专利名称：一种从海滨锦葵籽中提取活性蛋白质的工艺及用途的制作方法
技术领域：
本发明属于生化分离技术领域，特别是涉及一种从海滨锦葵籽中提取活性蛋白质的工艺；本发明还涉及前述活性蛋白质的用途。
背景技术：
海滨锦葵(Kostelezkya virginica)是适宜海滨地区生长的锦葵科锦葵属多年生宿根盐生植物，天然分布于美国东部沿海盐沼海岸带。1992年由南京大学引种至中国。有文献报导，因其耐盐水浇灌，种子产量高的耐盐油料作物而日益受到人们的重视。有实验表明海滨锦葵种子中营养成分有较高的营养价值，可以作为油料、食品、饲料、保健品和其他工业用途的原料；然而，基于探究其主要活性成分的研究较少，近年来仅有少量研究表明海滨锦葵种子具有增强免疫，降低血糖等功效的论文。而探明锦葵籽中的活性蛋白质成分的论文未见。从锦葵籽中提取制备锦葵生物活性蛋白质组分专利文献至今未有。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种新的、工艺更为简单合理的从海滨锦葵的籽中提取活性蛋白质的工艺。本发明需要解决的另一技术问题是提供上述工艺提取活性蛋白质的用途。本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种从海滨锦葵的籽中提取活性蛋白质的工艺，其特点是，其步骤如下
一种从海滨锦葵籽中提取活性蛋白质的工艺，其特征在于，其步骤是采集海滨锦葵的籽，粉碎，用石油醚或乙醚抽提去脂肪，得到无脂肪的干粉；将锦葵籽无脂肪干粉按1:20比例加入蒸馏水，混勻，用超声仪超声提取；超声条件为温度40°C，功率200W，时间1小时； 超声结束后，过滤，滤液存放，滤渣按比例1 20加入蒸馏水，再用上述超声条件重复提取一次；两次滤液合并，滤液减压蒸发，得超声提取浓缩液；
用DEAE-纤维素柱对超声提取浓缩液进行分离；DEAE-纤维素按常规方法处理，处理好后装柱，用磷酸缓冲液平衡，上样；先用0. OlmolPBS pH6. 5洗涤柱子，再用0. OlmolPBS -0. ImolNaCl pH6. 5 洗脱并第一次收集洗脱液；随后再用 0. OlmolPBS -0. 25moINaCl pH6. 5 洗脱并第二次收集洗脱液；将2次洗脱液分别装透析袋对水透析，透析后收集透析内液，冻干浓缩，分别得到两种活性蛋白质。以下是发明人所做的关于本发明工艺提取得到的海滨锦葵的两种活性蛋白质的生物学活性试验。1.)海滨锦葵两种蛋白质的免疫学活性
表1.锦葵籽活性蛋白对小鼠脾细胞和胸腺细胞增殖的影响
权利要求
1.一种从海滨锦葵籽中提取活性蛋白质的工艺，其特征在于，其步骤是采集海滨锦葵的籽，粉碎，用石油醚或乙醚抽提去脂肪，得到无脂肪的干粉；将锦葵籽无脂肪干粉按 1:20比例加入蒸馏水，混勻，用超声仪超声提取；超声条件为温度40°C，功率200W，时间1 小时；超声结束后，过滤，滤液存放，滤渣按比例1:20加入蒸馏水，再用上述超声条件重复提取一次；两次滤液合并，滤液减压蒸发，得超声提取浓缩液；用DEAE-纤维素柱对超声提取浓缩液进行分离；DEAE-纤维素按常规方法处理，处理好后装柱，用磷酸缓冲液平衡，上样；先用0. OlmolPBS pH6. 5洗涤柱子，再用0. OlmolPBS -0. ImolNaCl pH6. 5洗脱并第一次收集洗脱液；随后再用 0. OlmolPBS -0. 25moINaCl pH6. 5 洗脱并第二次收集洗脱液；将2次洗脱液分别装透析袋对水透析，透析后收集透析内液，冻干浓缩，分别得到两种活性蛋白质。
2.一种如权利要求1所述的方法提取得到的两种活性蛋白质在制备增强体液免疫和抗肝脏肿瘤的保健食品或药品中应用。
全文摘要
本发明是一种从海滨锦葵籽中提取活性蛋白质的工艺，其特征在于海滨锦葵籽粉碎，去脂，超声，过滤；上DEAE-纤维素柱，洗涤杂质，分别用0.01PBS-0.1molNaCL/L、-0.25molNaCL/L洗脱，收集，透析，冻干，得产品。本发明工艺提取制得的活性蛋白质可以在制备增强体液免疫和抗肝脏肿瘤的保健食品或药品中应用，依据这些生物活性可根据需要制成胶囊、片剂、口服液、粉针剂等保健品、药品。
文档编号C12N9/00GK102286450SQ20111015744
公开日2011年12月21日 申请日期2011年6月13日 优先权日2011年6月13日
发明者张太平, 张鹤云, 钦佩 申请人:南京大学, 南京大学连云港高新技术研究院