包含经热处理的澄清番茄浓缩物的组合物的制作方法
【专利说明】包含经热处理的澄清番茄浓缩物的组合物 发明领域
[0001] 本发明涉及包含经热处理的番茄衍生的浓缩物的组合物，已发现所述浓缩物具有 意料不到的高水平的抗炎活性。本发明还涉及经热处理的番茄衍生的浓缩物与类胡萝卜素 的协同组合。
[0002] 发明背景 形成非特异性免疫系统的重要部分的炎症过程的特征在于一系列复杂的化学和细胞 变化，其对于面对微生物试剂和其它潜在有害的环境因素的宿主防御而言是重要的。然而， 在许多情况下，炎症可被不当地触发，和/或可持续至对宿主变得有害的程度。在这类情况 下，可能需要抑制或阻止炎症过程的一个或更多个方面的发展，尤其，在非感染性的炎症疾 病的情况下。
[0003] 已显示非常多的不同的化学介质参与炎症过程的发展和控制。许多不同实验室的 近期研究已表明一氧化氮（N0)为众多急性和慢性炎症疾病的重要调节剂，所述疾病包括各 种类型的关节炎、胃肠疾病、中枢神经系统的炎症和某些形式的哮喘。所以，建议对N0生产 的抑制可对于这些炎症疾病的治疗和/或管理提供有用的治疗机理。此外，也已显示对N0 合成的抑制在一些本质上主要不是炎症的病症或状态中是有用的。因此，例如，已发现对NO 合成的抑制降低进入在锻炼期间的患有2型糖尿病的个体的肢体组织内的葡萄糖吸收。
[0004]N0的体内生产是由一氧化氮合酶（N0S)(包括可诱导的一氧化氮合酶（I-N0S))家 族介导的，所述可诱导的一氧化氮合酶是由多种不同的免疫刺激物包括脂多糖（LPS)、干扰 素Y和白细胞介素1 (IL-1)活化的。
[0005] 通过使用L-W-单甲基精氨酸柠檬酸酯（L-NMMA)可在体内和体外均实现对N0的 抑制。此外，已显示若干种其它化合物(包括一些天然产物)也抑制N0的生产。后一个群组 包括例如叶黄素[RafiM.M?等人?MolNutrFoodRes. 2007Mar;51(3):333-40;Choi, J.S.Nutrition. 2006Jun;22(6):668-71]和番茄红素[Rafi,M.M.等人.1?00(15(^. 2007Jan; 72(1):S069-74]的化合物。然而，已证明许多天然产物NO抑制剂的功效和效力 不是特别地高。因此存在对天然来源的改善的抑制N0生产的组合物的需要。
[0006] 另一种极为重要的炎症介质为肿瘤坏死因子-a(TNF-a)，其为由各种细胞类型 (包括巨噬细胞、嗜中性粒细胞和淋巴细胞）产生的细胞因子。TNF-a在炎症过程的早期阶 段占据关键位置并且负责刺激其它因子例如核因子-kB的产生，核因子-kB继而引起各 种促炎基因的活化。因此，鉴于其关键的促炎作用，TNF-a显然是抗炎剂的一个重要的潜 在治疗靶。
[0007] 现在转到另一个方面，为了保持健康正常的骨结构，骨持续经受重塑，其中骨被破 骨细胞分解并由成骨细胞重新建造。
[0008] 破骨细胞的分化尤其还受RANKL(NFKB配体受体活化剂)影响，其为由成骨细胞产 生的细胞因子，与破骨细胞祖细胞结合。对这个过程的抑制将导致破骨细胞活性的降低，从 而抑制骨再吸收。
[0009] 用于改变在骨重塑过程中的骨再吸收和新骨产生之间的平衡的替代策略会引起 增加的成骨细胞活性。尽管这种结果可能潜在地以若干种方式实现，一种可能的途径是通 过活化在成骨细胞内发信号的抗氧化剂应答元件（ARE/Nrf2 )。
[0010] 骨形成和骨再吸收之间的不平衡可能导致病理病症例如骨质疏松、关节炎、牙周 病、多发性骨髓瘤和转移性癌症的发展。对于患有骨质疏松症的个体，骨折代表危及生命的 事件，并且当前全球有超过7000万人处于风险之中。
[0011] 在过多的骨再吸收(例如发生在骨质疏松症中）的情况下，能够改变再吸收和新骨 的形成（layingdown)之间的平衡将是有利的。理想情况下，这将通过使用天然的，无毒物 质而实现，所述物质基本上没有不利的影响。本发明的目的之一就是满足这种需要。
[0012] 本发明的一个目的是提供一种天然产物组合物，其可用于抑制一种或更多种关键 炎症介质例如N0和TNF-a的生产，作为用于治疗或控制所述介质参与其中的病理状态和 过程的手段。
[0013] 本发明的另一个目的是提供具有改善抗炎性质的由番茄衍生的组合物。 本发明的另一个目的为提供用于改善骨健康的天然产物组合物。
[0014] 随着描述的进行，其他目的和目标将会变得显而易见。
【发明内容】
[0015] 本发明人现已发现被称为澄清番茄浓缩物（CTC)的由番茄衍生的产物的抗炎性 质是通过在使用前使所述CTC经受热处理来增强的。
[0016] 术语"CTC"指的是通过将番茄材料(例如榨碎的番茄或番茄汁）分离成果肉和浆 液，丢弃所述果肉，和然后浓缩所述浆液至介于约40和80、优选在55°Bx以上的白利糖度 (Brix)值所获得的浓缩番茄浆液。浓缩的浆液被称为"CTC"。制备CTC的进一步细节将在 下文提供。
[0017] 因此本发明主要涉及包含经热处理的CTC的治疗组合物。
[0018] 尽管可使用若干种不同的加热方案来制备前述的经加热处理的CTC，在一个优选 的实施方案中，在90°C下加热CTC(浓度对应于约60Bx) -段介于1和3小时之间的时间。 在一个特别优选的实施方案中，经热处理的CTC是通过在90°C下加热CTC1小时来制备的。
[0019] 在一个优选的实施方案中，本发明的治疗组合物基本上由经热处理的CTC组成。
[0020] 应注意的是，如本公开和所附的权利要求各处所使用的术语"基本上由…组成"指 的是以下情况，在其中本发明的组合物，在除了主要活性物质（加热的CTC)以外，还可包含 其他化合物、物质和试剂，其实质上不影响本发明的基本的新颖性和创造性特征。
[0021] 在一个优选的实施方案中，包含经热处理的CTC的上文公开的组合物具有小于2% w/w的总的游离氨基酸浓度。同样地，包含经热处理的CTC的所述组合物中的游离谷氨酰胺 浓度优选小于〇. 1%w/w。
[0022] 此外，现已出乎意料地发现，加热的CTC协同地与类胡萝卜素相互作用，从而产生 增强的抗炎效应。因此，本发明进一步涉及包含经热处理的CTC和一种或更多种类胡萝卜 素的协同组合的治疗组合物。 在该组合组合物的一个优选实施方案中，总游离氨基酸浓度小于2%w/w。同样地，游离 谷氨酰胺浓度优选小于〇. 1%w/w。
[0023] 虽然许多不同的类胡萝卜素可结合在本发明的组合物中，在优选的实施方案中， 所述组合物包含选自番茄红素、八氢番茄红素、六氢番茄红素、胡萝卜素和叶黄素和/ 或它们的衍生物的一种或更多种类胡萝卜素。然而，要认识到，许多其它类胡萝卜素也可以 用于制备本发明的协同组合物。
[0024] 在特别优选的实施方案中，本发明的组合物包含加热的CTC和番茄油树脂，其中 所述油树脂包含类胡萝卜素番茄红素、八氢番茄红素、六氢番茄红素和胡萝卜素。这 类番前油树脂的商业可购得的实例为Lyc-0-Mato?，其由申请人，Be'erSheva,Israel的 LycoRedLtd.生产并提供。
[0025] 在一个优选的实施方案中，本发明的治疗组合物基本上由经热处理的CTC和一种 或更多种类胡萝卜素的协同组合组成。在特别优选的实施方案中，治疗组合物基本上由经 热处理的CTC和选自番茄红素、八氢番茄红素、六氢番茄红素、胡萝卜素和叶黄素的一 种或更多种类胡萝卜素的协同组合组成。在一个特别优选的实施方案中，所述组合组合物 包含番茄红素。最优选地，所述组合物基本上由经热处理的CTC和番茄油树脂组成。
[0026] 优选地，在所述组合组合物中类胡萝卜素的总浓度为至少0. 1% (w/w)。在另一个 优选的实施方案中，其中所述类胡萝卜素包括番茄红素，所述番茄红素的浓度为至少〇. 1% (w/w)〇
[0027] 本发明还涉及一种或更多种的类胡萝卜素(如上文所公开）和具有与上文定义的 经热处理的CTC的相似的化学和/或生化组成的改性CTC一起的组合，或仅涉及所述改性 CTC。因此，在一个方面中，本发明涉及包含一种或更多种类胡萝卜素与总游离氨基酸浓度 小于2%w/w的CTC一起的协同组合的治疗组合物。在另一个实施方案中，本申请涉及 一种治疗组合物，其包含至少一种类胡萝卜素与游离谷氨酰胺浓度小于〇.l%w/w的CTC 一起的协同组合。
[0028] 在另一个方面中，本发明提供用于抑制或降低一种或更多种抗炎介质在受试者中 生产的方法，作为用于治疗或管理所述介质参与其中的病理状态和过程的手段，其中所述 方法包括向所述受试者给药根据任何上文公开的实施方案的治疗组合物。虽然所述方法可 用于抑制许多不同的炎症介质的生产，在一个优选的实施方案中，抗炎介质选自NO、TNF-a 和白细胞介素1。
[0029] 在另一方面中，本发明涉及经热处理的CTC在生产用于治疗响应于炎症介质，特 别是NO、TNF-a和/或白细胞介素1的抑制的病症的药物中的用途。
[0030] 在另一方面中，本发明涉及经热处理的CTC和一种或更多种类胡萝卜素在生产用 于治疗响应于NO、TNF-a和/或白细胞介素1的抑制的病症的药物中的用途。
[0031] 在又一个方面，本发明涉及任何上文所公开的组合物在生