大米为主要原料，经润水、灭菌、接种、培养、干燥和粉碎等工艺制成。20世纪90年代以来，对作为药物和保健食品的北虫草的药化、药理、毒理和毒性等进行了大量的研究和安全评价，证明人工栽培的北虫草无毒副作用，作为药品和食品使用对人体健康是安全可靠的。纳豆是外观带有薄白膜纳豆菌而不失大豆颗粒状的发酵品，可直接食用，也可冻干、烘干后食用，还可分别提取有效活性物质制成胶囊和片剂。纳豆主要以大豆为原料制作。大豆的蛋白质具有不溶解性，而做成纳豆后，变得部分可溶并产生游离氨基酸，而且原料中不存在的各种酵素会由于纳豆菌及关联细菌产生，帮助肠胃消化吸收。据报道，纳豆菌对大肠杆菌有杀菌消毒作用。常吃纳豆对癌症、糖尿病、高血压、动脉硬化、肥胖病等均可起到预防和缓解及治疗作用。北虫草子实体与食品和中草药配伍形成的药膳配方在中国有数以百计之多，但与纳豆配伍的生产工艺尚未见报道。
发明内容
本发明的目的在于弥补上述现有技术之不足，提供一种北虫草纳豆制品的制备方法。实现本发明目的所采用的技术方案是一种北虫草纳豆制品的制备方法，包括以下步骤(1)将上等大豆粉碎后，按上等大豆与水的质量比为1 0. 8 1的比例润水，然后在0. IOMPa 0. 14MPa压力下灭菌；(2)将灭菌后的物料冷却至40 70°C，接种细菌细胞数为1.0X IO7 6. OX IO7 个/ml的纳豆芽孢杆菌液体菌种后混合均勻，接种的纳豆芽孢杆菌液体菌种质量为上等大豆质量的4 25%，在37 40°C保温发酵，然后出料，干燥至含水量不超过10% ；(3)将干燥后的纳豆发酵物粉碎至60 80目，得到纳豆粉，然后加入60 80目的北虫草子实体粉，北虫草子实体粉的加入量为北虫草子实体粉与纳豆粉的总质量的8 10 %，混合均勻，即得到北虫草纳豆制品。步骤(1)中是将上等大豆粉碎至5 8目。步骤(1)中所述灭菌时间为45 60分钟。步骤O)中所述纳豆芽孢杆菌液体菌种的制备方法为将溶化后的细菌培养基装入试管、封口，在0. IOMI^a 0. HMI^a下灭菌后，摆成斜面，接种纳豆芽孢杆菌纯种，然后在 32 40°C恒温条件下培养直至菌种长满斜面；将液体培养基在0. IOMPa 0. 14MPa压力下灭菌，冷却至35 40°C后接种斜面菌种，然后在37 40°C下培养，直至细菌细胞数达到 1.0X IO7 6. OX IO7个/ml后终止培养；所述液体培养基的pH值为7. 0 7. 2，其原料为蛋白胨、牛肉膏、NaCl和水，蛋白胨牛肉膏NaCl 水的用量比为2 5g 1 3g 1 5g IOOOml0步骤O)中所述保温发酵的时间为24 36小时。步骤O)中出料后，在40 60°C干燥至含水量不超过10%。与现有技术相比，本发明具有以下优点(1)实验发现，在相同的保存条件下，与单纯的纳豆粉相比，本发明的北虫草纳豆制品的纳豆激酶活性损失明显减少，使得保质期更长，产品质量更稳定，此结果表明北虫草子实体中所含有的一些成分对纳豆激酶活性有保护作用。此外，北虫草子实体中所含的过氧化物歧化酶(SOD)等具有抗氧化性，可以减少纳豆芽孢杆菌菌体的氧化，从而对该菌体的存活起到保护作用。纳豆芽孢杆菌液体菌种的细菌细胞数(1.0X107 6.0X107个/ml) 和该液体菌种的接种量有利于发酵过程中纳豆芽孢杆菌的繁殖和纳豆激酶活性的提高。(2)采用本发明方法制备的北虫草纳豆制品与未添加北虫草子实体的纳豆粉相比，其异味小，口感更好。(3)北虫草子实体具有明显的镇静、抗疲劳、抗肿瘤、抑制癌细胞和促使雄性激素分泌等作用，可增强机体免疫功能等，因此采用本发明方法制备的北虫草纳豆制品比单纯的纳豆粉对人体的保健功能更全面。
具体实施例方式下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护内容不局限于以下实施例。实施例1 (1)将蛋白胨5g、牛肉膏3g、NaCl 5g、琼脂15g和水1000ml混勻并溶化，再用碳酸氢钠溶液调PH值至7. 0，得到细菌培养基。将溶化后的细菌培养基装入18mmX 180mm试管，每个试管7ml，塞上棉塞，在0. HMI^a下灭菌30min后，摆成斜面。在超净工作台中接种纳豆芽孢杆菌纯种后，在37°C恒温条件下培养至长满斜面为止，得到斜面菌种。(2)将蛋白胨5g、牛肉膏3g、NaCl 5g和水1000ml混勻，再用碳酸氢钠溶液调pH 值至7.0，得到液体培养基。用500ml玻璃瓶装液体培养基100ml，棉塞封口，在0. HMI3a下灭菌30min，冷却至35°C接种斜面菌种，每500ml液体培养基接种0. 3cm2，然后采用往复摇瓶机，摇瓶速度为140次/min，在37°C下摇瓶培养，直至采用活细胞计数法使其中细菌细胞数为5. 83 X IO7个/ml后终止培养，得到纳豆芽孢杆菌液体菌种，储藏备用。(3)选用上等大豆，粉碎至5 8目后按上等大豆与水的质量比为1 0.8的比例润水，然后在0. 14MPa压力下灭菌45min (在0. IOMPa 0. 14MPa压力下灭菌，温度通常可达到120°C以上)。(4)将灭菌后的物料冷却至40°C，接种上述纳豆芽孢杆菌液体菌种后混合均勻， 接种的纳豆芽孢杆菌液体菌种质量为上等大豆质量的20%，在37°C保温发酵M小时，然后出料，在40°C干燥至含水量为9.5%。(5)将干燥后的纳豆发酵物粉碎至60目，得到纳豆粉，然后加入60目的北虫草子实体粉，北虫草子实体粉的加入量为北虫草子实体粉与纳豆粉总质量的10%，混合均勻，即得到北虫草纳豆制品。经测定，该北虫草纳豆制品的纳豆激酶活性为M50FU/g，加入北虫草子实体粉前所得纳豆粉的纳豆激酶活性为2722FU/g，在37°C恒温箱中保存90天后，该北虫草纳豆制品的纳豆激酶活性为2380FU/g，比保存前下降70FU/g，下降了 2. 857%，而纳豆粉在同样条件下纳豆激酶活性下降338FU/g，下降了 12. 417%，下降幅度远大于前者。请30位年龄在25岁 47岁的健康男性以鼻闻并每人口服2g上述北虫草纳豆制品和纳豆粉，结果30位试验者100%反映北虫草纳豆制品异味小，口感更好。所得北虫草纳豆制品经质检、包装、入库，在阴凉、干燥、通风条件下保存。实施例2 (1)将蛋白胨5g、牛肉膏3g、NaCl 5g、琼脂15g和水1000ml混勻并溶化，再用碳酸氢钠溶液调PH值至7. 0，得到细菌培养基。将溶化后的细菌培养基装入18mmX 180mm试管，每个试管7ml，塞上棉塞，在0. 12ΜΙ^下灭菌40min后，摆成斜面。在超净工作台中接种纳豆芽孢杆菌纯种后，在37°C恒温条件下培养至长满斜面为止，得到斜面菌种。(2)将蛋白胨5g、牛肉膏3g、NaCl 5g和水1000ml混勻，再用碳酸氢钠溶液调pH 值至7.0，得到液体培养基。用500ml玻璃瓶装液体培养基100ml，棉塞封口，在0. 12ΜΙ^下灭菌40min，冷却至37°C接种斜面菌种，每500ml液体培养基接种0. 2cm2，然后采用往复摇瓶机，摇瓶速度为120次/min，在40°C下摇瓶培养，直至采用活细胞计数法使其中细菌细胞数达到1. 65 X IO7个/ml后终止培养，得到纳豆芽孢杆菌液体菌种，储藏备用。(3)选用上等大豆，粉碎至5 8目后按上等大豆与水的质量比为1 1的比例润水，然后在0. IMPa压力下灭菌60min。(4)将灭菌后的物料冷却至50°C，接种上述纳豆芽孢杆液体菌种后混合均勻，接种的纳豆芽孢杆液体菌种质量为上等大豆质量的10%，在40°C保温发酵对小时，然后出料，在50°C干燥至含水量为10%。(5)将干燥后的纳豆发酵物粉碎至70目，得到纳豆粉，然后加入70目的北虫草子实体粉，北虫草子实体粉的加入量为北虫草子实体粉与纳豆粉的总质量的9%，混合均勻， 即得到北虫草纳豆制品。本实施例所得北虫草纳豆制品的纳豆激酶活性为^98FU/ml。将该北虫草纳豆制品和本实施例未添加北虫草子实体的纳豆粉置于恒温箱中保存，同等条件下发现，前者比后者的纳豆激酶活性损失更小。按与实施例1相同的方法，试验者100%反映该北虫草纳豆制品异味小，口感更好。所得北虫草纳豆制品经质检、包装、入库，在阴凉、干燥、通风条件下保存。实施例3 (1)将蛋白胨5g、牛肉膏3g、NaCl 5g、琼脂15g和水1000ml混勻并溶化，再用碳酸氢钠溶液调PH值至7. 2，得到细菌培养基。将溶化后的细菌培养基装入15mmX150mm试管，每个试管細1，塞上棉塞，在0. IMI^a下灭菌50min后，摆成斜面。在超净工作台中接种纳豆芽孢杆菌纯种后，在36°C恒温条件下培养至长满斜面为止，得到斜面菌种。(2)将蛋白胨2g、牛肉膏3g、NaCl 4g和水1000ml混勻，再用碳酸氢钠溶液调pH 值至7. 2，得到液体培养基。用500ml玻璃瓶装液体培养基100ml，棉塞封口，在0. HMI3a下灭菌40min，冷却至35°C接种斜面菌种，每500ml液体培养基接种0. km2，然后采用往复摇瓶机，摇瓶速度为160次/min，在37°C下摇瓶培养，直至采用活细胞计数法使其中细菌细胞数达到3. 40 X IO7个/ml后终止培养，得到纳豆芽孢杆菌液体菌种，储藏备用。(3)选用上等大豆，粉碎至5 8目后按上等大豆与水的质量比为1 0.9的比例润水，然后在0. 12MPa压力下灭菌50min。(4)将灭菌后的物料冷却至40°C，接种上述纳豆芽孢杆液体菌种后混合均勻，接种纳豆芽孢杆液体菌种的质量为上等大豆质量的25%，在37°C保温发酵36小时，然后出料，在55°C干燥至含水量为8. 0%。(5)将干燥后的纳豆发酵物粉碎至80目，得到纳豆粉，然后加入80目的北虫草子实体粉，北虫草子实体粉的加入量为北虫草子实体粉与纳豆粉的总质量的8%，混合均勻， 即得到北虫草纳豆制品。本实施例所得北虫草纳豆制品的纳豆激酶活性为2780FU/g。将该北虫草纳豆制品和本实施例未添加北虫草子实体的纳豆粉置于恒温箱中保存，同等条件下发现，前者比后者的纳豆激酶活性损失更小。按与实施例1相同的方法，试验者100%反映该北虫草纳豆制品异味小，口感更好。所得北虫草纳豆制品经质检、包装、入库，在阴凉、干燥、通风条件下保存。
权利要求
1.一种北虫草纳豆制品的制备方法，其特征在于包括以下步骤(1)将上等大豆粉碎后，按上等大豆与水的质量比为1 0.8 1的比例润水，然后在 0. IOMPa 0. 14MPa压力下灭菌；(2)将灭菌后的物料冷却至40 70°C，接种细菌细胞数为1.OX IO7 6. OX IO7个/ ml的纳豆芽孢杆菌液体菌种后混合均勻，接种的纳豆芽孢杆菌液体菌种质量为上等大豆质量的4 25%，在37 40°C保温发酵，然后出料，干燥至含水量不超过10% ；(3)将干燥后的纳豆发酵物粉碎至60 80目，得到纳豆粉，然后加入60 80目的北虫草子实体粉，北虫草子实体粉的加入量为北虫草子实体粉与纳豆粉的总质量的8 10%， 混合均勻，即得到北虫草纳豆制品。
2.根据权利要求1所述的北虫草纳豆制品的制备方法，其特征在于步骤(1)中是将上等大豆粉碎至5 8目。
3.根据权利要求1所述的北虫草纳豆制品的制备方法，其特征在于步骤(1)中所述灭菌时间为45 60分钟。
4.根据权利要求1所述的北虫草纳豆制品的制备方法，其特征在于步骤O)中所述纳豆芽孢杆菌液体菌种的制备方法为将溶化后的细菌培养基装入试管、封口，在0. IOMPa 0. 14MPa下灭菌后，摆成斜面，接种纳豆芽孢杆菌纯种，然后在32 40°C恒温条件下培养直至菌种长满斜面；将液体培养基在0. IOMPa 0. 14MPa压力下灭菌，冷却至35 40°C后接种斜面菌种，然后在37 40°C下培养，直至细菌细胞数达到1. 0 X IO7 6. 0 X IO7个/ml后终止培养；所述液体培养基的PH值为7.0 7. 2，其原料为蛋白胨、牛肉膏、NaCl和水，蛋白胨牛肉膏NaCl 水的用量比为2 5g 1 3g 1 5g 1000ml。
5.根据权利要求1所述的北虫草纳豆制品的制备方法，其特征在于步骤O)中所述保温发酵的时间为M 36小时。
6.根据权利要求1所述的北虫草纳豆制品的制备方法，其特征在于步骤O)中出料后，在40 60°C干燥至含水量不超过10%。
全文摘要
本发明公开了一种北虫草纳豆制品的制备方法，属于微生物领域。该方法是将上等大豆粉碎后润水，高压灭菌；然后将物料冷却，接种纳豆芽孢杆菌液体菌种，混匀后保温发酵，出料干燥；将干燥后的纳豆发酵物粉碎，然后按比例加入北虫草子实体粉，混合均匀，即得到北虫草纳豆制品。采用本发明方法制备的北虫草纳豆制品比单纯的纳豆粉的纳豆激酶活性更稳定，异味小，口感更好，具有较高的营养价值和保健功能。
文档编号A23L1/29GK102342496SQ20101024031
公开日2012年2月8日 申请日期2010年7月27日 优先权日2010年7月27日
发明者李纯端 申请人:李光敏