专利名称：一种改良双相血培养瓶的制作方法
技术领域：
本发明属于体外诊断技术领域，特别涉及一种改良双相血培养瓶。
背景技术：
血培养是临床维生素检查中最重要的项目之一。临床几乎所有的发热性疾病，如多种细菌性传染病、肺炎、脑膜炎、泌尿系统感染、以及发热待查等，均可能因细菌进入血液而引起菌血症、败血症。双相血培养瓶主要用于血液中需氧和兼性厌氧菌的体外培养和无菌体液培养。所谓双相血培养，是指培养瓶中存在双相培养基，即固相和液相；培养时，先将血液以无菌操作方式注入液相培养基轻轻摇勻并浸润固相培养基表面，再进行常规培养。此双相系统形成不同的氧浓度梯度，利于对氧浓度要求不同的维生素的生长；并且固相的存在使分离培养变得简单，无污染，便于菌落的观察，以及后续的药敏试验及菌种鉴定。
为了尽快对病人作针对性抗菌治疗，准确、及时的血培养结果就尤为重要。而双相血培养基的质量好坏则对血培养的阳性检出率的高低和检出时间起着决定性的作用。
然而目前市场上常用的双相血培养瓶的质量却参差不齐，不容乐观，质量低劣的培养基不仅容易漏检，降低细菌的阳性检出率，而且有可能因为呈“假阴性”而造成误诊，这样不仅会延长患者的治疗时间、增加医疗费用，有时甚至会失去宝贵的治愈机会。
发明内容本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种配方齐全、诊断准确高效的改良双相血培养瓶。
本发明是通过如下技术方案实现的一种改良双相血培养瓶，包括由脑心浸液琼脂构成的固相和由含抗凝剂的新鲜肉汤组成的液相，固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成(1)固相中，脑心浸液肉汤35(Γ400份、琼脂粉20(Γ300份、酵母浸粉45 55份、核酸 15 25份、谷氨酸钠5 15份，其余为去离子水，共计10000份；(2)液相中，脑心浸液肉汤35CT400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香脑磺酸钠2 3份、辅酶10. 05 O. 15份、维生素B6O. 5 I. 5份、维生素B1O. 001 O. 003份、维生素B12O. 0005 O. 0007 份、L-谷氨酰胺f 3份、L-胱氨酸O. 2^0. 3份、L-半胱氨酸盐酸盐5飞份、腺嘌呤硫酸盐O. f O. 3份、鸟嘌呤盐酸盐O. 005、. 007份、硝酸铁O. 003、. 005份、对氨基苯甲酸 O. ooro. 005份，其余为去离子水，共计10000份。其优选的固相和液相中，各原料的重量配比为(1)固相中，脑心浸液肉汤385份、琼脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸钠 10份，其余为去离子水，共计10000份；(2)液相中，脑心浸液肉汤385份、酵母浸粉50份、聚茴香脑磺酸钠2.5份、辅酶10. 10 份、维生素B6L O份、维生素B1O. 002份、维生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸 O. 22份、L-半胱氨酸盐酸盐5. 18份、腺嘌呤硫酸盐O. 2份、鸟嘌呤盐酸盐O. 006份、硝酸铁O.004份、对氨基苯甲酸O. 0045份，其余为去离子水，共计10000份。
本发明所述原料均采用非高压灭菌技术进行除菌，有效减少营养成分的流失，并采用负压灌装工艺，预充了二氧化碳气体，使其不仅能促进血中常见细菌的快速繁殖，更能支持各种苛养菌的生长。
本发明的原料成分齐全，营养丰富。固相中除了有脑心浸液肉汤、酵母浸粉等营养成分和琼脂粉等凝固物质外，更是添加了核酸和谷氨酸钠作为细菌生长刺激剂，实验结果表明更能有效的加速细菌的生长；这样的一种配方组合，能够大大缩短阳性菌的发现时间， 特别是一些具有传染性的病原菌，缩短检出时间，更有利于医院及时确定作消毒隔离或转院处理，避免造成更严重的医院感染。
液相中除了加入了脑心浸液肉汤、酵母浸粉等基础营养物质以外，更是添加了各种必需营养素如L-谷氨酰胺、L-胱氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐等完整的氨基酸系列；维生素 B6、维生素B1、维生素B12等复合维生素；最适浓度的抗凝剂SPS，可有效中和溶菌酶、抑制吞噬细胞以及使某些氨基糖苷类抗生素失活，使细菌更好地生长；更是比常规血培养基多加了很多独特的生长因子辅酶I、腺嘌呤硫酸盐、鸟嘌呤盐酸盐等，更有利于苛养菌如链球菌、奈瑟氏菌、嗜血杆菌的生长检出。
本发明中合理的配方比例和完善的营养成分既能确保血液中常见细菌的快速繁殖，更有利于各种苛养菌的生长。最重要的是能大大提高阳性检出率和检出时间，培养结果准确及时，对于临床诊断和治疗具有极其重要的意义。
具体实施方式
实施例I:一种改良双相血培养瓶，包括由脑心浸液琼脂构成的固相和由含抗凝剂的新鲜肉汤组成的液相，其中，固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成(1)固相中，脑心浸液肉汤350g、琼脂粉200g、酵母浸粉45g、核酸15g、谷氨酸钠5g，其余为去尚子水，共计IOkg;(2)液相中，脑心浸液肉汤350g、酵母浸粉45g、聚茴香脑磺酸钠2g、辅酶10.05g、维生素B6O. 5g、维生素B1O. OOlg、维生素B12O. 0005g、L-谷氨酰胺lg、L-胱氨酸O. 2g、L-半胱氨酸盐酸盐5g、腺嘌呤硫酸盐O. lg、鸟嘌呤盐酸盐O. 005g、硝酸铁O. 003g、对氨基苯甲酸O.004g,其余为去离子水,共计10kg。
实施例2:一种改良双相血培养瓶，包括由脑心浸液琼脂构成的固相和由含抗凝剂的新鲜肉汤组成的液相，其中，固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成(1)固相中，脑心浸液肉汤400g、琼脂粉300g、酵母浸粉55g、核酸25g、谷氨酸钠15g， 其余为去离子水，共计IOkg ；(2)液相中，脑心浸液肉汤400g、酵母浸粉55g、聚茴香脑磺酸钠3g、辅酶10.15g、维生素B6L 5g、维生素B1O. 003g、维生素B12O. 0007g、L-谷氨酰胺3g、L-胱氨酸O. 3g、L-半胱氨酸盐酸盐6g、腺嘌呤硫酸盐O. 3g、鸟嘌呤盐酸盐O. 007g、硝酸铁O. 005g、对氨基苯甲酸O.005g,其余为去离子水,共计10kg。
实施例3:一种改良双相血培养瓶，包括由脑心浸液琼脂构成的固相和由含抗凝剂的新鲜肉汤组成的液相，其中，固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成(I)固相中，脑心浸液肉汤385g、琼脂粉230g、酵母浸粉50g、核酸20g、谷氨酸钠10g，其余为去离子水，共计IOkg ；(2)液相中，脑心浸液肉汤385g、酵母浸粉50g、聚茴香脑磺酸钠2. 5g、辅酶10. 10g、维生素B6L 0g、维生素B1O. 002g、维生素B12O. 0006g、L-谷氨酰胺2g、L-胱氨酸O. 22g、L-半胱氨酸盐酸盐5. 18g、腺嘌呤硫酸盐O. 2g、鸟嘌呤盐酸盐O. 006g、硝酸铁O. 004g、对氨基苯甲酸O. 0045g,其余为去离子水,共计10kg。
权利要求
1.一种改良双相血培养瓶，包括由脑心浸液琼脂构成的固相和由含抗凝剂的新鲜肉汤组成的液相，其特征为，固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成(1)固相中， 脑心浸液肉汤35(Γ400份、琼脂粉20(Γ300份、酵母浸粉45 55份、核酸15 25份、谷氨酸钠5 15份，其余为去离子水，共计10000份；(2)液相中，脑心浸液肉汤35(Γ400份、酵母浸粉45 55份、聚茴香脑磺酸钠2 3份、辅酶10. 05 O. 15份、维生素B6O. 5 I. 5份、维生素 B1O. 001 O. 003份、维生素B12O. 0005 O. 0007份、L-谷氨酰胺I 3份、L-胱氨酸O. 2 O. 3份、 L-半胱氨酸盐酸盐5飞份、腺嘌呤硫酸盐O. Γ0. 3份、鸟嘌呤盐酸盐O. 005^0. 007份、硝酸铁O. 003、. 005份、对氨基苯甲酸O. ΟΟΓΟ. 005份，其余为去离子水，共计10000份。
2.根据权利要求I所述的改良双相血培养瓶，其特征为，固相和液相分别由以下重量份数的原料配制而成(I)固相中，脑心浸液肉汤385份、琼脂粉230份、酵母浸粉50份、核酸20份、谷氨酸钠10份，其余为去离子水，共计10000份；(2)液相中，脑心浸液肉汤385 份、酵母浸粉50份、聚茴香脑磺酸钠2. 5份、辅酶10. 10份、维生素B6L O份、维生素B1O. 002 份、维生素B12O. 0006份、L-谷氨酰胺2份、L-胱氨酸O. 22份、L-半胱氨酸盐酸盐5. 18份、 腺嘌呤硫酸盐O. 2份、鸟嘌呤盐酸盐O. 006份、硝酸铁O. 004份、对氨基苯甲酸O. 0045份， 其余为去离子水，共计10000份。
3.根据权利要求I或2所述的一种改良双相血培养瓶，其特征在于所述原料均采用非高压灭菌技术进行除菌，并采用负压灌装工艺，预充了二氧化碳气体。
全文摘要
本发明属于体外诊断技术领域，特别公开了一种改良双相血培养瓶。该改良双相血培养瓶，固相由脑心浸液肉汤、琼脂粉、酵母浸粉、核酸、谷氨酸钠按一定重量配比，添加去离子水混合配制而成。液相由脑心浸液肉汤、酵母浸粉、聚茴香脑磺酸钠、辅酶I，维生素B6、维生素B1、维生素B12、L-谷氨酰胺、L-胱氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐、腺嘌呤硫酸盐、鸟嘌呤盐酸盐、硝酸铁、对氨基苯甲酸，按一定重量配比，添加去离子水混合配制而成。本发明中合理的配方比例和完善的营养成分既能确保血液中常见细菌的快速繁殖，更有利于各种苛养菌的生长。最重要的是能大大提高阳性检出率和检出时间，培养结果准确及时，对于临床诊断和治疗具有极其重要的意义。
文档编号C12M1/24GK102925345SQ20121047632
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月22日 优先权日2012年11月22日
发明者宁春华, 聂晖, 孟俊华, 崔兰兰, 霍雨艳, 李福川, 陈玉芹, 谭坤 申请人:济南百博生物技术有限责任公司