专利名称：一种风车子素的制备方法
技术领域：
本发明属于中药提取技术领域，涉及ー种风车子素的制备方法。
背景技术：
风车子素是从柳叶风车子CbffiArei應caff rum (Eckl. Zeyh,) Kuntze的枝叶中分离得到的一种芪类化合物。风车子素为针晶(丙酮-己烷)，mpl30 131 °C，分子式C18H22O6,分子量为334. 37。药理研究表明，风车子素具有细胞毒活性，对P-388细胞的ED50为O. 011 μ g/ml，对L1210细胞也有活性。风车子素像秋水仙碱ー样，具有抗有丝分裂作用，体外抑制微管聚合。 目前对风车子素的研究较少，因此提供一种风车子素的提取制备方法，为柳叶风车子资源开发利用及药理研究提供了丰富的物质基础。
发明内容
本发明的目的是提供ー种エ序简单、生产周期短的制备风车子素的方法。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
1)取柳叶风车子的枝叶粉碎，用65-80%こ醇微波提取1-2次，合并提取液加硅藻土，过滤浓缩；
2)浓缩液用こ酸こ酯萃取多次，合并萃取液；
3)将上述萃取液在多功能膜分离设备中依次进行微滤、超滤和纳滤；
4)截留液用氯仿溶解与硅胶拌样，挥干溶剂，装柱，石油醚-氯仿溶液梯度洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，65-75°C下减压浓缩，放置结晶，过滤，得到粗品；
5)将粗品用丙酮-己烷重结晶2-4次，滤出結晶，60-75°C下真空干燥，即得高含量风车子素。步骤I)中所述微波功率700-2000W，硅藻土用量为提取液总量的2_4%。步骤3)中所述微滤膜孔径为O. 2-0. 45 μ m,超滤膜截留分子量为1000-3000KD，纳滤膜截留分子量为200-300KD。步骤4)中所述石油醚-氯仿溶液体积比为5:6-17。步骤5)中所述丙酮-己烷体积比为I. 5-2:1。本发明的有益效果
A.整套方法对环境及设备要求不高，提取时间短，纯度高；
B.本分离纯化过程中采用膜分离技术，提高了产品纯度，并使大柱层析前的样品得以浄化，减轻对硅胶柱损害，延长了其使用寿命；纳滤技术使柱层析前样品可直接上样，简化了ェ序；
C.采用结晶和重结晶进行纯化，纯化效率高。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进ー步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
取柳叶风车子的枝叶粉碎，称取IOkg加6倍量的70%こ醇微波提取I次，每次2h，微波功率2000W，合并提取液，加2%的硅藻土搅拌脱色，过滤，减压浓縮，所得浓缩液用乙酸こ酯萃取4次，萃取液在多功能膜分离设备中依次进行微滤、超滤及纳滤，操作压カ为2bar，其中微滤膜材为聚偏氟こ烯膜，孔径为O. 2 μ m，超滤膜材为聚丙烯腈膜，截留分子量为3000KD，纳滤膜为聚醚砜膜，截留分子量为200KD，截留液用氯仿溶解与硅胶拌样，挥干溶剂，装柱，石油醚-氯仿溶液5:6、5:12、5:17梯度洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，75で下减压浓缩，放置结晶，过滤，得到风车子素粗品，用丙酮-己烷2:1重结晶2次，滤出結晶，75°C下真空干燥，即得风车子素产品，经HPLC检测，其纯度为96. 4%。
实施例2:
取柳叶风车子的枝叶粉碎，称取IOkg加4倍量的65%こ醇微波提取2次，每次I. 5h，微波功率700W，合并提取液，加4%的硅藻土搅拌脱色，过滤，减压浓縮，所得浓缩液用こ酸こ酯萃取3次，萃取液在多功能膜分离设备中依次进行微滤、超滤及纳滤，操作压カ为2bar，其中微滤膜材为聚偏氟こ烯膜，孔径为O. 45 μ m，超滤膜材为聚丙烯腈膜，截留分子量为2000KD,纳滤膜为聚醚砜膜，截留分子量为200KD，截留液用氯仿溶解与硅胶拌样，挥干溶齐U，装柱，石油醚-氯仿溶液5:7、5:13、5:17梯度洗脱，薄层检測，收集高浓度流分，70°C下减压浓缩，放置结晶，过滤，得到风车子素粗品，用丙酮-己烷2:1重结晶4次，滤出結晶，65°C下真空干燥，即得风车子素产品，经HPLC检测，其纯度为95. 5%。实施例3
取柳叶风车子的枝叶粉碎，称取IOkg加5倍量的80%こ醇微波提取I次，每次lh，微波功率1000W，合并提取液，加3%的硅藻土搅拌脱色，过滤，减压浓缩，所得浓缩液用こ酸こ酯萃取2次，萃取液在多功能膜分离设备中依次进行微滤、超滤及纳滤，操作压カ为2bar，其中微滤膜材为聚偏氟こ烯膜，孔径为0.2 μ m，超滤膜材为聚丙烯腈膜，截留分子量为2000KD,纳滤膜为聚醚砜膜，截留分子量为300KD，截留液用氯仿溶解与硅胶拌样，挥干溶齐U，装柱，石油醚-氯仿溶液5:8、5:14、5:17梯度洗脱，薄层检測，收集高浓度流分，65°C下减压浓缩，放置结晶，过滤，得到风车子素粗品，用丙酮-己烷I. 5:1重结晶3次，滤出結晶，60°C下真空干燥，即得风车子素产品，经HPLC检测，其纯度为96. 2%。实施例4:
取柳叶风车子的枝叶粉碎，称取IOkg加8倍量的80%こ醇微波提取2次，每次O. 5h，微波功率1500W，合并提取液，加3. 5%的硅藻土搅拌脱色，过滤，减压浓縮，所得浓缩液用こ酸こ酯萃取3次，萃取液在多功能膜分离设备中依次进行微滤、超滤及纳滤，操作压カ为I. 5bar，其中微滤膜材为聚偏氟こ烯膜，孔径为O. 2 μ m，超滤膜材为聚丙烯腈膜，截留分子量为1000KD，纳滤膜为聚醚砜膜，截留分子量为200KD，截留液用氯仿溶解与硅胶拌样，挥干溶剂，装柱，石油醚-氯仿溶液5:6、5:13、5:16梯度洗脱，薄层检測，收集高浓度流分，70°C下减压浓缩，放置结晶，过滤，得到风车子素粗品，用丙酮-己烷I. 5:1重结晶2次，滤出結晶，70°C下真空干燥，即得风车子素产品，经HPLC检测，其纯度为95. 9%。
权利要求
1.一种风车子素的制备方法，其特征在于包括以下步骤 1)取柳叶风车子的枝叶粉碎，用65-80%乙醇微波提取1-2次，合并提取液加硅藻土，过滤浓缩； 2)浓缩液用乙酸乙酯萃取多次，合并萃取液； 3)将上述萃取液在多功能膜分离设备中依次进行微滤、超滤和纳滤； 4)截留液用氯仿溶解与硅胶拌样，挥干溶剂，装柱，石油醚-氯仿溶液梯度洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，65-75°C下减压浓缩，放置结晶，过滤，得到粗品； 5)将粗品用丙酮-己烷重结晶2-4次，滤出结晶，60-75°C下真空干燥，即得高含量风车子素。
2.如权利要求I所述的一种风车子素的制备方法，其特征在于步骤I)中所述微波功率 700-2000W，硅藻土用量为提取液总量的2-4%。
3.如权利要求I所述的一种风车子素的制备方法，其特征在于步骤3)中所述微滤膜孔径为O. 2-0. 45 μ m，超滤膜截留分子量为1000-3000KD，纳滤膜截留分子量为200-300KD。
4.如权利要求I所述的一种风车子素的制备方法，其特征在于步骤4)中所述石油醚-氯仿溶液体积比为5:6-17。
5.如权利要求I所述的一种风车子素的制备方法，其特征在于步骤5)中所述丙酮-己烷体积比为I. 5-2:1。
全文摘要
本发明属于天然植物提取技术领域，涉及一种风车子素的制备方法，方法是取柳叶风车子的枝叶粉碎，用65-80%乙醇微波提取1-2次，合并提取液加硅藻土，过滤浓缩，浓缩液用乙酸乙酯萃取多次，萃取液在多功能膜分离设备中依次进行微滤、超滤和纳滤，截留液用氯仿溶解与硅胶拌样，挥干溶剂，装柱，石油醚-氯仿溶液梯度洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，减压浓缩，放置结晶，滤出结晶用丙酮-己烷重结晶，结晶干燥即得高含量产品。本发明方法制备风车子素工序简单、生产周期短、产品收率高。
文档编号C07C41/36GK102838461SQ20121034583
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月18日 优先权日2012年9月18日
发明者刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司