专利名称：一种制备牡蛎活性成份的方法
技术领域：
本发明属于食品生物技术领域，具体涉及一种牡蛎活性成份的制备方法。
背景技术：
牡蛎又称蚝、海蛎子等，是一种常见的海洋贝类动物，属软体动物门，瓣鳃纲(Lamellibranchia),牡贩科(Ostreidae),牡贩属。世界沿海各国几乎都产。牡贩肉质鲜嫩，营养丰富，是一种营养价值极高的食品。现代研究表明，牡蛎肉中含有丰富的糖原、蛋白质、氨基酸、人体必需的微量元素、维生素和较多的具有重要生理活性的不饱和脂肪酸。当前，国外除了将牡蛎作为海味直接食用外，尚开发研制了大量以牡蛎提取物为主要成分的食品、保健品和药品，这些产品不仅具有相当的营养或治疗价值，而且也具有极高的经济和社会效益。牡蛎中丰富的生物活性成分，为其在食品和医药领域的应用提供了巨大的支持。如何保护和合理利用牡蛎资源，开发新型牡蛎营养功能食品和医药品，促进牡蛎资源的可持续开发和利用，是未来牡蛎制品开发的方向。牡蛎提取物中的脂肪酸主要是正十四、十六、十八碳酸和二十烯酸等多不饱和脂肪酸，其中 EPA(eicosapentaenoic, 二十碳五稀酸)和 DHA(docosahexaenoic, 二十二碳六烯酸)含量较高，作为生物体的调节因子，EPA和DHA可降低血清LDL胆固醇(坏的胆固醇)及三甘油酯(中性油脂)，对心血管疾病诸如高血压、血栓症、心肌梗塞、狭心症等心脏疾病有预防和治疗作用，可促进学习脑力、记忆力并防止老化、老人痴呆症等。目前关于从牡蛎中提取EPA、DHA的研究报道还很少。糖原是广泛存在于动物内的多糖。糖原大量贮藏于肝脏，也存在于肌肉中，尤其是在一些水产的软体动物体内。植物界菌类，细菌、酵母等也含有糖原。牡蛎中糖原含量约为7%，牡蛎糖原可直接被机体吸收，从而减轻胰腺负担，因此对糖尿病的防治十分有效，研究表明，从牡蛎中提取的多糖具有明显的降血压，抗凝血，抗血栓，提高肌体的免疫功能和抗白细胞下降等作用；牡蛎中所含的糖原物能有效地使皮肤细胞再生，预防皱纹出现及阻止紫外线造成的皮肤损伤。牡蛎肉中蛋白质含量很高，并且氨基酸组成完善，为优质蛋白质；牡蛎肽是牡蛎蛋白水解的中间产物，牡蛎肽具有良好的水溶性，较好的酸、热稳定性。作为一种世界性的海产经济贝类，牡蛎的收获季节比较集中，生鲜牡蛎易变质腐败，长期保存和远程运输都有一定的困难，因此，对牡蛎进行深加工，提高产品的附加值，意义重大。当前，在牡蛎精深加工中对牡蛎肽、牡蛎糖原、牡蛎不饱和脂肪酸的研究都已经有零散的报道，但都没有从产业化的角度对牡蛎这些主要成份的综合、一体化开发进行深入研究。由于对牡蛎主要活性成份没有进行综合、一体化利用，造成严重的资源浪费。因此，建立合适的牡蛎活性成份综合、一体化制备方法非常必要。中国专利申请200310112802.3，公开了一种从牡蛎肉同步提取糖原和肽粉的方法，但该方法仅提取两种活性成份。
发明内容
本发明目的是提供一种制备牡蛎活性成分的方法，以同一批新鲜牡蛎为材料，依次提取牡蛎中不饱和脂肪酸、糖原、肽等有效成份。为实现上述目的，本发明的制备方法包括:一种制备牡蛎活性成份的方法，依次包括以下步骤:(I)以新鲜牡蛎为材料，用超临界萃取不饱和脂肪酸，获得不饱和脂肪酸和牡蛎渣；(2)以步骤(I)超临界萃取不饱和脂肪酸后的牡蛎渣为材料，用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，获得糖原和牡蛎残渣；(3)以步骤⑵提取糖原后的牡蛎残渣为材料，用酶法水解牡蛎蛋白制备牡蛎肽。具体地，首先将牡蛎放入冷冻干燥机中真空冻干，使物料含水量达到3%以下，再用粉碎机粉碎至10目，然后进行超临界萃取不饱和脂肪酸。萃取温度为30-50°C、萃取压力为25-45Mpa、CO2流量为15_30L/h，用超临界CO2萃取设备萃取牡蛎不饱和脂肪酸45-80min，之后在分离温度为35°C和分离压力为SMpa的条件下分离出不饱和脂肪酸，并收集牡蛎渣；将经超临界萃取方法萃取后的牡蛎渣，加入1-3倍体积的纯水，然后采用超声波破碎仪(功率为50-80W)进行破碎，再用热水蒸煮20-30min，离心，得上清液和牡蛎残渣，用浓度为60-90%的乙醇处理上清液，离心，得沉淀，将沉淀干燥后即得糖原；将经蒸煮和酒精沉淀提取糖原后的牡蛎残渣加水溶解，在PH4-9、温度为40-80°C下，用木瓜蛋白酶进行搅拌酶解反应，控制水解度(DH)为30-50%，反应结束后灭酶活(90-120°C )、离心，得酶解液，酶解液经喷雾干燥，获得牡蛎肽粉末。上述方法所获得的牡蛎不饱和脂肪酸、牡蛎糖原和肽可制成口服液、胶囊、冲剂或片剂。可作为功能性食品配料用于保健食品或普通食品配方中。根据本发明的方法可获得有益的效果:本发明以同一批新鲜牡蛎为原材料，依次用超临界萃取、蒸煮和酒精沉淀和酶法水解制备牡蛎中的活性成分，其中采用超临界萃取方法提取牡蛎不饱和脂肪酸，排除了氧化和见光反应的可能性，得率高，质量好；同时对超临界萃取后的牡蛎渣，利用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，得率高，简便易行，利于工业化生产；然后利用酶法水解牡蛎蛋白制备牡蛎肽，比传统的酸法和自溶法产量高，产品的相对分子量易于控制，对牡蛎原料的综合利用率高，且操作一体化，流程简单，是一种高效的综合性开发方法，可实现工业化生产。此外，过去的技术都是直接从牡蛎肉中提取分离牡蛎糖原，本发明是首次从经超临界萃取后的牡蛎渣中，提取分离牡蛎糖原；通过应用超声波破碎，有效地提高了牡蛎糖原的得率。
具体实施例方式本品牡贩为近江牡贩Ostrea rivularis Gould。实验所用仪器:超临界萃取仪(SFX-260D，美国ISC0)，气相色谱仪(美国惠普公司)，旋转真空蒸发仪(天津玻璃仪器厂)，722型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司广品)木瓜蛋白酶(食品级)。实施例1取新鲜牡蛎在冷冻干燥机中真空冻干，使物料含水量达到3%以下。之后用粉碎机粉碎至10目，打开超临界萃取设备，设定萃取温度为35°c，往萃取釜中加入50g物料。待萃取温度达到设定值后，控制萃取压力为35Mpa、CO2流量为20L/h的条件下萃取牡蛎不饱和脂肪酸60min，之后在分离温度为35°C和分离压力为SMpa的条件下分离出不饱和脂肪酸。从萃取釜中取出萃取脂肪酸后的牡蛎渣，加入2倍体积的纯水，然后采用两种方法进行糖原的提取分离:①不采用超声波破碎仪进行破碎，②采用超声波破碎仪进行破碎，功率为80W,时间为20min ;然后加入1/2体积水蒸煮30min，使糖原完全溶出，冷却，离心20min。将上清液用浓度为90%的酒精处理上清液，再离心取其沉淀，将沉淀干燥后即得糖原产品。采用蒽酮比色法测定糖原含量。结果对比如下表所示:
权利要求
1.一种制备牡蛎活性成份的方法，依次包括以下步骤: (1)以新鲜牡蛎为材料，用超临界萃取不饱和脂肪酸，获得不饱和脂肪酸和牡蛎渣； (2)以步骤(I)超临界萃取不饱和脂肪酸后的牡蛎渣为材料，用蒸煮和酒精沉淀提取糖原，获得糖原和牡蛎残渣； (3)以步骤(2)提取糖原后的牡蛎残渣为材料，用酶法水解牡蛎蛋白制备牡蛎肽。
2.如权利要求1所述的方法，其中: 步骤(I)之前，进一步包括将牡蛎放入冷冻干燥机中真空冻干，使物料含水量达到3%以下，然后用粉碎机粉碎至10目的步骤。
步骤(I)所述的超临近萃取不饱和脂肪酸包括:在萃取温度为30-50°C、萃取压力为25-45Mpa、CO2流量为15_30L/h下，用超临界CO2萃取设备萃取牡蛎不饱和脂肪酸45-80min，之后在分离温度为35°C和分离压力为SMpa的条件下分离出不饱和脂肪酸，并收集牡蛎渣； 步骤(2)所述的提取糖原包括:将步骤(I)的牡蛎渣，加入1-3倍体积的纯水，然后采用功率为50-80W的超声波破碎仪进行破碎，再用热水蒸煮20-30min ;离心，得上清液和牡蛎残渣；用浓度为60-90%的乙醇处理上清液，离心，得沉淀；将沉淀干燥后获得糖原； 步骤(3)所述的制备牡蛎肽包括:将步骤(2)获得的牡蛎残渣加水溶解，在PH4-9、温度为40-80°C下，用木瓜蛋白酶进行搅拌酶解反应；控制水解度为30-50%，反应结束后于90-120°C灭酶活、离心，得酶解液；酶解液经喷雾干燥，获得牡蛎肽粉末。
3.如权利要求1至2中任一项所述的方法制备的牡蛎活性成分在制备保健食品或普通食品中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种牡蛎活性成份的综合制备方法，涉及从一批牡蛎中同时分离制备不饱和脂肪酸、糖原和肽等三种牡蛎活性物质，所获得的不饱和脂肪酸、糖原和肽可制成口服液、胶囊、冲剂或片剂；提供了将所获得的牡蛎不饱和脂肪酸、糖原和肽等三种牡蛎活性物质作为功能性食品配料用于保健食品或普通食品中的应用。
文档编号A23L1/33GK103099248SQ20111035441
公开日2013年5月15日 申请日期2011年11月10日 优先权日2011年11月10日
发明者王兵, 冯汉林, 张丽娟, 朱丹, 黄传贵, 陈红, 康晖 申请人:深圳海王药业有限公司