一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐及其制备方法与流程

本发明属于食品加工技术领域，尤其涉及一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐及其制备方法。

背景技术：

鸭血性寒味咸，有补血和清热解毒的作用，鸭血除含85％左右的水分外，含有16％左右的蛋白质，富含铁、锌、钾等矿物元素和多种维生素，此外还含有多种生物活性物质，具有很高的营养价值；用鸭血能治疗痢疾、劳伤吐血等症。对于凡丹石、砒霜、蔬菜中毒等，用鸭血灌服皆有较好的疗效；鸭血还能治疗热血上冲、中风眩晕及防治消化道肿瘤；鸭血也富含血红素，它有很高的药用价值，在医学和保健品研究的领域上有很广泛的应用。

姜黄素是从姜黄中提取出的一种酚类复合物，具有较强的生理和药理活性,溶液中姜黄素以酮-烯互变异构体的形式存在，其中烯醇式结构更加稳定，是姜黄素存在的主要形式。许多研究显示姜黄素的烯醇式结构和酚羟基在抗氧化性上起着重要作用。大量研究表明，姜黄素具有抗炎、抗氧化、降血脂、抑制ⅱ型糖尿病并发症、抑制血栓和心肌梗塞、抗癌等生物活性，因此姜黄素在食品、医药行业中具有极大地开发和应用潜力。

中国cn105816885a号专利提供一种药物白蛋白纳米粒、制备方法及其在肿瘤靶向治疗中的应用。该纳米粒为亲和素和白蛋白两种蛋白包载难溶性抗肿瘤药物的纳米粒子。亲和素和白蛋白之间存在静电相互作用，而且纳米粒中的亲和素可以和生物素结合。亲和素可以将包载药物的该纳米粒靶向至生物素富集部位。在给予该纳米粒前，使用生物素化抗体预先靶向肿瘤部位，可以改善该纳米粒制剂在肿瘤部位的分布。将生物素化抗体和该纳米粒制剂联合用药可以起到比单克隆抗体和不含亲和素的白蛋白纳米粒联合用药更好的抗肿瘤效果；该发明在制备过程中使用有机溶剂溶解姜黄素，会造成最终产品中含有少量的有机溶剂，影响使用效果。

中国cn107114799a号专利公开了菜籽蛋白微胶囊的超声波制备方法及作为功能食品的应用涉及功能食品微胶囊技术领域。由以下重量份的原料制备而成：油菜籽活性蛋白：10-25份；姜黄素：1-5份。本发明在油菜籽活性蛋白包埋姜黄素的过程中施加了逆流超声波和扫频超声波，改变油菜籽活性蛋白的高级结构，使其结构打开，暴露活性基团，蛋白质形成小的聚集体，从而促进各聚集体通过疏水相互作用形成微胶囊为包埋生物活性成分提供基础。该发明中包埋姜黄素的油菜籽活性蛋白微胶囊的制备方法，工艺操作简单，制备过程中未涉及有机试剂，适宜工业化生产，且油菜籽活性蛋白原料价格便宜，制备工艺简单；该发明将含姜黄素的活性蛋白作为保健品用户使用感较差，且不利于日常的保健作用。

目前，对于姜黄素与蛋白质复合物的构建研究中，大多集中于植物蛋白，而对于畜产源蛋白的研究很少有人报导，一般采用的复合过程较为复杂，成本较高；由于姜黄素不溶于水，在制备过程中一般采用有机溶剂进行溶解，使得制备的产品中带有有机溶剂，影响使用效果；目前含姜黄素的食品中一般采用植物蛋白制备成含有姜黄素的保健药品，价格昂贵，且作为药物服用，使得用户的体验感较差。因此，急需设计一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐及其制备方法以解决上述问题。

技术实现要素：

本发明的目的是针对现有技术存在的问题，提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐及其制备方法，采用疏水组装法生成血浆蛋白-姜黄素聚合物直接作用在新鲜血液中改善了活性成分的稳定性和保质期、增强了肠吸收和细胞吸收、延长了血液滞留时间、增强了抗癌效果等；在制备过程中使用氯化钙作为激活剂使所述姜黄素的抗氧化性能保留完整。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：

本发明提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐,包含以下重量份数的原材料：

鸭血80-100份；

姜黄素0.2-0.6份。

姜黄素具有优异的治疗、保健作用，但由于姜黄素的水不溶解性质极大地限制了其在食品中的应用，一般采用生物降解性较好的物质辅助使用；目前，对于姜黄素与蛋白质复合物的构建研究中，大多集中于植物蛋白，而对于畜产源蛋白的研究很少有人报导，本发明以畜产来源的血浆蛋白为载体对姜黄素-畜产源蛋白复合物进行构建，加入到食品当中能够有效的保证姜黄素活性成分的稳定性和保质期、增强肠吸收和细胞吸收、延长姜黄素在血液中的滞留时间、增强抗癌效果等；本发明将姜黄素-畜产源蛋白复合以合适比例添加血豆腐中，为新型凝胶类食品开发和新型功能性食品配料，提供一定的应用借鉴，同时可以使用户在日常的饮食中对身体进行调理，考虑到了姜黄素的辛辣气味，本发明的姜黄素份数为0.2-0.6份，使用户更易接受。

优选地，所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐，包含以下重量份数的原材料：

鸭血100份；

姜黄素0.47份。

本发明还提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法，包括以下步骤：

a、制备抗凝全血：鸭屠宰时立即收集鸭血，在5min内向鸭血中加入柠檬酸钠溶液，搅拌均匀后过滤，收集滤液得到抗凝全血；

b、血浆分离：取所述抗凝全血离心，收集上层血浆，稀释、搅拌1-2h得到血浆蛋白溶液，下层血细胞回收待用；

c、疏水组装：调节步骤b所述血浆蛋白溶液的ph值至10-12，孵育20-60min，加入姜黄素颗粒，避光搅拌20-60min，调节ph至中性，得到血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液；

d、凝血酶激活：将步骤c所述血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液加入步骤b所述的血细胞中，搅拌均匀得到含血浆蛋白-姜黄素聚合物的全血溶液；再向上述溶液中加入氯化钙溶液；所述含血浆蛋白-姜黄素聚合物的全血溶液和氯化钙溶液的体积比为7-10:1-3；

e、加热定型：将步骤d所得溶液放入恒温水浴锅中加热至完全凝固，即得抗氧化姜黄素鸭血豆腐。

本发明所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法包括制备制备抗凝全血、血浆分离、疏水组装、凝血酶激活、加热成型工艺；所述疏水组装是通过调节溶液ph，利用疏水作用力形成血浆蛋白-姜黄素的水相高溶解度的非共价聚合物，从而解决了所述姜黄素的水不溶解性导致药用效果较差的问题；所述凝血酶激活是加入适宜浓度和比例的氯化钙溶液于已含姜黄素的血液中，使得血液蛋白间的交联作用加强，形成位于蛋白外层的保护膜使被蛋白包埋的姜黄素的抗氧化性能保留完整。

优选地，步骤a中所述柠檬酸钠溶液的浓度为0.9％-1.0％；搅拌均匀后用双层纱布过滤。

柠檬酸钠无毒性、具有ph调节性能及良好的稳定性，常被用作食品添加剂，本发明采用柠檬酸钠作用于新鲜鸭血中能够保证新鲜鸭血的稳定性，防止新鲜鸭血迅速凝固。

优选地，步骤c中，所述姜黄素的加入量以抗凝全血为基准为0.2-0.6g/100ml，以血浆蛋白为基准为0.3-1.0g/100ml。

本发明采用血浆蛋白作为载体包埋所述姜黄素，发明人通过大量实验得到，当所述姜黄素加入量以抗凝全血为基准为0.2-0.6g/100ml，以血浆蛋白为基准为0.3-1.0g/100ml时，所述血浆蛋白-姜黄素的包埋率能达到50％以上，提高所述姜黄素的生物利用率。

优选地，步骤c中，调节步骤b所述血浆蛋白溶液的ph值调12。本发明调节ph至为12，能够较好的调节蛋白疏水结构的暴露程度，从而促进血浆蛋白-姜黄素包埋聚合物的构建。

优选地，步骤d中，所述氯化钙溶液的浓度以抗凝全血为基准为25-30mg/ml；所述含血浆蛋白-姜黄素聚合物的全血溶液和氯化钙溶液的体积比为8：1。

优选地，步骤e中，所述加热的具体条件为：在70-80℃下加热15-20min。本发明的发明人通过大量实验得到氯化钙溶液浓度在25-30mg/ml，所述含血浆蛋白-姜黄素聚合物的全血溶液和氯化钙溶液的体积比为8：1，70-80℃下加热15-20min得到的抗氧化姜黄素鸭血豆腐中所述姜黄素的抗氧化性保留完整，加热前后的dpph清除率平均值为43.67％,且成品鸭血豆腐的弹性最佳。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

(1)本发明采用血浆蛋白作为载体将姜黄素加入食品中，克服了天然抗氧化剂姜黄素的难溶解性能，增强了姜黄素活性成分的稳定性和保质期、增强肠吸收和细胞吸收、延长血液滞留时间、增强了抗癌效果等。

(2)本发明通过控制溶液ph调节血浆蛋白疏水结构的暴露程度，利用疏水作用力形成血浆蛋白-姜黄素的水相高溶解的非共价聚合物，包埋率较高，本发明在制备过程中未引入有机溶剂，保健、治疗效果较好；

(3)本发明在制备过程中加入激活剂氯化钙，使所述姜黄素的抗氧化性保留完整，提高生物利用率；

(4)本发明制备过程简单、成本较低，将姜黄素作用于人们日常饮食生活中，能够使姜黄素的治疗保健效果溶于日常生活中。

附图说明

图1为本发明所述一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐及其制备方法的技术路线图。

具体实施方式

下面对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动条件下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐，包含以下重量份数的原材料：

鸭血80-100份；

姜黄素0.2-0.6份。

本发明以血浆蛋白为载体将所述姜黄素加入到新鲜血液中做成食品，使所述姜黄素的治疗、保健作用溶于人们的日常生活中，按照上述重量份数得到的抗氧化姜黄素鸭血豆腐，姜黄素的活性成分的稳定性较好和保质期较长、肠吸收和细胞吸收效果好、延长了所述姜黄素在血液中的滞留时间、增强了抗癌效果，且鸭血豆腐的口感较好。以下实施例均在上述范围内。

实施例1

本实施例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐，包含以下重量份数的原材料：

鸭血100份；

姜黄素0.47份。

所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法，包括以下步骤：

a、制备抗凝全血：鸭屠宰时立即收集新鲜鸭血，在5min内向100ml新鲜鸭血中加入浓度为0.9％-1.0％柠檬酸钠溶液，搅拌均匀，用双层纱布过滤得到抗凝全血；

所述抗凝全血的密度为1.06g/ml

b、血浆分离：取所述抗凝全血,使用低温离心机在0-4℃下离心，收集上层血浆，在磁力搅拌器的作用下搅拌溶解1h得到血浆蛋白溶液，下层血细胞回收待用；

c、疏水组装：用4mol/lnaoh溶液调节步骤b所述血浆蛋白溶液的ph至12，孵育30min，加入0.5g/100ml的姜黄素颗粒，避光搅拌30min，用4mol/lhcl调节ph至7，得到血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液；

d、凝血酶激活：将步骤c所述血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液加入步骤b所述的血细胞中，搅拌均匀得到含血浆蛋白-姜黄素聚合物的全血溶液；再向上述溶液中加入25mg/ml氯化钙溶液；所述含血浆蛋白-姜黄素聚合物的全血溶液和氯化钙溶液的体积比为8:1；

e、加热定型：将步骤d所得溶液放入75℃恒温水浴锅中加热20min至完全凝固，即得抗氧化姜黄素鸭血豆腐。

姜黄素包埋率和负载率的测定方法：

取步骤c中所述血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液在超滤管中2250g×15min离心，去滤液500ul定容至25ml，测其在波长为450nm处的吸光值，并计算游离姜黄素质量，根据下式计算姜黄素的包埋率和负载率：

姜黄素的包埋率(％)＝(姜黄素总质量-游离姜黄素质量)×100/姜黄素总质量；

姜黄素负载率(％)＝(姜黄素总质量-游离姜黄素质量)×100/抗氧化姜黄素鸭血豆腐样品总质量。

血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液对dpph自由基的体外清除试验的测试方法：

将步骤c中所述血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液于10ml离心管中，加入2ml无水乙醇，在振荡器下震荡10min，使所述血浆蛋白-姜黄素聚合物与乙醇充分混合后，在2250g×15min离心，上清液即为姜黄素释放液。将20μl姜黄素释放液与180ul60umol/l的dpph工作液混合作为待测液，震荡混合后在530nm处用酶标仪进行检测，每隔5min测一次，连续测40min。

空白对照组中姜黄素用20μl无水乙醇代替；以上操作均在室温下避光进行。反应体系中混合液在530nm处的吸光值即代表dpph自由基的含量。考虑到姜黄素本身的吸光值，以加入姜黄素释放液20μl和无水乙醇180μl为姜黄素的本底吸收值。

清除率(％)＝[a-(b-c)]/a×100％。其中，a为空白对照组的吸光值，b为待测液的吸光值，c为姜黄素待测液的本底吸收值。

抗氧化性保留程度的测定方法：

抗氧化性保留程度(％)＝(步骤d制得的溶液的dpph自由基清除率-步骤e制得的产品的dpph自由基清除率)×100％/步骤d制得的溶液的dpph自由基清除率；

具体检测结果如表1所述，采用本发明所述制备方法制备得到的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐具有较高的包埋率和负载率，有利于人体吸收，且所述姜黄素抗氧化性保留程度较高。

实施例2

本实施例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法，与实施例1相比，不同之处在于，步骤c中，用4mol/lnaoh溶液调节步骤a所述血浆蛋白溶液的ph至10。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

实施例3

本实施例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐及其制备方法，与实施例1相比，不同之处在于，包含以下重量份数的原材料：

鸭血100份；

姜黄素0.28份。

步骤c中，所述姜黄素颗粒的加入量为0.3g/100ml。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

实施例4

本实施例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐及其制备方法，与实施例1相比，不同之处在于，包含以下重量份数的原材料：

鸭血100份；

姜黄素0.38份。

步骤c中，所述姜黄素颗粒的加入量为0.4g/100ml。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

实施例5

本实施例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐及其制备方法，与实施例1相比，不同之处在于，包含以下重量份数的原材料：

鸭血100份；

姜黄素0.57份。

步骤c中，所述姜黄素颗粒的加入量为0.6g/100ml。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

实施例6

本实施例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法，与实施例1相比，不同之处在于，步骤d中，所述氯化钙加入量为30mg/ml，所述含血浆蛋白-姜黄素聚合物的全血溶液和氯化钙溶液的体积比为4:1。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

实施例7

本实施例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法，与实施例1相比，不同之处在于，步骤d中，所述氯化钙溶液的浓度为30mg/ml，所述含血浆蛋白-姜黄素聚合物的全血溶液和氯化钙溶液的体积比为7:3。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

实施例8

本实施例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法，与实施例1相比，不同之处在于，步骤e中，将步骤d所得溶液放入75℃恒温水浴锅中加热25min至完全凝固。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

对比例1

本对比例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法，包括以下步骤，

a、鸭屠宰时立即收集新鲜鸭血，在5min内向100ml新鲜鸭血中加入浓度为0.9％-1.0％柠檬酸钠溶液，搅拌均匀，用双层纱布过滤得到抗凝全血；

b、取10ml所述抗凝全血,使用低温离心机在0-4℃下离心，收集上层血浆，在磁力搅拌器的作用下搅拌溶解1h得到血浆蛋白溶液，下层血细胞回收待用；

c、将姜黄素溶于乙醇的有机溶剂中制得0.2mg/ml姜黄素溶液，将步骤b中血浆蛋白溶液与姜黄素溶液混合均质得到血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液；

d、将步骤c所述血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液加回到血细胞中，搅拌均匀；再向上述溶液中加入12.5ml浓度为25mg/ml氯化钙溶液；所述血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液和氯化钙溶液和所述抗凝全血的体积比为1:8；

e、将步骤d所得溶液放入75℃恒温水浴锅中加热20min至完全凝固，即得抗氧化姜黄素鸭血豆腐。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

对比例2

本对比例提供一种抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备方法，与实施例1相比，不同之处在于，在所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的制备过程中不加入氯化钙。

采用实施例1所述的测试方法对本实施例制备的所述抗氧化姜黄素鸭血豆腐的性能进行测试，如表1所示。

测试结果

采用实施例1中所述姜黄素包埋率和负载率的测定方法、血浆蛋白-姜黄素聚合物溶液对dpph自由基的体外清除试验的测试方法、抗氧化性保留程度的测定方法对抗氧化姜黄素鸭血豆腐进行测试，结果如表1所示：

表1测试结果汇总表

从表1中可以看出，采用本发明所述的方法制备得到的抗氧化姜黄素鸭血豆腐的包埋率、负载率较高，提高了所述姜黄素活性成分的稳定性和保质期，且产品弹性好；在本发明所述范围内变化氯化钙溶液的浓度，能够使dpph清除率和抗氧化性保留程度均较高，增强了所述姜黄素的肠吸收和细胞吸收、延长了所述姜黄素在血液中的滞留时间、增强了抗癌效果；对比例1采用有机溶剂溶解所述姜黄素使其与蛋白结合，其包埋率、负载率较低；对比例2在制备过程中不使用氯化钙使得所述姜黄素的dpph清除率和抗氧化性保留程度较低，产品弹性差。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。