作为内皮肽转化酶抑制剂的吡咯烷衍生物的制作方法

专利名称：作为内皮肽转化酶抑制剂的吡咯烷衍生物的制作方法
吡咯烷衍生物本发明涉及这样一些化合物，它们可用作金属蛋白酶例如锌蛋白酶，特别是锌水解酶的抑制剂，并且它们可有效地预防和治疗与血管收缩的增加的发生率有关的疾病。这些疾病的例子是高血压、冠心病(coronarydisorders)、心机能不全、肾和心肌缺血、肾机能不全、透析、脑缺血、心肌梗塞、偏头疼、蛛网膜下出血、Raynaud综合症和肺动脉高血压。另外，该化合物还用作细胞生长抑制剂和脑保护剂，用于抑制移植排斥、用于器官保护和用于治疗眼科疾病。
内皮素是一类肽，它们存在有三种同种型ET-1，ET-2，和ET-3，每一种均由一种不同的基因编码。1988年Yanagisawa(Yanagisawa M；Kurihara H；Kimura S；Tomobe Y；Kobayashi M；Mitsui Y；Yazaki Y；Goto K；Masaki T一种新的由血管内皮细胞产生的强效血管收缩肽[参见注释].NATURE(1988 Mar 31)，332(6163)，411-5.)最早在猪内皮细胞的条件培养基中发现它们。活性ETs是具有两个分子内二硫键的21个氨基酸的肽。它们由203到212个氨基酸的前原蛋白质产生，该前原蛋白质经弗林蛋白酶样内肽酶加工而形成无生物活性的大-内皮素(大-ET)。大-ETs经氨基酸21和22之间的水解切割被特异性地加工为成熟ETs，氨基酸21和22在大-ET-1和大-ET-2中是Trp21-Val22，在大-ET-3中是Trp21-Ile22。早在1988年就推测一种特定的金属蛋白酶负责这种特定的切割。1994年，从牛肾上腺纯化和克隆到ECE-1(内皮肽转化酶-1)(XuD，Emoto N，Giaid A，Slaughter C，Kaw S，de Witt D，Yanagisawa MECE-1一种催化大内皮素-1蛋白水解活化作用的膜结合金属蛋白酶.Cell(1994)78473-485.)。
ECE-1是一种II型膜结合锌-内肽酶，中性pH对其最适宜，并且具有一个锌结合基元HExxHx(＞20)E。它属于M13亚家族，具有一个较大的681个氨基酸的含有活性位点的胞外域。M13家族的其它成员有NEP24.11(中性内肽酶)，PEX，磷酸盐调节的中性内肽酶，以及最近才报道过的作为大-ET-3加工酶的Kell血型蛋白。人源M13家族成员的特征在于较大的分子量(＞80kDa)、若干保守的二硫键和复杂的糖基化模式。NEP的结构最近已有报道(Oefner等，J.Mol.Biol.2000，296，341-349)。ECE和相关的人M13蛋白酶的催化域比基质金属蛋白酶(MMPs)的成员明显要大得多(＞650个氨基酸)。不象MMPs家族属于蛋氨酸锌蛋白(metzincins)，表现典型的HExxHxxGxxH模式，M13家族成员是包含HExxHx(＞20)E模式的谷氨酸锌蛋白(gluzincins)。这两个家族在催化域的大小、结构和配体的锌配位模式方面明显不同。这两个家族的活性位点表现出明显的差异，其显然影响着抑制剂的种类和潜在的选择性。
本发明的一方面涉及通式I的化合物 其中R1为氢，烷基羰基，或芳基羰基；R2为烷基，烷基环烷基，烷基环烷基烷基，环烷基，卤代烷基，羧基烷基，氨基烷基，二烷基氨基烷基，烷氧基烷基，烷氧基羰基烷基，炔基(alkinyl)，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，芳基(烷氧基羰基)烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基或杂环基烷基；A为-C(O)-R3，-CH(OH)-R4，或-C(O)-NR5R6，其中R3和R4独立地选自(are independently form the group consisting of)烷基，芳基，芳基炔基，芳基烷基，和芳基烯基；R5为氢，烷基，环烷基，环烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基；R6为烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羟基烷基，羟基烷基-(羟基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基，环烷基，环烷基烷基，或羧基烷基，或R6选自式IIa，IIb，和IIc； 或者A的-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元饱和环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R7为氢，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，杂芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，或杂芳基烷基；或式III的化合物 R7A为氢或烷基；R8为-OR9或-NR10R11，其中R9为氢，烷基，芳基烷基；R10为氢或烷基；R11为烷基，芳基，杂芳基，芳基烷基，或-NR10R11代表5或6元环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R12为烷基，芳基，或芳基烷基；Y为-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-；m为0，1，或2；X为-SO2，-CO-，-C(O)O-，-SO2NH-，或-C(O)NR13-其中R13为氢，烷基，芳基、或羧基烷基；
以及其二聚体形式，和/或其药用酯，和/或其药用盐。
术语″烷基″，单独或组合，指含有最多7个，优选最多4个碳原子的直链或支链烷基，例如甲基，乙基，n-丙基，2-甲基丙基(异-丁基)，1-甲基乙基(异-丙基)，n-丁基，和1，1-二甲基乙基(t-丁基)。
术语″羧基″指-C(O)OH基团。
术语″羰基″指-C(O)-基团。
术语″卤素″指基团氟，溴，氯和碘。
术语″烯基″指定义烷基的烃链具有至少一个烯属双键(olefinicdouble bond)(包括例如，乙烯基，烯丙基和丁烯基)。
术语″炔基(alkinyl)″指定义烷基的烃链具有至少一个烯属三键(olefinic triple bond)包括例如丙炔基，丁炔-(1)-基，等)。
术语″烷氧基″，单独或组合，指烷基醚基，其中术语“烷基”含义如前所述，例如甲氧基，乙氧基，n-丙氧基，异丙氧基，n-丁氧基，异丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基等。
术语″烷氧基羰基″指式-C(O)Rc的基团，其中Rc为前所定义的烷氧基。
术语″羟基″指基团-OH，术语″氰基″指基团-CN。
术语″羟基烷基″指被羟基取代的前面定义的烷基。
术语″硫烷基″和″氰基烷基″指分别被-SH基或-CN基取代的前面定义的烷基。
术语″卤代烷基″指被一到三个卤原子，优选氟取代的前面定义的烷基，例如三氟甲基，2，2，2-三氟乙基，等。
术语″烷基硫烷基″指式烷基-S-烷基的基团。
″羧基烷基″指被HOOC-基取代的前面定义的低级-烷基。
术语″烷基羰基″，单独或组合，指来源于烷烃羧酸的酰基，即烷基-C(O)-，例如乙酰基，丙酰基，丁酰基，戊酰基，4-甲基戊酰基等。
术语″环烷基″指具有3-8，优选3-6个碳原子的饱和的、环烃基，即环丙基，环丁基，环戊基和环己基等。
术语″氨基″指基团-NH2。
R2的术语″芳基″-单独或组合，指芳香碳环基，即6或10元芳香的或部分的芳香环，即苯基，萘基，四氢萘基，芴基或联苯基，优选苯基或萘基，最优选萘基。芳基，特别是苯基，任选地被独立地选自以下基团的一个或多个基团取代卤素优选氟，烷基，烷氧基，单-或二烷基氨基，羧基，烷氧基，和烷基羰基氨基。
R2的术语″杂芳基″单独或组合，指具有5到10个，优选5到6个环原子的芳香单-或双环基，其含有一到三个杂原子，优选一个杂原子，例如独立地选自氮，氧或硫。杂芳基的例子有噻吩基，异噁唑基，噻唑基，吡啶基，吡咯基，咪唑基，四唑基，优选噻吩基。任选地，杂芳基可以独立地被以下基团单-，二-或三-取代烷基，烷基羰基，卤素优选氟，烷氧基羰基，羟基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，羧基，烷氧基羰基烷基，优选烷基。优选的杂芳基是噻吩基。
R1和R3-R12的术语″芳基″-单独或组合，指芳香碳环基，即6或10元芳香环或部分芳香环，例如苯基，萘基或四氢萘基，优选苯基。芳基任选地被独立地选自下列基团的一个或多个基团取代卤素优选氟，烷氧基羰基例如甲基羰基，烷基氧羰基烷氧基，羧基，羧基烷氧基，氰基，烷基，烷氧基，苯基，苯氧基，苯基烷基，苯基烷氧基，三氟甲基，三氟甲氧基，羟基，烷基酰氨基，例如乙酰氨基，硝基，烷基磺酰基例如甲基磺酰基。优选的取代基是氟，羧基，烷基氧羰基，羟基，羟基烷基，烷氧基羰基烷氧基，羧基烷基，和羧基烷氧基。
术语″芳氧基″指经氧基与母结构结合的前面定义的芳基，即芳基-O-。
R3和R4-R10的术语″杂芳基″-单独或组合，指具有5-10，优选5-6个环原子的芳香单-或双环基，其含有一到三个杂原子，优选一个杂原子，例如独立地选自氮，氧或硫。杂芳基的例子有噻吩基，异噁唑基，噻唑基，吡啶基，吡咯基，咪唑基，四唑基，吲哚基，苯并咪唑基，噁二唑基，优选吡啶基，异噁唑基，苯并二氧杂环戊烯基和噻唑基，优选吲哚基，四唑基，苯并咪唑基，噁二唑基，和苯并二氧杂环戊烯基。任选地，杂芳基可以独立地被以下基团单-，二-或三-取代卤素，烷基，烷基羰基，烷氧基羰基，羟基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基，羧基，烷氧基羰基烷基，优选烷基或卤素，卤素优选氟。
术语″杂环基″-单独或组合，指具有5-10，优选5-6个环原子的非芳香单-或双环基，其含有一到三个杂原子，优选一个杂原子，例如独立地选自氮，氧或硫。任选地，杂环可以被独立地选自以下基团的一个基团取代卤素，烷基，烷氧基，氧羧基(oxocarboxy)，烷氧基羰基等，和/或在仲氮原子(即-NH-)上被烷基，芳基烷氧基羰基，烷基羰基取代，或在叔氮原子(即＝N-)上被环氧(oxido)取代。杂环基的例子是吗啉基，吡咯烷基，哌啶基等。
术语″二聚体型″指这样一种化合物，其中式I的两个相同化合物的两个R1基被一个共同的单键取代，或者其中R1是谷胱甘肽-S-或半胱氨酸-S-，或其酯和/或其烷基羰基或芳基羰基衍生物，例如乙酰基半胱氨酸-S-或苯甲酰基半胱氨酸-S-，优选谷胱甘肽-S-，半胱氨酸-S-，乙酰基半胱氨酸-S-或苯甲酰基半胱氨酸-S-。
术语″药用盐″指保留游离碱或游离酸生物有效性和特性的盐，它们并非生物学上或者其它方面上不合需要的。这些盐是通过与无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等和有机酸例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、丙酮酸、oxylic acid、马来酸、丙二酸、琥珀酸、反丁烯二酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、苯基乙醇酸、甲磺酸、乙磺酸、p-甲苯亚磺酸、水杨酸、N-乙酰基半胱氨酸等形成的。另外这些盐可以通过向游离酸加成无机碱或有机碱制备。来源于无机碱的盐包括但不限于，钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐等。来源于有机碱的盐包括但不限于，伯胺、仲胺和叔胺盐，取代的胺包括天然取代的胺，环胺和碱离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、赖氨酸、精氨酸、N-乙基哌啶，哌啶，聚乙烯亚胺(polymine)树脂等。
″药用酯″指通式(I)的化合物可以在功能基团上被衍生，得到能够在体内转化恢复成为原化合物的衍生物。这些化合物的例子包括生理可接受和代谢不稳定的酯衍生物，例如甲氧基甲基酯，甲基硫甲基酯和新戊酰氧基甲基酯。另外，通式(I)化合物的任何生理可接受的等价物、在体内能够产生通式(I)原化合物的类似的代谢不稳定酯在本发明范围内。
式(I)化合物用于抑制哺乳动物金属蛋白酶活性，尤其是锌水解酶活性。更具体地说，式(I)化合物用作治疗和预防与内皮素-转化酶(ECE)活性导致的疾病有关的病症的药物。对该酶的抑制将在治疗以下疾病中有用，心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫、肾病、动脉硬化症、Buerger’s症、Takayasu’s关节炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、胃肠道失调(gastrointestinal disorders)、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼。另外，该化合物还可用作细胞生长抑制剂和脑保护剂，用于抑制移植排斥、用于器官保护，以及用于治疗眼科疾病。
更具体地说，本发明涉及式(I)的化合物 其中R1为氢，烷基羰基，或芳基羰基；R2为烷基，烷基环烷基，烷基环烷基烷基，环烷基，卤代烷基，羧基烷基，氨基烷基，二烷基氨基烷基，烷氧基烷基，烷氧基羰基烷基，炔基，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，芳基(烷氧基羰基)烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基或杂环基烷基；A为-C(O)-R3，-CH(OH)-R4，或-C(O)-NR5R6，其中R3和R4独立地选自以下基团烷基，芳基，芳基炔基，芳基烷基，或芳基烯基；R5为氢，烷基，环烷基，环烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基；R6为烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羟基烷基，羟基烷基-(羟基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基，环烷基，环烷基烷基，或羧基烷基，或R6选自式IIa，IIb，或IIc；
或当A的-C(O)-NR5R6中-NR5R6代表5或6元饱和环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R7为氢，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，杂芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，或杂芳基烷基；或式III的化合物 R7A为氢或烷基R8为-OR9或-NR10R11，其中R9为氢，烷基，芳基烷基；R10为氢或烷基；R11为烷基，芳基，杂芳基，芳基烷基，或基团-NR10R11代表5或6元环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R12为烷基，芳基，或芳基烷基；Y为-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-；m为0，1，或2；X为-SO2，-CO-，-C(O)O-，-SO2NH-，或-C(O)NR13-其中R13为氢，烷基，芳基，或羧基烷基；和其二聚体形式，和/或其药用酯，和/或其药用盐，优选其药用酯，和/或其药用盐，最优选其药用盐。
本发明特别涉及式(I)的化合物，其中R1为氢或烷基羰基，优选R1为氢或乙酰基，更优选R1为氢。
进一步说，本发明涉及上述化合物，其中R2为烷基，烷基环烷基，烷基环烷基烷基，环烷基，卤代烷基，羧基烷基，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，或芳基(烷氧基羰基)烷基，优选其中R2为烷基，芳基或芳基烷基，更优选其中R2为烷基，苯基或萘基，最优选其中R2为萘基。
本发明更优选的实施方案是上述化合物，其中R3和R4独立地选自烷基，苯基，苯基炔基，苯基烷基，或苯基烯基，优选R3为烷基，苯基，苯基炔基，或R4为苯基炔基，苯基烷基，或苯基烯基。
本发明另一个优选的实施方案涉及式(I)的上述化合物，其中A为-C(O)-NR5R6。
本发明的再一个优选的实施方案涉及上述化合物，其中X优选为-SO2-或-C(O)(O)-。
在本发明的一个优选实施方案中，m为0或1，优选m为0。
在本发明的更优选的实施方案中，式(I)化合物的特征在于R5为烷基，环烷基，环烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基，优选R5为烷基，芳基烷基，或环烷基。
本发明特别地涉及上述化合物，其中A的-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元环，例如哌啶基或吡咯烷基，优选哌啶基，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基，优选烷氧基羰基或羧基。-NR5R6优选为哌啶基或吡咯烷基，任选地被烷氧基羰基或羧基取代，更优选-NR5R6为哌啶基。
在一个优选的实施方案中，R6为烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羟基烷基，羟基烷基-(羟基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基，环烷基，环烷基烷基，羧基烷基，或基团-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表前面定义的5或6元环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基，或R6为下式的基团
其中R7，R7a，R8和R12如前面的定义。优选，R7为氢，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基；R7A为氢或烷基，R8为OR9或-NR10R11，其中R9为氢，烷基，芳基烷基；R10为氢或烷基；R11为芳基，杂芳基，芳基烷基，或者基团-NR10R11形成如前面所定义的-NR5R6一样的5或6元饱和环；Y优选为-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-，更优选-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-，R12为烷基，芳基或芳基烷基。
在一个优选实施方案中，本发明包括上述化合物，其中R6为烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羟基烷基，羟基烷基-(羟基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，环烷基，环烷基烷基，羧基烷基，或杂环基，优选其中R6为烷基，烷基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，杂芳基烷基，羧基烷基，更优选其中R6为烷基，烷基羰基烷基，苄基，四唑基乙基，苯基羰基甲基，或噁二唑基甲基。
本发明还包括这样的化合物，其中R6为式(IIa)或(IIb)的基团 其中R7为氢，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，杂芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基，芳基烷基或杂芳基烷基；或R7为式III的基团
其中Y为-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-，R12为芳基，优选苯基，R8为OR9或-NR10R11，其中R9为氢，烷基，芳基烷基；R10为氢或烷基；R11为芳基，杂芳基，芳基烷基。
另外，本发明涉及上述化合物，其中R6为下式的基团 其中R7和R8如前面所定义。
在上述化合物中，优选R7为氢和R8为-NR10R11，R10和R11如前面所定义。在这些化合物中，R10优选为氢或甲基，R11优选为芳基，更优选R11为苯基，任选被以下基团取代烷氧基羰基，羧基，或羟基烷基。
本发明的另一个优选实施方案涉及这样的化合物，其中A为-C(O)-R3或-CH(OH)-R4。R3和R4如前面所定义。
本发明的一个最优选的实施方案包括下式的化合物 其中R1，R2，A和X如前面所定义。
本发明的优选实施方案是实施例中举例说明的那些化合物。本发明特别包括下列化合物a)(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯；b)(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸；c)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺；d)(2S，4R)-2-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯；e)(2S，4R)-2-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸；f(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸；g(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯；h(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺；i)(2S，4R)-3-{苄基-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸；j)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸环丙基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺；k)(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-3-甲基-丁-1-酮；l)(2S，4R)-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-(3-甲基-丁基)-氨基]-乙酸；m)(2S，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸异丙酯；n)(2S，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸戊酯；o)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺；p)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸己基-甲基-酰胺；q)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-氧代-2-苯基-乙基)-酰胺；
r)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(4-甲基-2-氧代-戊基)-酰胺；s)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(3-甲基-丁基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基-酰胺；t)(2S，4R)-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸丁酯；u)(2S，4R)-4-巯基-2-(3-苯基-丙酰基)-吡咯烷-1-羧酸丁酯；v)(2S，4S)-1-[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯；和w)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯。
这些化合物在放射性免疫分析中(对于ECE-抑制的E(E on ECE-inhibition)，参见下面)显示IC50值约为5nM到1000nM。
上述化合物的制备方法包括式1化合物(反应路线3) 其中R2，X和m如上所定义，和PG为硫保护基团，例如S-三苯甲基，S-对-甲氧基苄基或S-乙酰基，与胺HNR5R6反应，其中R5和R6如上所定义，得到式2化合物(反应路线3)。
本发明还涉及含有上述化合物和药用赋型剂的的药物组合物。
本发明的进一步实施方式涉及上述化合物作为活性成分在生产药物中的应用，该应用包括上述化合物用于预防和治疗内皮肽转化酶(ECE)活性导致的疾病，特别是心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫(pre-eclampsia)、肾病、动脉粥样硬化、Buerger’s症、Takayasu’s关节炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、肠胃失调、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼、移植排斥、与细胞抑制的、眼科的和脑保护性适应症有关的疾病，以及器官保护。
本发明进一步涉及上述化合物用于治疗或预防以下疾病的应用，与心肌缺血有关的疾病、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫、肾病、动脉粥样硬化、Buerger’s症、Takayasu’s关节炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、肠胃失调、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼、移植排斥、与细胞抑制的、眼科的和脑保护性适应症有关的疾病，以及器官保护。
另外，本发明包括上述化合物用作治疗活性物质，特别是用做与锌水解酶活性有关的疾病的治疗活性物质，例如心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫、肾病、动脉粥样硬化、Buerger’s症、Takayasu’s关节炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、肠胃失调、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼、移植排斥、与细胞抑制的、眼科的和脑保护性适应症有关的疾病，以及器官保护的治疗活性物质。
本发明还包括治疗性和/或预防性处理以下疾病的方法，心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫、肾病、动脉粥样硬化、Buerger’s症、Takayasu’s关节炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、肠胃失调、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼、移植排斥、与细胞抑制的、眼科的和脑保护性适应症有关的疾病，以及器官保护，所述方法包括将上述化合物施用给人或动物。
本发明还涉及上述化合物用于抑制锌水解酶活性的应用。
本发明还涉及通过下述方法制备的上述化合物。
式(I)化合物可以按照本领域已知的方法或如下所述的方法制备。除非另有指明，取代基R1，R2，R3，R4，R5，R6，R7，R7a，R8，R9，R10，R11，R12，A，m，X和Y如上所述。
用于制备式(I)化合物的中间体(酸)的合成如反应路线1所示。起始原料可以商业购买，或按照本领域已知方法从羟基脯氨酸合成，例如在″肽合成实践(The Practice of Peptide Synthesis)″，M.Bodanszky和A.Bodanszky，Springer Verlag，Berlin，1984中所描述。
反应路线1步骤a描述了羟基和氨基基团的全硅烷化(persilylation)，例如通过化合物1与六甲基二硅氮烷在140℃下反应，随后在THF中与R2SO2Cl反应，或转化成所有其它的下述R2X或二-叔-丁基碳酸氢盐，在二噁烷中的NaHCO3，H2O(BOC保护)。
为了使构型反转(通过甲磺酸酯)，将得到的醇2用MeSO3H、Ph3P、DIAD或DEAD在甲苯中处理(室温至80℃)，或(通过溴化物)用LiBr、DEAD、Ph3P在THF中处理(4℃至室温)，或(通过氯化物)用Ph3P、CCl4在CH2Cl2中处理(3℃至室温)。如果仍保持该构型(通过甲磺酸酯或甲苯磺酸盐)，醇2可以通过与MeSO2Cl、吡啶、DMAP或TosCl、吡啶、DMAP在CH2Cl2中反应，转化成式3化合物(0℃至室温)。
为了引入保护的硫醇部分，式3化合物用例如三苯基甲硫醇或4-甲氧基苄基硫醇和K-Ot-Bu在DMF中处理(对于Br0℃至室温；对于Cl0℃；对于甲磺酸酯室温至100℃)，或用硫代乙酸钾在DMF中、室温至100℃下处理(步骤c)。
如果X-R2＝BOC和R＝/t-丁基，可以用TFA在CH2Cl2中、-20℃至室温下完成去保护，得到胺。为了引入新的R2，该胺可以与R2OCOCl/吡啶在THF中反应，或与R2OH/Cl3COCl/喹啉反应(形成氯甲酸酯)，随后如果新的R2X是氨基甲酸酯，与NaH反应。如果R2X是磺酰胺，该胺任选地在催化的DMAP或DMAP-poly.(在CH2Cl2中)存在下、室温下用R2SO2Cl，(i-Pr)2EtN处理，或如果R2X是酰胺，该胺可以与R2COOH，EDCI，DMAP反应。
应用在THF中的含水氢氧化锂(0℃至室温)或在乙醇中的氢氧化钠，可以获得酯4的水解(PG＝乙酰基，步骤d)，得到酸5，如果是叔-丁基酯，可以用TFA在CH2Cl2中完成皂化。
对于化合物5到化合物6的反应(步骤e)，可以使用Arndt-Eistert反应。因此，如果m＝1，可以采用下列步骤在0℃至室温下加入在CH2Cl2中的(COCl)2，cat DMF，得到相应的酰基氯，随后在0℃至室温下与三甲基甲硅烷基重氮甲烷在THF，CH3CN中反应，得到相应的重氮乙酮(diazoethanone)，在-25℃至室温下应用苯甲酸银重排成甲基酯，随后通过含水氢氧化锂在THF中(0℃至室温)或氢氧化钠在乙醇中进行酯裂解，得到化合物6。对于m＝2，可以将式5化合物转化成相应的Weinreb酰胺(例如HCl.HNMeOMe，NMM，EDCI，HOBT)，和转化成醛(LAH，-78至-30℃，在THF中)。可以通过Horner-Emmons反应(例如(EtO)2P(＝O)CH2COOEt，在THF中的NaH)转化得到的化合物，随后应用含水氢氧化锂在THF中(0℃至室温)或氢氧化钠进行双键的还原(例如在MeOH中的Mg)和酯的皂化，得到化合物6。
BOC取代其它的R2X，随后可以通过BOC-裂解和用上述试剂处理胺。
从S-乙酰基保护的酯4开始，用0.1M LiOH在THF中或1M NaOH在THF中进行酯和硫酯部分的皂化，得到硫醇，将其用碘和三乙胺或iPr2NEt在CH2Cl2中处理，得到二硫醚-二酸7(步骤f，反应路线1)。

其中o＝1，对于R7＝H或o＝0，对于R7＝/H进一步修饰在 c.对于RaCO2Me到CH2OH如d.对于RaCH2OH到CH2OMee.对于RaCH2OH到CH2OTBDMS R6＝COOt-Bu R5＝苯乙基 反应路线2R6′＝COOtBu，[1，2，4]oxadiazol，CN(参见反应路线P)
在偶合成按照反应路线1制备的酸之前，可以如反应路线2a所描述，容易地连接上侧链A。将适当保护的氨基酸用TPTU、在CH2Cl2中的4-甲基吗啉和适当的胺NHR10R11处理，或用2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪、4-甲基-吗啉、胺NHR10R11和在DMF中的4-二甲基氨基-吡啶处理。或者，通过将酸1转变成相应的氯化物(例如在甲苯中的草酰氯)或转变成相应的混合的酐(例如在DMF中的异丁基氯甲酸酯和N-乙基吗啉)，随后用在DMF中的所需的胺NHR10R11处理；制备酰胺2。
如果是BOC-保护通过用TFA在CH2Cl2中处理，如果是Z-保护通过氢化(例如10％Pd/C，H2在MeOH中(在HCl存在下)，或10％Pd/C，H2在MeOH/NEt3中)，可以获得胺3的去保护(步骤b)。
在去保护前可以进行侧链的进一步修饰通过用在THF中的硼氢化锂处理，芳香环(Ra)的酯部分可以被还原成羟基甲基基团(50℃，2h，步骤c)。应用TBDMSCl和咪唑在THF中、5℃至室温下12h，其可以被保护作为TBDMS(步骤d)，或者通过用氢化钠、烷基碘化物在DMF中处理，将其转化成醚(步骤e)。
应用反应路线2b描述的反应路线可以制备其它的胺即胺4与溴衍生物5烷基化得到相应的仲胺6(步骤f)。
反应路线3
可以如反应路线3所描述，从酸1和相应的NHR5R6制备式(I)化合物。为了合成硫保护的酰胺2，可以使用几种方法TPTU、NMM或iPr2Net、HNR5R6在CH2Cl2中或EDCI、HOBT、HNR5R6在DMF中，将该酸转变成相应的氯化物(例如在DMF中的草酰氯)或转变成相应的混合的酐(例如在DMF中的1-丙基-或乙基氯甲酸酯)，随后用在DMF中的HNR3R4处理(步骤a)。
如果PG是p-甲氧基苄基或三苯甲基，应用三乙基硅烷在TFA中或三异丙基硅烷在TFA中，如果PG是乙酰基，应用氢氧化锂在THF/水中或醇钠(sodium alkoholates)在THF中，可以获得硫基部分的去保护(步骤b)。
如果PG是同型二聚体，用三-n-丁基膦和水在2，2，2-三-氟乙醇中或DTT、2M aq.K2CO3在MeOH、THF中裂解二硫化物，得到硫醇化合物3。
如果R2X＝BOC，可以通过BOC去保护(例如TFA、CH2Cl2在0℃至室温下)引入最终的R2X，得到胺，其可以进一步被修饰。
如果R2X是氨基甲酸酯，该胺可以与R2OCOCl、吡啶或(i-Pr)2EtN在THF或CH2Cl2中反应，或通过与(a)R2OH、Cl3COCl，喹啉(形成氯甲酸酯)反应，随后与NaH反应。如果R2X是磺酰胺，该起始化合物可以与R2SO2Cl、(i-Pr)2EtN、cat DMAP在CH2Cl2中、室温下反应。如果R2X是脲，该起始化合物可以与异氰酸酯在EtOH中、室温下反应。如果R2X是烷基化的脲，该起始化合物可以与异氰酸酯在EtOH中、室温下反应，随后与相应的烷基卤化物、K-OtBu在0℃至室温下反应。如果R2X是酰胺，该起始化合物可以与R2COOH，EDCI，DMAP反应(形成酐)，随后在-10℃至室温下加入起始的胺，或者备选地与R2COOH/EDCI/DMAP在室温下反应。如果R2X是磺酰胺(R13为H)，该胺可以在过量的三乙胺存在下与氨磺酰氯在二噁烷中反应。可以从R2NH2和氯磺酸在CH2Cl2中、0℃至室温下反应，随后与PCl5在甲苯中、75℃下反应，合成该氨磺酰氯。备选地，可以在乙睛中R2NH2和磺酰氯在0℃至65℃下反应，合成该氨磺酰氯。如果R2X是烷基化的磺酰胺(R13不为H)，该磺酰胺R2SONH-可以与NaH、烷基卤化物在DMF中、0℃至室温下反应。
如果其中R6含有氰基部分，用三乙基硅烷在TFA中、0℃至室温下处理，可以获得还原成酰胺，并伴随有S-PMB-醚裂解。应用三乙基硅烷在TFA中、0℃下15分钟，可以完成选择性的硫基去保护。通过用叠氮化钠和氯化铵在DMF中、70-120℃下处理，随后如上所述去保护(例如TFA，Et3SiH，回流)，在R6位的残基的进一步修饰可以将氰基部分转化成四唑。
如果其中R6为式(II)，其中R8为OR9，通过应用氢氧化锂在THF中的酯皂化，随后通过此前描述的方法之一与胺NHR10R11成酰胺(步骤c，d，反应路线3)，可以获得侧链的进一步的修饰。化合物5可以按照上述方法进行去保护(步骤e，参见步骤b)。
如果其中残基R7或R11中的一个含有酯，其可以在S-去保护前被水解(对于S-PMB或S-Tr)，或者对于同型二聚体，应用在THF中的氢氧化锂或在THF中的氢氧化钠。
R11修饰的进一步的方法包括将酯还原成甲基羟基基团(例如用在THF中的硼氢化锂)，或按照本领域公知的方法对醇部分去保护(例如HF乙腈，CH2Cl2)。应用例如氢化钠、烷基卤化物在THF或DMF中，或2，2，2-三氯乙酰亚胺酸叔-丁酯与三氟甲磺酸在CH2Cl2、c-己烷或CCl4中，可以任选将该烷醇(alkohol)烷基化。
通过处理化合物2，如果R12Y是磺酰胺，应用R12SO2Cl、(i-Pr)2EtN、cat DMAP在CH2Cl2中室温下处理，如果R12Y是氨基甲酸酯，应用R12OCOCl、吡啶或(i-Pr)2EtN在THF或CH2Cl2中处理，如果R12Y是脲，起始化合物可以与异氰酸酯在EtOH中室温下反应，如果R12Y是酰胺，应用R12COOH、EDCI、DMAP在-10至℃室温下处理，如果R12Y是醚，应用反应性烷基卤化物或者芳基烷基卤化物处理，可以进一步修饰酪氨酸的羟基部分。为了S-PMB和S-Tr应用三乙基硅烷、TFA进行硫基部分的去保护，或者应用三-n-丁基膦和水在2，2，2-三-氟乙醇中或DTT、2M K2CO3水溶液在MeOH、THF中进行二硫化物的裂解，得到化合物7(步骤f，b)。并且，其中A为-CONR5R6的式(I)化合物可以如反应路线4所描述制备。用胺H2NR5或H2NR6、EDCI、HOBT在THF中处理该酸1，或应用上述描述的成酰胺的其它方法中的一种，随后用三乙基硅烷在TFA中回流下进行硫基部分的去保护，得到酰胺3(步骤a，b)。通过烷基化可以引入第二个取代基。因此，可以用反应性的R5-卤化物和氢化钠在DMF中处理酰胺2，用三乙基硅烷在TFA中S-Tr或S-PMB去保护后，得到酰胺4。如果R6含有酯，α-烷基化会导致侧链A的修饰(例如a.LiHMDS，b.R5-Br在THF中)。通过去保护可以获得酰胺5(步骤d，b)。
反应路线4
反应路线5
四唑衍生物可以如反应路线5所述制备。通过用氨基四唑、HOBT、EDCI在THF中处理，随后用DBU在CH2Cl2中处理，或应用上述的一种方法，可以将酸1转化成含有四唑部分的酰胺2(步骤b)。对于四唑氨基衍生物的合成，参见例如Sephane De Lombaert，作为中性肽链内切酶抑制剂的四唑基烷基氨基甲基膦酸酯的制备。美国专利5,273,990 A 931228或S.De Lombaert等，医学化学杂志(J.Med Chem)，2000，43，488-504等文献在此引用。在引入侧链前，或通过处理酰胺2(例如4-甲氧基苄基氯，NaI，Et3N在丙酮中)，该四唑部分可以被保护(例如PG2为CH2CH2CN)。
含有PG2-保护的四唑进行烷基化(例如氢化钠、烷基卤化物在DMF中)，硫基和四唑部分去保护(例如三乙基硅烷，TFA，80℃)后，得到化合物3(步骤c，b)。
如果是未保护的四唑衍生物2(PG2为H)，应用氢化钠、烷基卤化物在DMF中进行烷基化，可以得到二烷基化的区域异构体(regioisomers)的混合物，其可以被分离和去保护(例如三乙基硅烷，TFA，80℃)，得到化合物5和6(步骤d，b)。
用于修饰残基R2X的另一种方法如反应路线6所描述。
用LDA处理甲基磺酰胺衍生物1，随后用例如苄基溴进行烷基化，然后通过用NHR5R6、HOBT、EDCI在DMF中处理或上述任何其它的成酰胺的方法，转化成酰胺2(步骤a，b)。应用LiHMDS，随后用例如苄基溴处理，可以完成二烷基化，然后转化成酰胺4。在这两种情况下，应用三乙基硅烷在TFA中处理，可以获得硫醇的去保护。
在反应路线7中描述了备选的合成路线，其中在引入硫基部分前，进行成酰胺反应。通过TPTU在CH2Cl2、NMM中，或者通过用EDCI、CH2Cl2、NMM在CH2Cl2中处理，随后用胺NHR3R4处理，或通过前面反应路线中所描述的任何其它成酰胺方法，将酸1予活化。为了使构型反转(通过甲磺酸酯)，将得到的醇2用MeSO3H、Ph3P、DIAD或DEAD在甲苯中处理(室温至80℃)，或(通过溴化物)用LiBr、DEAD、Ph3P在THF中处理(4℃至室温)，或(通过氯化物)用Ph3P、CCl4在CH2Cl2中处理(3℃至室温)。如果仍保持该构型(通过甲磺酸酯或甲苯磺酸盐)，醇2可以通过与MeSO2Cl、吡啶、DMAP或TosCl、吡啶、DMAP在CH2Cl2中反应，转化成式3化合物(0℃至室温)。
例如通过硫代醋酸钾在DMF中处理，可以转化成相应保护的硫基化合物4。
如果R2X部分需要进一步修饰，如果R2X为BOC，可以应用TFA在CH2Cl2中去保护，随后通过应用反应路线1和3中描述的试剂处理，进一步修饰去保护的胺。
通过用在THF中的0.1M氢氧化锂或在THF中的氢氧化钠(所有其它的酯裂解)处理，或用在THF中的醇化钠处理，可以获得硫酯4的裂解，得到化合物5。
反应路线6
反应路线7
反应路线8
如反应路线8所描述，可以制备式(I，A＝-C(O)-R3或-CH(OH)-R4)的酮和醇。在该反应路线中，基团R3还包括如上所述的R4的定义。通过与NHMeOMe.HCl，Me3Al(过量)在甲苯中反应，或者用TPTU，Huenig碱在DMF中、室温下予活化酸1，随后与NH(OMe)Me反应，可以将起始的酸1转化成Weinreb衍生物。
如果R2X＝BOC，可以通过BOC去保护(例如TFA、CH2Cl2在0℃至室温下)引入最终的R2X，得到胺，其可以进一步与反应路线1或3中化合物的一种试剂反应。
可以用金属有机化合物(例如R3MgBr在THF中或R3Li在-25℃至室温下THF中)处理Weinreb衍生物2，得到S-保护的酮3。通过使用DMSO、Me3SiCl在乙腈中氧化成相应的二硫化物，随后应用DTT在碳酸钾存在下甲醇中或应用三乙基硅烷在TFA中，裂解二硫化物，得到酮4。应用iPr3SiH、TFA在CH2Cl2中可以获得去保护并还原成醇5。
为了合成型12的酮(步骤i，b，c)，通过用TPTU，Huenig碱在DMF中、室温下予活化酸1，随后与NHR5CH2NH(OMe)Me反应，可以将起始的酸1转化成相应的Weinreb衍生物10。用金属有机化合物(例如R3MgBr在THF中或R3Li在-25℃至室温下THF中)处理，随后用三乙基硅烷在TFA中去保护，可以从Weinreb衍生物10制备所需的酮。
备选地，可以从酯6制备醇5(m＝0)，它是通过选择性地还原到醛7(例如二-异丁基铝氢化物在甲苯、THF中、-78℃下(步骤e))，随后用金属有机化合物(例如R3MgBr在THF中或R3Li在-25℃至室温下THF中，步骤f)处理，得到非对映异构体混合物的醇8。如果R3含有三键，其可以任选被还原(H2/Pd/C在MeOH中、1atm下)。为了引入保护的硫基部分，可以用乙酸钾在DMF中、100℃下处理化合物8 2.5小时。非对映异构体分离后，通过用1N LiOH在EtOH中处理，从S-Ac前药中解离出单一化合物(步骤h)。
对于制备式(I)化合物，反应路线9，10-树脂合成的反应路径如下所示如反应路线1所描述从羟基脯氨酸合成起始的原料1。TFA、三异丙基去保护在回流下30分钟得到硫醇2(步骤a)。在附着到树脂上之前或树脂上的酮制备后，可以引入最终的R2X(反应路线10)。对于第二种情况，R2X理想地含有FMOC。按照本领域已知方法，例如在″肽合成实践(ThePractice of Peptide Synthesis)″，M.Bodanszky和A.Bodanszky，Springer Verlag，Berlin，1984中所描述，其可以从起始酸1的R2X(＝BOC)到非酸的不稳定保护基团(例如R2X＝FMOC，先用40％TFA在CH2Cl2中室温下选择性BOC-去保护，随后与在二噁烷/水中的Fmoc-Osu和作为碱的NaHCO3反应)制备。
该树脂可以从下列制备(步骤b，反应路线9)用TPTU、二异丙基乙基胺在DMF中活化连接剂4-(α，α-二苯基羟基甲基)苯甲酸，加入到二苯甲基胺树脂3中。然后用硫醇2在CH2Cl2、TFA中处理树脂4，得到树脂负载的起始原料5。
最终式(I)化合物的合成如反应路线10所示通过预活化酸1(TPTU、Huenig碱在DMF中室温下)，随后通过与NH(OMe)Meo反应，将树脂连接的酸1转化成相应的Weinreb衍生物2。用R5MX型的金属有机化合物处理化合物2，得到树脂结合的酮3，其可以通过用TFA、iPr3SiH在CH2Cl2中室温下处理进行分离(步骤d)。
如果R2X＝FMOC，在该树脂的化合物分离前，可以完成R2的进一步修饰。因此，用20％哌啶在DMF中处理FMOC保护的化合物2，随后通过反应路线1和3中合成描述的方法引入新的R2X。
反应路线9
反应路线10
通过应用相应的酐或酰基氯处理硫醇1(例如Ac2O/吡啶在CH2Cl2中室温下或AcCl/吡啶在CH2Cl2中(步骤a))，可以完成前药的制备(反应路线11)。如果残基A含有羧酸部分，其可以转化为酯(例如乙醇，EDCI，DMAP，CH2Cl2，步骤b)。
如步骤c所述，通过用Ac-Cys(NPys)-OH在DMF中处理硫醇1，可以制备二硫化物衍生物。
基于式I的化合物抑制金属蛋白酶活性，特别是锌水解酶活性的能力，式I的化合物可以用作治疗和预防与血管收缩发病率的增加有关的疾病的药物。这些疾病的例子是高血压、冠心病、心机能不全、肾和心肌缺血、肾机能不全、透析、脑缺血、心肌梗塞、偏头疼、蛛网膜下出血、Raynaud综合症和肺动脉高血压。它们还可以被用于动脉粥样硬化症、预防气泡-诱导的血管膨胀(balloon-induced vascular dilation)后的再狭窄、炎症、胃和十二指肠溃疡、脚溃疡(ulcus cruris)、革兰氏阴性脓血症、休克、肾小球肾炎、肾绞痛、青光眼、哮喘，治疗和预防糖尿病并发症和在环孢菌素给药中的并发症，以及其它与内皮素活性有关的疾病。
式I化合物抑制金属蛋白酶活性，特别是锌水解酶活性的能力可以通过各种本领域普通技术人员已知的体外和体内分析方法证明。
A)细胞培养将一株稳定的人脐静脉内皮细胞系(ECV304)培养于所述的″细胞工厂″直到铺满为止(Schweizer等1997，Biochem.J.328871-878)。在铺满状态，将细胞用胰蛋白酶/EDTA溶液脱附，然后经低速离心收集。用磷酸盐缓冲盐水pH 7.0漂洗细胞沉淀物一次，于-80℃储藏直到使用。
B)来自ECV304细胞的ECE的溶解(solubilization)如果没有其它说明所有步骤都在0-4℃下进行。将1×109个细胞的细胞沉淀悬浮于50ml缓冲液A(含有5mM MgCl2，100μM PMSF，20μM E64，20μM亮抑酶肽的20mM Tris/HCl，pH 7.5)，然后超声处理。得到的细胞匀浆在100,000gav离心60分钟。弃取上清液，得到的膜沉淀物在50ml缓冲液A中匀浆，然后如上所述离心。膜成分在缓冲液A中的漂洗重复进行两次。最后的膜制品在50 ml缓冲液B(缓冲液A+0.5％吐温20(v/v)，0.5％CHAPS(w/v)，0.5％洋地黄皂苷(w/v))中匀浆，在4℃下振荡2小时。之后保留的膜成分如上所述沉降。得到的含有溶解的ECE的澄清上清液以1.0ml的整份于-120℃下贮藏，直到使用。
C)ECE的分析该分析法测定了来自人大ET-1的ET-1的产生量。为了测定大量样品，发明了在96孔平板中进行的分析法。酶反应和产生的ET-1的放射性免疫检测在同一个孔中进行，应用特别研制和优化的包被技术。
D)平板的包被将Fluoronunc Maxisorp White(代码437796)96孔平板在UVStratalinker 2400(Stratagene)中用1焦耳照射30分钟。然后向96孔平板的每个孔中加入300μl蛋白A溶液(2μg/ml在0.1M Na2CO3pH 9.5中)，在4℃保温48小时。包被的平板在4℃下能够储藏高达3周直到使用。
使用前，弃去蛋白A溶液，在4℃下用0.1M Na2CO3pH 9.5中的0.5％BSA封闭平板2小时。
用重蒸水洗平板，然后准备进行ECE分析。
E)筛选分析溶解试验化合物，并在DMSO中稀释。向孔中加入10μl DMSO，然后加入125μl含有200ng大ET-1的分析缓冲液(50mM Tris/HCl，pH 7.0，1μM Thiorphan，0,1％NaN3，0.1％BSA)。加入50μl溶解的ECE(在分析缓冲液中稀释1∶30到1∶60倍(v/v))起始酶反应。在37℃进行酶反应30分钟。加入10μl 150mM ETDA，pH 7.0终止酶反应。
放射性免疫分析ET-1 RIA原则上按照以前的报道进行(Loffler，B.-M.和Maire，J.-P.1994，Endothelium 1273-286)。向含有EDTA以终止酶反应混合物的平板中加入25μl含有20000cpm(3-(125I)Tyr)-内皮素-1的分析缓冲液和25μl ET特异性抗血清AS-3(在分析缓冲液中以1∶1000稀释)。平板混合后在4℃下保温过夜。之后，用平板清洗器吸出液相，用重蒸水洗一次。向清洗后的平板中加入200μl闪烁混合物(Microscint 40 LSC-Cocktail，Packard，代码6013641)，然后在Topcount中对每个孔记数2分钟。
用终浓度为0-3000pg ET-1/孔的合成的ET-1制备平板中的标准曲线。所有平板中都设置最大ECE活性(10μl DMSO存在下)的对照和背景产生ET-1免疫反应性(在10mM EDTA或100μM膦酰二肽的存在下)的对照。分析进行三次。
F)动力学分析通过改变分析中使用的底物浓度，可以用所述的分析模式确定使用的ECE制剂以及不同ECE抑制剂的动力学特征(即Km，Ki)。
G)细胞基础上的ECE分析按照报道将人ECE-1c在MDCK细胞中稳定表达(Schweizer等1997，Biochem.J.328871-878)。在潮湿空气/CO2(19∶1)的环境中，在附加10％(v/v)胎牛血清(FBS)，0.8mg/ml遗传霉素，100i.u./ml青霉素和100μg/ml链霉素的Dulbecco’s改进的Eagles’s培养(DMEM)中，在24孔平板中培养细胞至铺满。在ECE分析前，将培养基换成添加0.1％(w/v)BSA的0.5ml DMEM-HBSS 1∶1，10mM HEPES pH 7.0。加入终浓度为1％的DMSO中的抑制剂。加入0.42μM人大ET-1起始酶反应，在37℃的培养箱中进行1.5小时。温育结束后，迅速移出保温培养基，如前面所述，通过产生的ET-1的放射性免疫分析对等份样进行分析。
通过测定膦酰二肽(IC500.8±0.2uM)和CGS 314447(IC50 20±4nM)的特征性抑制常数，进行ECE筛选分析[De Lombaert，Stephane；Stamford，Lisa B.；Blanchard，Louis；Tan，Jenny；Hoyer，Denton；Diefenbacher，Clive G.；Wei，Dongchu；Wallace，Eli M.；Moskal，Michael A.；等内皮肽转化酶和中性内肽酶的强效非-肽双重抑制剂24.11.Bioorg.Med.Chem.Lett.(1997)，7(8)，1059-1064]。测得这两个抑制剂的IC50值与文献中报道的但用不同的分析方案测定的值无明显不同。在基于细胞的分析中，膦酰二肽显示IC50值为4μM。该分析还给出有关在生理得多的条件下抑制剂的抑制效力的其它信息，例如ECE被包埋入正常质膜的环境。需要重点陈述的是，筛选分析在存在1μM Thiorphan的条件下进行，以便阻断由于NEP24.11的活性导致的任何潜在的大ET-1的降解。当测定在有或无thiorphan条件下的ET-1的产生时，初步试验中MDCK-ECE-1c转染的细胞中不存在NEP活性。
按照上述方法，本发明的化合物在放射性免疫分析(对于ECE-抑制的E)中显示IC50值约为5nM-1000μM。优选化合物显示该值为5nM到1000nM。
按照前面所述，含有式I化合物的药物以及生产该药物的方法也是本发明的主题，所述方法包括将式I的一个或多个化合物和，必要时，一种或多种其它有治疗价值的物质混合起来制成盖仑(galenical)给药剂型。
该药物组合物可以口服给药，例如以片剂，包衣的片剂，糖锭剂，硬或者软明胶胶囊，溶液剂，乳剂或者混悬剂的形式。给药也可以通过直肠进行，例如使用栓剂；局部给药或者经皮肤给药，例如使用软膏剂，霜剂，凝胶剂或者溶液剂；或者胃肠外给药，例如可注射溶液。
对于制备片剂，包衣的片剂，糖锭剂，硬明胶胶囊，本发明的化合物可以与药学惰性的，有机或无机赋形剂一起混合。合适的片剂，糖锭剂，硬明胶胶囊的赋形剂的实例包括乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石，或者硬脂酸或者其盐。
软明胶胶囊的合适的赋形剂包括例如植物油，蜡，脂肪，半固体或者液体多元醇等；但是，根据该活性成分的性质，可能有软明胶胶囊根本不需要任何赋形剂的情况。
对于制备溶液剂和糖浆剂，可以使用的赋形剂包括例如水，多元醇，糖类，转化糖和葡萄糖。
对于制备注射溶液，可以使用的赋形剂包括例如水，醇，多元醇，甘油，和植物油。
对于制备栓剂和局部给药或经皮肤给药用剂，可以使用的赋形剂包括例如天然或者硬化油，蜡，脂肪，半固体或者液体多元醇。
该药物组合物还可以含有防腐剂，增溶剂，稳定剂，润湿剂，乳化剂，甜味剂，着色剂，调味剂，改变渗透压的盐，缓冲剂，包衣剂或者抗氧化剂。它们也可以含有其它的治疗上有价值的活性剂。
给药式I化合物的有效量的剂量根据特殊活性成份的性质、患者的年龄和要求以及施用方式来确定。通常，考虑大约0.1-100mg/kg体重/天的剂量，尽管当显示出指征时可以超过上述上限。
提供下列具体实施例作为帮助实施本发明的指南，而不是为了限制本实施例一般性注释和缩略语所有反应在氮气条件下进行。
缩略语aq.水，盐水饱和的NaCl水溶液，CH2Cl2二氯甲烷，DBU 1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯，DCHA二环己基胺，DEAD偶氮二羧酸二乙酯，DIAD偶氮二羧酸二异丙酯，DIEA二异丙基乙基胺，DMA二甲基乙酰胺，DMAP 4---甲基氨基吡啶，DMF二甲基甲酰胺，DMSO二甲亚砜，DTT1，4-二硫-DL-苏糖醇，EDCI N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺·盐酸盐，Et2O二乙基醚，EtOAc乙酸乙酯，EtOH乙醇，Fmoc 9-芴基甲氧基羰基，Fmoc-OSu N-(9H-芴-2-基甲氧基羰基氧基)琥珀酰亚胺，己烷己烷，HOBT 1-羟基苯并三唑，LAH氢化铝锂，LDA二异丙基氨基锂，LiHMDS双(三甲基甲硅烷基)氨基锂，MeOH甲醇，NaH氢化钠，NaK酒石酸盐酒石酸钠钾，NEM N-乙基吗啉，NMM N-甲基吗啉，PMB对甲氧基苄基，sat.饱和的，TBAF氟化四丁基铵，TBDMSCl叔丁基二甲基甲硅烷基氯，TFA三氟乙酸，THF四氢呋喃，TPTU 0-(1，2-二氢-2-氧代-1-吡啶基)-N，N，N’，N’-四-甲基脲鎓-四氟硼酸盐。
实施例1一般方法1.1.用氯甲酸乙酯的酰胺形成在0℃下向1当量(10-20ml/mmol)THF中的酸中加入1.1-1.3当量4-乙基吗啉，然后加入1.1-1.3当量氯甲酸乙酯。在该温度下搅拌悬浮液1小时，之后加入1.1-1.3当量THF中的胺。室温下搅拌混合液过夜，用EtOAc稀释，然后加入水。用1M HCl，水，NaHCO3水溶液，水，和盐水洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，过滤和蒸发。粗产品经快速色谱纯化。
1.2.用TPTU作为试剂的酰胺形成向(10-20ml/mmol)CH2Cl2中的1当量酸中加入1.1当量4-甲基吗啉，然后加入1.2当量TPTU和1.1当量胺。在室温下搅拌该溶液，直到检测不到起始原料。浓缩混合液，残留物溶解于EtOAc。有机相用1M KHSO4，5％NaHCO3水溶液和盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤和蒸发。粗产品经快速色谱纯化。
1.3.用EDCI作为试剂的酰胺形成向(10-20ml/mmol)THF中的1当量酸中加入2-3当量4-甲基吗啉，然后加入0.2当量HOBT，和1.2当量EDCI和1.1当量胺或胺·HCl。在室温下搅拌该溶液，直到检测不到起始原料。用EtOAc稀释混合液，残留物溶解于EtOAc。有机相用1M KHSO4，5％NaHCO3水溶液和盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤和蒸发。粗产品经快速色谱纯化。
2.1.磺酰胺的制备在室温下，在0.15-1.5当量DMAP(任选)存在下，用在(20-30ml/mmol胺)CH2Cl2中的(1.5当量/NH2)RSO2Cl处理1当量胺，直到TLC检测不到起始原料。加入1M HCl，用CH2Cl2萃取无机相，用1M HCl和盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥，过滤和蒸发。粗产物经快速色谱纯化。
2.2.碳酰胺(carbonamides)的制备在室温下，在0.15-1.5当量DMAP(任选)存在下，用在(20-30ml/mmol胺)CH2Cl2中的(1.5当量/NH2)RCOCl处理1当量胺，直到TLC检测不到起始原料。加入1M HCl，用CH2Cl2萃取无机相，用1M HCl，饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥，过滤和蒸发。粗产物经快速色谱纯化。
2.3.脲的制备在室温下，5当量Hüinigs碱存在下，用(5-10ml/mmol胺)CH2Cl2中的(2.1当量/NH2)R异氰酸酯处理1当量胺·HCl，直到TLC检测不到起始原料。加入1M KHSO4，用CH2Cl2萃取无机相，用盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥，过滤和蒸发。粗产物经快速色谱纯化。
3.1.BOC-裂解用(8-15ml/mmol BOC-胺)CH2Cl2∶TFA(2∶1-10∶1)处理1当量Boc-保护的胺，直到TLC检测不到起始原料。将该溶液倒进饱和NaHCO3水溶液，用EtOAc或CH2Cl2萃取无机相。用NaHCO3溶液洗涤合并的有机相，通过碳酸钠干燥，过滤和蒸发。
3.2.在S-三苯甲基存在下选择性BOC-脱保护的一般方法在-20℃下用34ml TFA处理30ml CH2Cl2中的15.1mmol N-BOC-S-三苯甲基化合物溶液，5.5小时内升温至室温。蒸发反应液，然后用饱和NaHCO3水溶液/EtOAc处理(3x)，有机相通过硫酸钠干燥，蒸发，得到游离氨基-三苯甲基硫烷基(sulfanyl)化合物。
4.1.用三-n-丁基膦的二硫化物裂解在0℃下用1.2-1.5当量三-n-丁基膦和(痕量)0.009当量H2O处理在(25-30ml/mmol)2，2，2-三氟乙醇中的1当量二硫化物，直到TLC检测不到起始原料。真空蒸发溶液，立即通过快速色谱在硅胶上纯化。
4.2.用DTT的二硫化物裂解向(15-30ml/mmol)MeOH-任选添加(10-15ml/mmol)THF或(10-15ml/mmol)乙腈中的1当量二硫化物中加入饱和K2CO3的MeOH溶液和1.1当量DTT。在室温下搅拌溶液，直到检测不到起始原料，用1M KHSO4水溶液(pH 2)酸化溶液，用EtOAc萃取无机相。用盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥，过滤和蒸发。粗产物通过结晶或柱色谱纯化。
4.3.二硫化物和酯的单罐(one-pot)裂解在0℃下向(50-60mmol)THF中的1当量二酯中加入(50-60ml/mmol)0.1M LiOH，在室温下搅拌该溶液直到检测不到起始原料。向该溶液中加入3当量DTT。在室温下搅拌该溶液直到检测不到中间产物，用1M KHSO4水溶液(pH 2)酸化溶液，用EtOAc萃取无机相。用盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥，过滤和蒸发。粗产物通过结晶或柱色谱纯化。
5.1.对于二酯应用LiOH进行酯裂解在0℃下向在THF中的1当量二酯(50-60ml/mmol)中加入(50-60ml/mmol)0.1M LiOH，在室温下搅拌该溶液直到检测不到起始原料。用乙醚稀释该溶液，进行相分离，用KHSO4酸化无机相，EtOAc萃取。通过硫酸钠干燥有机层，并蒸发。
5.2.对于单酯应用LiOH进行酯裂解在0℃下向在THF中的1当量酯(30-60ml/mmol)中加入(30-60ml/mmol)0.1M LiOH(在反应前所有的溶液用氩气脱气30分钟)，在室温下搅拌该溶液直到检测不到起始原料。用乙醚稀释该溶液，进行相分离，用KHSO4酸化无机相，EtOAc萃取。通过硫酸钠干燥有机层，并蒸发。
5.3.叔-丁酯的裂解将1当量的酯在(1-4ml/mmol)CH2Cl2∶CF3CO2H(1∶10-1∶2)的溶液中室温下搅拌，直到检测不到起始原料。浓缩溶液，通过标准方法分离产物。
5.4.用NaOH裂解酯将5.38mmol羧酸甲酯的溶液溶解在150ml EtOH或EtOH/THF(1∶1)中，在室温下用10.8ml(10.8mmol)1N NaOH水溶液处理。3小时后(接着进行TLC)，蒸发反应，将其倒入10％KHSO4/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，得到羧酸。
6.1.Cbz-基团的裂解将在MeOH中的1当量Cbz-保护的胺(10-15ml/mmol)和0.05当量披钯炭在1atm氢气下搅拌1小时。通过过滤除去催化剂，通过色谱或结晶纯化粗产物。
7.1.S-乙酰基-保护的硫醇的裂解在0℃下向在THF中的1当量硫酯(thioester)(20-40ml/mmol)中加入(20-40ml/mmol)0.1M LiOH(在反应前所有的溶液用氩气脱气30分钟)，在室温下搅拌该溶液直到检测不到起始原料。用乙醚稀释该溶液，进行相分离，用KHSO4酸化无机相，EtOAc萃取。通过硫酸钠干燥有机层，并蒸发。
7.2.S-乙酰基-保护的硫醇和酯的裂解在0℃下向在THF中的1当量硫酯(45-60ml/mmol)中加入(45-60ml/mmol)(6当量)0.1M LiOH(在反应前所有的溶液用氩气脱气30分钟)，在室温下搅拌该溶液直到检测不到起始原料。用乙醚稀释该溶液，进行相分离，用KHSO4酸化无机相，EtOAc萃取。通过硫酸钠干燥有机层，并蒸发。
7.3.在乙基/甲基酯存在下裂解S-乙酰基-保护的硫醇在0℃下向在乙醇/甲醇中的1当量保护的化合物(20-30ml/mmol)中加入0.6-0.7M(1.5当量)NaOEt/NaOMe(在反应前所有的溶液用氩气脱气30分钟)，在0℃下搅拌该溶液直到检测不到起始原料。用EtOAc/1MKHSO4稀释该溶液，进行相分离，用EtOAc萃取无机相，通过硫酸钠干燥有机层，并蒸发。
8.1.PMB-硫醚裂解的一般方法在室温下向在TFA中的1当量PMB硫醚(15-30ml/mmol)中加入10当量三乙基硅烷，将该溶液加热至80℃1分钟至2小时，或在室温下搅拌2天，再冷却，真空下浓缩，通过快速色谱进行标准操作和纯化，得到相应的硫醇。
9.1.对于单一化合物(single compounds)应用三乙基硅烷进行三苯甲基去保护在0℃下，用0.92ml(5.78mmol)三乙基硅烷处理0.58mmol三苯甲基硫烷基(sulfanyl)在5.8ml TFA中的溶液，在室温下10-30分钟后，蒸发，并通过硅胶快速色谱纯化，或从Et2O或Et2O/戊烷中沉淀，得到硫醇-化合物。
9.2.对于单一化合物应用三异丙基硅烷进行三苯甲基去保护在0℃下，用8ml TFA和5.82ml(28mmol)三异丙基硅烷处理2.84mmol三苯甲基-保护的化合物在30ml CH2Cl2中的溶液。在室温下30分钟后，完全蒸发该溶液，从Et2O/戊烷中沉淀该化合物两次，或通过硅胶快速色谱纯化，得到硫醇。
9.3.对于平行合成的三苯甲基去保护将0.32mmol三苯甲基-保护的化合物溶解在1.5ml乙腈/0.4mlTFA/0.1ml三乙基硅烷中，在室温下一夜后，通过制备HPLC(RP18，CH3CN/H2O 80∶20至95∶5)纯化，得到游离的硫醇。
实施例2吡咯烷-衍生物的合成2.1.酯的制备将40g(220mmol)L-羟基脯氨酸甲基酯.盐酸盐(在甲苯中混悬两次，减压下蒸发除去水)混悬于600ml六甲基二硅氮烷中，回流2小时。将溶液在减压下蒸发，溶解于100ml THF中。缓慢加入在200ml THF中的49.9g(220mmol)2-萘-磺酰氯，在室温下搅拌16小时。加入150ml H2O，1小时后蒸发溶剂。将残渣在水/EtOAc中分配(3x)，用10％NaCl洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，得到60.4g(82％)(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS335(M+)。
按照类似的方法制备下列化合物L-羟基脯氨酸苄基酯·盐酸盐和1-萘磺酰氯得到(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基酯，MS411(MH+)；
L-羟基脯氨酸甲酯·盐酸盐和1-萘磺酰氯得到(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS335(M)；L-羟基脯氨酸苄基酯·盐酸盐和甲烷磺酰氯得到(2S，4R)-4-羟基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸苄基酯，mp 132-133℃，MS300(MH+)；L-羟基脯氨酸甲酯·盐酸盐和甲烷磺酰氯得到(2S，4R)-4-羟基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸甲酯，mp 115.5-117℃，MS164(M-COOMe)。
(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯*和萘基磺酰氯得到(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，其直接进行下列反应。
*按照T.Ken-ichi，S.Hiroyuki TetrahedronAsymmetry 1995，6，7，1641-1656从Z-Hyp-OtBu制备。
通过甲磺酸酯将13.9ml(215mmol)甲烷磺酸、29.8ml(215mmol)三乙胺和58.7g(224mmol)三苯膦在150ml甲苯中的两相溶液加入到60g(179mmol)(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯在300ml甲苯中的机械搅拌下的混悬液中。加入44.9ml(233mmol)of二异丙基偶氮二羧酸酯(放热！)后，将该溶液加热至80℃2.5小时。在室温下加入300ml水，用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。用10％KHSO4(2×100ml)，10％NaCl(2×150ml)水溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，蒸发得到180g粗产物。快速色谱(EtOAc/己烷1∶1)纯化，得到63.7g(86％)(4S，2S)-4-甲烷磺酰基氧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯。
在室温下将64.2g(167mmol)三苯基甲烷硫醇缓慢加入到17.9g(160mmol)叔-丁基钾在300ml DMF的溶液中，机械搅拌30分钟。通过末端用冰浴冷却，在20℃下加入在300ml DMF中的63g(152mmol)of(4S，2S)-4-甲烷磺酰基氧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯。在100℃下加热反应1.3小时，冷却，蒸发至400ml，用250ml NH4Cl/EtOAc饱和水溶液(3×300)萃取。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。快速色谱(CH2Cl2/MeOH 99∶1)得到(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯的58.6g(65％，(2S，4R)/(2R，4R)-异构体，大约4∶1，1H-NMR)和9.2g(10％)，(2S，4R)/(2R，4R)-异构体，大约1∶1，1H-NMR)，MS594(MH+)。
按照类似的方法制备下列化合物(2S，4R)-4-羟基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸甲酯经80℃下3.75小时，得到(4S，2S)-4-甲烷磺酰基氧基-1-(甲基磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，将其与三苯基甲烷硫醇盐在100℃下加热45分钟，得到(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯(2S，4R)/(2R，4R)-异构体，大约9∶1，1H-NMR)，MS482(MH+)；(2S，4R)-4-羟基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸苄基酯经80℃下5小时，得到(2S，4S)-1-甲烷磺酰基-4-甲烷磺酰基氧基-吡咯烷-2-羧酸苄基酯，将其与4-甲氧基苄基硫醇/叔-丁醇钾加热30分钟，得到(2S，4S)-1-甲烷磺酰基-4-甲烷磺酰基氧基-吡咯烷-2-羧酸苄基酯，mp 91-92℃，MS453(MNH4+)。
(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，经(2S，4S)-4-甲烷磺酰基氧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，其与4-甲氧基苄基硫醇/叔-丁醇钾加热，得到无色油状(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯(Rf 0.4 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS472(MH+)。
(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，经(2S，4S)-4-甲烷磺酰基氧基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，其与硫代乙酸钾在DMF中加热，得到橙色液体状(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS303(MH+)。
(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，经(2S，4S)-4-甲烷磺酰基氧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，将其用硫代乙酸钾在100℃下处理，得到淡黄色固体(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，MS359(M-HSCOCH3)。
(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯2-叔-丁酯(Z-Hyp-OtBu*)，经(2S，4S)-4-甲烷磺酰基氧基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯2-叔-丁酯，将其用硫代乙酸钾在DMF中、100℃下处理，得到(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯2-叔-丁酯。通过溴化物在1.5-4.5℃间、0.5小时内，向76.5g(291.6mmol，6当量)三苯膦在650ml THF的溶液中，加入在70ml THF中的44.6ml(286.8mmol，5.9当量)DEAD。在加入42.2g(486.1mmol，10当量)LiBr前，搅拌该溶液0.5小时，将反应混合物再次冷却至4℃，以加入在75mlTHF中的20g(48.6mmol)(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基酯。搅拌3小时后，加入水，浓缩混悬液，再溶解于700ml EtOAc和水中。进行相分离，有机相用100ml EtOAc(3x)萃取，用盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸镁干燥并蒸发。通过从EtOAc/己烷中结晶除去三苯膦氧化物，通过硅胶柱色谱纯化母液(己烷∶EtOAc 3∶1)，得到13.4g(62％)无色固体(2S，4S)-4-溴-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基酯，mp 97-98℃，MS473(MH+)。
在0℃下，用4.4ml(31.5mmol，1.15当量)4-甲氧基苄基硫醇处理在150ml DMF中的3.38g(30.1mmol，1.1当量)叔丁基钾。在加入在100ml DMF中的12.99g(27.4mmol)(2S，4S)-4-溴-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基酯之前，在室温下搅拌该溶液1小时。在室温下搅拌该溶液过夜，真空下除去DMF，将残渣再溶解于EtOAc和1M KHSO4水溶液中。进行相分离，用盐水洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。通过硅胶快速色谱纯化粗制油，己烷/EtOAc(3∶1-2∶1)作为洗脱剂，得到7.23g淡黄色固体(48％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基酯，mp 90-91℃，MS547(M+)。
按照类似的方法制备下列化合物(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯与4-甲氧基苄基硫醇/叔丁基钾，得到(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS382(MH+)。
通过氯化物((2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯本发明中间体的合成为本领域已知技术，例如在国际专利申请WO 9820001和欧洲专利申请公开EP-A-696593中描述)用680g(2.6mol)三苯膦处理374g(1.48mol)(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯在1.61 CH2Cl2中的溶液，冷却至3-5℃，用1.24升(12.8mol)CCl4处理10分钟，在该温度下2小时后，停止冷却，在2小时时间内将反应温度升高至35℃。将其冷却至20℃，进一步搅拌45分钟。加入4升n-庚烷后，将反应蒸发至2.9升，冷却至0℃，过滤，将残渣用相同方法处理两次，第三次将残渣溶解于2升CH2Cl2中。蒸发溶剂，并通过硅胶过滤，己烷/叔-丁基(buthyl)-甲基醚9∶1作为洗脱剂。蒸发溶剂得到347g(89％)(2S，4S)-4-氯-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS246(MH+)。
冷却76g(0.68mol)叔丁基钾在1.5升DMF中的溶液(-3℃)，缓慢(1.5h)用在1.8升DMF中的202g(0.73mol)三苯基甲烷硫醇处理(最大1℃)。在0℃下2.5小时后，加入161g(0.61mol)(2S，4S)-4-氯-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯在0.35升DMF中的溶液。在2℃下搅拌反应过夜，蒸发，溶解于1.5升EtOAc中，倒入2.7升饱和NH4Cl水溶液中，用EtOAc(2x)萃取。有机相用饱和NaHCO3水溶液洗涤，通过硫酸钠干燥并蒸发。用洗脱剂为己烷/EtOAc(95∶5至7∶3)的硅胶色谱纯化，得到268g(87％)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS504(MH+)。
2.2.胺部分取代类型的修饰从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，按照3.1.进行BOC-去保护，随后分别用萘-2-磺酰氯(2.1.)，4-叔-丁基-苯磺酰氯(2.1.)和萘-2-羰基氯(2.2.)处理，制备下列化合物(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，白色固体，MS393(MH+)；(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，白色固体，MS400(MH+)；(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，无色油，MS358(MH+)；2.3.酸的制备将14.7g(29.2mmol)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯的溶液溶解于660ml THF/EtOH(1∶1)中，在室温下用58.4ml(58.4mmol)1N NaOH水溶液处理。2小时后，将反应倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥，得到14.8g(定量)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯。MS488(M-H)-。
按照类似的方法制备下列化合物(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯给出(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸，mp 64-69℃，MS466(M-H)-；(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-甲烷磺酰基氧基-吡咯烷-2-羧酸苄基酯给出(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸，MS344(M-H)-；(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲酯给出(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸，MS578(M-H)-；(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基酯给出(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，MS456(M-H)-；(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯给出(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯，MS366(M-H)-；(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯给出无色固体(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，MS456(M-H)-。
从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯2-叔-丁酯，按照5.3.制备淡粉色无定形物(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯，MS322(M-H)-。
酸的制备应用其它方法从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸叔-丁酯，按照5.3.制备米黄色固体(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，MS378(M-H)-。
实施例3二硫化物-二酸在0℃下，向在220ml THF中的1.65g(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯中加入220ml 0.1N LiOH，在室温下搅拌该溶液1小时，浓缩，用CH2Cl2洗涤无机层，酸化，并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，通过硫酸钠干燥并蒸发，得到白色固体(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，MS337(MH+)。
向在20ml CH2Cl2中的1.41g(4.18mmol)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸1.22ml(8.8mmol，2.2当量)三乙胺中，加入0.13M I2在CH2Cl2中的溶液，直到不再消耗碘。通过加入NaHSO3水溶液破坏过量的碘，进行相分离，用CH2Cl2萃取无机层，用盐水洗涤合并的有机相，并通过硫酸钠干燥。残渣用己烷研制，得到1.3g淡黄色固体(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(93％)，MS673(MH+)。
按照类似的方法制备下列化合物从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯得到黄色泡沫状(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸。
从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯得到黄色泡沫状(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸。
实施例4衍生于L-Hyp-OMe的其它立体异构体在室温下，将在250ml CH2Cl2中的4.54g(13.5mmol)(2S，4R)-4-羟基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯用2.48g(20.3mmol，1.5当量)DMAP和3.87g(20.3mmol，1.5当量)p-甲苯磺酰氯处理36小时，倒入1M KHSO4中，用CH2Cl2萃取。用盐水洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。通过洗脱剂为EtOAc∶己烷1∶1的柱色谱纯化，得到5.43g(82％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯16217B112，其为白色固体。
将5.42g(11mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯混悬于60ml DMF中，用1.89g(16.55mmol，1.5当量)硫代乙酸钾处理。将反应混合物加热至100℃45分钟，冷却至室温，并浓缩。将残渣再溶解于CH2Cl2/饱和NaHCO3溶液中。用EtOAc萃取无机相，用盐水洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥。残渣蒸发后，通过柱色谱纯化，得到3.6g(83％)橙色油状(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，MS394(MH+)。
类似地，从(2S，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯制备橙色油状(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，MS304(MH+)。
类似地，为了如前部分描述的二硫化物二酸形成，制备下列化合物从(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯制备(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，其为米黄色固体，MS671(M-H)-。
从(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯制备(2S，2’S，4S，4S’)-4，4’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，其为淡黄色固体，MS491(M-H)-。
实施例5延伸的(Extended)酯的制备5.1.延伸的酯I同型系列[类似于J.Podlech，D.Seebach应用Arndt-Eistert反应从α-氨基酸制备β-氨基酸范围、限制和立体选择性。应用到碳水化合物肽。一些β-氨基酸的立体选择性α-烷基化，Liebigs Ann.(1995)，Issue 7，1217-28]在0℃下，将25g(93mmol)(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸在265ml CH2Cl2中的溶液用2滴DMF处理，随后用8ml(99mmol)草酰氯处理。在0℃下15分钟后，将反应在室温下搅拌2小时，蒸发，溶解于260ml THF/CH3CN 1∶1中，然后在0℃下加入58.5ml(117mmol)2M三甲基甲硅烷基重氮甲烷在己烷中的溶液。将反应在室温下搅拌16小时，蒸发，倒入H2O/EtOAc中。通过硫酸钠干燥有机相，蒸发，通过快速硅胶柱色谱纯化，己烷/EtOAc(7∶3至1∶1)作为洗脱剂，得到12.4g(48％)of(2S，4R)-2-重氮-1-(1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酮，MS509(MNH4+)。
按照类似于上面的方法，从(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(与2.3当量三甲基甲硅烷基重氮甲烷)给出(2S，4R)-2-重氮-1-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酮，产率57％，MS621(MNH4+)。
将12g(24.4mmol)(2S，4R)-2-重氮-1-(1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酮在96ml MeOH/67ml THF中的溶液冷却(-25℃)，在暗处用0.62g(2.7mmol)苯甲酸银在13.9ml(99.7mmol)三乙胺中处理。将反应升温至室温，在室温下搅拌1小时，蒸发，用H2O/EtOAc萃取，通过快速硅胶柱色谱纯化，己烷/EtOAc(7∶3)作为洗脱剂，得到8.7g(72％)(2R，4R)-(1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酸甲酯，MS496(MH+)。
按照类似于上面的方法，从(2S，4R)-2-重氮-1-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酮给出(2R，4R)-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酸甲酯，产率72％，MS625(MNH4+)。
5.2.延伸的酯II将在800ml CH2Cl2中的30g(81.6mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯用62.8ml(571.2，7当量)NMM、2.19g(16.24mmol，0.2当量)羟基苯并三唑、37.5g(195.84mmol，2.4当量)EDCI和17.5g(179.52mmol，2.2当量)N，O-二甲基胲基-盐酸盐处理。将该溶液在室温下搅拌3小时，浓缩，溶解于500ml 1M KHSO4溶液中，加入500ml EtOAc。分离有机层，用盐水洗涤，通过硫酸钠干燥并蒸发。通过快速硅胶色谱纯化，EtOAc∶己烷1∶1作为洗脱剂，得到3.6g(62.4％)淡黄色油状(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS411(MH+)。
向360ml THF中，加入30.8ml LiAlH4溶液(30.8mmol，1M在THF中，1.2当量)，将该溶液冷却至-30℃，在该温度下加入在100ml THF中的10.9g(25.67mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，搅拌30分钟。将该溶液冷却至-78℃，加入硅胶、MgSO4和10％KHSO4溶液的混悬液，缓慢升温至室温。过滤该混悬液，用THF彻底洗涤，并蒸发。将粗产物再溶解于CH2Cl2中，通过硫酸钠干燥并蒸发，得到9g(定量)黄色油状(2S，4R)-2-甲酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS351(M+)。
在-78℃下，向6.2ml(30.82mmol，1.2当量)膦酸乙酸三乙酯在80ml THF中的溶液中，加入1.35g(30.82mmol，1.2当量，55％)NaH，随后加入在50ml THF中的9g(25.68mmol，1当量)(2S，4R)-2-甲酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯。将该溶液升温至室温过夜，冷却至O℃，加入5ml MeOH，随后加入105ml酒石酸钠钾饱和水溶液和105ml 10％NaHCO3溶液。过滤该混悬液，进行相分离，用EtOAc萃取无机相，通过硫酸钠干燥合并的有机相，过滤并蒸发。粗产物通过硅胶柱色谱纯化，己烷/EtOAc(9∶1-8∶2)作为洗脱剂，得到6.21g(58％)无色胶状(E)-和/或(Z)-(2S，4R)-2-(2-乙氧基羰基-乙烯基)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS422(MH+)。
按照类似于文献[T.Hudlicky，G.Sinai-Zingde，M.G.Natchus，在烯烃存在下α，β-不饱和酯的选择性还原，四面体通讯(TetrahedronLett.)(1987)，28(44)，5287-90]的方法在室温下，用1.32g(54mmol，6当量)镁处理在42ml MeOH中的3.78g(9mmol，1eq)(E)-和/或(Z)-(2S，4R)-2-(2-乙氧基羰基-乙烯基)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯5小时。蒸发溶剂，将粗产物溶解于EtOAc中，从固体颗粒中过滤。重复该方法，蒸发溶剂，得到3.67g(定量)(2R，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-2-(2-甲氧基羰基-乙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其为无色油，MS410(MH+)。
在0℃下，向在40ml CH2Cl2中的1.54g(3.76mmol，1当量)(2R，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-2-(2-甲氧基羰基-乙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯中加入4.32ml(56.4mmol，15当量)TFA，在室温下搅拌该溶液4小时。蒸发溶剂，粗产物(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯·三氟乙酸盐不经过进一步纯化直接进行下列反应。
在室温下，用0.1ml(0.72mmol，3当量)三乙胺和82mg(0.36mmol，1.5当量)萘基磺酰氯处理在CH2Cl2中的0.1g(0.24mmol，1当量)(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯·三氟乙酸盐2小时。进一步加入0.2ml(1.44mmol，6当量)三乙胺，将该溶液再搅拌2小时。将该溶液用10％NaHCO3溶液和水萃取，通过硫酸钠干燥并蒸发。分离出0.11g(92％)黄色油状(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯，MS500(MH+)。
类似地，从(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯·三氟乙酸盐和甲基磺酰氯制备(2R，4R)-3-[1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯，MS388(MH+)。
实施例6延伸的酸的制备6.1.延伸的酸I根据酯5.4.水解的常规方法，从(2R，4R)-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酸甲酯给出(2R，4R)-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酸，MS592(M-H)-。
根据酯5.4.水解的常规方法，从(2R，4R)-(1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酸甲酯给出(2R，4R)-(1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基)-乙酸，MS480(M-H)-。
6.2.延伸的酸II在室温下，用1.85ml 1M NaOH(1.85mmol，5当量)处理在5ml EtOH中的185mg(0.37mmol，1当量)(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯2小时，通过加入1M HCl将pH调节至7，蒸发溶剂，将粗产物再溶解于EtOH中，过滤固体并蒸发，得到170mg(94％)棕色胶状(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酸，MS486(MH+)。
类似地，从(2R，4R)-3-[1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸甲酯制备(2R，4R)-3-[1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸，MS374(MH+)。
实施例7侧链的制备7.1.衍生于Z-Sar的化合物在氩气氛下，用11.75ml(88mmol)异丁基氯甲酸酯在3℃下处理在400ml DMF中的18.03g(80mmol)Z-Sar-OH和11.3ml(88mmol，1.1当量)N-乙基吗啉，搅拌2小时。缓慢加入在100ml DMF中的12.81g(76mmol，0.96当量)(4-甲基氨基)苯甲酸甲酯，将该溶液在室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，将残渣再溶解于200ml水和250ml EtOAc中。用300mlEtOAc(2x)萃取无机层，合并的有机层用150ml 1N KHSO4(2x)、200ml水(2x)、200ml稀释的NaHCO3溶液(2x)、200ml水洗涤，通过硫酸镁干燥，过滤并蒸发。应用己烷∶EtOAc(4∶1-1∶2)梯度快速硅胶色谱纯化，得到24.54g(83％)黄色油状4-[[(苄氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其按照6.1.去保护，得到4-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯，MS237(MH+)。
类似地，从Z-Sar-OH和甲基N-甲基制备淡黄色油状的2-[[(苄氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯(Rf 0.3己烷∶EtOAc1∶2)，MS370(M)，其按照6.1.去保护，通过用HCl/MeOH处理转化成盐酸盐，得到2-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯.盐酸盐，MS237(MH+)。
在氩气氛下，用7.95g(77mmol，1.1当量)N-甲基吗啉在0℃下处理在400ml DMF中的15.784g(70mmol)Z-Sar-OH和13.52g(77mmol，1.1当量)2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪，搅拌2小时。加入在100mlDMF中的12.26g(73.5mmol，1.05当量)4-氨基苯甲酸乙酯，随后加入3.41g(28mmol，0.40当量)DMAP，升温至室温。搅拌该混合物过夜，蒸发溶剂，将残渣再溶解于200ml水和250ml CH2Cl2中。用250mlCH2Cl2(2x)萃取水层，用水洗涤合并的有机层，并通过硫酸镁干燥，过滤并蒸发。应用己烷/EtOAc(4∶1-1∶1-EtOAc)梯度快速硅胶色谱纯化，得到21.69g(83.7％)淡黄色固体4-[2-(苄氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其按照6.1.去保护，得到白色浆状4-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，MS237(MH+)。
类似地，制备下列化合物从Z-Sar-OH和3-氨基苯甲酸乙酯，通过3-[2-(苄氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，白色固体(Rf 0.4己烷∶EtOAc 1∶2)，MS371(MH+)，随后按照6.1.去保护，用HCl/MeOH处理，得到白色固体3-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯.盐酸盐(1∶1)(Rf 0.05；EtOAc)，MS236(M)；从Z-Sar-OH和氨基苯甲酸甲酯，随后通过按照6.1.去保护和用HCl/MeOH处理，得到白色结晶2-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸甲酯.盐酸盐(1∶1)(Rf 0.1；EtOAc)，MS222(M)。
进一步处理侧链中间体，得到下列化合物7.2.氮的烷基化在氩气氛下，将在80ml DMF中的2.6g(7.02mmol)3-[2-(苄氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯用1.13g(25.97mmol，3.7当量)NaH(55％Disp)处理，随后用7.34ml(116.5mmol)甲基碘化物处理。将该混悬液在室温下搅拌过夜，加入冰水，并用100ml CH2Cl2(3x)萃取。用水洗涤合并的有机层，通过硫酸镁干燥，过滤并蒸发。应用己烷/EtOAc(9∶1-3∶2)梯度快速硅胶色谱纯化残渣，得到1.61g(59％)黄色油状3-[[(苄氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸乙酯(Rf 0.4己烷∶EtOAc 1∶2)，MS384(M)，其按照6.1.去保护和用HCl/MeOH处理，得到白色结晶3-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸乙酯.盐酸盐(1∶1)(Rf 0.1；EtOAc)，MS250(M)。
7.3.还原在氩气氛下，将在35ml THF中的742.7mg(32.4mmol，1.5当量)硼氢化锂加入到在室温下、100ml THF中的8g(21.6mmol)4-[[(苄氧基羰基-甲基-氨基)-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯中。在室温下搅拌该混悬液过夜，加热至50℃3.25小时，再冷却至室温，缓慢加入21mlMeOH。将该溶液加入到冰水中，用乙醚萃取(3x)，水洗涤合并的有机层，通过硫酸镁干燥，过滤并蒸发。应用CH2Cl2/MeOH(100∶0-99.9∶0.1)梯度快速硅胶色谱纯化粗产物，得到3.9g(52％){[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基}-甲基-氨基甲酸苄基酯，其为黄色油(Rf 0.4CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS343(MH+)。
7.4.O-甲硅烷基保护或醚形成在氩气氛下，将2.4g(7.0mmol)[[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酸苄基酯和1.2g(7.7mmol，1.1当量)TBDMSCl溶解于35ml DMF中，冷却至5℃，分小部分加入2.4g(35.0mmol，5.0当量)咪唑。在室温下搅拌该溶液过夜，进一步加入435.7mg(2.8mmol，0.4当量)TBDMSCl，再搅拌4小时。将该溶液加入冰水中，进行相分离，有机相用50ml CH2Cl2(3x)萃取，用水洗涤合并的有机层(2x)，通过硫酸镁干燥，过滤并蒸发。应用CH2Cl2/MeOH(100∶0-95∶5)梯度快速硅胶色谱纯化，得到2.25g(70％)黄色油状[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酸苄基酯(Rf 0.8CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS457(MH+)，其按照6.1.去保护，得到棕色油状N-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺，(Rf 0.3 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS323(MH+)。
在氩气氛下，向在40ml DMF中的1.23g(3.6mmol)[[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酸苄基酯中，加入580mg(13.3mmol，3.7当量，55％disp)氢化钠，随后加入3.8ml(59.6mmol，16.6当量)甲基碘化物。在室温下搅拌该混悬液过夜，加入到冰水中。进行相分离，有机相用50ml CH2Cl2(3x)萃取，用水洗涤合并的有机层(2x)，通过硫酸镁干燥，过滤并蒸发。应用CH2Cl2/MeOH(100∶0-98∶2)梯度硅胶柱色谱纯化，得到0.984g(77％)淡黄色油状[[(4-甲氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酸苄基酯(Rf 0.07 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS356(MH+)，其按照6.1.去保护，得到黄色油状N-(4-甲氧基甲基-苯基)-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺(Rf 0.2 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS223(MH+)。
7.5.从BOC-甘氨酸和Z-β-Ala-OH以及其它Z-保护的氨基酸衍生的化合物在氩气氛下，将在210ml CH2C12中的1.5g(8.56mmol)BOC-甘氨酸用1.07ml(9.42mmol，1.1当量)4-甲基吗啉、3.08g(10.27mmol，1.2当量)TPTU和1.59g(9.42mmol，1.1当量)4-氨基苯甲酸乙酯处理。在室温下搅拌该溶液过夜，并浓缩。通过EtOAc/己烷(1∶2-2∶1)梯度快速硅胶色谱纯化残渣，得到3.28g淡棕色结晶4-(2-叔-丁氧基羰基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，其按照3.1.进行BOC-裂解，得到白色固体4-(2-氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，(Rf 0.1 CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS222(MH+)。
类似地，制备下列化合物从BOC-甘氨酸和甲基-4-甲基氨基苯甲酸酯按照1.2.，随后BOC-裂解3.1.，得到橙色胶状4-(氨基乙酰基-甲基-氨基)-苯甲酸甲酯，(Rf 0.1CH2Cl2∶MeOH 9∶1)，MS222(MH+)。
从Z-β-Ala-OH和乙基-4-氨基苯甲酸酯按照1.2.，随后按照6.1.去保护，得到4-(3-氨基-丙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，MS236(M)。
从Z-Asp(OtBu)OH和N-苄基甲基胺按照1.2.，随后按照6.1.去保护和用HCl/tBuOH、MeOH处理，得到(S)-3-氨基-N-苄基-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯·盐酸盐，MS293(MH+)。
从Z-Asp(OtBu)OH和4-异丙基苯胺按照1.2.，随后按照6.1.去保护和用HCl/MeOH处理，得到(S)-3-氨基-N-(4-异丙基-苯基)-琥珀酰胺酸叔-丁酯·盐酸盐，MS307(MH+)。
从Z-N-Me-Asp(OtBu)-OH DCHA盐(1∶1)和N-苄基甲基胺按照1.2.，随后按照6.1.去保护和用HCl/MeOH处理，得到(S)-N-苄基-N-甲基-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.盐酸盐，MS307(MH+)。
从Z-N-Me-Asp(OtBu)-OH DCHA盐(1∶1)和4-异丙基苯胺按照1.2.，随后按照6.1.去保护和用HCl/MeOH处理，得到(S)-N-(4-异丙基-苯基)-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.盐酸盐，MS321(MH+)。
从Z-MeAla-OH和N-苄基甲基胺按照1.2.，随后按照6.1.去保护和用HCl/MeOH处理，得到(S)-N-苄基-N-甲基-2-甲基氨基-丙酰胺.盐酸盐，MS206(M)。
7.6.γ-溴-链烷酸的酯的侧链在室温下，用7.4ml(200mmol)溴乙酸叔-丁基酯处理12.6ml(100mmol)苯乙胺在50ml甲苯中的溶液，加热至95℃4小时。冷却(0℃)后，过滤并蒸发滤液，将残渣混悬于戊烷中，冷却(0℃)，过滤并蒸发，得到油状11.5g(98％)苯乙基氨基-乙酸叔-丁酯，MS236(MH+)。
该油具有作为副产物的伯胺(苯乙胺)，其导致相应的副产物，其可以经EDCI-偶合后分离。
类似地从3-苯基-1-丙基胺给出(3-苯基-丙基氨基)-乙酸叔-丁酯，MS249(M)；从色胺给出[2-(1H-吲哚-3-基)-乙基氨基]-乙酸叔-丁酯，MS274(M)；从2-氟苯乙胺给出[2-(2-氟-苯基)-乙基氨基]-乙酸叔-丁酯，MS254(MH+)；从4-氟苯乙胺给出[2-(4-氟-苯基)-乙基氨基]-乙酸叔-丁酯，MS254(MH+)；从3-氟苯乙胺给出[2-(3-氟-苯基)-乙基氨基]-乙酸叔-丁酯，MS198(MH+-异丁烯)；从4-甲基苯乙胺给出(2-p-甲苯基-乙基氨基)-乙酸叔-丁酯，MS250(MH+)；从1-氨基-3-甲基丁烷给出(3-甲基-丁基氨基)-乙酸叔-丁酯，MS146(MH+-异丁烯)。
在50分钟内，缓慢将28g(138mmol)N，N-二甲基甲酰胺二-叔-丁基乙缩醛加入到5.3g(34.5mmol)3-溴-丙酸在50ml甲苯的溶液中。进一步加热反应30分钟，冷却，用H2O/甲苯(2x)、饱和NaHCO3水溶液、和饱和NaCl水溶液萃取，通过硫酸钠干燥有机相，小心蒸发(产品具有低沸点)，得到5.8g(80％)3-溴-丙酸叔丁基酯[U.Widmer，叔-丁酯的便利制备，合成(Synthesis)(1983)，Issue 2，135-6]。
类似于该胺的一般性合成方法，3-溴-丙酸叔丁基酯和苯乙胺给出3-苯乙基氨基-丙酸叔-丁酯，MS250(MH+)；3-苯基-1-丙基胺给出3-(3-苯基-丙基氨基)-丙酸叔-丁酯，MS264(MH+)；2-氟苄基胺给出3-(2-氟-苄基氨基)-丙酸叔-丁酯，MS253(M)；2，4，5-三氟苄基胺给出3-(2，4，5-三氟-苄基氨基)-丙酸叔丁酯，MS290(MH+)；2，5-二氟苄基胺给出3-(2，5-二氟-苄基氨基)-丙酸叔-丁酯，MS271(M)；类似于该胺的一般性合成方法，3-(氯甲基)-1，2，4-噁二唑和1-氨基-3-甲基丁烷和NaI在甲苯中给出(3-甲基-丁基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基-胺(3-甲基-丁基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基-胺，MS170(MH+)。
将9.55g(48.6mmol)2-氯-1，1，1-三乙氧基乙烷和3.9ml(30mmol)4-甲氧基苄基胺的溶液在40℃下加热15分钟。然后在室温下加入2.92g(45mmol)叠氮化钠在60ml乙酸中的溶液，在60℃下加热过夜，80℃下20小时，100℃下1小时。用含水和固体NaHCO3/EtOAc(3x)中和反应，用10％NaCl水溶液洗涤。通过硫酸钠干燥有机相，蒸发，并通过硅胶快速色谱(己烷/EtOAc 1∶1)纯化，得到3.36g(47％)5-氯甲基-1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑，MS238(M)。[Y.Satoh，S.De Lombaert，N.Marcopulos，J.Moliterni，M.Moskal，J.Tan，E.Wallace，通过α-氨基甲基四唑的希夫氏碱烷基化合成α-氨基酸的四唑类似物，四面体通讯(Tetrahedron Lett.)(1998)，39(21)，3367-3370]类似于该胺的一般性合成方法，5-氯甲基-1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑和苯乙胺给出[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基甲基]-苯乙基-胺，MS324(MH+)；环丙基胺经50℃下3天后给出环丙基-[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-四唑-5-基甲基]-胺，MS259(M)；类似于该胺的一般性合成方法，3-溴-丙腈和环丙基胺给出3-环丙基氨基-丙腈，MS110(M)；苄基胺给出3-苄基氨基-丙腈，MS160(M)；如文献所描述进一步的侧链按照文献L.Alig，A.Edenhofer，P.Hadvary，M.Huerzeler，D.Knopp，M.Mueller，B.Steiner，A.Trzeciak，T.Weller，“低分子量非肽纤维蛋白原受体拮抗剂”，医学化学杂志(J.Med.Chem.)(1992)，35(23)，4393-407，制备(哌啶-4-基氧)-乙酸叔-丁酯(MH+)。
实施例8另外的试剂按照给出的文献制备下列试剂5-氯磺酰基-2-乙氧基-苯甲酸DJ.Dale，P.J.Dunn，C.Golightly，M.L.Hughes，P.C.Levett，A.K.Pearce，P.M.Searle，G.Ward，和A.S.Wood有机方法研究与开发(Organic Process Research& Development)，2000，4，1，17-22；2-苯基-乙烷磺酰氯Z.Zhong，J.A.Bibbs，W.Yuan，C.-H.Wong，美国化学协会杂志(J.Amer.Chem.Soc.)；113；6；1991；2259-2263；3-苯基-丙烷-1-磺酰氯M.Truce，美国化学协会杂志(J.Amer.Chem.Soc.)；74；1952；974-975。
实施例9作为离析物的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-l，2-二羧酸1-叔-丁酯用6.6ml(60mmol，1.1当量)4-甲基吗啉、19.4g(65.3mmol，1.2当量)TPTU和12.7g(59.8mmol)肌氨酸苄基酯.盐酸盐处理在1.5升CH2Cl2中的20g(54.4mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯。将该混合物在室温下搅拌39小时，浓缩，通过柱色谱纯化，其中EtOAc∶CH2Cl24∶1作为洗脱剂，得到14.2g(50％)(2S，4R)-2-(苄氧基羰基甲基-甲基-氨基甲酰基)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯。
在0℃下，向在150ml CH2Cl2中的24.24g(45.8mmol)(2S，4R)-2-(苄氧基羰基甲基-甲基-氨基甲酰基)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯中，加入30ml TFA，在室温下搅拌溶液，直到检测不到起始原料。将反应混合物在真空下浓缩，溶解于甲苯中，并蒸发三次。将粗制的油再溶解于CH2Cl2中，用22.6ml(205mmol，4.5当量)4-甲基吗啉、15.57g(68.7mmol，1.5当量)2-萘基磺酰氯和560mg(4.58mmol，0.1当量)DMAP处理。将该混合物在室温下搅拌过夜，用CH2Cl2稀释，用150ml 1M KHSO4、盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，得到27.9g粗制的(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸苄基酯。
在室温下，用160ml 0.33M LiOH处理在1升THF中的27.44g粗制的(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸苄基酯2小时。加入乙醚，进行相分离。用乙醚萃取无机相，酸化无机相，并用EtOAc萃取，用盐水洗涤，并通过硫酸钠干燥。通过用己烷沉淀，分离产物，得到14.5g(62％)(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸，其为淡灰色固体，MS529(MH+)。
最终的产物-酯和酸将100mg(0.19mmol)(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸和28mg(0.29mmol)苯酚在1ml TFA中加热至75℃1小时。浓缩该混合物，将其溶解于甲苯中，并蒸发(3x)。残渣通过快速色谱纯化，得到46mg(59％)(2S，4R)-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸，其为白色固体，mp 200-201℃，MS409(MH+)。
在0℃下，用0.08ml(0.63mmol，3.9当量)三甲基氯硅烷和23μl(0.32mmol，2当量)DMSO处理在0.7ml TFA中的100mg(0.16mmol)(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸苄基酯。在室温下搅拌该混合物45分钟，浓缩，再溶解于EtOAc/NaHCO3中。用盐水洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，通过色谱纯化粗产物，得到38mg(47％)(2S，4R)-[[4-[5-(苄氧基羰基甲基-甲基-氨基甲酰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸苄基酯，其为白色泡沫。将其溶解于1ml三氟乙醇中，在0℃下用13μl(0.053mmol)三丁基膦和6.5μl(0.36mmol)H2O处理。1小时后，在真空下浓缩该反应混合物，通过快速色谱纯化，得到28mg(73％)(2S，4R)-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸苄基酯，其为无色油，MS499(MH+)。
实施例10进一步修饰中间体(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸将在1.13ml CH2Cl2中的248mg(0.47mmol)(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸用935μl(0.94mmol，2.0当量)NMM、在CH2Cl2中的1.1ml 0.085M(0.09mmol，0.2当量)HOBT、在CH2Cl2中的3.77ml 0.15M(0.56mmol，1.2当量)EDCI和在CH2Cl2中的1.2ml 0.43M(0.52mmol，1.1当量)o-甲苯胺处理。振摇该溶液过夜，蒸发溶剂，将残渣溶解于EtOAc中，用1MKHSO4、饱和NaHCO3溶液和盐水萃取，通过硫酸钠干燥并蒸发。
将粗产物溶解于5.8ml TFA中，在80℃下用460μl(2.9mmol)三乙基硅烷处理1小时。用CH2Cl2和水稀释溶液，通过加入饱和NaHCO3溶液将pH调节至7。用CH2Cl2萃取无机相，用盐水洗涤有机相，并用硫酸钠干燥。柱色谱纯化得到26mg(18％，2步)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(o-甲苯基氨基甲酰基-甲基)-酰胺，其为白色结晶，MS498(MH+)。
类似地，从(2S，4R)-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酸，分别和3，5-二氟苯胺，4-氟苯胺，3-氟苯胺，2-氨基吡啶，2-氟苯胺和2，6-二氟苯胺，苯胺反应，制备下列化合物(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(3，5-二氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其为白色固体，MS520(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(4-氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其为白色结晶，MS502(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(3-氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其为白色结晶，MS502(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(吡啶-2-基氨基甲酰基甲基)-酰胺，其为白色无定形物，MS485(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(2-氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其为白色固体，MS502(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(2，6-二氟-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其为白色固体，MS520(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-苯基氨基甲酰基甲基-酰胺，其为白色固体，mp 90℃，MS484(MH+)。
实施例11作为离析物的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯从(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯和4-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯(1.2.)，随后通过BOC裂解(3.1.)，制备(2S，4R)-4-(2-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯。
将(2S，4R)-4-(2-[[4-(-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯用2-苯基-乙烷磺酰氯(参见上述试剂的制备)(2.1.)处理，通过(2S，4R)-4-(2-{[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基}-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS654(MH)，随后按照8.1.描述的一般性方法进行PMB醚裂解，得到(2S，4R)-4-[2-[[4-巯基-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色结晶，MS534(MH+)。
类似地，将(2S，4R)-4-(2-[[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯用3-苯基-丙烷-1-磺酰氯处理，随后按照8.1.描述去保护，得到无色泡沫状(2S，4R)-4-[2-[[4-巯基-1-(3-苯基-丙烷-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，MS548(MH+)。
按照5.2.，用0.1M LiOH处理157mg(0.24mmol)(2S，4R)-4-(2-{[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基}-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，将粗产物(2S，4R)-4-(2-{[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基}-乙酰基氨基)-苯甲酸溶解于1ml TFA中，在23mg(0.24mmol)苯酚存在下加热至75℃1.5小时。蒸发溶剂，将油溶解于甲苯中，并蒸发(两次)，将残渣在己烷中研制，得到45mg(2S，4R)-4-[2-[[4-巯基-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其为淡黄色固体，MS506(MH+)。
类似地，从(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯，通过按照1.3.处理2-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸甲酯.盐酸盐，随后BOC裂解3.1.，然后分别用异氰酸乙酯或异氰酸2-萘基酯处理(2.3.)，随后PMB硫醚裂解(8.1.)，制备下列化合物(2S，4R)-2-[2-[(1-乙基氨基甲酰基-4-巯基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色结晶，MS423(MH+)；(2S，4R)-2-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-基氨基甲酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS521(MH+)。
类似地，从(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯，通过按照1.3.处理2-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸甲酯.盐酸盐，随后BOC裂解3.1.，然后分别用5-氯磺酰基-2-乙氧基-苯甲酸(参见上述试剂的制备)，2-萘基磺酰氯，甲基磺酰氯(2.1.)处理，随后PMB硫醚裂解(8.1.)，制备下列化合物
(2S，4R)-2-乙氧基-5-[4-巯基-2-[[(2-甲氧基羰基-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-吡咯烷-1-磺酰基]-苯甲酸，其为白色结晶，mp 65℃，MS580(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(2-甲氧基-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其为白色固体，mp 72℃，MS514(MH+)；(2S，4R)-2-[2-[(4-巯基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，mp 48℃，MS430(MH+)。
实施例12叔酰胺12.1.S酰胺(直接)，方法A将800mg(1.38mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和390mg(1.66mmol)粗制的苯乙基氨基-乙酸叔-丁酯在14ml THF中的溶液冷却至0℃，用318mg(1.66mmol)EDCI和19mg(0.14mmol)HOBT处理。将反应升温至室温过夜，在10％KHSO4水溶液/乙酸乙酯间分配(3x)。用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥。通过快速硅胶色谱(己烷/EtOAc 4∶1至1∶1)纯化，得到290mg(26％)(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基]-乙酸叔-丁酯，MS797(MH+)和90mg(10％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苯乙基-酰胺，MS683(MH+)。
通过方法9.1.或9.2.进行三苯甲基-去保护，如果存在p-甲氧基苄基，使用方法8.1.。
在室温下，用0.3ml(2mmol)三乙基硅烷处理159mg(0.2mmol)(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸叔-丁酯在2ml TFA中的溶液，进一步在室温下搅拌10分钟。在室温、减压下蒸发，用Et2O/戊烷沉淀两次，得到78mg(78％)of(2S，4R)-{[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸，其为白色粉末，mp198-200℃，MS497(M-H)-。
类似地从(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苯乙基-酰胺给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苯乙基-酰胺，mp138.5-143℃，MS441(MH+)。
此外，制备了按照表1和2的化合物
表2
12.2.酰胺，方法B(间接)按照EDCI-偶合1.3.的一般性方法，(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸与甘氨酸叔-丁酯.盐酸盐/N-甲基吗啉给出(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯，MS693(MH+)。
类似地(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和β-丙氨酸叔-丁酯-盐酸盐给出(2S，4R)-3-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸叔-丁酯，MS707(MH+)；(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和2，2，2-三氟乙胺给出(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺，MS661(MH+)。
在0℃下，用0.24ml(2mmol)苄基溴和35mg(0.8mmol)55％NaH处理346.5mg(0.5mmol)(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯在3ml DMF中的溶液，升温至室温过夜。将反应倒入饱和NH4Cl水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并在减压下蒸发。通过硅胶快速色谱(己烷/EtOAc 9∶1)纯化，给出277mg(71％)(2S，4R)-[苄基-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯，MS781(M-H)-。
按照方法9.2.进行三苯甲基去保护，给出(2S，4R)-{苄基-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸，MS483(M-H)-。
类似地(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯和环丙基甲基溴给出(2S，4R)-{环丙基甲基-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸，MS449(MH+)；(2S，4R)-{[-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯和溴乙酸甲酯给出(2S，4R)-{[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲氧基羰基甲基-氨基}-乙酸，mp缓慢分解70-78℃，MS465(M-H)-；
(2S，4R)-3-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸叔-丁酯和苄基溴给出(2S，4R)-3-{苄基-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸，mp缓慢分解58-63℃，MS499(MH+)；(2S，4R)-3-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸叔-丁酯和3-溴甲基-吲哚-1-羧酸叔-丁酯[T.K.Venkatachalam，S.Mzengeza，M.Diksic.1-(叔-丁基oxy羰基)-3-(溴甲基)吲哚的一种改进的合成，Org.Prep.Proced.Int.1993，25，249-51]，给出(2S，4R)-3-{(1H-吲哚-3-基甲基)-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸，mp114-120℃，分解，MS538(MH+)；(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺和溴乙酸叔-丁酯给出(2S，4R)-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-(2，2，2-三氟-乙基)-氨基]-乙酸，MS477(MH+)；(2S，4R)-[苄基-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯给出(2S，4R)-{[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸，MS395(MH+)；(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺，MS419(MH+)。
α-烷基化在-78℃下，用1.1ml(1M在THF中，1.1mmol)二(三甲基甲硅烷基)酰胺锂溶液(LiHMDS)处理346mg(0.5mmol)(2S，4R)-{[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-乙酸叔-丁酯在10mlTHF中的溶液。30分钟后，加入0.127ml(1.5mmol)烯丙基溴化物，将反应升温至室温过夜。在10％KHSO4水溶液/EtOAc(4x)之间分配反应物，用10％NaCl水溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。通过硅胶快速色谱(己烷/EtOAc 2∶1)纯化，用Et2O/戊烷沉淀，给出76mg(21％)(2RS)-2-{(2S，4R)-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-戊-4-烯酸叔-丁酯，MS733(MH+)。
按照方法9.2.进行三苯甲基去保护，给出(R)-和(S)-2-{[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-戊-4-烯酸的1∶1混合物，MS433(M-H)-。
实施例13四唑衍生物类似于酰胺偶合(1.3.)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和3-环丙基氨基-丙腈给出(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-环丙基-酰胺，MS672(MH+)。
类似地(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和3-苄基氨基-丙腈给出(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苄基-(2-氰基-乙基)-酰胺，MS722(MH+)。
(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和3-氨基-丙腈给出(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-酰胺，mp86-90℃，MS632(MH+)。
按照方法9.2.进行三苯甲基去保护(在室温下15分钟)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-环丙基-酰胺给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(2-氨基甲酰基-乙基)-环丙基-酰胺，mp157.9-159.9℃，MS448(MH+)。
(在0℃下30分钟并在max RT蒸发)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-酰胺给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-酰胺，MS412(M+Na+)。
四唑的合成将336mg(0.5mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(2-氰基-乙基)-环丙基-酰胺、267mg(5mmol)NH4Cl和325mg(5mmol)NaN3在10ml DMF中的溶液在70℃下加热22小时。加入267mg(5mmol)NH4Cl和325mg(5mmol)NaN3以及40ml DMF，在100℃下加热24小时，在120℃下加热24小时。将反应倒入水(0℃)/EtOAc中(3x)。用10％KHSO4、10％NaCl水溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥。通过硅胶快速色谱纯化(CH2Cl2/MeOH99∶1)给出143mg(40％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸环丙基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，MS715(MH+)。
按照方法9.2.进行三苯甲基去保护(迅速加热至80℃)，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸环丙基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，mp173.5℃，分解MS473(MH+)。
类似地(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苄基-(2-氰基-乙基)-酰胺给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，MS523(MH+)。
方法A将520mg(0.9mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和315mg(1mmol)(1S)-3-[5-(1-氨基-2-联苯基-4-基-乙基)-四唑-1-基]-丙腈[S.De Lombaert.作为中性肽链内切酶抑制剂的四唑基烷基氨基甲基膦酸酯的制备，U.S.，17pp.CODENUSXXAM.美国专利号5,273,990 A 931228]在5ml THF中的溶液冷却至0℃，用206mg(1.1mmol)EDCI和14mg(0.09mmol)HOBT处理。将反应在室温下搅拌3小时，在10％KHSO4水溶液/乙酸乙酯中分配(3x)。用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥。通过硅胶快速色谱(己烷/EtOAc 1∶1)纯化，给出639mg(81％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-联苯-4-基-1-[1-(2-氰基-乙基)-1H-四唑-5-基]-乙基]-酰胺，Mp122-133℃，缓慢分解MS880(MH+)。
在0℃下，用0.05ml DBU处理300mg(0.34mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-联苯基-4-基-1-[1-(2-氰基-乙基)-1H-四唑-5-基]-乙基]-酰胺在10ml二氯甲烷中的溶液，并搅拌3小时。将反应倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥，得到220mg(78％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-联苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺.mp135-145℃缓慢分解，MS827(MH+)。
按照方法9.2.进行三苯甲基去保护，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-联苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，mp245-247.5℃，MS585(MH+)。
类似地从(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸得到(2S，4R)-4-巯基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸[(S)-2-联苯-4-基-1-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺，mp208.5-213.5℃，MS473(MH+)。
方法B在0℃下，用72mg(0.38mmol)EDCI处理200mg(0.34mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸和42mg(0.38mmol)N-羟基-2-吡啶酮在15ml二氯甲烷中的溶液。在室温下3.5小时后，将其冷却(0℃)，用37mg(0.38mmol)5-氨基甲基-四唑处理。在室温下搅拌反应过夜，加入2ml DMF，在室温下4小时后，用EtOAc/NaHCO3饱和水溶液萃取反应。用10％KHSO4水溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，通过硅胶快速色谱(CH2Cl2/MeOH 9∶1)纯化，得到100mg(44％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp135-145℃缓慢分解，MS661(MH+)。
按照方法9.2.进行三苯甲基去保护，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp61-73℃缓慢分解，MS419(MH+)。
类似地从(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸得到(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，MS549(MH+)；将其进行三苯甲基去保护(方法9.2.)，得到(2S，4R)-4-巯基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，MS307(MH+)。
在0℃下，用0.15ml(2.4mmol)碘甲烷和122mg(2.8mmol)55％NaH处理800mg(1.21mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺在15ml DMF中的溶液，升温至室温3小时。用水终止反应，用Et2O萃取(3x)。用10％KHSO4水溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。通过硅胶快速色谱(己烷/EtOAc1∶1至2∶1)纯化，得到2异构体。从最终产物追溯确定结构(通过CH-COSY)A)180mg(43％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-甲基-2H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp69-80℃缓慢分解，MS689(MH+)；B)190mg(45％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲基-(1-甲基-1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp46-56℃缓慢分解，MS689(MH+)。
按照方法9.2.进行三苯甲基去保护从(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-甲基-2H-四唑-5-基甲基)-酰胺给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-甲基-2H-四唑-5-基甲基)-酰胺，MS447(MH+)和从(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲基-(1-甲基-1H-四唑-5-基甲基)-酰胺给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(1-甲基-1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp103℃，缓慢分解，MS447(MH+)。
将865mg(1.3mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺、0.19ml(1.4mmol)4-甲氧基苄基氯，0.19ml(1.4mmol)三乙胺和一刮勺碘化钠在10ml丙酮中的溶液在75℃下加热15小时。反应在10％KHSO4水溶液/Et2O中分配(3x)。通过硫酸钠干燥有机相。从Et2O中沉淀，得到(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸1-(4-甲氧基-苄基)-1H-和[2-(4-甲氧基-苄基)-2H-四唑-5-基甲基]-酰胺的1∶1混合物，MS781(MH+)。
在0℃下，用0.11ml(1.7mmol)碘甲烷和31mg(0.7mmol)55％NaH处理350mg(0.44mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸1-(4-甲氧基-苄基)-1H-和[2-(4-甲氧基-苄基)-2H-四唑-5-基甲基]-酰胺的1∶1混合物的溶液，在3小时中升温，在室温下再搅拌1.5小时。将反应倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并在减压下蒸发。通过硅胶快速色谱(己烷/EtOAc 1∶1)纯化，得到359mg(100％)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-和[2-(4-甲氧基-苄基)-2H-四唑-5-基甲基]-甲基-酰胺的1∶1混合物，MS795(MH+)。
用0.3ml(1.9mmol)三乙基硅烷处理150mg(0.19mmol)(2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[1-(4-甲氧基-苄基)-1H-和[2-(4-甲氧基-苄基)-2H-四唑-5-基甲基]-甲基-酰胺的1∶1混合物在10ml TFA中的溶液，在80℃下回流7分钟，并蒸发。从氯甲烷/Et2O中结晶，得到46mg(57％)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp175℃缓慢分解，MS433(MH+)。
类似地2S，4R)-1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸1-(4-甲氧基-苄基)-1H-和[2-(4-甲氧基-苄基)-2H-四唑-5-基甲基]-酰胺的1∶1混合物与苄基溴，给出(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，mp152-155℃分解，MS509(MH+)；从(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，经过(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸[-(4-甲氧基-苄基)-1H-和[2-(4-甲氧基-苄基)-2H-四唑-5-基甲基]-酰胺的1∶1混合物与苄基溴，给出(2S，4R)-4-巯基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸苄基-(1H-四唑-5-基甲基)-酰胺，MS397(MH+)。
实施例14MeSO2酰胺的烷基化在-78℃下，用0.83ml(1.24mmol，1.5M THF溶液)LDA处理138mg(0.4mmol)(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸在8ml THF中的溶液。30分钟后，加入0.17ml(1.4mmol)苄基溴，升温至室温过夜。将反应倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥，得到242mg(定量)粗制的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸。
在0℃下，用0.057ml(0.44mmol)N-苄基甲基胺、92mg(0.48mmol)EDCI、6.1mg(0.04mmol)HOBT处理242mg(0.4mmol)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸在4ml THF中的溶液，升温至室温过夜。将反应倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥，经快速硅胶柱(己烷/EtOAc 4∶1)得到21mg(10％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，MS539(MH+)。
按照方法9.1.，从(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺给出(2S，4R)-4-巯基-1-(2-苯基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，MS419(MH+)。
类似于上述实施例，应用LiHMDS进行(2S，4R)-1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸的去质子化，应用苄基溴进行烷基化，经用N-苄基胺进行EDCI/HOBT偶合，得到(2S，4R)-1-(1，3-二苯基-丙烷-2-磺酰基)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，产率7％，MS629(MH+)；按照方法9.1.，从(2S，4R)-1-(1，3-二苯基-丙烷-2-磺酰基)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，给出(2S，4R)-1-(1，3-二苯基-丙烷-2-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，MS509(MH+)。
实施例15从二硫化物-二酸(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯开始在室温下，用0.45ml(4.08mmol，2当量)NMM、0.63ml(4.09mmol，2当量)哌啶-4-羧酸乙酯和1.5g(5.05mmol，2.5当量)TPTU处理1g(2.03mmol)(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯在50ml二氯甲烷中的溶液过夜。用二氯甲烷稀释溶液，用1M KHSO4溶液、5％NaHCO3溶液、盐水洗涤，并通过硫酸钠干燥。柱色谱纯化得到1.24g(79％)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，其为白色结晶。
按照3.1.的一般性方法，处理200mg(0.26mmol)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，得到1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，将其溶解于10ml二氯甲烷中，在室温下用176mg(0.78mmol，3当量)2-萘磺酰氯和95mg(0.78mmol，3当量)DMAP处理30分钟。将反应混合物倒入1M KHSO4和二氯甲烷中。用盐水洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，并通过快速色谱纯化，得到174mg(70％)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，其为白色固体，MS951(MH+)。
按照4.1.的一般性方法，将174mg(0.18mmol)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯进行二硫化物裂解，得到153mg(88％)(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，MS475(M-H)-。
按照5.2.，用LiOH处理(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，得到(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸，其为白色冻干固体，MS449(MH+)。
类似地，从1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯，分别与4-叔-丁基苯磺酰氯、5-二甲基氨基萘1-磺酰氯和1-萘基磺酰氯反应，制备下列化合物(2S，4S)-1-[1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，MS483(MH+)；(2S，4S)-1-[1-(5-二甲基氨基-萘-1-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为黄色固体，MS520(MH+)；(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为无色油，MS477(MH+)。
按照5.2.，用LiOH处理(2S，4S)-1-[1-(5-二甲基氨基-萘-1-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，得到(2S，4S)-1-1-(5-二甲基氨基-萘-1-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸，其为黄色固体MS492(MH+)。
形成作为最终产物的脲用82mg(0.69mmol，2.02当量)苯基异氰酸酯和70mg(0.69mmol，2.2当量)NMM处理180mg(0.31mmol)1-[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(4-乙氧基羰基-哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸4-乙酯在5ml甲苯中的溶液。将混合物在室温下搅拌2小时，置于冷冻箱中，通过过滤分离结晶，并用甲苯洗涤。按照4.1.进行粗产物的二硫化物裂解，得到200mg(77％)(2S，4S)-1-(4-巯基-1-苯基氨基甲酰基-吡咯烷-2-羰基)-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，MS405(M)。
类似于上述实施例，下列化合物制备如下从(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯与4-氨基-苯甲酸乙酯，随后BOC-裂解(3.1.)，经4-[[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-(4-乙氧基羰基-苯基氨基甲酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为米黄色固体，MS587(MH+)，随后分别用萘甲酰氯(naphtoyl chloride)(2.2.)、4-叔-丁基-苯磺酰氯、4-n-丁氧基苯磺酰氯、2-甲氧基羰基苯磺酰氯、4-联苯基磺酰氯、1-丁烷磺酰氯、3，4-二甲氧基苯磺酰基氯处理，随后按照4.1.进行二硫化物裂解，得到(2S，4S)-4-[[4-巯基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS449(MH+)；
(2S，4S)-4-[[1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS489(M-H-)(MH-)；(2S，4S)-4-[[1-(4-丁氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色无定形物，MS507(MH+)；(2S，4S)-4-[[4-巯基-1-(2-甲氧基羰基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色无定形物，MS493(MH+)；(2S，4S)-4-[[1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色无定形物，MS511(MH+)；(2S，4S)-4-[[1-(丁烷-1-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色无定形物，MS415(MH+)；(2S，4S)-4-[1-(3，4-二甲氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色无定形物，MS495(MH+)；类似地，从(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯与4-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，随后BOC-裂解(3.1.)，分别用2-萘磺酰氯、8-喹啉磺酰氯、α-甲苯磺酰氯、反式-β-苯乙烯磺酰氯、丙烷-2-磺酰氯处理，随后进行二硫化物裂解(4.1.)，制备下列化合物(2S，4S)-4-(2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS554(M-H)-；(2S，4S)-4-[2-[[4-巯基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS557(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[(4-巯基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS520(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[[4-巯基-1-(2-苯基-乙烯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS532(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[[4-巯基-1-(丙烷-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS471(MH+)。
类似地，从(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯与4-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯，随后BOC-裂解(3.1.)，分别用8-喹啉磺酰氯、α-甲苯磺酰氯、反式-β-苯乙烯磺酰氯处理，按照程序(5.1.)用LiOH裂解酯，进行二硫化物裂解(4.1.)，制备下列化合物(2S，4S)-4-[2-[[4-巯基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS529(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[(4-巯基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS492(MH+)；(2S，4S)-4-[2-[[4-巯基-1-(2-苯基-乙烯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS504(MH+)。
类似地，从(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯与N-苄基甲基胺，随后BOC-裂解(3.1.)，用2-萘磺酰氯处理，进行二硫化物裂解(4.1.)，制备下列化合物(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS441(MH+)。
按照1.2.用4-氨基苯甲酸乙酯处理(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，随后按照3.1.进行BOC水解，分别用2-萘磺酰氯、苯基甲烷磺酰氯、4-甲氧基苯磺酰氯、2-噻吩磺酰氯(2.1.)处理，随后按照一般性方法4.1.进行二硫化物裂解，制备下列化合物(2S，4S)-4-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS483(M-H)-；(2S，4S)-4-[(4-巯基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色冻干固体，MS447(M-H)-；(2S，4S)-4-{[4-巯基-1-(4-甲氧基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS463(M-H)-；(2S，4S)-4-{[4-巯基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS441(MH+)。
按照1.2.通过用甲基苄基胺处理(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，随后按照3.1.进行BOC水解，用4-叔-丁基-苯磺酰氯(2.1.)处理，随后按照一般性方法4.1.进行二硫化物裂解，制备下列化合物
(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS447(MH+)。
按照1.2.通过用哌啶-4-羧酸乙酯处理(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，随后按照3.1.进行BOC水解，分别用4-叔-丁基苯甲酰氯(2.2.)、4-甲氧基苯磺酰氯、苯基甲烷磺酰氯和2-噻吩磺酰氯(2.1.)处理，随后按照一般性方法4.1.进行二硫化物裂解，制备下列化合物(2S，4S)-1-[1-(4-叔-丁基-苯甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，MS447(MH+)；(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(4-甲氧基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，MS457(MH+)；(2S，4S)-1-(4-巯基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，MS441(MH+)；(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，MS433(MH+)。
实施例16酪氨酸-衍生物类似地，从(2S，2’S，3S，3S’)-3，3’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯和L-酪氨酸-甲酯.盐酸盐，随后进行BOC-裂解(3.1.)，制备下列中间体(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-[[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其为米黄色无定形物，MS647(MH+)。
在室温下，将230mg(0.35mmol)(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-[[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-吡咯烷-3-基二硫烷基]-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯用248mg(1.06mmol，3当量)4-叔-丁基苯磺酰氯和130mg(1.03mmol)DMAP在6ml二氯甲烷中处理48小时。浓缩溶液，粗产物按照4.1.进行二硫化物裂解，经柱色谱纯化后得到(S)-2-[[(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羟基-苯基)-丙酸甲酯，其为白色固体，MS521(MH+)，和(S)-2-[[(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(4-叔-丁基-苯磺酰基氧基)-苯基]-丙酸甲酯，其为无色无定形物，MS717(MH+)。
类似地，应用1-萘磺酰氯，制备(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其为无色无定形物，MS515(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(萘-1-磺酰基氧基)-苯基]-丙酸甲酯，其为无色无定形物，MS705(MH+)；应用1-联苯基-4-磺酰氯，制备(S)-2-[(2S，4S)-1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羟基-苯基)-丙酸甲酯，其为白色固体，MS541(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(联苯基-4-磺酰基氧基)-苯基]-丙酸甲酯，其为白色无定形冻干物，MS757(MH+)；应用4-丁氧基-苯磺酰氯，制备(S)-2-[[(2S，4S)-1-(4-丁氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羟基-苯基)-丙酸甲酯，其为白色固体，MS537(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-1-(4-丁氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(4-丁氧基-苯磺酰基氧基)-苯基]-丙酸甲酯，其为无色无定形物，MS749(MH+)；应用3，4-二甲氧基-苯磺酰氯，制备(S)-2-[[(2S，4S)-1-(3，4-二甲氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羟基-苯基)-丙酸甲酯，其为白色固体，MS525(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-1-(3，4-二甲氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(3，4-二甲氧基-苯磺酰基氧基)-苯基]-丙酸甲酯，其为无色无定形物，MS742(MNH4+)；
应用丁烷-1-磺酰氯，制备(S)-2-[[(2S，4S)-1-(丁烷-1-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-羟基-苯基)-丙酸甲酯，其为白色固体，MS462(MNH4+)；应用2-甲氧基羰基苯磺酰氯，制备2-[(2S，4S)-2-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酰基]-苯甲酸甲酯，其为白色结晶，MS523(MH+)。
应用2-萘甲酰氯，制备萘-2-羧酸4-[(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-2-甲氧基羰基-乙基]-苯基酯，其为白色结晶MS633(MH+)。
按照一般性方法5.2.处理2-[(2S，4S)-2-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酰基]-苯甲酸甲酯，得到2-[(2S，4S)-2-[(S)-1-羧基-2-(4-羟基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-磺酰基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS509(MH+)。
实施例17作为离析物的(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸向400mg(0.59mmol)(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸在9ml二氯甲烷的溶液中，加入220mg(2.6mmol，2.2当量)4-甲基吗啉，随后加入440mg(1.48mmol，1.25当量)TPTU和220mg(1.3mmol，1.1当量)L-缬氨酸甲酯-盐酸盐。将该溶液在室温下振摇过夜。浓缩溶液，通过快速色谱纯化粗产物，得到520mg(98％)(S)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-((S)-1-甲氧基羰基-2-甲基-丙基氨基甲酰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲基-丁酸甲酯，其为白色泡沫，将其按照一般性方法4.1.进行二硫化物裂解，得到(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-甲基-丁酸甲酯，其为无色泡沫，MS451(MH+)。
按照一般性过程5.2.，用0.1M LiOH处理(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-甲基-丁酸甲酯，得到(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-甲基-丁酸，其为白色泡沫，MS437(MH+)。
类似地，从(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，分别和β-丙氨酸乙酯-盐酸盐、L-脯氨酸甲酯.盐酸盐、L-酪氨酸甲酯-盐酸盐、L-甲硫氨酸甲酯.盐酸盐、3，4-(亚甲二氧基)苯胺、4-羟基-L-脯氨酸甲酯.盐酸盐、3，4-亚甲二氧苄基胺、(4-氨基苯基)乙酸乙酯、氨基苯甲酸乙酯、3-氨基苯甲酸乙酯-甲烷磺酸酯、4-氨基苄基醇、D，L-二哌啶酸乙酯、3-哌啶甲酸乙酯、p-甲氧基苯胺、4-羟基哌啶、(哌啶-4-基氧)-乙酸叔-丁酯、L-色氨酸甲酯.盐酸盐、2-氨基-1，3-丙二醇反应，制备下列化合物(2S，4S)-3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸乙酯，其为白色固体，MS437(MH+)；(S)-1-[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸甲酯，其为白色固体，MS449(MH+)；经(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯，得到(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其为白色固体，MS515(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-甲基-丁酸甲酯，其为无色泡沫，MS451(MH+)；(S)-2-(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-4-甲基硫烷基-丁酸甲酯，其为无色胶状物，MS483(MH+)；(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基酰胺，其为淡粉红色固体，MS457(MH+)；(2S，4R)-4-羟基-1-[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸甲酯，其为白色固体，MS465(MH+)；(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(苯并[1，3]间二氧杂环戊烯-5-基甲基)-酰胺，其为白色固体，MS471(MH+)；
(2S，4S)-[4-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯基]-乙酸乙酯，其为白色固体，MS499(MH+)；(2S，4S)-2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS485(MH+)；(2S，4S)-3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS485(MH+)；(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(4-羟基甲基-苯基)-酰胺，其为白色固体，MS443(MH+)；(R)-和(S)-1-[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-2-羧酸乙酯的混合物，其为无色胶状物，MS477(MH+)；(R)-和(S)-1-[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-3-羧酸乙酯的混合物，其为无色胶状物，MS477(MH+)；(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(4-甲氧基-苯基)-酰胺，其为白色固体，MS443(MH+)；(2S，4S)-(4-羟基-哌啶-1-基)-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-甲酮，其为白色固体，MS421(MH+)；(2S，4S)-[1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-基氧]-乙酸叔-丁酯，其为白色固体，MS535(MH+)；(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其为白色固体，MS538(MH+)；(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(2-羟基-1-羟基甲基-乙基)-酰胺，其为白色固体，MS411(MH+)；相应的酸的制备类似地，从(2S，4S)-4-(3S，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，分别和β-丙氨酸乙酯-盐酸盐、L-脯氨酸甲酯.盐酸盐、L-酪氨酸甲酯-盐酸盐、L-甲硫氨酸甲酯.盐酸盐、4-羟基-L-脯氨酸甲酯.盐酸盐、(4-氨基苯基)乙酸乙酯、氨基苯甲酸乙酯、3-氨基苯甲酸乙酯-甲烷磺酸酯、D，L-二哌啶酸乙酯、3-哌啶甲酸乙酯反应，随后如上所述进行二硫化物裂解(4.1.)和酯水解(5.2.)，制备下列化合物(2S，4S)-3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其为白色固体，MS409(MH+)；(S)-1-[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸，其为白色固体，MS435(MH+)；(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其为白色固体，MS501(MH+)；(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-4-甲基硫烷基-丁酸，其为无色胶状物，MS469(MH+)；(2S，4R)-4-羟基-1-[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸，其为白色固体，MS451(MH+)；(2S，4S)-[4-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-amin]-苯基]-乙酸，其为淡黄色固体，MS471(MH+)；(2S，4S)-2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS457(MH+)；(2S，4S)-3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS457(MH+)；(R)-和(S)-1-[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-2-羧酸的混合物，其为白色固体，MS449(MH+)；(R)-和(S)-1-[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-3-羧酸的混合物，其为白色固体，MS449(MH+)。
在室温、209mg(13.5mmol)DTT存在下，用22.5ml 0.1M LiOH处理243mg(4.5mmol)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯在13.5ml THF中的溶液72小时。溶液用1M KHSO4酸化，EtOAc萃取无机相。用盐水洗涤合并的有机相，并用硫酸钠干燥。通过二氯甲烷∶MeOH 9∶1作为洗脱剂的柱色谱进行纯化，随后用己烷研制，得到204mg(86％)(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其为白色固体，mp 130℃，MS522(M-H)-。
进一步修饰在室温下，用107mg(0.56mmol，1.5当量)2-萘甲酰氯和68mg(0.56mmol，1.5当量)DMAP处理在6ml二氯甲烷中的192mg(0.187mmol)(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯30分钟。蒸发溶剂，残渣通过二氯甲烷∶EtOAc 8∶1作为洗脱剂的快速色谱进行纯化，得到218mg(87％)白色泡沫，将其按照一般性过程4.1.进行二硫化物裂解，得到萘-2-羧酸4-[(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-2-甲氧基羰基-乙基]-苯基酯，其为白色泡沫，MS669(MH+)。
因此，用4-叔丁基苯甲酰氯代替萘甲酰氯，得到4-叔-丁基-苯甲酸4-[(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-2-甲氧基羰基-乙基]-苯基酯，其为白色泡沫，MS675(MH+)。
在室温、172mg(1.24mmol，3当量)K2CO3存在下，用54μl(0.45mmol，1.1当量)苄基溴处理在6ml DMF中的213mg(0.21mmol)(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯1小时。过滤混合物并蒸发。通过二氯甲烷∶EtOAc 8∶1-4∶1作为洗脱剂的柱色谱进行纯化，得到93mg白色泡沫，将其按照一般性过程4.1.进行二硫化物裂解，得到(S)-3-(4-苄氧基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其为白色泡沫，MS605(MH+)。
类似地，应用乙基溴和乙基2-溴丙酸酯代替苄基溴，制备下列化合物(S)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其为白色泡沫，MS543(MH+)；(S)-3-[4-[(R)-和-[(S)-1-乙氧基羰基-乙氧基)-苯基]-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯的混合物，其为白色泡沫，MS615(MH+)。
按照一般性过程5.2.进行酯部分的水解，分别得到(S)-3-(4-乙氧基-苯基)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其为白色固体，MS529(MH+)；(S)-3-[4-[(R)-和-[(S)-1-羧基-乙氧基]-苯基]-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸的混合物，其为白色固体，MS573(MH+)。
在室温下，用50μl(0.44mmol，1.2当量)异氰酸苯基酯处理在2mlDMF中的200mg(0.19mmol)(S)-3-(4-羟基-苯基)-2-{[(2S，4S)-4-[(3S，5S)-5-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-丙酸甲酯48小时。浓缩溶液，将残渣通过二氯甲烷∶EtOAc 4∶1作为洗脱剂的柱色谱纯化，得到150mg白色泡沫，将其按照一般性过程4.1.进行二硫化物裂解，得到(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-(4-苯基氨基甲酰基氧基-苯基)-丙酸甲酯，其为白色泡沫，MS634(MH+)。
因此，用异氰酸4-甲氧基苯基酯代替异氰酸苯基酯，得到(S)-2-[[(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-3-[4-(4-甲氧基-苯基氨基甲酰基氧基)-苯基]-丙酸甲酯，其为白色泡沫，MS664(MH+)。
实施例18作为离析物的(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸向8.05g(11.95mmol)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸在450ml二氯甲烷的溶液中，加入5.8ml(52.8mmol，2.2当量)4-甲基吗啉，随后加入8.9g(29.9mmol，1.2当量)TPTU和6.19g(23.9mmol，1.0当量)2-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸甲酯.盐酸盐。在室温下搅拌该溶液过夜，，用1M KHSO4溶液、5％碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，过滤并蒸发。粗产物通过快速色谱纯化，得到8.7g(67％)2-[2-[[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[(2-甲氧基羰基-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色无定形物，(Rf 0.2 EtOAc)，MS1098(MNH4+)。
向在200ml MeOH中的7.6g(7.05mmol)2-[2-[[(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[(2-甲氧基羰基-苯基氨基甲酰基)-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯中加入1ml 2M K2CO3和2.72g(17.6mmol，1.25当量)DTT。将该溶液在室温下搅拌2小时，用1M KHSO4水溶液(pH 2)酸化该溶液，并用EtOAc萃取无机相。用盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥，过滤并蒸发。将粗产物用Et2O研制，得到6.95g(91％)(2S，4R)-2-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，(Rf0.5 EtOAc)，MS559(MNH4+)。
以类似的方式，下列化合物制备如下从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸和a)3-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯-盐酸盐，随后按照4.1.进行二硫化物裂解，得到(2R，4R)-3-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色无定形物，(Rf 0.2己烷∶EtOAc 4∶1)，MS573(MNH4+)；b)2-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯-盐酸盐，随后按照4.1.进行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-2-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，(Rf 0.3 EtOAc)，MS556(MH+)；c)3-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸乙酯.盐酸盐，随后按照4.1.进行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-3-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色无定形物，(Rf 0.4 EtOAc)，MS570(MH+)；d)N-(4-甲氧基甲基-苯基)-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺，随后按照4.1.进行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-甲氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其为白色固体，(Rf 0.4二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 9∶1∶0.1)，MS542(MH+)。
按照1.2，从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸和N-[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺，制备中间体(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其为橙色固体，(Rf 0.8二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 9∶1∶0.1)，MS1298(MNH4+)。
进一步修饰在氩气氛下，将820mg(0.57mmol)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[[4-(叔-丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-苯基]-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺溶解于9ml乙腈∶二氯甲烷(2∶1)中，缓慢加入502μl HF(40％在水中)。搅拌该溶液4.5小时，加入冰水和CH2Cl2，然后通过饱和碳酸钠溶液调节pH值至8-9。进行相分离，用二氯甲烷(2x)萃取无机相，用水洗涤合并的有机相，并通过硫酸镁干燥，过滤并蒸发。通过二氯甲烷/MeOH(100∶0-96∶4)梯度硅胶柱色谱纯化，得到590mg(98％)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[(4-羟基-甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其为淡黄色固体，(Rf 0.4二氯甲烷∶MeOH 9∶1)，MS1070(MNH4+)。
在氩气氛、0℃下，向100mg(0.09mmol)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[(4-羟基-甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺和50μl(0.21mmol，2.2当量)2，2，2-三氯亚氨逐乙酸叔-丁基酯的混悬液中，加入1μl(0.01mmol)triflic acid。将反应升温至室温，搅拌5小时。加入27μl(0.11mmol，1.2当量)2，2，2-三氯亚氨逐乙酸叔-丁基酯，将反应在室温下搅拌12小时后，再加入27μl(0.11mmol，1.2当量)2，2，2-三氯亚氨逐乙酸叔-丁基酯、2ml环己烷和2ml of CCl4，再搅拌30小时。将该溶液加入到冰水中，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用二氯甲烷(3x)萃取无机相，用水洗涤合并的有机相，并通过硫酸镁干燥，过滤并蒸发。将残渣溶解于3ml二氯甲烷中，冷却至0℃，过滤并浓缩。用硅胶柱色谱(EtOAc)纯化，得到48mg(43％)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[[(4-叔-丁氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-叔-丁氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其为灰白色无定形物，(Rf 0.2 EtOAc∶MeOH 98∶2)，将其按照4.2.进行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-叔-丁氧基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其为白色无定形物，(Rf 0.35二氯甲烷∶MeOH 95∶5)，MS584(MH+)。
按照4.2.，进行中间体(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-[[[(4-羟基-甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺的二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺，其为白色固体，(Rf 0.3二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 9∶1∶0.1)，MS528(MH+)。
实施例19从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸的进一步的例子下列酸如下制备从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，和
a)2-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸甲酯.盐酸盐，按照1.2.，随后按照5.1.和4.2.，得到(2S，4R)-2-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其为白色固体，(Rf 0.4二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 9∶1∶0.1)，MS526(M-H)-；b)3-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯.盐酸盐，按照1.2.，随后按照5.1.和4.2.，得到(2S，4R)-3-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其为淡黄色固体，(Rf0.5二氯甲烷∶MeOH 4∶1)，MS545(MNH4+)；c)2-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯.盐酸盐，按照1.2.，随后按照5.1.和4.2.，得到(2S，4R)-2-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为淡蓝色固体，(Rf 0.2二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 95∶5∶0.1)，MS540(M-H)-；d)3-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸乙酯.盐酸盐，按照1.2.，随后按照5.1.和4.2.，得到(2S，4R)-3-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，(Rf 0.2二氯甲烷∶MeOH∶AcOH 95∶5∶0.1)，540(M-H)-。
按照1.3.，从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，和(S)-3-氨基-N-苄基-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.盐酸盐、(S)-3-氨基-N-(4-异丙基-苯基)-琥珀酰胺酸叔-丁酯、(S)-N-(4-异丙基-苯基)-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯、(S)-N-苄基-N-甲基-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯、(S)-N-苄基-N-甲基-2-甲基氨基-丙酰胺、N-苄基-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺、(S)-吡咯烷-2-羧酸甲酯、3-环丙基氨基-丙酸乙酯、(R)-吡咯烷-2-羧酸苄基酯、1-甲基氨基乙酰基-哌啶-4-羧酸乙酯、3-甲基氨基-丙酸乙酯、3-氨基-丙酸甲酯、(S)-N-苄基-N-甲基-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.盐酸盐和2-氨基吡啶，随后按照4.2.进行二硫化物裂解，制备下列化合物(S)-N-苄基-3-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其为白色固体，MS612(MH+)；(S)-N-(4-异丙基-苯基)-3-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其为淡黄色固体，MS626(MH+)；(S)-N-(4-异丙基-苯基)-3-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其为白色固体，MS638(M-H)-；(S)-N-苄基-3-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其为白色固体，MS626(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(S)-[1-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-乙基]-甲基-酰胺，其为白色固体，MS526(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(苄基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其为白色固体，MS512(MH+)；(2S)-1-[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸甲酯，其为无色油，mp 80-82℃，MS449(MH+)；(2S，4R)-3-[环丙基-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸乙酯，其为无色油，MS476(M)；(R)-1-[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸苄基酯，其为白色泡沫，MS525(MH+)；(2S，4R)-1-[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，mp 65-66.5℃，MS548(MH+)；(2S，4R)-3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-丙酸乙酯，其为无色油，MS451(MH+)；(2S，4R)-3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其为无色油，MS421(M-H)-；(S)-N-苄基-3-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯，其为白色固体，MS626(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(吡啶-2-基甲基)-酰胺，其为白色结晶，MS428(MH+)；
按照1.3，从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，和(S)-3-氨基-N-(4-异丙基-苯基)-琥珀酰胺酸叔-丁酯、(S)-3-氨基-N-苄基-N-甲基-琥珀酰胺酸叔-丁酯.盐酸盐、(S)-N-苄基-N-甲基-3-甲基氨基-琥珀酰胺酸叔-丁酯，随后按照5.3.进行叔-丁酯裂解和按照4.2.进行二硫化物裂解，制备下列化合物(S)-N-(4-异丙基-苯基)-3-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-琥珀酰胺酸，其为白色固体，MS570(MH+)；(S)-N-苄基-3-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸，其为白色固体，MS554(M-H)-；(3S)-N-苄基-3-[[(2S，4R])-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-N-甲基-琥珀酰胺酸，其为白色固体，MS570(MH+)；按照1.3.，从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，分别和1-甲基氨基乙酰基-哌啶-4-羧酸乙酯、(R)-吡咯烷-2-羧酸苄基酯、3-甲基氨基-丙酸乙酯、3-环丙基氨基-丙酸乙酯和3-氨基-丙酸甲酯反应，随后按照4.3.进行二硫化物裂解，制备下列化合物(2S，4R)-1-[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-哌啶-4-羧酸，其为白色固体，mp 105-107℃，MS520(MH+)；(2R)-1-[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-吡咯烷-2-羧酸，其为白色固体，mp 240-241.5℃，MS435(MH+)；(2S，4R)-3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-丙酸，其为白色固体，mp 160-162℃421(M-H)-；(2S，4R)-3-[环丙基-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其为白色固体，MS447(M-H)-；(2S，4R)-3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其为白色固体，mp 88-89℃，MS407(M-H)-。
实施例20从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸的进一步的例子向在25ml二氯甲烷中的300mg(0.44mmol)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸中，加入100μl(0.89mmol，1当量)4-甲基吗啉，随后加入331mg(1.1mmol，1.25当量)TPTU和115μl(0.89mmol，1当量)N-甲基苄基胺。将该溶液在室温下搅拌过夜。将混合物加入到1M KHSO4溶液中，用EtOAc萃取，有机相用5％碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。通过硫酸钠干燥该溶液，过滤并蒸发，得到313mg(81％)(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为无色泡沫，将其按照一般性过程4.1.进行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS441(MH+)。
类似地，从(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，分别和异哌啶甲酸乙酯、4-氨基苯甲酸乙酯、L-色氨酸甲酯.盐酸盐和4-(3-氨基-丙酰基氨基)-苯甲酸乙酯反应，制备下列化合物(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色固体，MS477(MH+)；(2S，4R)-4-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS485(MH+)；(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯，其为白色固体，MS538(MH+)；(2S，4R)-4-[3-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS556(MH+)。
按照一般性过程5.2.，分别对(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯和(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸甲酯进行酯裂解，得到(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸，其为白色固体，MS449(MH+)；
(S)-3-(1H-吲哚-3-基)-2-[[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-丙酸，其为白色固体，MS522(M-H)-。
实施例21其它的二硫化物-二酸修饰分别用N-甲基苄基胺和哌啶-4-羧酸乙酯(1.2.)处理(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，随后按照一般性过程4.1.进行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为无色油，MS447(MH+)；(2S，4R)-1-[1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为无色油，MS483(MH+)；分别用N-甲基苄基胺和哌啶-4-羧酸乙酯(1.2.)处理(2S，4R)-4-[(3R，5S)-5-羧基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸，随后按照一般性过程4.1.进行二硫化物裂解，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为无色油，MS405(MH+)；(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-羰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为无色油，MS441(MH+)。
实施例22从AcS-酸开始22.1.作为离析物的(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(a1)用49μl(0.43mmol，1.1当量)4-甲基吗啉、142mg(0.47mmol，1.2当量)TPTU和140mg(0.59mmol，1.5当量)4-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯处理在10ml二氯甲烷中的150mg(0.4mmol)(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸。将该溶液在室温下搅拌过夜。浓缩混合物，通过快速色谱纯化，得到233mg(98％)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS598(MH+)。
(a2)按照一般性过程7.2.，将(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯转化为(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS542(MH+)。
(a3)在0℃下，用335μl 0.6M(0.2mmol)甲酸钠(在甲醇中)处理在5ml甲醇中的80mg(0.134mmol)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯1小时。将该溶液倒入EtOAc/1M KHSO4中，用EtOAc萃取无机相，盐水洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。通过柱色谱(EtOAc)纯化，得到70mg(定量)(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS556(MH+)。
类似地，从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，分别和4-甲基氨基苯甲酸甲酯、4-(2-氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯、4-(氨基乙酰基-甲基-氨基)-苯甲酸甲酯、4-(2-甲基氨基-乙酰基氨基)-苯甲酸乙酯、4-氨基苯甲酸乙酯、2，3，6-三氟苄基胺反应，制备下列化合物(b1)(2S，4R)-4-[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS527(MH+)；(b2)(2S，4R)-4-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS471(MH+)；(b3)(2S，4R)-4-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS485(MH+)；(c1)(2S，4R)-4-[2-[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色泡沫，MS584(MH+)；(c2)(2S，4R)-4-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其为白色结晶，MS514(MH+)；(c3)(2S，4R)-4-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色结晶，MS542(MH+)；(d1)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS584(MH+)；(d2)(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色泡沫，MS526(M-H)-；(d3)(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色结晶，MS542(MH+)；(e1)(2S，4R)-4-[2-[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS598(MH+)；(e2)(2S，4R)-4-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸，其为白色泡沫，MS528(MH+)；(e3)(2S，4R)-4-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS556(MH+)；(f2)(2S，4R)-4-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS457(MH+)；(f3)(2S，4R)-4-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-苯甲酸乙酯，其为白色固体，MS485(MH+)；(g1)硫代乙酸(3R，5S)-S-[1-(萘-2-磺酰基)-5-(2，3，6-三氟-苄基氨基甲酰基)-吡咯烷-3-基]酯，MS523(MH+)；(g3)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸2，3，6-三氟-苄基酰胺，其为无色油，MS481(MH+)。
进一步的例子按照1.2.，用3-氨基-N-乙基哌啶处理(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸，随后按照7.1.进行去保护，得到(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(R)-和(S)-(1-乙基-哌啶-3-基)-酰胺的1∶1混合物，其为白色固体，MS448(MN+)。
向在10ml甲苯和4ml THF中的200mg(0.52mmol)(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸中，加入226μl(2.6mmol，5当量)草酰氯，在室温下搅拌该溶液2小时，并浓缩。将残渣溶剂于8mlTHF中，在0℃下将该溶液加入到180mg(1.19mmol，2.2当量)4-甲基氨基苯甲酸和360mg(2.6mmol，5当量)K2CO3在8ml THF的混悬液中。2.5小时后，通过1M KHSO4酸化该溶液，EtOAc萃取，用盐水洗涤有机相并通过硫酸钠干燥。柱色谱纯化，得到91mg(35％)(2S，4R)-4-[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS513(MH+)。
22.2从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯开始类似地，按照1.2.，从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯，分别和4-氨基苯甲酸乙酯，L-亮氨酸乙基酯.盐酸盐、L-色氨酸甲酯.盐酸盐、L-缬氨酸甲酯.盐酸盐、L-酪氨酸甲酯.盐酸盐、异哌啶甲酸乙酯反应，随后按照7.2.进行硫酯裂解，制备下列化合物(2S，4R)-2-(4-羧基-苯基氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为白色固体，MS399(M-H)-；(2S，4R)-2-[(S)-1-羧基-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为无色无定形物，MS395(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-1-羧基-2-(1H-吲哚-2-基)-乙基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为白色固体，MS468(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-1-羧基-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为白色固体，MS381(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-1-羧基-2-(4-羟基-苯基)-乙基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为白色固体，MS445(MH+)；(2S，4R)-1-(1-苄氧基羰基-4-巯基-吡咯烷-2-羰基)-哌啶-4-羧酸，其为无色无定形物MS359(M-SH)；类似地，按照1.2.，从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯，分别和哌啶、4-氨基-1-苄基哌啶、2-氨基-1，3-丙二醇、N-苄基甲基胺、3-氨基丙腈反应，随后按照7.1.进行硫酯裂解，制备下列化合物(2S，4R)-4-巯基-2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为无色无定形物，MS349(MH+)；(2S，4R)-2-(1-苄基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为无色无定形物，MS454(MH+)；(2S，4R)-2-(2-羟基-1-羟基甲基-乙基氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为无色无定形物，MS355(MH+)；(2S，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为无色无定形物，MS351(M-SH)；(2S，4R)-2-(2-氰基-乙基氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为无色无定形物，MS334(MH+)；类似地，按照1.2.，从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-苄基酯，和4-氨基苯甲酸乙酯、L-色氨酸甲酯.盐酸盐、L-缬氨酸甲酯.盐酸盐、L-亮氨酸乙酯.盐酸盐、L-酪氨酸甲酯.盐酸盐、异哌啶甲酸乙酯反应，随后按照7.3.进行硫酯裂解，制备下列化合物(2S，4R)-2-(4-乙氧基羰基-苯基氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为白色固体，MS429(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-2-(1H-吲哚-2-基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为白色固体，MS482(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-2-[(S)-1-甲氧基羰基-2-甲基-丙基氨基甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为无色无定形物，MS395(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-1-乙氧基羰基-3-甲基-丁基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为无色无定形物，MS423(MH+)；(2S，4R)-2-[(S)-2-(4-羟基-苯基)-1-甲氧基羰基-乙基氨基甲酰基]-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸苄基酯，其为白色固体，MS459(MH+)；(2S，4R)-1-(1-苄氧基羰基-4-巯基-吡咯烷-2-羰基)-哌啶-4-羧酸乙酯，其为无色无定形物，MS387(M-SH)。
22.3.(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-[[[(4-甲氧基羰基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯-吡咯烷-N位残基的修饰按照一般性过程1.2.，从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯和4-(甲基-甲基氨基乙酰基-氨基)-苯甲酸甲酯，制备(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-[[[(4-甲氧基羰基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其为白色固体。
在0℃下，用15ml TFA处理在60ml二氯甲烷中的2.92g(5.7mmol)(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-[[[(4-甲氧基羰基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-氨基甲酰基]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，直到检测不到起始原料。浓缩溶液，溶解于甲苯中并蒸发3次，得到2.7g(93％)(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯.三氟-乙酸盐，其为棕色泡沫，MS 408(MH+)。
向在3ml二氯甲烷中的179mg(0.71mmol，1.5当量)联苯基磺酰氯中，加入248mg(0.47mmol)(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯三氟-乙酸盐(在1ml二氯甲烷中)，随后加入83μl(0.75mmmol，1.6当量)NMM和58mg(0.047mmol，0.1当量)DMAP。将反应振摇30分钟，直到检测不到起始产物。用1M KHSO4、盐水萃取有机相，并通过硫酸钠干燥。通过柱色谱(EtOAc)纯化，得到134mg(46％)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(联苯基-4-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS624(MH+)；类似地，用反式-β-苯乙烯磺酰氯、2-(1-萘基)乙烷磺酰氯、8-喹啉磺酰氯、1-萘基磺酰氯、2-三氟甲基磺酰氯、α-甲苯磺酰氯、4-硝基苯磺酰氯、4-氟苯磺酰氯、2-噻吩磺酰氯、苯磺酰氯代替联苯基磺酰氯，制备下列化合物(E)-(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(2-苯基-乙烯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为米黄色泡沫，MS574(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(2-萘-1-基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS626(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS599(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS598(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS616(MH+)；(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS562(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(4-氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS566(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS554(MH+)；(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-1-苯磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS548(MH+)；(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(4-硝基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS593(MH+)；在0℃下，向在10ml THF中的106mg(0.17mmol)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(联苯基-4-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯中，加入10ml 0.1M LiOH，将该溶液在室温下搅拌2小时，倒入2ml 1M KHSO4溶液中，用EtOAc萃取。用盐水洗涤合并的有机相，硫酸钠干燥。将残渣在己烷中研制，得到67mg(69％)(2S，4R)-4-[[[[1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS568(MH+)。
类似地，制备下列化合物从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(2-萘-1-基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(2-萘-1-基-乙烷磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS570(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS543(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS542(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS560(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[(4-巯基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS506(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(4-氟-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[1-(4-氟-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS510(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS498(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-1-苯磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[(1-苯磺酰基-4-巯基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸，其为白色固体，MS490(M-H)-。
在0℃下，用0.35ml 0.6M(0.21mmol)NaOMe(在MeOH中)处理在3ml MeOH中的85mg(0.142mmol)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯1小时，将该溶液倒入1M KHSO4溶液中，用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。将残渣在己烷中研制，得到55mg(60％)(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-1-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS556(MH+)。
类似地，制备下列化合物从(E)-(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(2-苯基-乙烯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(E)-(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(2-苯基-乙烯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS532(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(喹啉-8-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS557(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(2-三氟甲基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS574(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(噻吩-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色固体，MS512(MH+)；从(2S，4R)-4-[[[(4-乙酰基硫烷基-1-苯磺酰基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯制备(2S，4R)-4-[[[(1-苯磺酰基-4-巯基-吡咯烷-2-羰基)-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯，其为白色泡沫，MS506(MH+)。
实施例23通过平行合成制备酰胺23.1.中间体的制备在0℃下，用6.71g(35.02mmol)和0.4g(2.92mmol)HOBT处理14.82g(29.2mmol)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯和4.13ml(32.1mmol)N-苄基甲基胺在300ml THF中的溶液。将反应倒入10％KHSO4水溶液/EtOAc中(3x)。用饱和NaHCO3水溶液和10％NaCl溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥，通过硅胶快速色谱纯化(己烷/EtOAc 9∶1至1∶1)后，得到9.68g(56％)(2S，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS593(MH+)。
19176 B73在-20℃下，用36ml TFA处理9.68g(16.33mmol)(2S，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯在33ml二氯甲烷中的溶液，在5.5中升温至室温，保持在0℃下过夜。蒸发反应，用饱和碳酸氢钠水溶液/EtOAc处理(3x)，并通过硫酸钠干燥有机相，并蒸发，得到7.59g(95％)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，MS493(MH+)。
23.2N-最优化，合成的一般性过程氨基甲酸酯用1.2当量N-乙基二异丙基胺和1.2当量氯甲酸酯处理0.22mmol(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺在1.7ml二噁烷中的溶液。在室温下16小时后，过滤反应，用二噁烷洗涤，通过制备HPLC(RP-16，CH3CN/H2O，UV 230nm)纯化。
三苯甲基-去保护(9.3.)给出游离的硫醇。
磺酰胺将0.32mmol(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺、1.2当量N-乙基二异丙基胺和催化量的DMAP在2ml二氯乙烷中的溶液加入到1.2当量磺酰氯中。过夜，蒸发反应，将残渣再溶解于DMF中，通过制备HPLC(RP-16，CH3CN/H2O，UV 230nm)纯化。
三苯甲基-去保护(9.3.)给出游离的硫醇。
脲用0.21mmol适当的异氰酸酯处理0.11mmol(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺在0.5ml二噁烷中的溶液，将反应保持在室温下30分钟，通过制备HPLC(RP-18，CH3CN/H2O，UV 230nm)纯化。
三苯甲基-去保护(9.3.)给出游离的硫醇。
酰胺用1.5当量EDCI(在1ml二氯甲烷中)处理在1ml二噁烷中的0.25mmol(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺、1.5当量酸和催化量的DMAP。搅拌反应过夜，蒸发，并通过制备HPLC(RP-18，CH3CN/H2O，UV 230nm)纯化。
三苯甲基-去保护(9.3.)给出游离的硫醇。
按照表3，4，5和6，制备下列化合物
*5-氯磺酰基-2-乙氧基-苯甲酸Dunn，Peter James；Wood，Albert Shaw.
通过环化制备Sildenafil的方法，欧洲专利申请EP 812845 A11D、1E与1F(本发明)各包含1重量％聚氨基酰胺(MW＝10,000)、0.1重量％聚氨基酰胺(MW＝10,000)、与1重量％聚氨基酰胺(MW＝80,000)。测量各化学-抛光系统对基底的铂与氧化硅层的移除速率。移除速率(RR)与选择性列于下表中表铂移除速率及铂/氧化物选择性
这些结果证明，依照本发明使用包含含胺聚合物的CMP系统可得改良的金属对氧化物选择性。
在此所列的所有参考数据，包括公告、专利申请与专利，在此以如同将各参考数据个别地且特定地并入作为参考及在此全部叙述的相同程度并入作为参考。
在叙述本发明的文(特别是以下的申请专利范围)中的名词“一(a)”与“一(an)”与“此(the)”及类似符号视为涵盖单数或复数，除非在此另有指示或在内文中明确地否认。名词“包含”、“具有”、“包括”、及“含”视为开放名词(即，mmol)(2S，4R)-4-羟基-2-(哌啶-1-基羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯48小时。用1M KHSO4溶液、水、5％碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤该溶液，通过硫酸钠干燥并浓缩。快速色谱纯化，得到6.42g(90％)(2S，4R)-2-(哌啶-1-羰基)-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其为白色泡沫。
在100℃下，用2.42g(21.18mmol，1.5当量)硫代乙酸钾处理在50ml DMF中的6.39g(14.12mmol)(2S，4R)-2-(哌啶-1-羰基)-4-(甲苯-4-磺酰基氧基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯4小时。在真空下浓缩该溶液，将残渣溶解于EtOAc、NaHCO3溶液中，进行相分离，用EtOAc萃取无机相。用水和盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥。通过柱色谱纯化，得到3.59g(71％)(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其为淡粉红色固体。
用3ml TFA处理在6ml二氯甲烷中的1.27g(3.56mmol)(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，在0℃下处理10分钟，在室温下处理20分钟。将该溶液倒入饱和碳酸氢钠水溶液中，用二氯甲烷萃取，水和盐水洗涤，通过硫酸钠干燥，得到910mg粗产物(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯，其不经过进一步进行下列反应。
在室温、214mg(1.75mmol，1.5当量)DMAP存在下，用398mg(1.75mmol，1.5当量)2-萘磺酰氯处理在25ml二氯甲烷中的300mg(1.17mmol)(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯1.5小时。将该溶液加入到1M KHSO4溶液中，进行相分离，用二氯甲烷萃取无机相，1M KHSO4溶液、水和盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥并浓缩，通过快速色谱纯化，得到280mg(54％)(3S，5S)-硫代乙酸S-[1-(萘-2-磺酰基)-5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯，其为白色结晶。
用9ml 0.1M LiOH处理在9ml THF中的148mg(0.33mmol)(3S，5S)-硫代乙酸S-[1-(萘-2-磺酰基)-5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯，在0℃下处理30分钟，在室温下处理1小时。用乙醚萃取该溶液，1M KHSO4溶液酸化无机相，EtOAc萃取。用盐水洗涤EtOAc相，通过硫酸钠干燥，用己烷研制，给出99mg(74％)(2S，4S)-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-哌啶-1-基-甲酮，其为白色固体，MS405(MH+)。
类似地，从(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-3-基]酯，和4-叔-丁基-苯磺酰氯、4-甲氧基-苯磺酰氯、4-n-丁氧基苯磺酰氯，苯基甲烷磺酰氯(2.1.)、p-甲氧苯酰氯和4-叔-丁基苯甲酰氯(2.2)反应，制备下列化合物(2S，4S)-[1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-基]-哌啶-1-基-甲酮，其为白色固体，MS411(MH+)；(2S，4S)-[4-巯基-1-(4-甲氧基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-基]-哌啶-1-基-甲酮，其为白色固体，MS385(MH+)；(2S，4S)-[1-(4-丁氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-基]-哌啶-1-基-甲酮，其为白色固体，MS427(MH+)；(2S，4S)-(4-巯基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-基)-哌啶-1-基-甲酮，其为黄色浆状物，MS369(MH+)；(2S，4S)-[4-巯基-2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-基]-(4-甲氧基-苯基)-甲酮，其为无色浆状物，MS349(MH+)；(2S，4S)-(4-叔-丁基-苯基)-[4-巯基-2-(哌啶-1-羰基)-吡咯烷-1-基]-甲酮，其为白色固体，MS375(MH+)；23.4.B)-thioac，amid形成，接着R3SO2Cl或R3COCl处理类似地，下列中间体制备如下从N-BOC-L-羟基-脯氨酸和N-甲基苄基胺反应，随后引入S-乙酰基和进行Boc-裂解，得到(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-吡咯烷-3-基]酯。
按照上述例子，用4-甲氧基-苯磺酰氯、2-萘基磺酰氯、4-叔-丁基-苯磺酰氯、4-n-丁氧基苯磺酰氯，苯基甲烷磺酰氯(2.1.)、p-甲氧苯酰氯和4-叔-丁基苯甲酰氯(2.2)处理(3S，5S)-硫代乙酸S-[5-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-吡咯烷-3-基]酯，随后进行S-乙酰基裂解(7.1.)，得到(2S，4S)-4-巯基-1-(4-甲氧基-苯磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS421(MH+)；(2S，4S)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS441(MH+)；
(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS447(MH+)；(2S，4S)-1-(4-丁氧基-苯磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS463(MH+)；(2S，4S)-4-巯基-1-苯基甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为无色浆状物，MS405(MH+)；(2S，4S)-4-巯基-1-(4-甲氧基-苯甲酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为无色浆状物，MS385(MH+)；(2S，4S)-1-(4-叔-丁基-苯甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为无色浆状物，MS411(MH+)。
23.5.D-4-巯基吡咯烷衍生物类似于实施例2或4，从(2R，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯制备(2R，4S)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯，其为棕色油，MS304(MH+)。
类似地，如在“二硫化物酸”(实施例3)部分所描述为了形成二硫化物二酸，从(2R，4S)-4-乙酰基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯制备下列化合物(2R，2’R，4S，4S’)-4，4’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，其为淡黄色固体。
按照1.2.用苄基甲基胺处理(2R，2’R，4S，4S’)-4，4’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，随后按照3.1.用TFA处理，按照2.1.用甲烷磺酰氯处理，按照4.1.进行二硫化物裂解，得到(2R，4S)-4-巯基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为淡灰色油，MS329(MH+)；按照1.2.用苄基甲基胺处理(2R，2’R，4S，4S’)-4，4’-二硫烷二基-二-吡咯烷-1，2-二羧酸1，1’-二-叔-丁酯，随后按照3.1.用TFA处理，按照2.3.用异氰酸2-萘基酯处理，按照4.1.进行二硫化物裂解，得到(2R，4S)-4-巯基-吡咯烷-1，2-二羧酸2-(苄基-甲基-酰胺)1-萘-2-基酰胺，其为淡黄色固体，MS420(MH+)。
向6.7ml(103.3mmol)甲烷磺酸、14.4ml(103.3mmol)三乙胺和28.8g(107.6mmol)三苯膦在280ml甲苯的混悬液中，加入21.12g(86.12mmol)(2R，4R)-4-羟基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯[按照“通过锍盐环化合成大环二内酯”制备，T.Nakamura，H.Matsuyama，N.Kamigata，M.Iyoda，有机化学杂志(J.Org.Chem.)(1992)，57(14)，3783-9]在180ml甲苯中的混悬液。加入21.6ml(112mmol)偶氮二羧酸二异丙基酯(放热！)，将该溶液在80℃下加热2.5小时，在室温下搅拌1天。在室温下加入300ml水，用乙酸乙酯(3×300ml)萃取。用1M KHSO4水溶液(2×100ml)、盐水(2×150ml)洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发，得到作为粗产物的27.85g(2R，4S)-4-甲烷磺酰基氧基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯，将其溶解于THF中，按照5.2.用LiOH处理，得到(2R，4S)-4-甲烷磺酰基氧基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯。
从(2R，4S)-4-甲烷磺酰基氧基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯开始制备，按照1.2.用N-甲基苄基胺处理，随后用三苯基甲烷硫醇/硫代乙酸钾处理(参见实施例2，’通过甲磺酸酯制备酯’)，得到(2R，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，其为淡黄色结晶，MS593(MH+)。
从(2R，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，在三苯甲基(3.2.)存在下进行BOC-裂解，随后按照2.1.分别用2-萘基磺酰氯、4-联苯基磺酰氯、异丙基磺酰氯、甲烷磺酰氯和5-氯磺酰基-2-乙氧基-苯甲酸处理，随后进行三苯甲基裂解(9.1.)，制备下列化合物(2R，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS441(MH+)；(2R，4R)-1-(联苯基-4-磺酰基)-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS467(MH+)；(2R，4R)-4-巯基-1-(丙烷-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为淡棕色油，MS357(MH+)；(2R，4R)-4-巯基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为白色固体，MS329(MH+)；(2R，4R)-5-[2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-磺酰基]-2-乙氧基-苯甲酸，其为白色固体，MS479(MH+)。
从(2R，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，在三苯甲基(3.2.)存在下进行BOC-裂解，随后分别用乙酰基氯，苯基乙酰基氯(2.2.)处理，随后进行三苯甲基裂解(9.1.)，制备下列化合物(2R，4R)-1-乙酰基-4-巯基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为淡棕色油，MS293(MH+)；(2R，4R)-4-巯基-1-苯基乙酰基-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺，其为淡黄色油，MS369(MH+)。
从(2R，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，在三苯甲基(3.2.)存在下进行BOC-裂解，随后分别用异氰酸2-萘基酯、异氰酸乙基酯(2.3.)处理，随后进行三苯甲基裂解(9.1.)，制备下列化合物(2R，4R)-4-巯基-吡咯烷-1，2-二羧酸2-(苄基-甲基-酰胺)1-萘-2-基酰胺，其为灰白色固体，MS420(MH+)；(2R，4R)-4-巯基-吡咯烷-1，2-二羧酸2-(苄基-甲基-酰胺)1-乙基酰胺，其为无色油，MS322(MH+)。
23.6.延伸的产物(酰胺)向在0.86ml THF中的75mg(0.154mmol，1当量)(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酸中，加入24μl(0.185mmol，1.2当量)苄基甲基胺，将该溶液冷却至0℃，加入71mg(0.371mmol，2.4当量)EDCI和21mg(0.151mmol，1.2当量)HOBT。在室温下搅拌该混合物过夜，用EtOAc稀释，10％KHSO4溶液、饱和NaHCO3溶液和盐水洗涤，通过硫酸钠干燥并蒸发，得到131mg(50％)(2R，4R)-N-苄基-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-甲基-丙酰胺，其为棕色胶状物，将其不经过进一步纯化进行去保护。
在0℃下，向在8ml TFA中的131mg(0.23mmol)(2R，4R)-N-苄基-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-甲基-丙酰胺中，加入0.37ml(2.3mmol，10当量)三乙基硅烷，将该溶液在80℃下搅拌60分钟，蒸发，混悬于甲苯中两次并蒸发。通过应用RPC18柱的制备HPLC纯化粗产物，得到17mg(2R，4R)-N-苄基-3-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-甲基-丙酰胺，其为淡黄色胶状物，MS469(MH+)。
类似地，制备下列酰胺从(2R，4R)-3-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酸，分别和苄基胺，苄基甲基胺，苯基胺，2-氟-苄基胺，异丙基胺，苯乙胺，2，3，6-三氟-苄基胺，2，4，5-三氟-苄基胺反应，随后进行去保护，得到(2R，4R)-N-苄基-3-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酰胺，MS455(MH+)；(2R，4R)-3-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-苯基-丙酰胺，其为黄色胶状物，MS441(MH+)；(2R，4R)-N-(2-氟-苄基)-3-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酰胺，其为淡棕色胶状物，MS473(MH+)；(2R，4R)-N-异丙基-3-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-丙酰胺，其为淡棕色胶状物，MS407(MH+)；(2R，4R)-3-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-苯乙基-丙酰胺，其为淡棕色胶状物，MS469(MH+)；(2R，4R)-3-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-(2，3，6-三氟-苄基)-丙酰胺，其为淡棕色胶状物，MS509(MH+)；(2R，4R)-3-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-(2，4，5-三氟-苄基)-丙酰胺，其为棕色胶状物，MS509(MH+)；从(2R，4R)-3-[1-甲烷磺酰基-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-基]-丙酸和苄基甲基胺反应，随后去保护，得到(2R，4R)-(N-苄基-3-(4-巯基-1-甲烷磺酰基-吡咯烷-2-基)-N-甲基-丙酰胺，MS457(MH+)；从(2R，4R)-[1-(萘-2-磺酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-基]-乙酸，分别和苄基甲基胺、苄基胺、2，5-二氟苄基胺反应，，随后去保护，得到(2R，4R)-N-苄基-2-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-N-甲基-乙酰胺，其为白色固体，MS455(MH+)；(2R，4R)-N-苄基-2-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-乙酰胺，其为白色结晶，MS441(MH+)；(2R，4R)-N-(2，5-二氟-苄基)-2-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-乙酰胺，其为白色结晶，MS477(MH+)。
实施例24酮和醇24.1.酮和醇a)在溶液中Weinreb化合物的制备在氩气氛下，将6.6g(67.4mmol，5.3当量)N，O-二甲基羟基胺.盐酸盐溶解于100ml甲苯中，在0℃下用32ml(63.5mmol，5当量)三甲基铝处理，并在室温下搅拌1.5小时。通过插管向该溶液中加入在250ml甲苯中的6.0g(12.72mmol，1.0当量)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲酯，将反应在45℃下搅拌过夜，在0℃下加入到2M HCl中，进行相分离，用EtOAc萃取无机相，盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥，过滤并蒸发。通过己烷∶EtOAc 2∶1作为洗脱剂的硅胶快速色谱纯化，得到3.09g(49％)(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺其为无色固体，(Rf 0.2己烷∶EtOAc 1∶2)，mp 101-102℃，MS501(MH+)。
按照一般性过程1.2.，从(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸和N-甲氧基-N-甲基-2-甲基氨基-乙酰胺.TFA[之前按照3.1.从[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-氨基甲酸叔-丁酯*制备，*D.Jukic，M.Mayer，P.Schmitt，G.Drapeau，D.Regoli，R.Michelot，含有减少的肽键的神经激肽假肽类似物的合成和生物活性，欧洲医学化学杂志(Eur.J.Med.Chem.)(1991)，26(9)，921-8.]，制备(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，其为无色胶状物，MS572(MH+)。
按照一般性方法1.3.，从(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯和N，O-二甲基羟基1胺-盐酸盐/N-甲基吗啉，给出(2S，4R)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS533(MH+)。
通过BOC-去保护(3.2.)，给出(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺，MS433(MH+)。
在0℃下，用4ml(50mmol)吡啶和5.59ml(42mmol)氯甲酸丁基酯处理17.3g(40mmol)(2S，4R)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-2-羧酸甲氧基-甲基-酰胺在120ml THF中的溶液。将反应升温至室温过夜，蒸发，并在10％KHSO4水溶液/Et2O中分配(3x)。用饱和NaHCO3水溶液、10％NaCl溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥。通过硅胶快速色谱纯化(己烷/EtOAc4∶1)，给出20.4g(96％)(2S，4R)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS533(MH+)。
制备起始原料，醛在40分钟内，将57ml(57mmol，1.2M在甲苯中的溶液)二异丁基铝氢化物(DIBAH)加入到6g(22.7mmol)(2S，4S)-4-氯-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯2-甲酯在180ml THF中的冷冻溶液(-78℃)中。将反应在-78℃下搅拌2小时，用23g硅胶/23g MgSO4.7H2O在70ml 10％KHSO4水溶液的混悬液淬灭。将混悬液在室温下搅拌15分钟，过滤，并用THF洗涤。蒸发THF后，将残渣置于二氯甲烷中，通过硫酸钠干燥并蒸发，得到5.88g粗制的(2S，4S)-4-氯-2-甲酰基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯。
酮和醇的制备在-78℃下，向在8ml THF中的0.38ml(3mmol)4-溴苯甲醚中加入1.8ml(2.9mmol，1.6M在己烷中)n-丁基锂，将反应混合物在温度下搅拌1.5小时，之后加入300mg(0.6mmol)制备的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺在10ml THF中的溶液。将反应在-78℃下搅拌3.5小时，加入饱和NH4Cl水溶液，缓慢升温至室温。通过进一步加入1M KHSO4溶液酸化该溶液，用EtOAc萃取该水溶液，盐水洗涤有机层，并通过硫酸钠干燥。柱色谱纯化得到140mg(43％)(2S，4R)-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-(4-甲氧基-苯基)-甲酮其为白色固体。
在室温下，用0.45ml(6mmol)三甲基甲硅烷基氯化物和0.3ml(6mmol)DMSO处理在2ml TFA中的140mg(0.26mmol)(2S，4R)-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-(4-甲氧基-苯基)-甲酮2小时，将其加入到饱和碳酸钠溶液中，用EtOAc萃取，盐水洗涤，并干燥。将粗产物溶解于6ml乙腈中，加入在MeOH中的饱和碳酸钾溶液和100mg(0.65mmol)DTT。将该溶液在室温下搅拌1.5小时，用1M KHSO4水溶液酸化该溶液，并用EtOAc萃取无机相。用盐水洗涤合并的有机相，通过硫酸钠干燥，过滤并蒸发。快速色谱纯化得到89.5mg(81％)(2S，4R)-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-(4-甲氧基-苯基)-甲酮，其为淡黄色固体，MS292(M-C5H9O)+，135(C5H9O)+。
类似地，从制备的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，分别和异丁基溴化镁、苯基锂(从溴-苯和n-丁基锂制备)和甲基溴化镁反应，随后按照上述实施例描述进行PMB-硫醚裂解，制备下列化合物(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-3-甲基-丁-1-酮，其为无色油，MS292(M-C8H7O2)+，135(C8H7O2)+。
(2S，4R)-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-苯基-甲酮，其为白色固体，MS398(MH+)；(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-乙酮，其为无色固体，MS292(M-C2H3O)+，43(C2H3O)+。
类似地，从(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺，分别和苯基锂(从溴-苯和n-丁基锂制备)和异丁基溴化镁反应，随后按照上述实施例描述进行PMB-硫醚裂解，制备下列化合物(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-氧代-2-苯基-乙基)-酰胺，其为淡棕色油，MS469(MH+)；(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(4-甲基-2-氧代-戊基)-酰胺，其为黄色油，MS449(MH+)。
在-25℃下，用43.8ml(70mol)n-丁基锂(1.6M，在己烷中)处理7.69ml(70mmol)苯基乙炔在140ml THF中的溶液。将该反应升温至-10℃下1小时。然后加入7.46g(14mmol)(2S，4R)-2-(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯在110ml THF中的溶液。20分钟后，用190ml 10％KHSO4水溶液中和反应。将该混合物用10％KHSO4溶液/Et2O萃取(3x)。用10％NaCl饱和溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，蒸发，并通过硅胶快速色谱(己烷/EtOAc 9∶1)纯化，得到6.54g(81％)(2S，4R)-2-(3-苯基-丙炔酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS574(MH+)。
按照一般性过程9.2.，从(2S，4R)-2-(3-苯基-丙炔酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯给出(2S，4R)-4-巯基-2-(3-苯基-丙炔酰基)-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS332(MH+)。
类似地，从(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[(甲氧基-甲基-氨基甲酰基)-甲基]-甲基-酰胺和甲基溴化镁，制备下列化合物(2S，4R)-1-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-乙酮，其为无色胶状物，MS456(MH+)。
在80℃下，用0.75ml(4.67mmol，12.56当量)处理170mg(0.37mmol)(2S，4R)-1-[4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-乙酮在10ml TFA中的溶液10分钟。浓缩该溶液，在80℃下，用10ml TFA和0.75ml(4.67mmol，12.56当量)处理第二次8分钟。浓缩该溶液，将残渣通过快速色谱纯化，得到63 mg(51％)(R)和(S)-1-[(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-乙醇，其为无色油，MS338(MH+)。
按照一般性过程9.1.(在室温下45分钟)，从(2S，4R)-2-(3-苯基-丙炔酰基)-4-三苯甲基硫烷基-吡咯烷-1-羧酸丁酯给出，经快速硅胶色谱(己烷/EtOAc 9∶1)纯化后，得到(2S，4R)-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS334(MH+)和(2S，4R)-2-((R)或(S)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸丁酯，MS334(MH+)。
通过醛的合成在-25℃下，用39.3ml(62.9mol)n-丁基锂(1.6M，在己烷中)处理6.9ml(62.9mmol)苯基乙炔在120ml THF中的溶液。将反应保持在-25℃下20分钟，然后滴加到2.94g(12.6mmol)粗制的(2S，4S)-4-氯-2-甲酰基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯在100ml THF中冷却到-25℃的溶液中。45分钟后，用100ml 10％KHSO4水溶液中和反应。将该混合物用10％KHSO4溶液/Et2O萃取(3x)。用10％NaCl饱和溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥，蒸发，并通过硅胶快速色谱(甲苯/乙腈195∶5至9∶1)纯化，得到0.58g(14％)(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS336(MH+)和0.67g(16％)(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS336(MH+)。
三键的氢化将在12ml MeOH中的0.2g(0.61mmol)(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物和20mg Pd/C(10％)氢化(1atm)过夜。(硅藻土)过滤后，得到(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)1-羟基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物。
向在12ml DMF中的0.4g(1.19mmol)(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物中，加入0.2g(1.79mmol，1.5当量)硫代乙酸钾，并加热至100℃下2.5小时。在真空下浓缩该混合物，将残渣通过硅胶快速色谱(己烷/EtOAc9∶1)纯化，得到0.12g(27％)(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS376(MH+)和0.13g(28％)(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-[(R)-或-[(S)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS376(MH+)。
类似地，从(2S，4S)-4-氯-2-((R)或(S)1-羟基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4S)-4-氯-2-((S)或(R)1-羟基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物，经硅胶快速色谱(CH2Cl2/EtOAc 99∶1至95∶1)纯化后，得到30％(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS380(MH+)和20％(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-((R)或(S)-1-羟基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS380(MH+)。
将37.5mg(0.1mmol)(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯和(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-[(R)-或-[(S)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)]-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯的1∶1混合物溶解于4ml脱气的(用氩气)乙醇中，在0℃下，用0.3ml 1N LiOH水溶液处理。在该温度下1小时后，在室温下搅拌反应5小时。冷却该溶液(0℃)，用10％KHSO4水溶液/Et2O中和(3x)。用10％NaCl水溶液洗涤有机相，干燥(Na2SO4)，得到32mg(96％)(2S，4R)-2-((S)和(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS334(MH+)。
与上述类似，从(2S，4R)-4-乙酰基硫烷基-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙基)-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，给出定量的(2S，4R)-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸叔-丁酯，MS338(MH+)。
24.2.酮和醇b)固相合成树脂的制备A)结构单元合成用二氯甲烷(120ml)中的TFA(80ml)处理(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔-丁酯(19.48g，53mmol)15分钟。在减压下浓缩反应混合物，将得到的暗红色油在二乙醚/n-己烷(1∶4 v/v，860ml)中研制。收集沉淀的盐，在减压下干燥(18.9g)，直接用于下一步。
用Fmoc-OSu(19.7g，58.3mmol)处理在1，4-二噁烷/含有NaHCO3的(17.8g，212mmol)水溶液(300ml)中的(2S，4R)-4-(4-甲氧基-苄基硫烷基)-吡咯烷-2-羧酸的TFA盐(18.9g，53mmol)，机械搅拌16小时。将反应混合物用水(400ml)稀释，二乙醚(2x)洗涤。加入乙酸乙酯(400ml)和HCl(25％，50ml)，萃取有机相，用水、NaCl饱和溶液洗涤，硫酸镁干燥。过滤，并在减压下浓缩，得到泡沫状物(22.5g)。
将上述泡沫状物(20.7g，42.3mmol)溶解于TFA(350ml)中，加入三异丙基硅烷(43.5ml)。回流该混合物0.5小时，在减压下浓缩，加入二乙醚(100ml)和n-己烷(300ml)，得到沉淀。滗析上清液，在减压和高真空下干燥沉淀，得到白色泡沫状物(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(9.6g，MS370MH+)。
B)树脂衍生化用在DMF(abs.，250ml)中的TPTU(17.8g，60mmol)、DIEA(30.8ml，180mmol)活化连接剂4-(α，α-二苯基羟基甲基)苯甲酸(18.3g，60mmol)3分钟。将该混合物加入到含有二苯甲基胺树脂(加载-NH20.9mmol/g，44.4g)的烧瓶中，振摇该烧瓶1小时。在滤器上收集树脂，洗涤(3x交替DMF/异丙醇)，二氯甲烷，乙醚，并干燥，得到54.65g，0.65mmol/g(根据质量增加填料)。
向二氯甲烷洗涤的上述树脂(46.9g，30mmol)中，加入(2S，4R)-4-硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸12.2g，36mmol)在二氯甲烷(abs.550ml)、TFA(80ml)中的混合物。将该红色混合物振摇1.5小时，然后过滤树脂，用(3x交替DMF/异丙醇)、二氯甲烷、乙醚洗涤，并干燥，得到42g，0.65mmol/g(根据质量增加填料)。
向二氯甲烷洗涤的上述树脂(33.5g，22mmol)中，加入(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(9.7g，26mmol)在二氯甲烷(abs.450ml)、TFA(67ml)中的混合物。将该红色混合物振摇1.5小时，然后过滤树脂，用(3x交替DMF/异丙醇)、二氯甲烷、乙醚洗涤，并干燥，得到42g，0.59mmol/g(根据质量增加填料)。
产物的制备固相-酮的平行化学用DMF(abs.80ml)、TPTU(3.4g，11.46mmol)、DIEA(2.94ml，17.2mmol)处理上述用(2S，4R)-4-硫烷基-1-(芴基甲氧基羰基)-吡咯烷-2-羧酸(9.71g，5.73mmol)衍生的树脂15分钟。在真空下除去DMF溶液，在反应烧瓶中加入在DMF(abs.80ml)中的N，O-二甲基羟基胺.盐酸盐(1.68g，17.2mmol)。振摇该反应混合物2小时。在滤器上收集树脂，用(3x交替DMF/异丙醇)、DMF洗涤。在氩气氛过压下用THF(abs.2x)洗涤该树脂(1.0g，0.6mmol)，重新混悬于THF(abs.8ml)中，用4-氟苯基溴化镁(1M在THF中，5.9ml)处理。4小时后，过滤树脂，用THF洗涤。加入0.5N KHSO4，将反应烧瓶振摇15分钟。将该树脂进一步用DMF、0.5N KHSO4，(交替DMF，MeOH，H2O)、DMF、二氯甲烷、二乙醚洗涤，并干燥。用40％TFA/CH2Cl2(10ml)、三异丙基硅烷(0.5ml)处理树脂1小时，收集滤液，在减压下浓缩，残渣通过制备RP-HPLC纯化，合并所需的级分，从乙酸(10ml)中冷冻干燥，得到(2S，4R)-2-(4-氟-苯甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸9H-芴-9-基甲酯MS448.3(MH+)。
此外，通过下列步骤获得Fmoc基团的去除应用20％哌啶/DMF(2x5分钟)，和典型的吡咯烷取代反应，随后，例如，向该树脂(0.33g，0.20mmol)中加入DMF(abs.5ml)、吡啶(0.16ml，1.95mmol)和萘-2-磺酰氯(0.09g，0.39mmol)在DMF(abs.1ml)中的溶液。将该混合物振摇16小时，在滤器上收集树脂，用(3x交替DMF/异丙醇)、二氯甲烷、乙醚洗涤，并干燥。将该树脂(0.25mg)用40％TFA/CH2Cl2(10ml)、三异丙基硅烷(0.5ml)处理1小时，收集滤液，在减压下浓缩，残渣通过制备RP-HPLC纯化，合并所需的级分，从乙酸(10ml)中冷冻干燥，得到(2S，4R)-(4-氟-苯基)-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-甲酮MS416.3(MH+)。
通过上述过程，平行制备其它化合物，如表7所示。
实施例25吡咯烷-衍生物的合成25.1.直接合成参见实施例2225.2.从相应的硫醇合成前药S-乙酰基-前药起始原料(硫醇(mercaptane))的制备如上所述。
在室温下，用60μl(0.63mmol，2当量)醋酐处理在2ml吡啶中的150mg(0.32mmol)(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯5小时。加入乙醇，将该溶液在室温下搅拌10分钟，并浓缩。将残渣溶解于二氯甲烷中，用1M HCl，5％NaHCO3溶液和盐水萃取，通过硫酸钠干燥，并通过柱色谱纯化得到60mg(37％)1-[(2S，4S)-4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯，其为白色泡沫，MS519(MH+)。
在0℃下，用0.04ml(0.4mmol)乙酰氯处理124mg(0.2mmol)(2S，4R)-{[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸在3.2ml吡啶中的溶液，病在室温下搅拌10分钟。将反应倒入冰水中，用1N HCl/EtOAc萃取(3x)。用1N HCl水溶液和10％NaCl溶液洗涤有机相，通过硫酸钠干燥并蒸发。从二氯甲烷/戊烷(4℃)中沉淀，给出30mg(28％)(2S，4R)-{[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸，mp190-193℃；MS539(M-H)-。
在0℃下，用273mg(1.42mmol)EDCI和16mg(0.13mmol)DMAP处理700mg(1.29mmol)(2S，4R)-{[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸和0.1ml(1.68mmol)EtOH在12ml二氯甲烷中的混悬液。升温至室温(1h)后，将反应在10％KHSO4水溶液/Et2O间分配(3x)。用饱和KHCO3水溶液、10％NaCl溶液洗涤有机相，并通过硫酸钠干燥。通过硅胶快速色谱纯化(己烷/EtOAc 9∶1 to 4∶1)，给出0.254mg(34％)(2S，4R)-{[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸乙酯，mp119-120℃，MS569(MH+)。
25.3二硫化物例如S-Cys-衍生物的合成将(2S，4R)-{[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸(35.2mg，0.07mmol)和Boc-Cys(Npys)-OH(Bachem A-2825，26.3mg，0.07mmol)溶解于氩气脱气的DMF(abs.2ml)中，加入脱气的0.1M磷酸盐缓冲液(pH 6.2，2ml)。在氩气氛下机械搅拌该反应混合物2小时。加入乙酸乙酯(30ml)、水(20ml)，用水(3×20ml)洗涤有机相，减压下浓缩得到黄色油53mg。在0.5小时中将该油溶解于4M HCl/1，4-二噁烷(5ml)中。加入二乙醚(30ml)，过滤沉淀的产物，用二乙醚洗涤并干燥，得到37mg。制备RP-HPLC纯化，随后收集并冷冻干燥所需的级分，得到2-氨基-3-[5-(羧基甲基-苯乙基-氨基甲酰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-丙酸；与三氟-乙酸的化合物，为白色冻干物(26mg)MS616.3(M-H)-(MH-)。
将(2S，4R)-{[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-苯乙基-氨基}-乙酸(32.6mg，0.07mmol)和Ac-Cys(Npys)-OH(20.6mg，0.07mmol)溶解于氩气脱气的DMF(abs.2ml)中，加入脱气的0.1M磷酸盐缓冲液(pH 6.2，2ml)。在氩气氛下机械搅拌该反应混合物2小时。加入乙酸乙酯(30ml)、水(20ml)，用水(3×20ml)洗涤有机相，减压下浓缩得到黄色油37mg。制备RP-HPLC纯化，随后收集并冷冻干燥所需的级分，得到2-乙酰基氨基-3-[5-(羧基甲基-苯乙基-氨基甲酰基)-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-3-基二硫烷基]-丙酸，其为白色冻干物(20mg)MS657.9(M-H)-。
实施例A可以按照常规方法制备含有下列成分的片剂。
实施例B
可以按照常规方法制备含有下列成分的胶囊。
实施例C注射溶液可以含有下列成分
实施例D将500mg式I化合物混悬于3.5ml Myglyol 812和0.08g苄基醇中。将该混悬液填充到具有剂量阀的容器中。通过剂量阀在一定压力下将5.0g氟利昂12加入到该容器中。通过振摇将氟利昂溶解到Myglyol-苄基醇混合物中。该喷射容器含有大约100个单剂量，其可以单独应用。
权利要求
1.通式I的化合物 其中R1为氢，烷基羰基，或芳基羰基；R2为烷基，烷基环烷基，烷基环烷基烷基，环烷基，卤代烷基，羧基烷基，氨基烷基，二烷基氨基烷基，烷氧基烷基，烷氧基羰基烷基，炔基，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，芳基(烷氧基羰基)烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基或杂环基烷基；A为-C(O)-R3，-CH(OH)-R4，或-C(O)-NR5R6，其中R3和R4独立地选自烷基，芳基，芳基炔基，芳基烷基，和芳基烯基；R5为氢，烷基，环烷基，环烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基；R6为烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羟基烷基，羟基烷基-(羟基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基，环烷基，环烷基烷基，或羧基烷基，或R6选自式IIa，IIb，和IIc； 或者A为-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元饱和环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R7为氢，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，杂芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，或杂芳基烷基；或式III的化合物 R7A为氢或烷基；R8为-OR9或-NR10R11，其中R9为氢，烷基，芳基烷基；R10为氢或烷基；R11为烷基，芳基，杂芳基，芳基烷基，或-NR10R11代表5或6元环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基；R12为烷基，芳基，或芳基烷基；Y为-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-；m为0，1，或2；X为-SO2，-CO-，-C(O)O-，-SO2NH-，或-C(O)NR13-其中R13为氢，烷基，芳基，或羧基烷基；以及其二聚体形式，和/或其药用酯，和/或其药用盐。
2.按照权利要求1的化合物，其中R1为氢或烷基羰基。
3.按照权利要求1或2的化合物，其中R1为氢或乙酰基。
4.按照权利要求3或4的化合物，其中R1为氢。
5.按照权利要求1-4之一的化合物，其中R2为烷基，烷基环烷基，烷基环烷基烷基，环烷基，卤代烷基，羧基烷基，芳基，芳基烷基，芳基烷基(烷氧基羰基)烷基，芳基羰基烷基，芳氧基烷基，芳基烯基，或芳基(烷氧基羰基)烷基。
6.按照权利要求1-5之一的化合物，其中R2为烷基，芳基或芳基烷基。
7.按照权利要求1-6之一的化合物，其中R2为烷基，萘基或苯基。
8.按照权利要求1-7之一的化合物，其中R2为萘基。
9.按照权利要求1-8之一的化合物，其中R3和R4为独立地选自烷基，苯基，苯基炔基，苯基烷基，和苯基烯基。
10.按照权利要求1-7之一的化合物，其中A为-C(O)-NR5R6。
11.按照权利要求1-10之一的化合物，其中X为-SO2-。
12.按照权利要求1-10之一的化合物，其中X为-C(O)O-。
13.按照权利要求1-12之一的化合物，其中m为0，1，或2。
14.按照权利要求1-13之一的化合物，其中m为0。
15.按照权利要求1-14之一的化合物，其中R5为烷基，环烷基，环烷基烷基，羧基烷基，或芳基烷基。
16.按照权利要求1-15之一的化合物，其中R5为烷基，芳基烷基，或环烷基。
17.按照权利要求10-16之一的化合物，其中A的-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基。
18.按照权利要求18的化合物，其中-NR5R6为哌啶基或吡咯烷基，任选被烷氧基羰基或羧基取代。
19.按照权利要求17的化合物，其中-NR5R6为哌啶基。
20.按照权利要求1-19之一的化合物，其中R6为烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羟基烷基，羟基烷基-(羟基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基，环烷基，环烷基烷基，或羧基烷基，或者基团-C(O)-NR5R6中的-NR5R6代表5或6元环，任选被以下基团取代羧基，烷基氧羰基，羟基，烷氧基羰基烷氧基，苯基烷基，或苯基烷氧基羰基，或R6为下式的基团 其中R7为氢，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基；R7A为氢或烷基；R8为OR9或-NR10R11其中R9为氢，烷基，芳基烷基；R10为氢或烷基；R11为芳基，杂芳基，芳基烷基，或基团-NR10R11构成如权利要求17-19中的-NR5R6所定义的5或6元饱和环，和Y为-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-，和R12为烷基，芳基烷基，芳基。
21.按照权利要求1-20之一的化合物，其中R6为烷基，烷基羰基烷基，氰基烷基，羟基烷基，羟基烷基-(羟基烷基)，烷氧基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，芳基氨基羰基烷基，芳基(烷基)氨基羰基烷基，氨基羰基烷基，芳基，芳基烷基，杂芳基，杂芳基烷基，杂环基，环烷基，环烷基烷基或羧基烷基。
22.按照权利要求1-21之一的化合物，其中R6为烷基，烷基羰基烷基，芳基烷基，芳基羰基烷基，杂芳基烷基，羧基烷基。
23.按照权利要求1-22之一的化合物，其中R6为烷基，烷基羰基烷基，苄基，四唑基乙基，苯基羰基甲基，或噁二唑基甲基。
24.按照权利要求1-23之一的化合物，其中R6为下式的基团 其中R7为氢，烷基，烯基，烷基硫烷基，芳基，杂芳基，羧基烷基，羧基，烷氧基羰基烷基或R7为式III的基团 其中Y为-O-，-O-S(O2)-，-O-C(O)-或-O-C(O)-NH-和R12为芳基；R8为OR9或-NR10R11，其中R9为氢，烷基，芳基烷基；R10为氢或烷基；和R11为芳基，杂芳基，芳基烷基。
25.按照权利要求24的化合物，其中R6为下式的基团 R7和R8如权利要求1-24任一所定义。
26.按照权利要求24或25的化合物，其中R7为氢。
27.按照权利要求24-26之一的化合物，其中R8为-NR10R11，其中R10和R11如权利要求24所定义。
28.按照权利要求24-27之一的化合物，其中R10为氢或甲基。
29.按照权利要求24-28之一的化合物，其中R11为芳基。
30.按照权利要求20-29之一的化合物，其中R11为苯基，任选被烷氧基羰基，羧基，或羟基烷基取代。
31.按照权利要求1-9之一的化合物，其中A为-C(O)-R3。
32.按照权利要求1-9之一的化合物，其中A为-CH(OH)-R4。
33.按照权利要求31或32的化合物，其中R3或R4为烷基，芳基炔基，芳基烯基或芳基烷基。
34.具有下式的化合物 其中，R1、R2、A和X如权利要求1-33任一所定义。
35.选自下组的权利要求1的化合物a)(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯；b)(2S，4S)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-哌啶-4-羧酸；c)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-甲基-酰胺；d)(2S，4R)-2-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸甲酯；e)(2S，4R)-2-[2-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基氨基]-苯甲酸；f(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸；g(2S，4R)-4-[[[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-甲基-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯；h(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸[[(4-羟基甲基-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-甲基]-甲基-酰胺；i)(2S，4R)-3-{苄基-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基)-丙酸；j)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸环丙基-[2-(1H-四唑-5-基)-乙基]-酰胺；k)(2S，4R)-1-[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-基]-3-甲基-丁-1-酮；l)(2S，4R)-[[4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-(3-甲基-丁基)-氨基]-乙酸；m)(2S，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸异丙酯；n)(2S，4R)-2-(苄基-甲基-氨基甲酰基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸戊酯；o)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸苄基-[2-(IH-四唑-5-基)-乙基]-酰胺；p)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸己基-甲基-酰胺；q)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(2-氧代-2-苯基-乙基)-酰胺；r)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸甲基-(4-甲基-2-氧代-戊基)-酰胺；s)(2S，4R)-4-巯基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羧酸(3-甲基-丁基)-[1，2，4]噁二唑-3-基甲基-酰胺；t)(2S，4R)-2-((S)或(R)-1-羟基-3-苯基-丙-2-炔基)-4-巯基-吡咯烷-1-羧酸丁酯；u)(2S，4R)-4-巯基-2-(3-苯基-丙酰基)-吡咯烷-1-羧酸丁酯；v)(2S，4S)-1-[4-乙酰基硫烷基-1Э(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2Э羰基]-哌啶-4-羧酸乙酯；w)(2S，4R)-4-[[[[4-乙酰基硫烷基-1-(萘-2-磺酰基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基]-乙酰基]-甲基-氨基]-苯甲酸甲酯。
36.含有权利要求1-35任一的化合物和药用赋形剂的药物组合物。
37.权利要求1-35之一的化合物作为活性成分在制备预防和治疗内皮肽转化酶(ECE)活性导致的疾病的药物的应用，所述疾病特别是心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫、肾病、动脉粥样硬化、Buerger’s症、Takayasu’s动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、肠胃失调、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼、移植排斥、与细胞抑制的、眼科的和脑保护性适应症有关的疾病，以及器官保护。
38.权利要求1-35之一的化合物作为活性成分在生产用于抑制锌水解酶活性的药物中的应用。
39.权利要求1-35之一的化合物用于治疗或预防以下疾病的应用，所述疾病是与心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫、肾病、动脉粥样硬化、Buerger’s症、Takayasu’s动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、肠胃失调、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼、青光眼、移植排斥、与细胞抑制的、眼科的和脑保护性适应症有关的疾病，以及器官保护有关的疾病。
40.用作治疗性活性物质的权利要求1-35之一的化合物，特别用作治疗与锌水解酶活性有关的疾病，例如心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫、肾病、动脉粥样硬化、Buerger’s症、Takayasu’s动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、肠胃失调、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼、青光眼、移植排斥、与细胞抑制的、眼科的和脑保护性适应症有关的疾病，以及器官保护的治疗性活性物质。
41.治疗性和/或预防性治疗以下疾病的方法，所述疾病是心肌缺血、充血性心力衰竭、心律不齐、高血压、肺动脉高血压、哮喘、脑血管痉挛、蛛网膜下出血、先兆子痫、肾病、动脉粥样硬化、Buerger’s症、Takayasu’s动脉炎、糖尿病并发症、肺癌、前列腺癌、肠胃失调、内毒素休克、和败血病，以及用于伤口愈合和控制月经、青光眼、移植排斥、与细胞抑制的、眼科的和脑保护性适应症有关的疾病，以及器官保护，所述方法包括给人或动物施用权利要求1-35之一的化合物。
42.制备权利要求1-35之一的化合物的方法，包括使式I的化合物(反应路线3) 其中R2，X和m如上所定义，和PG为硫保护基团，与胺HNR5R6反应，其中R5和R6如上所定义，得到式2化合物(反应路线3)。
43.通过权利要求42的方法准备的化合物。
44.如前文所定义的发明。
全文摘要
本发明涉及式(I)的化合物，其中R
文档编号A61P13/12GK1620433SQ01813023
公开日2005年5月25日 申请日期2001年7月10日 优先权日2000年7月19日
发明者约翰尼斯·埃必, 丹尼丝·布卢姆, 丹尼尔·布尔, 亚历山大·丘乔楼斯凯, 亨丽埃格·德姆洛, 埃里克·阿尔吉里奥斯·基塔斯, 贝恩德·米夏埃尔·勒夫勒, 乌尔丽克·奥布斯特, 扎比内·瓦尔鲍姆 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司