专利名称：一种改良淋球菌培养基的制作方法
技术领域：
本发明涉及体外诊断试剂领域，特别涉及一种改良淋球菌培养基。背景技术：
淋病(Gonorrhea)是淋菌性尿道炎的简称，是由淋病奈瑟菌(Neisseriagonorrhoeae)所引起的泌尿生殖系统化脓性炎症，主要通过性交传染，是目前世界范围内流行异常广泛的性传播疾病；该病可感染尿道、子宫颈内膜、也可侵犯直肠、眼结膜和咽部。女性可发生前庭大腺炎、子宫内膜炎、输卵管炎、盆腔炎；男性可发生附睾炎和前列腺炎；造成不孕或不育；并可经血行播散，引起菌血症、关节炎、心内膜炎、脑膜炎、肝炎等。在许多过国家和地区，淋病的患病率一直居于各种性传播疾病的首位，淋球菌培养法是WHO推荐的诊断淋病的“金标准”，培养质量的关键之一是淋球菌培养基的性能，由于淋球菌的营养要求较复杂，所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子。目前国外常用的培养基有Thayer-Martin(T-M)培养基、NewYork City(NYC)培养基和Martin-Lewis(ML)培养基等；国内常用的是血液琼脂或巧克力琼脂培养基，这些培养基的营养成分不能很好的满足淋球菌的生长需要，培养时间长，菌落较小，不容易检出。
发明内容
本发明为了弥补现有技术的不足，提供了一种配制简单、检出率高的改良淋球菌培养基。本发明是通过如下技术方案实现的
一种改良淋球菌培养基，组分包括基础培养基、抗凝羊血、抑菌剂、生长因子及添加剂，各组分由以下重量份数的原料配制而成
(1)基础培养基胰蛋白胨3.(Γ5. O份，蛋白际胨3. (Γ5. O份，多价蛋白胨8. (Γ12. O份，酵母浸膏I. 0 2· O份，玉米淀粉2. 0 3· O份，Nacl 14. 0 16· O份，Κ2ΗΡ043· 0 5· O份，ΚΗ2Ρ042· 0 3· O 份，琼脂 14. 0 16· O 份；
(2)抗凝羊血10 15份；
(3)抑菌剂万古霉素0.003、. 005份，制霉菌素0. 125、. 175份，多粘菌素0. 0075 0. 015份，三甲氧苄二氨嘧啶0. 005 0. 010份；
(4)生长因子促生长液3份；
(5)添加剂淋球菌增菌剂0.Γ0. 2份、胎牛血清8 16份；
其余为去离子水，共计10000份。其优选的各组分的重量份数配比为
(1)基础培养基胰蛋白胨4.O份，蛋白际胨4. O份，多价蛋白胨10. O份，酵母浸膏I. 5份，玉米淀粉 2. 5 份，Nacl 15. O 份，Κ2ΗΡ044· O 份，ΚΗ2Ρ042· 5 份，琼脂 15. O 份;
(2)抗凝羊血12.5份；
(3)抑菌剂万古霉素0.004份，制霉菌素0. 150份，多粘菌素0.01075份，三甲氧苄二氨嘧啶0. 0075份；
(4)生长因子促生长液3份；(5)添加剂淋球菌增菌剂O. 15份、胎牛血清12份；
其余为去离子水，共计10000份。所述促生长液包括胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黄嘌呤和尿嘧啶。鉴于淋球菌的营养要求较复杂，本发明所用的培养基中应含有动物蛋白及细菌生长所需的各种因子，并且需要在5% 二氧化碳环境中培养。与传统的淋球菌培养基相比较，本发明的培养基以淋球菌生长基础培养基为基础，还富含抗凝羊血，添加了万古霉素，制霉菌素，多粘菌素和三甲氧苄二氨嘧啶四种抗生素，特别添加了淋球菌生长必须的生长因子，如谷氨酸，半胱氨酸，胱氨酸等以及淋球菌增菌剂，使得本改良淋球菌培养基与其它类别的培养基相比营养丰富，选择性强，配制简单，培养用时短，准确性高。本发明在基础培养基的基础上添加了多种抗生素，更好的抑制杂菌生长，增强选择性，提高检出率，适合医疗单位分离培养淋病奈瑟氏菌时一次性使用，营养丰富，性能优良，既克服了目前市场上现有淋球菌培养基的缺点，又提高了检出率，培养时间短，提高了临床工作效率，操作简单，适合各级医院使用。具体实施例方式
实施例I:以以下重量份数的组分为原料制备培养基
(1)基础培养基胰蛋白胨3g，蛋白际胨3.Og,多价蛋白胨8. 0g，酵母浸膏I. 0g，玉米淀粉 2. 0g, Nacl 14. 0g, K2HP043. 0g, ΚΗ2Ρ042· Og,琼脂 14. Og ；
(2)抗凝羊血10ml；
(3)抑菌剂万古霉素0.003g，制霉菌素O. 125g，多粘菌素O. 0075g，三甲氧苄二氨嘧啶 O. 005g ；
(4)生长因子促生长液(胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黄嘌呤、尿嘌呤)3ml ；
(5)添加剂淋球菌增菌剂O.lg，胎牛血清8ml ；
其余为去离子水，共计IOkg ；
实施例2 :以以下重量份数的组分为原料制备培养基
(1)基础培养基胰蛋白胨4.Og,蛋白际胨4. Og,多价蛋白胨10. Og,酵母浸膏I. 5g,玉米淀粉 2. 5g，Nacl 15. 0g, Κ2ΗΡ044· 0g, KH2PO4 2. 5g，琼脂 15. Og ；
(2)抗凝羊血12.5ml ；
(3)抑菌剂万古霉素0.004g，制霉菌素O. 150g，多粘菌素0.01075g，三甲氧苄二氨嘧Pg O. 0075g ；
(4)生长因子促生长液(胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黄嘌呤、尿嘌呤)3ml ；
(5)添加剂淋球菌增菌剂O.15g，胎牛血清12ml ；
其余为去离子水，共计10kg。实施例3 :以以下重量份数的组分为原料制备培养基
(I)基础培养基胰蛋白胨5. 0g，蛋白际胨5. Og,多价蛋白胨12. 0g，酵母浸膏2. 0g，玉米淀粉 3. 0g, Nacl 16. 0g, K2HP045. 0g, KH2PO4 3. Og,琼脂 16. Og ；(2)抗凝羊血15ml；
(3)抑菌剂万古霉素0.005g，制霉菌素O. 175g，多粘菌素0.015g，三甲氧苄二氨嘧啶
O.OlOg ；
(4)生长因子促生长液(胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黄嘌呤、尿嘌呤)3ml ；
(5)添加剂淋球菌增菌剂O.2g，胎牛血清16ml ；
其余为去离子水，共计10kg。
权利要求
1.一种改良淋球菌培养基，组分包括基础培养基、抗凝羊血、抑菌剂、生长因子及添加剂，其特征为，各组分由以下重量份数的原料配制而成(1)基础培养基胰蛋白胨3. (Γ5.0份，蛋白际胨3. (Γ5. O份，多价蛋白胨8. (Γ12. O份，酵母浸膏I. (Γ2. O份，玉米淀粉2. 0 3. O份，Nacl 14. 0 16· O 份，Κ2ΗΡ043· 0 5· O 份，ΚΗ2Ρ042· 0 3· O 份，琼脂 14. 0 16· O 份；(2)抗凝羊血10 15份；(3)抑菌剂:万古霉素0. 003 O. 005份，制霉菌素O. 125 O. 175份，多粘菌素O. 0075 O. 015份，三甲氧苄二氨嘧啶O. 005 O. 010份；(4)生长因子促生长液3份；(5)添加剂淋球菌增菌剂O. Γ0. 2份、胎牛血清8 16份；其余为去离子水，共计10000份。
2.根据权利要求I所述的改良淋球菌培养基，其特征为，各组分由以下重量份数的原料配制而成(I)基础培养基胰蛋白胨4. O份，蛋白际胨4. O份，多价蛋白胨10. O份，酵母浸膏 I. 5 份，玉米淀粉 2. 5 份，Nacl 15. O 份，Κ2ΗΡ044· O 份，ΚΗ2Ρ042· 5 份，琼脂 15. O 份；(2)抗凝羊血12. 5份；(3)抑菌剂万古霉素0. 004份，制霉菌素O. 150份，多粘菌素O. 01075份，三甲氧苄二氨嘧啶O. 0075份；(4)生长因子促生长液3份；(5)添加剂淋球菌增菌剂O. 15份、胎牛血清12份；其余为去离子水，共计10000份。
3.根据权利要求I所述的改良淋球菌培养基，其特征在于所述促生长液包括胱氨酸、精氨酸、蛋氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、半胱氨酸、次黄嘌呤和尿嘧啶。
全文摘要
本发明涉及体外诊断试剂领域，特别公开了一种改良淋球菌培养基。该改良淋球菌培养基以淋球菌生长基础培养基为基础，还富含抗凝羊血，添加了万古霉素，制霉菌素，多粘菌素和三甲氧苄二氨嘧啶四种抗生素，特别添加了淋球菌生长必须的生长因子，如谷氨酸，半胱氨酸，胱氨酸等以及淋球菌增菌剂，使得本改良淋球菌培养基与其它类别的培养基相比具备下列特点营养丰富，选择性强，配制简单，培养用时短，准确性高。
文档编号C12Q1/04GK102925533SQ20121047610
公开日2013年2月13日 申请日期2012年11月22日 优先权日2012年11月22日
发明者宁春华, 聂晖, 孟俊华, 霍雨艳, 崔兰兰, 李福川, 陈玉芹, 谭坤 申请人:济南百博生物技术有限责任公司