一种牡丹籽总芪类化合物组合物及其提取方法和应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种牡丹籽总芪类化合物组合物及其提取方法和应用，将牡丹籽皮乙醇回流提取，过滤浓缩得浸膏，然后将浸膏溶解并与吸附剂混合，再将混合料依次用溶剂萃取，最后用丙酮和活性炭精制，浓缩至无溶剂得到总芪类化合物组合物。这6种化合物分别为牡丹醇A、牡丹醇、牡丹醇C、顺式葡根素、反式葡根素和买麻藤H。本发明的牡丹总芪类化合物组合物，经过药理学试验证明，具有较好的抗革兰氏阳性和阴性菌活性，可以作为抗菌的药物活性成分，可以单独或与适宜的赋形剂等结合，作为食品添加剂用于食品的防腐，或用于制备抗菌的药物。
【专利说明】一种牡丹籽总芪类化合物组合物及其提取方法和应用
【技术领域】
[0001]本发明主要涉及一种牡丹籽总芪类化合物组合物及其提取方法和应用。
【背景技术】
[0002]芪类化合物(stilbeniods)是指具有1，2_ 二苯乙烯骨架的单体及其聚合物的总称。低聚芪类属于酚酸类化合物，这类化合物具有广泛的生物活性，如抗细菌和抗真菌活性，抗炎活性，抗氧化活性，抗肿瘤活性，抗艾滋病活性及保肝活性等。【李小妹，李娜，黄开胜，林茂.白藜芦醇低聚体类似物的光谱特征、生源与生物活性，药学学报，2002，37(1):69-74 ;陈莉，陈坚波.芪类化合物的药理研究综述，广东药学，2005，15(3):84-86】
牡丹籽油含有多种不饱和脂肪酸，尤其是含有罕见的奇数脂肪酸，是一种具有重要开发价值的食用油脂来源。2011年3月22日，中华人民共和国卫生部批准自凤丹牡丹{Paeonia ostii T.Hong et J.X.Zhang)和紫斑牡丹{P册oriia rockii)的杆仁经过经压榨、脱色、脱臭等工艺制成的牡丹籽油作为新资源食品可以生产及食用【中华人民共和国卫生部公告，2011年第9号:卫生部关于批准元宝枫籽油和牡丹籽油作为新资源食品的公告】。这将为牡丹籽油的生产和使用起到非常大的促进作用。
[0003]由于牡丹籽油的高营养价值，我国油用牡丹籽的种植量在逐渐增多，油用牡丹籽的产量也逐年增加。目前，牡丹籽油的制备工艺是先将牡丹籽干燥脱壳。按照目前的产量，油用牡丹籽产量为3万吨，经过脱壳会产生大约3000-5000吨左右的牡丹籽皮，这些牡丹籽皮的开发利用将会是一个非常重要且任务艰巨的研究课题。
[0004]近年来，已有课题组对药用植物牡丹籽中芪类化合物进行了研究:文献【何春年.芍药属药用植物亲缘学研究，中国协和医科大学[D]，2010】报道了 9种芪类化合物的分离过程，其所得到的芪类化合物收率`非常低，从4公斤原料中所得到的单体芪类化合物最多100多毫克，难于产业化。另外，其所用的分离材料为牡丹种子，研究过程中还存在着有毒有机溶剂的应用问题。
[0005]本课题组前期研究表明，牡丹籽饼中含有较多的低聚芪类化合物，进一步活性测试表明这些芪类化合物具有较好的抗菌活性。因此，从牡丹籽饼中分离芪类化合物，并研究其抗菌活性具有非常重要的意义。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一种牡丹籽总芪类化合物组合物及其提取方法和应用，从牡丹籽中提取出来的芪类化合物抗菌效果好，应用范围广，天然成分，安全性高。
[0007]本发明实现上述目的采用的技术方案是:一种牡丹籽总芪类化合物组合物的提取方法，包括以下步骤:
I)取牡丹籽原料，除去杂质，并用清水清洗2-3遍，然后置于恒温干燥箱中，在60-80°C条件下干燥3_9h，烘干后加入脱壳机中去皮，然后将得到的牡丹籽皮干燥至含水量不超过10%，粉碎，置于提取器中，加入牡丹籽皮重量10-20倍的质量浓度为60-80%的乙醇，在40-60°C条件下回流提取8-10h，提取结束后进行过滤，将过滤得到的滤液蒸发浓缩得到浸膏状物，备用；
2)将步骤I)得到的浸膏状物用其重量3-5倍的有机溶剂溶解，除去不溶物，然后加入重量为浸膏状物3-6倍的吸附剂，所述吸附剂为质量比为1:1-3的硅胶和硅藻土的混合物，搅拌均匀后放置在通风处干燥4-12h，得到混合拌料，备用；
3)将步骤2)得到的混合拌料依次用溶剂石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯、甲醇进行萃取，收集甲醇萃取液，并在小于60°C条件下浓缩得到总芪类化合物粗品，备用；
4)将步骤3)得到的总芪类化合物粗品在40-50°C条件下用其重量2-4倍量的丙酮溶解，溶解完全后加入重量为总芪类化合物粗品4-7倍的活性炭，搅拌10-30min后过滤，搅拌速度为60-100r/min，收集滤液并在小于60°C条件下浓缩，浓缩至无溶剂，即得到总芪类化合物组合物。
[0008]所述的牡丹籽原料为凤丹牡丹籽或紫斑牡丹籽的一种或两种。
[0009]所述的步骤I)中牡丹籽皮回流提取和过滤过程至少重复三次，合并滤液。
[0010]所述的步骤2)中的有机溶剂为丙酮、乙醇或乙酸乙酯的一种或几种。
[0011]所述的步骤3)中的萃取剂石油醚-乙酸乙酯的体积比为1:1。
所述的步骤3)中的每次萃取所用溶剂为混合拌料重量的3-5倍。
[0012]所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物，包括以下重量百分比的芪类化合物: 化合物1:牡丹醇A，含量为10-15% ；
化合物2:牡丹醇B，含量为22-28% ；
化合物3:牡丹醇C，含量为10-20% ；
化合物4:顺式葡根素，含量为0.5-1% ；
化合物5:反式葡根素，含量为2-5% ；
化合物6:买麻藤H，含量为23-33% ；
化合物1-6的结构式分别为:
【权利要求】
1.一种牡丹籽总芪类化合物组合物的提取方法，其特征在于:包括以下步骤: 1)取牡丹籽原料，除去杂质，并用清水清洗2-3遍，然后置于恒温干燥箱中，在60-80°C条件下干燥3-9h，烘干后加入脱壳机中去皮，然后将得到的牡丹籽皮干燥至含水量不超过10%，粉碎，置于提取器中，加入牡丹籽皮重量10-20倍的质量浓度为60-80%的乙醇，在40-60°C条件下回流提取8-10h，提取结束后进行过滤，将过滤得到的滤液蒸发浓缩得到浸膏状物，备用； 2)将步骤I)得到的浸膏状物用其重量3-5倍的有机溶剂溶解，除去不溶物，然后加入重量为浸膏状物3-6倍的吸附剂，所述吸附剂为质量比为1:1-3的硅胶和硅藻土的混合物，搅拌均匀后放置在通风处干燥4-12h，得到混合拌料，备用； 3)将步骤2)得到的混合拌料依次用溶剂石油醚-乙酸乙酯、乙酸乙酯、甲醇进行萃取，收集甲醇萃取液，并在小于60°C条件下浓缩得到总芪类化合物粗品，备用； 4)将步骤3)得到的总芪类化合物粗品在40-50°C条件下用其重量2-4倍量的丙酮溶解，溶解完全后加入重量为总芪类化合物粗品4-7倍的活性炭，搅拌10-30min后过滤，搅拌速度为60-100r/min，收集滤液并在小于60°C条件下浓缩，浓缩至无溶剂，即得到总芪类化合物组合物。
2.如权利要求1所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物的提取方法，其特征在于:所述的牡丹籽原料为凤丹牡丹籽或紫斑牡丹籽的一种或两种。
3.如权利要求1所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物的提取方法，其特征在于:所述的步骤I)中牡丹籽皮回流提取和过滤过程至少重复三次，合并滤液。
4.如权利要求1所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物的提取方法，其特征在于:所述的步骤2)中的有机溶剂为丙酮、乙醇或乙酸乙酯的一种或几种。
5.如权利要求1所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物的提取方法，其特征在于:所述的步骤3)中的萃取剂石油醚-乙酸乙酯的体积比为1:1。
6.如权利要求1所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物的提取方法，其特征在于:所述的步骤3)中的每次萃取所用溶剂为混合拌料重量的3-5倍。
7.如权利要求1所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物，其特征在于:包括以下重量百分比的芪类化合物: 化合物1:牡丹醇A，含量为10-15% ； 化合物2:牡丹醇B，含量为22-28% ； 化合物3:牡丹醇C，含量为10-20% ； 化合物4:顺式葡根素，含量为0.5-1% ； 化合物5:反式葡根素，含量为2-5% ； 化合物6:买麻藤H，含量为23-33% ； 化合物1-6的结构式分别为:
8.如权利要求7所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物在制备抗菌药物中的应用。
9.如权利要求7所述的一种牡丹籽总芪类化合物组合物在食品抗菌剂中的应用。
【文档编号】A23L3/3544GK103494797SQ201310434769
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年9月23日 优先权日:2013年9月23日
【发明者】刘普, 邓瑞雪, 付改玲, 杨丹蕾, 刘欣, 高嘉屿, 尹卫平, 柴元武 申请人:河南科技大学