专利名称：蓝莓叶中抗氧化物质的制备方法
技术领域：
本发明属于天 然抗氧化物质的制备工艺，特别涉及一种蓝莓叶中抗氧化物质的制备方法。
背景技术：
随着经济的发展和人民生活水平的提高，人们对食品的安全性日益重视。抗氧化是食品加工的关键问题，目前主要使用二叔丁基羟基甲苯(BHT)、叔丁基羟基茴香醚(BHA) 等化学合成抗氧化剂。由于化学合成抗氧化剂或多或少的会对人体产生一定的毒害，人们越来越倾向于用天然抗氧化剂取代合成抗氧化剂，因此，研究开发高效、安全的天然抗氧化齐U，成为当今食品科学研究的热点，而许多植物富含抗氧化活性成分，是天然抗氧化剂很好的来源。国内外对植物抗氧化物质的研究也十分热门，已发现许多植物富含抗氧化活性物质。蓝莓，又称越橘，属杜鹃花科(Ericaceae)越橘属(Kaccifliwsspp.)多年生落叶或常绿灌木，是20世纪30年代开始在美国发展起来的新兴果树，果实风味独特，营养价值高， 并具有抗癌、预防心血管疾病、防止脑神经衰弱等保健功能。蓝莓在西方发达国家已成为普遍接受的产品，我国蓝莓栽培历史短，但是发展迅猛。尤其是近三年来种植面积迅速增长， 目前已超过一千公顷，我国蓝莓产业方兴未艾，前景广阔。蓝莓的大量种植，蓝莓叶的产量也随之增加且还没有很好利用，但对蓝莓叶的加工利用极少，大部分当做废弃物，造成资源浪费和环境污染。蓝莓叶富含抗氧化活性物质，为了充分开发和利用蓝莓叶中的抗氧化物质，本发明针对蓝莓叶中的抗氧化物质制备工艺进行研究。《营养学报》2008年第30卷第4期公开了蓝莓叶黄酮提取物抗氧化活性的研究， 将蓝莓叶(沈阳农业科技开发院蓝莓种植基地提供)50°C烘干，粉碎后过40目筛，用80% 乙醇按lg:20ml，50°C浸提2h后抽滤，收集滤液，浓缩，石油醚脱脂，AB-8大孔树脂纯化， 40°C减压浓缩，真空干燥得到黄色粉末状蓝莓叶黄酮提取物，纯度为78. 04%。《食品与发酵工业2008，34(1):133-137.》公开了大孔树脂纯化蓝莓叶总黄酮的工艺研究，比较了种大孔树脂对蓝莓叶黄酮的吸附和解吸效果，从中筛选出适合蓝毒叶黄酮分离纯化的树脂，并对其吸附和解吸条件进行了探讨。结果表明HPD-600大孔树脂是纯化蓝荐叶黄酮比较好的树脂，该工艺生产的黄酮产品为黄色粉末，回收率为81. 9%，纯度为 78. 04%ο《粮食与油脂》2010年第6期公开了蓝莓叶原花青素提取工艺将精选蓝莓叶于 50°C下烘干，经粉碎处理后过筛。将经粉碎后蓝莓叶粉末置于索氏提取器中，在40°C 50°C 下用石油醚脱脂处理后，过滤，烘干备用。提取工艺流程优质蓝莓叶一粉碎一脱脂一过滤 —烘干一超声波提取一过滤一蒸发浓缩一乙酸乙酯萃取一真空浓缩一粗产品一洗脱一真空浓缩一干燥一精产品。上述的文献公开的蓝莓叶原花青素提取工艺中采用了乙醇、石油醚以及乙酸乙酯等有机溶剂，对环境影响较大，成本较高，另外在工艺上也较为复杂，提取的纯度不高。
发明内容
为了解决上述工艺中存在对环境的影响大，工艺复杂，成本高，提取的纯度不高的技术缺陷，本发明的目的是提供一种蓝莓叶中提取原花青素的方法，该方法工艺简单，环境友好，纯度好，产品安全且抗氧化活性强。为了实现上述的目的，本发明采用了以下的技术方案 蓝莓叶中抗氧化物质的制备方法，该方法包括以下的步骤
(1)采集新鲜蓝莓叶，用水洗净，浙干，剪成长短碎段，加8 14倍水，调pH3 8，90 100°C热水浴提取，过滤取滤液，50 60°C减压浓缩至原浓度的15 25倍；
(2)用大孔树脂吸附，用水及10% 30%浓度酒精洗脱，用紫外分光光度法检测，收集 280nm处有吸收的抗氧化活性强的洗脱液，收集的洗脱液50 60°C减压浓至膏状，50 60 °C真空干燥得浅褐色粉末。作为优选，上述的大孔树脂采用AB-8大孔树脂。本发明由于采用了上述的技术方案，浅褐色粉末得率为1.8-2.5%，采用硫酸-香草醛法，以原花青素标准品作标准曲线，计算样品的原花青素含量> 95%。本发明得到的蓝莓叶抗氧化物质具有强的总抗氧化能力和DPPH ·自由基的清除能力。该发明工艺简单，环境友好，纯度好，产品安全且抗氧化活性强。
图1为25 μ g/mL不同抗氧化剂对DPPH ·自由基的清除动力学曲线。
具体实施例方式实施例1
1.采集新鲜蓝莓叶，自来水冲洗，浙干。2.将100 g上述蓝莓叶剪成约1 cm长短碎段，加800ml (400 ml +400 ml)自来水，调pH8，90°C水浴提取2次，时间分别是1.5 h和Ih0 ·
3.过滤取滤液，减压浓缩(50°C)至约50 ml。4. AB-8大孔树脂吸附，用水和10-30%浓度乙醇洗脱，用紫外分光光度法检测，收集280nm处有吸收的抗氧化活性强的洗脱液，减压浓缩(50°C )至膏状。5.真空干燥(50°C)得浅褐色粉末2. 97 g，采用硫酸-香草醛法，以原花青素标准品作标准曲线，计算样品的原花青素含量为95. 3%。实施例2
1.采集新鲜蓝莓叶，自来水冲洗，浙干。2.将80 g上述蓝莓叶剪成约1 cm长短碎段，加IOOOml (400 ml +300 ml +300 ml)自来水，调pH6，沸水浴提取3次，时间为2. 5 h、2h和1. 5h.
3.过滤取滤液，减压浓缩(50°C)至约40 ml，约为原浓度的25倍。4. AB-8大孔树脂吸附，用水和10-30%浓度乙醇洗脱，用紫外分光光度法检测，收集280nm处有吸收的抗氧化活性强的洗脱液，减压浓缩(50°C )至膏状。5.真空干燥(50°C)得浅褐色粉末2. 52g，采用硫酸-香草醛法，以原花青素标准品作标准曲线，计算样品的原花青素含量为95. 5%。实施例3
1.采集新鲜蓝莓叶，自来水冲洗，浙干。2.将80 g上述蓝莓叶剪成约1 cm长短碎段，加560ml自来水，调pH4，沸水浴提取2h，过滤，滤渣再加560ml自来水，沸水浴提取1.5 h，过滤。3.合并滤液，减压浓缩(50°C)至约55 ml，约为原浓度的20倍。4. AB-8大孔树脂吸附，用水和10-30%浓度乙醇洗脱，用紫外分光光度法检测，收集280nm处有吸收的抗氧化活性强的洗脱液，减压浓缩(50°C )至膏状。5.真空干燥(50°C)得浅褐色粉末2. 28 g，采用硫酸-香草醛法，以原花青素标准品作标准曲线，计算样品的原花青素含量为96. 2%。上述实施例1 3得到的蓝莓叶原花青素为浅褐色粉末，水溶性好。试验例蓝莓叶抗氧化物质的抗氧化性能
抗氧化物质能使Fe3+还原成Fe2+，后者可与菲啉类物质形成稳固的络合物，通过比色可
测出其总抗氧化能力的高低。总抗氧化体系是用以检验抗氧化剂抗氧化作用的最常用的体
系。本次实验将蓝莓叶抗氧化物质(BLA)及维生素C (VC)配置成溶液后，先取一部分样测
定其总抗氧化能力表示为(、)，室温(20 °C)放置24小时后再次取样，测定其总抗氧化能
力表示为(t24)。结果如表1所示
表1蓝莓叶抗氧化物质(BLA)和维生素C (VC)的总抗氧化能力_
权利要求
1.蓝莓叶中抗氧化物质的制备方法，其特征在于该方法包括以下的步骤(1)采集新鲜蓝莓叶，用水洗净，浙干，剪成长短碎段，加8 14倍水，调pH3 8，90 100°C热水浴提取，过滤取滤液，50 60°C减压浓缩至原浓度的15 25倍；(2)用大孔树脂吸附，用水及10% 30%浓度酒精洗脱，用紫外分光光度法检测，收集 280nm处有吸收的抗氧化活性强的洗脱液，收集的洗脱液，50 60°C减压浓至膏状，50 60 °C真空干燥得浅褐色粉末。
2.根据权利要求4所述的蓝莓叶中抗氧化物质的制备方法，其特征在于大孔树脂采用AB-8大孔树脂。
全文摘要
本发明属于天然抗氧化物质的制备工艺，特别涉及一种蓝莓叶中抗氧化物质的制备方法。蓝莓叶中抗氧化物质的制备方法，该方法包括以下的步骤(1)采集新鲜蓝莓叶，用水洗净，沥干，剪成长短碎段，加8～14倍水，调pH3～8，90～100℃热水浴提取，过滤取滤液，50～60℃减压浓缩至原浓度的15～25倍；(2)用大孔树脂吸附，用水及10%～30%浓度酒精洗脱，用紫外分光光度法检测，收集280nm处有吸收的抗氧化活性强的洗脱液，收集的洗脱液50～60℃减压浓至膏状，50～60℃真空干燥得浅褐色粉末。该发明工艺简单，环境友好，纯度好，产品安全且抗氧化活性强。
文档编号A23L3/3472GK102178325SQ201110089058
公开日2011年9月14日 申请日期2011年4月11日 优先权日2011年4月11日
发明者徐丽珊, 陈文荣, 黄启亮 申请人:浙江师范大学