一种狗蚁草提取物的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了狗蚁草提取物在制备保护肝损伤功能的药物、食品和保健品中的应用，具体为可以制备保护由于急慢性肝损伤功能的药物、食品和保健品，狗蚁草优选提取物为乙酸乙酯提取物，可以通过添加药学和食品相关载体、辅料，制成多种剂型，通过对小鼠试验结果显示，狗蚁草提取物可以明显降低CCl4和D-GalN和所致急性肝损小鼠伤血清ALT、AST含量，并可明显改善CCl4和D-GalN引起的肝组织病理改变，从而起到保护作用。
【专利说明】一种狗蚁草提取物的应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于药学领域，具体涉及一种狗蚁草提取物的应用，具体涉及狗蚁草提取 物在制备保护肝损伤功能的药物、食品和保健品中的应用。
【背景技术】
[0002] 狗蚁草为豆科植物链荚豆（Alysicarpus vaginalis(L. )DC.)的全草，另Ij称山上 豆、山地豆、假花生、大叶青、廖蓝豆、单叶草等。原产于南亚、东非。广布于东半球热带地 区。喜热带潮湿干旱气候。稍耐旱、耐酸，不耐渍。在砂壤土上生长良好，但易感染线虫病， 故通常种于粘土上。狗蚁草具有诸多药用功效，全草：甘、苦，平；活血通络，清热化湿，驳骨 消肿；用于跌打损伤，半身不遂，股骨酸痛，肝炎；蛇咬伤，骨折，外伤出血，疮疡溃烂久不收 口。《中华本草》傣药卷中记载按如下附方可以清火解毒，利胆退黄，主治"拢牛"，即小便热 涩疼痛等症：狗蚁草30g，野芦谷根20g。煎汤内服(景洪市名傣医康郎仑验方）；治"拢案答 勒"：狗蚁草30g，射干20g。煎汤内服(景洪市傣医波的应验方）。
[0003] 肝脏作为人体腹腔内最大的实质性器官，担负着重要的生理功能。肝细胞对缺氧 的耐受力较差，故有肝动脉和门静脉提供丰富的血液供应，并有大小胆管与血管伴行输送 胆汁。它位于右上腹的深部，有下胸壁和膈肌的保护。在人体受到外界环境刺激或影响时容 易造成肝损伤：1、病毒感染：由多种肝炎病毒引起，具有传染性强，传播途径复杂，流行面 广泛，发病率高等特点。2、药物或化学毒物：许多药物和化学毒物都可引起肝脏损伤，发生 药物性肝炎或中毒性肝炎。3、酗酒：酒精对肝脏的损害是很严重的，损害的后果包括酒精性 肝炎、酒精性脂肪肝、酒精性肝硬化，主要是由于酒精（乙醇）及其代谢产物乙醛的毒性对 肝细胞直接损害造成的。4、其他原因：原发和继发的肝脏肿瘤、心功能不全导致肝脏淤血、 某些先天性肝脏疾病、静脉高价营养等，都可以造成不同程度的肝损害，这些肝损害的早期 表现往往是ALT(转氨酶）或胆红素的升高，不祛除病因，肝脏的损害会进一步加重。5、很 多全身性传染病都可侵犯肝脏，如EB病毒、细菌性传染病中的伤寒等，都可以引起血清转 氨酶的升高或其他肝功能异常。一旦遭受暴力容易损伤，发生腹腔内出血或胆汁泄漏，引起 出血性休克或胆汁性腹膜炎，后果严重，必须及时诊断和正确处理。目前应用于肝损伤病人 的常用药品有联苯双酯、硫普罗宁、绿汀诺、辰吉格、海诺欣及诺百力等。
[0004] 发明人通过过年研究，通过科学的实验发现，狗蚁草提取物在治疗急性肝损伤方 面有较为突出的效果，同时还发现了其治疗的作用机理。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种狗蚁草提取物在制备保护肝损伤功能的药物、食品和保 健品中的应用。
[0006] 本发明的目的是通过如下技术方案实现的： 狗蚁草提取物在制备保护肝损伤功能的药物、食品和保健品中的应用。
[0007] 所述肝损伤为急性肝损伤。
[0008] 所述狗蚁草提取物提取方法为：水提、醇提、酯提、酮提、层析、真空提取、超临界流 体萃取法、超声提取法、酶法提取、微波提取法。
[0009] 所述醇提溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇；所述酯提溶剂为乙酸乙酯、醋酸丁酯、醋酸乙 酯；酮提溶剂为丙酮、环己酮。
[0010] 所述狗蚁草提取物优选为乙酸乙酯提取物：提取具体步骤为： (1)将狗蚁草洗净、在18-25°c室温下通风干燥、剪碎并称重，置于开口反应器中。
[0011] (2)在开口反应器中加入3-5倍95%乙醇（v/v)浸泡12-24h，再加入95%乙醇（v/ v)至药材10-15倍量，进行回流提取。
[0012] (3)保持微沸2h，过滤，得第一次提取液；药材冷却后，第二次加10-15倍量95%乙 醇（v/v)，保持微沸1. 5小时，得第二次滤液；药材冷却后，第三次加入10-15倍量95%乙醇 (v/v)，保持微沸1小时，得第三次滤液，合并3次提取液，经旋转蒸发仪浓缩，得到相对密度 为1. 25-1. 28的乙醇浸膏。
[0013] (4)将乙醇浸膏置于水浴锅上，加热至80_85°C，挥发，真空干燥，直至浸膏重量不 再减轻，得到相对密度为1. 30-1. 32的浸膏，称重。
[0014] (5)加入5-10倍纯水将乙醇浸膏全部溶解，再加入2-3倍量石油醚进行萃取，轻轻 震摇，静置，直至出现清晰的分层界面，吸取上层石油醚溶液，重复石油醚萃取过程2-5次， 直至石油醚层颜色为淡黄色且不再变淡。
[0015] (6)按步骤（5)方法，用乙酸乙酯对浸膏进行萃取，将乙酸乙酯萃取液用旋转蒸 发仪进行浓缩，得到相对密度为1.22-1. 24的狗蚁草乙酸乙酯浸膏，将乙酸乙酯浸膏置 于水浴锅上，加热至80-85 °C，挥发溶剂并转移入真空干燥箱继续干燥，得到相对密度为 1. 28-1. 30的狗蚁草乙酸乙酯提取物。
[0016] 保护肝损伤功能的药物，是由以狗蚁草提取物为主要有效成分和药学上可接受的 辅料组成，狗蚁草提取物在药物配方中的重量百分比为0. 1-99%。同时加工为多种剂型，可 以为丸剂、颗粒剂、液剂、注射剂、胶囊剂、片剂。所述辅料可以为：甘露醇、山梨醇、山梨酸或 钾盐、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素 A、 维生素 C、维生素 E、维生素 D、氮酮、EDTA二钠、EDTA钙钠，乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、 果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘露糖醇、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚 乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、乙醇、蜂蜡、羊毛脂、液体石蜡、十六醇、没食子酸酯类、琼脂、 三乙醇胺、碱性氨基酸、聚乙二醇、环糊精、β -环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸 I丐、硬脂酸镁，大豆油、橄榄油、茶油、棕榈油、当归油、沙棘油、莪术油、川弯油、薏米仁油、红 花油、花椒油、大蒜油、蛋黄卵磷脂、大豆磷脂、氢化蛋黄卵磷脂、氢化大豆磷脂、人工合成磷 月旨、油酸或油酸盐、维生素 E ;亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、维生素 C等。
[0017] 保护肝损伤功能的食品和保健品，是由以狗蚁草提取物为主要有效成分和食品添 加剂、食品原料组成，狗蚁草提取物在配方中的重量百分比为1-50%。可以加工为液剂、片 齐U、颗粒剂、胶囊剂或作为食品辅料加工为粗粮、糕点、饮料。加工为食品和保健品是因为发 明人发现：狗蚁草提取物不仅作为药物可以直接作用于肝损伤部位起到保护效果，还可以 作为食品或保健品被病人服用后进行调理身体，对于肝损伤病人的身体恢复也能起到良好 效果。
[0018] 本发明的有益效果：本发明的狗蚁草提取物对急慢性肝损伤有良好的治疗效果， 同时狗蚁草提取物在作为食品和保健品应用方面，对于肝损伤病人也有较好的恢复效果， 这说明本发明的狗蚁草提取物具有较好的保护肝损伤作用，可用于制备保护肝损伤功能的 药物、食品和保健品，为狗蚁草提取物的应用开发了一种新用途。
【具体实施方式】
[0019] 实施例一狗蚁草乙酸乙酯提取物的制备 具体步骤为： (1) 将狗蚁草洗净、在18-25°C室温下通风干燥、剪碎并称重，置于开口反应器中； (2) 在开口反应器中加入3-5倍95%乙醇（v/v)浸泡12-24h，再加入95%乙醇（v/v)至 药材10-15倍量，进行回流提取； (3) 保持微沸2h，过滤，得第一次提取液；药材冷却后，第二次加10-15倍量95%乙醇 (v/v)，保持微沸1. 5小时，得第二次滤液；药材冷却后，第三次加入10-15倍量95%乙醇（v/ v)，保持微沸1小时，得第三次滤液，合并3次提取液，经旋转蒸发仪浓缩，得到相对密度为 1. 25-1. 28的乙醇浸膏； (4) 将乙醇浸膏置于水浴锅上，加热至80-85°C，挥发，真空干燥，直至浸膏重量不再减 轻，得到相对密度为1. 30-1. 32的浸膏，称重； (5) 加入5-10倍纯水将乙醇浸膏全部溶解，再加入2-3倍量石油醚进行萃取，轻轻震 摇，静置，直至出现清晰的分层界面，吸取上层石油醚溶液，重复石油醚萃取过程2-5次，直 至石油醚层颜色为淡黄色且不再变淡； (6) 按步骤（5)方法，用乙酸乙酯对浸膏进行萃取，将乙酸乙酯萃取液用旋转蒸发仪进 行浓缩，得到相对密度为1. 22-1. 24的狗蚁草乙酸乙酯浸膏，将乙酸乙酯浸膏置于水浴锅 上，加热至80-85°C，挥发溶剂并转移入真空干燥箱继续干燥，得到相对密度为1. 28-1. 30 的狗蚁草乙酸乙酯提取物。
[0020] 实施例二狗蚁草提取物加工为食品和保健品 1将狗蚁草乙醇提取物真空干燥，加入淀粉、葡萄糖、膳食纤维后，充分搅拌，粗粉碎至 60-80目，真空包装，按IOg/袋分装，即得其速溶粉剂。
[0021] 2.将狗蚁草乙醇提取浸膏，再次蒸发乙醇至含量低于0. 1%，加入膳食纤维、麦乳 精、木糖醇、面粉，在粉碎机中粉碎至60-80目，加入5-10%纯净水，挤压造粒，干燥，过筛，包 装，即得其颗粒剂。
[0022] 3.将狗蚁草乙酸乙酯提取物浸膏，加纯水搅拌溶解，加入防腐剂、蜂蜜、红豆汁，经 灭菌、消毒后灌装，得其液剂。
[0023] 4.将狗蚁草全株超临界流体萃取法制得的提取物，烘干后，作为辅料加入粗粮制 品中，添加量为20%，最终制成各易被人体消化吸收的粗粮制品。
[0024] 5.将狗蚁草全株真空提取制得的提取物，烘干后，作为辅料加入小苏打饼干原料 中，精加工制成狗蚁草苏打饼干，其提取物添加量为5%。
[0025] 6.将狗蚁草乙酸乙酯提取物再次挥发溶剂，至溶剂含量不得高于0. 01%，加入蜂 蜜、维生素 E、维生素 B1、叶酸、葡萄糖酸亚铁、葡萄糖酸锌、大豆油和蜂蜡，制成保健品胶 囊，每粒含狗蚁草提取物50mg，每粒重500mg。
[0026] 7.将狗蚁草超声提取物烘干后，加入亚硒酸钠、蜂蜡、甘油、明胶、氧化铁棕，制成 保健品胶囊，每粒含狗蚁草提取物80mg，每粒胶囊重500mg。
[0027] 效果实施例 1狗蚁草乙酸乙酯提取物对CCl4和D-DalN所致小鼠急性肝损伤的保护作用 1. 1实验材料 1. 1. 1实验动物 昆明种小鼠60只，雌雄各半，体重20±2g，由广西中医药大学实验动物中心提供，合格 证号，桂医动字第11004号。
[0028] I. 1. 2实验试剂 联苯双酯滴丸：250丸/瓶浙江万邦药业股份有限公司，批号：A02140101 四氯化碳（CCL4):(分析纯500ml/瓶）广东西陇化工厂产品，批号：20111130 ; D-半乳糖胺盐酸盐（D-GalN · HCL) :Sigma Batch No:080612 谷丙转氨酶（ALT)测试盒，南京建成试剂有限公司，批号：20140410 谷草转氨酶（AST)测试盒，南京建成试剂有限公司，批号：20140303 I. 1. 3实验仪器
【权利要求】
1. 狗蚁草提取物在制备保护急性肝损伤功能的药物、食品和保健品中的应用。
2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述肝损伤为急性肝损伤。
3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述狗蚁草提取物提取方法为：水提、醇 提、酯提、酮提、层析、真空提取、超临界流体萃取法、超声提取法、酶法提取、微波提取法。
4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述醇提溶剂为甲醇、乙醇、正丁醇；所述 酯提溶剂为乙酸乙酯、醋酸丁酯、醋酸乙酯；酮提溶剂为丙酮、环己酮。
5. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述狗蚁草提取物为乙酸乙酯提取物：提 取具体步骤为：先将狗蚁草干燥粉碎后，用95%乙醇浸泡后，进行回流提取，保持微沸2h，过 滤，得第一次提取液，药材冷却后，再加12倍量95%乙醇，保持微沸1. 5小时，得第二次滤 液； 药材稍稍冷却，加入12倍量95%乙醇，保持微沸1小时，得第三次滤液，合并3次提取 液，旋转蒸发仪浓缩，先制得95%乙醇浸膏；干燥后用水溶解，然后依次用石油醚、氯仿、乙 酸乙酯进行萃取，经浓缩、挥发溶剂和真空干燥后，即得。
6. -种保护肝损伤功能的药物，其特征在于：是由以狗蚁草提取物为主要有效成分和 药学上可接受的辅料组成，狗蚁草提取物在药物配方中的重量百分比为〇. 1-99%。
7. 根据权利要求6所述的保护肝损伤功能的药物，其特征在于：可以加工为丸剂、颗粒 齐U、液剂、注射剂、胶囊剂、片剂。
8. -种保护肝损伤功能的食品和保健品，其特征在于：是由以狗蚁草提取物为主要有 效成分和食品添加剂、食品原料组成，狗蚁草提取物在配方中的重量百分比为1-50%。
9. 根据权利要求8所述的保护肝损伤功能的食品和保健品，其特征在于：可以加工为 液剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂或作为食品辅料加工为粗粮、糕点、饮料。
【文档编号】A23L2/52GK104367612SQ201410667200
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年11月20日 优先权日:2014年11月20日
【发明者】郑作文, 唐云丽, 黄丽贞 申请人:广西中医药大学