专利名称：一种治疗肝病的中药制剂及制备方法
技术领域：
本发明涉及中药制剂及制备方法，具体涉及一种含有龙胆总苦甙的中药制剂、制备方法以及该制剂作为制备治疗肝病药物的应用。
背景技术：
目前世界各地各种类型的肝病发病率较高，尤其在发展中国家发病率更高。如埃及已成为一个全国性的问题，每年约有50万人患病毒性肝炎。在国内虽无全国性的流行病等报告，从局部地区调查表明发病率已超过5％，上海地区在80年代大规模甲肝流行也说明病毒性肝病的严峻性。有人估计目前世界上治疗肝病药物有500种之多，但事实上至今尚无一种能真正根治的。不少肝病患者由于得不到有效的药物治疗，由慢性肝炎发展成结节性肝硬化，有的慢性活动性肝炎长期持续不愈，有些肝硬化和慢性活动性肝病进一步恶化成肝癌。上医大病理解剖教研室从220例肝癌尸检的观察和分析表明肝癌患者的肝炎和肝硬化均发生在肝癌之前，说明急慢性肝病治疗的重要性。它不仅能使失去劳动力的肝病患者有所恢复，而且对预防肝癌起积极有效的作用，减少肝癌发病率。对人民健康建设国家是至关重要的。
由于病毒性肝炎传播的传染方式和途径很多，它可以通过灰尘、接触、食物或血制品使人感染上慢性病毒性肝炎或肝坏死等病症，而目前治疗病毒性肝病尚无确切有效的药物。如广西中医学院附院等单位，用岩黄连注射液治疗464例急慢性肝病临床治愈率31.47％，好转率50％。采用中西结合治疗的，能提高治愈率，但往往复发率较高。重型肝炎的治疗，目前病死率尚较高，近年来经国内外学者的努力，虽有可喜进展，但国内对重型肝炎肝坏死的死亡率在50％左右。因此研究确有疗效的肝病药物是当务之急。
龙胆草为龙胆科龙胆属的植物，在国内以龙胆为主的中药复方，治疗急慢性肝病都有良好的效果。湖北省中医学院附属医院，曾用复方龙胆(所II)治疗166例急性黄疸性肝炎，治愈121例(72％)，上海第一医学院内科学院治疗谷丙转氨酶持续增高的迁延性和慢性传染性肝炎20例，对降转氨酶有较好效果。对胁痛、口苦、尿赤、脉弦、舌边红等肝胆郁热的清除有良效。湖北医学院附一内科，治疗25例急黄和105例儿童黄疸型肝炎，治愈率91.42％；其他各地也以龙胆为主的复方，治疗各种类型的胆病，都收到良好的效果。龙胆科獐牙菜属植物青叶胆(Swertia chinensis Franch)和当药(S.pseudochinensis Hara)，单独用于急慢性肝炎，都显示很好的效果。
在祖国医药记载中龙胆草也是泻肝胆火的要药。如《本草纲目》记载龙胆能益肝之气，泻肝胆之邪热，……。《本草新编》中龙胆草其功专利水，清湿除黄疸，……。在《本经》中龙胆主骨问寒热……清泄肝胆有余之火，疏通下焦湿热……。与现代的药理和临床相吻合，尤其近几年的研究工作证实，龙胆草中的龙胆苦甙具有对小鼠或大鼠实验性的肝保护作用和肝损害的抑制作用。
发明内容
本发明在广泛临床实践基础上对肝II方(龙胆、青蒿、大青叶、车前、败酱草)进行药理筛选，认为龙胆有利疸、保肝和消炎等作用，且优于其他四味药。
本发明所要解决的技术问题是在现有的药理试验基础上，通过提取龙胆草中的有效成分，制备质量稳定，疗效确切，方便使用的治疗肝病的中药制剂。
本发明公开的治疗肝病的中药制剂由重量百分比为0.3--85％龙胆草活性成分提取物和15--99.7％药用辅料组成的医学上可接受的各种剂型的制剂，其中龙胆草活性成分提取物中的主要活性成分龙胆总苦甙含量≥90％。
本发明所述的医学上可接受的各种剂型为注射剂(包括水针、粉针、冻干针、大输液等)、固体制剂(包括各类片剂、胶囊剂、颗粒剂等)、霜剂和口服液。
本发明所要解决的另一技术问题是提供上述治疗肝病的中药制剂的制备方法。
本发明公开的治疗肝病的中药制剂的制备方法包括下列步骤1.龙胆总苦甙提取物的制备
取龙胆草用65-95％醇溶液渗漉至无苦味，药液减压浓缩得粗粉，粗粉去脂后用溶剂纯化，减压浓缩，真空干燥后即得淡黄色的提取物固体，龙胆总苦甙含量≥90％。
其中所用的醇溶液可以是甲醇或乙醇溶液；
其中所述的去脂方法可以是超临界液态CO2萃取法或酯溶性溶剂如石油醚等抽提法；
其中所述的溶剂纯化选用的溶剂为丙酮、甲醇、乙酸乙酯、正丁醇或上述溶剂二种或多种的混合溶剂。2.注射液的制备
取上述龙胆总苦甙提取物，加注射用水溶解，脱色，过滤；
滤液若直接灌封、消毒即制成水针剂；若消毒灌装后冻干即为冻干针；若直接消毒、干燥、粉碎、灌装即为粉针；若与输液配制即可制成大输液；所制成的制剂龙胆总苦甙含量为3-5％；3.固体制剂的制备
按处方量分别称取龙胆总苦甙提取物和药用辅料用流化床喷雾制粒法制粒，用常规方法制成片剂、胶囊剂和颗粒剂等，使每片、粒或袋的龙胆总苦甙含量为100-600mg；4、霜剂的制备
按处方量分别称取龙胆总苦甙提取物和药用辅料，用常规方法制成水包油的霜剂，使龙胆总苦甙含量为1-10％；5.口服液的制备
按处方量分别称取龙胆总苦甙提取物和药用辅料，用常规方法制成口服掖，使龙胆总苦甙含量为100-600mg/ml。
本发明上述制剂均采用HPLC或TCL-scan方法测定龙胆总苦甙含量。
本发明所要解决的再一技术问题是提供上述制剂在制备治疗肝病药物中的应用。
本发明公开的制剂可用于病毒性肝炎高峰期的重症肝炎或高峰期后病情迁延不愈，而且反复发作的黄疸性重症肝炎；尤其是预防亚急性肝坏死和肝癌。
中国药典确定的龙胆草有4种，即龙胆科植物条叶龙胆Gentianamanshuriea Kitag.、龙胆G.scabra Bge.、三花龙胆G.triflora Pall.，前三种统称龙胆，另外还有一种坚龙胆G.rigescens Franch。
在市售的龙胆中龙胆属各种品种至少有40多种，龙胆科獐牙菜属含有龙胆苦甙也有几十种。本发明所用的龙胆为我国东北等地产的粗糙龙胆Gengtiana scabra Bge.，即龙胆科，龙胆属scabra种的龙胆草。
根据文献报道龙胆草含有龙胆总甙(包括当药甙)，龙胆碱，龙胆酸及龙胆二糖、三糖等龙胆成份，龙胆甙能促进胃液分泌，胃酸增加。涂擦家兔皮肤后，皮肤温度上升，皮肤复元时间缩短、毛细管抵抗运动减弱，皮肤酸化还原功能增大，对皮肤肌肉有显著的亢进作用，说明龙胆苦甙能使血管微循环增加。从中医理论说明能活血化瘀，促进肝循环，增进肝细胞的营养；对胃酸增加，促进胃的消化功能也有利肝功能的恢复。另外有瑞士学者报道，龙胆碱小剂量对中枢神经有兴奋作用，大剂量有抑制麻痹作用，因此治肝病的成分应是龙胆苦甙。
从总成分的药理获得信息，苦甙与生物碱不分离，其药理只见毒性不见疗效，从动物解剖中观察到动物内脏的麻痹现象。联系生物碱对中枢作用，说明大剂量的龙胆碱毒性掩盖了龙胆苦甙的药理作用。要达到治疗目的，需分离龙胆碱，纯化龙胆苦甙。以后的试验均证明了这一点。
用本发明方法制得的龙胆总苦甙及龙胆总苦甙注射液进行高效液相色谱分析，结果如下
装置JASCO FLC-350高效液相色谱仪
层析柱JASCO WC-01(吸附)500×2.3mm
流动相氯仿∶己烷∶甲醇(100∶50∶5)0.5ml/min
检测器UVIDEC-2 紫外检测258nm、0.056AUFS
记录器50Mvfs纸速2mm/min
选择量数十微克龙胆总甙
图谱分析
图1为龙胆总苦甙的色谱图，其中①号峰经鉴别是溶媒甲醇引起，其余10个峰均是样品的组分，号峰含量最大，⑩号峰次之(由峰面积推测)，这两种成分合起来占总量90％以上。其余各成分经正丁醇精制，大部分可以被除去(见图2)；图3为龙胆注射液的色谱，⑩和号峰是注射液的主要成分，与图1比较稍有差异，可能由于水溶液稀释所引起。
用本发明方法制得的龙胆总苦甙进行有关毒性试验，结果如下
1.LD50＝163.49/kg(贯序法)；
2.对猫的血压呼吸影响(常规法)未见明显影响；
3.对狗的毒性总甙注射液40毫升，加10％葡萄糖注射液500毫升，静脉滴注。对血压、血胆红素、血钾、血SGPT及尿胆元等均无明显影响，也未见有溶血反应。
实验证明无明显毒性，安全、有效、可供临床。
用本发明方法制得的龙胆总苦甙进行有关药理试验与临床疗效观察。
(一)龙胆总苦甙的药理
1.利胆作用(大鼠毛细管插入法)
用75和76二个批号进行4次实验，给药后胆汁流量有增加，增加率为23％-42％，3次实验P值均小于0.05，表明龙胆总甙有明显的利胆作用。(详见表1)
表1 龙胆总苦甙对大鼠胆汁流量的影响
2.抗炎作用(急性蛋清性关节炎的抗炎作用)
实验结果(见表2)表明龙胆总苦甙对蛋清性关节炎有一定的抗炎作用。
表2 龙胆总甙对大鼠蛋清性关节炎的影响注*与对照组间比较P＜0.05
3.对实验性高SGPT的作用(CCL4引起高SGPT)；结果(见表3)似有一定的降酶作用。
表3 龙胆总苦甙对SGPT的影响
从以上的初步实验结果表明龙胆总苦甙具有明显的利胆作用和抗炎作用，对四氯化碳引起的高SGPT有一定降酶效果，毒性小、较安全、可供临床试用。
4、本发明曾在上海药物所用CCL4损伤肝细胞后用龙胆总苦甙成分治疗，经病理切片证实能使破坏的肝细胞恢复正常。
(二)龙胆总苦甙临床疗效观察
1.病例及治疗方法(在武汉同济医院传染科进行临床观察)
选择急慢性肝炎合并黄疸的患者，黄疸指数在30-140单位，谷丙转氨酶活力在500-720单位，其中黄疸肝炎第二次复发患者，黄疸指数入院时为90单位，3天后检测至140单位，说明在黄疸上升期，且病情严重，SGPT600单位，伴发热、恶心、呕吐、昏沉。此外有胆管癌一例肝外阻塞，黄疸指数120单位，SGPT 370单位。临床用龙胆总苦甙40ml，加入500ml10％葡萄糖注射液，静脉滴注，每日一次，疗程13-28天，每3-7天记录临床症状并测定黄疸指数和SGPT，同时选择病情相似的3例，用其他中西药治疗作对照。
2.疗效观察结果
(1)临床观察无毒副反应，安全可靠。
(2)治疗组的血清胆血素恢复时间为12.7天，对照组为27.3天。
(3)治疗组ALT复常时间为22.8天，对照组为45.3天。
(4)临床痊愈(症状、体征显著好转或消失，肝功能指标复常)治疗组平均为22.8天，对照组为45.7天。
初步临床观察龙胆总苦甙静脉注射液，对急慢性肝炎活动期并发黄疸患者能迅速退黄，高SGPT也都能在13-28天内降至正常。1例重症病人也能迅速缓解，且无其他副作用，安全、可靠，在治疗中病人食欲增加各种病症得到改善，病人出院时面色红润，心情愉快、体力得到恢复。医师们在小结时指出GS注射液从6个病例来看，对急慢性肝病有确切的疗效，而且对重症病人也能迅速缓解是值得进一步研究的药物，还有可能用于治疗重症肝坏死患者。
本发明通过对龙胆草有效成分的筛选，提取其龙胆总苦甙制成适用于治疗肝病的制剂，具有明显的利胆、消炎作用。对于急慢性传染性肝炎，在退黄、降酶、增进食欲及完善精神状态方面，都显示有良好的疗效和独特的作用，且无任何的副作用，安全无毒。为肝病患者提供了一种疗效显著、使用方便的新型药物。对促进肝病患者恢复健康，减低肝病死亡率，减少肝癌发病均具有积极的意义。
图1龙胆总苦甙的HPLC色谱图
图2精制后龙胆总苦甙的HPLC色谱图
图3龙胆总苦甙注射液的HPLC色谱图
具体实施例方式
实施例1
龙××(27岁，女)门诊检查为慢性肝炎，多次反复发作的肝病，有发热、恶心、呕吐、无力，用担架抬进医院。当时黄疸指数为90，转氨酶570，胆红素9mg，是重症肝炎。进院后第二天开始用龙胆总甙注射液进行治疗，住院第5天进行抽血化验，黄疸指数140单位，胆红素14mg，谷丙转氨酶600单位，说明正处在病情重，上升期，但患者自觉症状改善，故继续应用龙胆注射液，于第九天降至70单位，发热等症状也渐渐消失，第28天SGPT降至190单位，黄疸指数降至13单位。因供试药用完，改用一般保肝药至临床痊愈出院。半年后随访患者一切正常，未发现再复发。实施例2 龙胆总苦甙的制备
取龙胆草用75％乙醇溶液渗漉至无苦味，药液减压浓缩得粗浸膏，粗浸膏用超临界液态CO2萃取法去脂后，浓缩除去溶剂，用乙酸乙酯及正丁醇精制，真空干燥后即得淡黄色的提取物固体，龙胆总苦甙含量为93％。实施例3 龙胆总苦甙注射液的制备
取按实施例1方法制得的龙胆总苦甙提取物，加注射用水溶解，活性炭脱色，过滤，消毒灭菌后灌装成20ml/支，使每支含龙胆总苦甙0.5g，供静脉注射。实施例4 龙胆总苦甙冻干针的制备
取按实施例1方法制得的龙胆苦甙提取物，加注射用水及少量乙醇溶解，活性炭脱色，过滤，消毒灭菌后灌装，冻干，使每支含龙胆总苦甙1g。实施例5 龙胆总苦甙片剂的制备
取按实施例1方法制得的龙胆苦甙提取物，加10％重量的麦芽糊精，40％微晶纤维素，用流化床制粒，加1％硬酯酸钙后混匀压片，每片含龙胆总苦甙250mg。实施例6 龙胆总苦甙胶囊剂的制备
取按实施例1方法制得的龙胆苦甙提取物，加20％重量的麦芽糊精，60％微晶纤维素，1％硬酯酸钙后混匀灌入胶壳中即得，每粒含龙胆总苦甙150mg实施例7 龙胆总苦甙霜剂的制备配方
龙胆总苦甙 16.9g
硅油100g
石蜡油 500g
硬脂酸 500g
硬酯醇 50g
A-209g
SG 16g
甘油500g
用常规方法制成水包油霜剂，龙胆总苦甙含量1％。
权利要求
1、一种治疗肝病的中药制剂，其特征在于该制剂由重量百分比为0.3-85％龙胆草活性成分提取物和15-99.7％药用辅料组成的医学上可接受的各种剂型的制剂，其中龙胆草活性成分提取物中的主要活性成分龙胆总苦甙含量≥90％。
2、一种如权利要求1所述的治疗肝病的中药制剂，其特征在于其中所述剂型为注射剂、固体制剂、霜剂和口服液。
3、一种如权利要求1所述的治疗肝病的中药制剂的制备方法，其特征在于该制备方法包括下列步骤(1)龙胆总苦甙提取物的制备
取龙胆草用65-95％醇溶液渗漉至无苦味，药液减压浓缩得粗粉，粗粉去脂后用溶剂纯化，减压浓缩，真空干燥后即得淡黄色的提取物固体，龙胆总苦甙含量≥90％；(2)注射液的制备
取上述龙胆总苦甙提取物，加注射用水溶解，脱色，过滤；
滤液直接灌封、消毒即制成水针剂；消毒灌装后冻干即为冻干针；直接消毒、干燥、粉碎、灌装即为粉针；与输液配制即可制成大输液；所制成的制剂龙胆总苦甙含量为3-5％；(3)固体制剂的制备
按处方量分别称取龙胆总苦甙提取物和药用辅料用流化床喷雾制粒法制粒，用常规方法制成片剂、胶囊剂和颗粒剂等，使每片、粒或袋的龙胆总苦甙含量为100-600mg；(4)霜剂的制备
按处方量分别称取龙胆总苦甙提取物和药用辅料，用常规方法制成水包油的霜剂，使龙胆总苦甙含量为1-10％；(5)口服液的制备
按处方量分别称取龙胆总苦甙提取物和药用辅料，用常规方法制成口服掖，使龙胆总苦甙含量为100-600mg/ml。
4、一种如权利要求3所述的治疗肝病的中药制剂的制备方法，其特征在于其中所用的醇溶液选用甲醇或乙醇溶液。
5、一种如权利要求3所述的治疗肝病的中药制剂的制备方法，其特征在于其中所述的去脂方法为超临界液态CO2萃取法或酯溶性溶剂如石油醚抽提法。
6、一种如权利要求3所述的治疗肝病的中药制剂的制备方法，其特征在于其中所述的溶剂纯化选用的溶剂为丙酮、甲醇、乙酸乙酯、正丁醇或上述溶剂二种或多种的混合溶剂。
7、一种如权利要求1所述的含有龙胆总苦甙中药制剂在制备治疗肝病药物中的应用。
8、一种如权利要求7所述的含有龙胆总苦甙中药制剂在制备治疗肝病药物中的应用，其特征在于该制剂可用于病毒性肝炎高峰期的重症肝炎或高峰期后病情迁延不愈，而且反复发作的黄疸性重症肝炎；尤其是预防亚急性肝坏死和肝癌。
全文摘要
本发明涉及一种含有龙胆总苦甙的中药制剂、制备方法以及该制剂作为制备治疗肝病药物的应用。本发明公开的含有龙胆总苦甙的中药制剂由重量百分比为0.3－85％龙胆草活性成分提取物和15－99.7％药用辅料组成的医学上可接受的各种剂型的制剂如注射剂、固体制剂、霜剂和口服液，其中龙胆草活性成分提取物中的主要活性成分龙胆总苦甙含量≥90％。本发明还公开了上述中药制剂的制备方法。本发明制剂具有明显的利胆、消炎、降酶作用，对于急慢性传染性肝炎，都显示有良好的疗效和独特的作用，且安全无毒，为肝病患者提供了一种疗效显著、使用方便的新型药物。对促进肝病患者恢复健康，减低肝病死亡率，减少肝癌发病均具有积极的意义。
文档编号A61P1/16GK1403099SQ0112670
公开日2003年3月19日 申请日期2001年9月7日 优先权日2001年9月7日
发明者娄如菊 申请人:娄如菊