本发明涉及一种以鱼骨为原料，联合亚临界水技术、动态高压微射流处理、蛋白酶酶解、微波处理和喷雾干燥制备肽钙的方法,属于肽钙产品的制备领域。
背景技术：
鱼类是人类摄入的蛋白质主要来源之一，具有价格低廉、绿色安全等特点。随着人民生活水平的提高和生活节奏的加快，方便快捷、绿色营养的食品受到越来越多消费者的喜爱，其中，鱼糜制品正是近些年发展起来的新型鱼制品。鱼糜加工的原料是鱼肉，采肉后剩下的鱼骨则丢弃或简单粉碎后作为饲料，造成资源浪费和环境污染。
鱼骨中含有丰富的蛋白质和钙质，是生产肽钙的良好原料。若将鱼骨加工成肽钙产品，不仅能减少鱼骨的资源浪费和环境污染，而且能提升鱼糜制品加工产业的竞争力。但存在的关键技术问题是鱼骨的软化、多肽的制备和肽钙的螯合。
针对上述三大技术难点，本发明人进行了长期的实验和攻关，创造出本发明的技术方案。
技术实现要素：
本发明的目的是针对现有技术不足提供一种利用鱼骨制备肽钙的方法。
本发明所采取的技术方案是：以鱼骨为原料，在酸性条件下采用亚临界水处理鱼骨，运用动态高压微射流超微细化鱼骨，借助胃蛋白酶和复合风味蛋白酶酶解鱼骨，再利用微波技术处理鱼骨酶解液，最后经过喷雾干燥制成肽钙产品。
本发明所述方法步骤如下：
1、亚临界水处理鱼骨
（1）鱼骨与盐酸溶液混合：将鱼骨与pH值为1.0-4.0的盐酸溶液按照固液比1:1-1:20进行混合；
（2）亚临界水处理：对鱼骨和盐酸混合液进行亚临界水处理，亚临界水温度设置为100-140 ℃，处理时间为0.5-4.0 h。
2、动态高压微射流超微细化鱼骨
采用胶体磨对鱼骨混合液处理1-4次，再采用10-40 MPa的均质机处理1-4次，进而采用动态高压微射流进行超微细化处理，微射流压力设置为80-200 MPa，处理次数为2-6次；
所述动态高压微射流装置型号是M-100EH-30,卖家是美国MFIC公司。
3、蛋白酶酶解鱼骨
（1）胃蛋白酶酶解鱼骨：采用胃蛋白酶对动态高压微射流处理后的鱼骨进行酶解，酶与底物比为1:20-1:200，酶解温度为30-40 ℃，酶解时间为1-6 h；
（2）复合风味蛋白酶酶解：胃蛋白酶酶解后，用0.5-2.0M的NaOH溶液将酶解物pH值调至5.5-7.5，按照酶与底物比1:20-1:200加入复合风味蛋白酶，酶解温度为40-65 ℃，酶解时间为2-15 h；
（3）离心：对复合风味蛋白酶酶解后的鱼骨酶解物进行离心处理，离心机转速为3000-10000 r/min，离心时间为5-30 min，去除离心后最上层的油脂和最下层的沉淀物，即得到鱼骨酶解液。
4、微波处理鱼骨酶解液
用0.5-2.0M的NaOH溶液将鱼骨酶解液pH值调至8.0-10.0之后，采用微波对鱼骨酶解液进行加热处理，控制溶液温度在30-60 ℃，微波时间为20-120 min。微波处理结束后即得到肽钙溶液。
5. 喷雾干燥
利用喷雾干燥技术去除肽钙溶液中的水分，控制进风温度为160-200 ℃，出风温度为75-95 ℃，即得到鱼骨肽钙粉末。
本发明的有益效果：
1、亚临界水技术对鱼骨和盐酸混合物进行处理，能有效缩短鱼骨软化的速度，促进钙离子的溶出；
2、高压微射流处理能大大降低鱼骨的颗粒，提高后续的鱼骨的酶解效率；
3、运用胃蛋白酶和复合风味蛋白酶对超微细化后的鱼骨进行酶解，能促进蛋白质向多肽的转变，形成肽和钙的混合液；
4、微波加热能促进多肽和钙的螯合效率，提高产品品质；
5、本发明能达到同时利用鱼骨中蛋白质和钙质的目的，提高了鱼糜加工副产物鱼骨的利用价值。
附图说明
图1为本发明所述方法的工艺流程图。
具体实施方式
实施例一
1、亚临界水处理鱼骨
（1）鱼骨与盐酸溶液混合：将鱼骨与pH值为2.0的盐酸溶液按照固液比1:10进行混合；
（3）亚临界水处理：对鱼骨和盐酸混合液进行亚临界水处理，亚临界水温度设置为120 ℃，处理时间为2.0 h。
2、动态高压微射流超微细化鱼骨
采用胶体磨对鱼骨混合液处理3次，再采用40 MPa的均质机处理2次，进而采用动态高压微射流进行超微细化处理，微射流压力设置为140 MPa，处理次数为4次。
3、蛋白酶酶解鱼骨
（1）胃蛋白酶酶解鱼骨：采用胃蛋白酶对动态高压微射流处理后的鱼骨进行酶解，酶与底物比为1:100，酶解温度为37 ℃，酶解时间为5 h；
（2）复合风味蛋白酶酶解：胃蛋白酶酶解后，用1.0M的NaOH溶液将酶解物pH值调至6.5，按照酶与底物比1:80加入复合风味蛋白酶，酶解温度为55 ℃，酶解时间为10 h；
（3）离心：对复合风味蛋白酶酶解后的鱼骨酶解物进行离心处理，离心机转速为4500 r/min，离心时间为30 min，去除离心后最上层的油脂和最下层的沉淀物，即得到鱼骨酶解液。
4、微波处理鱼骨酶解液
用1.0M的NaOH溶液将鱼骨酶解液pH值调至9.0之后，采用微波对鱼骨酶解液进行加热处理，控制溶液温度在40 ℃，微波时间为30 min。微波处理结束后即得到肽钙溶液。
5. 喷雾干燥
利用喷雾干燥技术去除肽钙溶液中的水分，控制进风温度为180 ℃，出风温度为85 ℃，即得到鱼骨肽钙粉末。
实施例二
1、亚临界水处理鱼骨
（1）鱼骨与盐酸溶液混合：将鱼骨与pH值为2.5的盐酸溶液按照固液比1:10进行混合；
（3）亚临界水处理：对鱼骨和盐酸混合液进行亚临界水处理，亚临界水温度设置为125 ℃，处理时间为1.5 h。
2、动态高压微射流超微细化鱼骨
采用胶体磨对鱼骨混合液处理2次，再采用10-40 MPa的均质机处理2次，进而采用动态高压微射流进行超微细化处理，微射流压力设置为160 MPa，处理次数为2次。
3、蛋白酶酶解鱼骨
（1）胃蛋白酶酶解鱼骨：采用胃蛋白酶对动态高压微射流处理后的鱼骨进行酶解，酶与底物比为1:50，酶解温度为35 ℃，酶解时间为3 h；
（2）复合风味蛋白酶酶解：胃蛋白酶酶解后，用2.0M的NaOH溶液将酶解物pH值调至7.0，按照酶与底物比1:50加入复合风味蛋白酶，酶解温度为50 ℃，酶解时间为8 h；
（3）离心：对复合风味蛋白酶酶解后的鱼骨酶解物进行离心处理，离心机转速为5000 r/min，离心时间为20 min，去除离心后最上层的油脂和最下层的沉淀物，即得到鱼骨酶解液。
4、微波处理鱼骨酶解液
用2.0M的NaOH溶液将鱼骨酶解液pH值调至9.5之后，采用微波对鱼骨酶解液进行加热处理，控制溶液温度在50 ℃，微波时间为20 min。微波处理结束后即得到肽钙溶液。
5. 喷雾干燥
利用喷雾干燥技术去除肽钙溶液中的水分，控制进风温度为185 ℃，出风温度为90 ℃，即得到鱼骨肽钙粉末。
实施例三
1、亚临界水处理鱼骨
（1）鱼骨与盐酸溶液混合：将鱼骨与pH值为2.0的盐酸溶液按照固液比1:15进行混合；
（3）亚临界水处理：对鱼骨和盐酸混合液进行亚临界水处理，亚临界水温度设置为130 ℃，处理时间为2.0 h。
2、动态高压微射流超微细化鱼骨
采用胶体磨对鱼骨混合液处理2次，再采用30 MPa的均质机处理2次，进而采用动态高压微射流进行超微细化处理，微射流压力设置为180 MPa，处理次数为3次。
3、蛋白酶酶解鱼骨
（1）胃蛋白酶酶解鱼骨：采用胃蛋白酶对动态高压微射流处理后的鱼骨进行酶解，酶与底物比为1:100，酶解温度为37 ℃，酶解时间为5 h；
（2）复合风味蛋白酶酶解：胃蛋白酶酶解后，用1.0M的NaOH溶液将酶解物pH值调至6.5，按照酶与底物比1:50加入复合风味蛋白酶，酶解温度为50 ℃，酶解时间为10 h；
（3）离心：对复合风味蛋白酶酶解后的鱼骨酶解物进行离心处理，离心机转速为8000 r/min，离心时间为15 min，去除离心后最上层的油脂和最下层的沉淀物，即得到鱼骨酶解液。
4、微波处理鱼骨酶解液
用1.0M的NaOH溶液将鱼骨酶解液pH值调至9.0之后，采用微波对鱼骨酶解液进行加热处理，控制溶液温度在55 ℃，微波时间为25 min。微波处理结束后即得到肽钙溶液。
5. 喷雾干燥
利用喷雾干燥技术去除肽钙溶液中的水分，控制进风温度为190 ℃，出风温度为90 ℃，即得到鱼骨肽钙粉末。