专利名称：一种防治糖尿病的药物组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物及其制备方法，特别是涉及一种防治糖尿病的药物组合物及其制备方法。
背景技术：
糖尿病是一类由遗传、环境、免疫等多病因引起的内分泌代谢紊乱疾病。其特点是慢性高血糖，伴随因胰岛素分泌及/或作用缺陷引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱。基本病理生理是绝对或相对性胰岛素分泌不足及胰高糖素活性增高所引起的代谢紊乱。临床出现多饮、多食、多尿、消瘦、疲劳等症状，并发症广泛而严重，常可引发心、脑血管、肾、眼底、视网膜及神经系统病变，严重时可发生酮症酸中毒，高渗性昏迷等并发症。
糖尿病为慢性终身性疾病，一旦发生，需终身服药。糖尿病为常见病、多发病，年发病率为930/10万，现今糖尿病有扩大化和年轻化的倾向，我国新患糖尿病人数每年以125万，每天以3500人的速度递增[1]，这个惊人的成长，使糖尿病正式挤入十大代表性国民病之列。糖尿病是现代疾病中的第二杀手，其对人体的危害仅次于癌症，造成严重的身心损害和社会负担。因此，积极开展糖尿病的防治研究，已成为当今卫生工作的一项重要课题。糖尿病的治疗目的是纠正糖代谢紊乱，促进胰岛功能恢复，改善胰岛素抵抗状态，并及时防治各种并发症。西医口服降糖药疗效肯定，但长期使用会出现抗体，导致继发性失效，且具有不同程度的副作用，如低血糖、胃肠道不适等。胰岛素疗效确切，但需注射给药，使用不便，且久用易产生抗体，使其生物活性降低，剂量增加则易产生高胰岛素血症而加速各种慢性并发症的发生和发展。中医药文献无“糖尿病”病名，根据糖尿病的临床表现，如多尿、多食、多饮等“三多”症，与中医学“消渴”病的临床表现相一致。中医治疗糖尿病是以整体观念、辨证论治为主，针对气血盛衰、阴阳消长及气机、痰瘀状况，调整人体内环境，改善患者代谢状况而达治疗目的。中药降血糖效果虽较西药弱，但作用缓和而持久，能有效地改善症状、降低血糖、防治并发症、控制病情发展且由于许多中药具有双向调节作用，一般不会引起低血糖等不良反应，有着西药不可替代的优势，日益受到国内外学者的重视。因此，充分继承祖国医学防治糖尿病的宝贵遗产，突出中医特色，发挥其优势，结合现代医学对糖尿病的研究和中医药治疗最新进展，开发出高效、无毒副作用的纯天然药物，具有十分重要的理论意义与临床实用价值，将产生良好的经济效益和社会效益。本发明目的在于提供一种防治糖尿病的药物组合物及其制备方法。本发明目的在于提供一种质量控制方法。
发明内容
本发明目的是通过如下技术方案实现的，原料药按重量比为黄芪400-800重量份葛根300-500重量份山药300-500重量份苍术200-400重量份知母200-400重量份天花粉200-400重量份地黄300-500重量份马齿苋200-400重量份 丹参200-400重量份鬼箭羽200-400重量份 桑枝200-400重量份上述原料药可以制成任何临床可接受的剂型，如片剂，胶囊，颗粒剂，口服液体制剂，皮下给药制剂，栓剂等。
本发明药物组合物的制备方法为取苍术、丹参二味用4-8倍量85-95％乙醇回流提取1-2小时，滤过，药渣与葛根合并，用60-80％乙醇回流提取2-4次，每次4-7倍量，分别提取0.5-2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，水液备用；取黄芪等八味药加水煎煮2-3次，每次加8-12倍水，煎煮1-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10~1.12/60℃，兑入上述醇提浓缩液，喷雾干燥，制成临床可接受的剂型，如片剂，胶囊，颗粒剂，口服液体制剂，皮下给药制剂，栓剂等。
本发明颗粒剂的质量控制方法中包括鉴别和/或含量测定，鉴别包括如下方法中的一种或几种
鉴别a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超声提取20-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚分2-4次萃取，每次15-30ml，弃去乙醚液，取水层用水饱和正丁醇分2-4次萃取，每次15-30ml，合并正丁醇层用0.5-2％，氢氧化钠溶液分2-3次洗涤，每次10-20ml，弃去碱液，正丁醇用正丁醇饱和的水洗至中性，取正丁醇液，浓缩至干，残渣加水5ml使溶解，加于已处理好的D101大孔树脂柱，分别用水40-60ml，30-50％乙醇20-40ml，60-80％乙醇40-60ml洗脱，收集60-80％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验；吸取供试品溶液8μl，黄芪甲苷对照品4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以11-14∶6-9∶1-2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10硫酸乙醇溶液，100-110℃加热5-8min，至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b.取本品3g，加乙醇30ml，超声提取20-40分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取苍术对照药材2g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液4μ1，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G板上，以石油醚60-90℃为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
c.取鉴别b项下供试品溶液作为供试品溶液，另取丹参对照药材2g，加乙醇30ml，超声提取20-40分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液。再取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4μ1，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以16-19∶1-4苯—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
d.取本品2g，用甲醇20ml超声20-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 ml使溶解，再加盐酸0.5～2ml，沸水浴回流1-2小时，回流液用氯仿分2-3次萃取，每次20ml。合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取山药对照药材2g同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸气饱和，为展开剂展开，取出，晾干，喷以5-10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加热3-8min至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
e.取鉴别d项下供试品液作为供试品液，另取菝葜皂苷元对照品，加苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸气饱和，为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，100-110℃加热5min至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；19-17∶79-82∶1-2甲醇—水—冰醋酸为流动相，检测波长为250nm。理论塔板数按葛根素峰计算应不低于4000；对照品溶液的制备，精密称取葛根素对照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加20-40％乙醇至刻度，摇匀，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品颗粒研细，称取1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声提取30-50分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法，分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少于0.85mg。
本发明药物组合物(芪黄降糖颗粒)药效学研究表明芪黄降糖颗粒具有滋阴清热、益气养阴、活血化瘀；适用于NIDDM糖尿病(气阴两虚兼血瘀证)。(1)芪黄降糖颗粒对ALX-DM家兔的血糖升高有明显的降低作用，对ALX-DM家兔糖代谢有明显的改善作用，可明显的拮抗葡萄糖引起的血糖升高，并能明显降低AUC血糖区线下面积。(2)芪黄降糖颗粒对STZ-DM大鼠的体重下降和血糖升高有明显的降低作用，对STZ-DM大鼠糖代谢有明显的改善作用，对葡萄糖引起的血糖升高有明显的拮抗作用，并能明显降低AUC血糖区线下面积。(3)芪黄降糖颗粒对STZ-DM大鼠的血脂代谢障碍有明显的改善作用，表现在血CHO、TG水平的降低。(4)芪黄降糖颗粒对STZ-DM大鼠的血MDA水平有明显的降低作用，表明本品有一定的抗氧化作用。(5)芪黄降糖颗粒对STZ所造成的胰岛细胞损伤有一定的修复作用，表现在给糖负荷前、后血清胰岛素水平明显高于模型对照组，病理组织学检查证实芪黄降糖颗粒对STZ所致大鼠胰岛β-细胞损伤有一定的修复作用。(6)芪黄降糖颗粒对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的体重、耐力下降有明显的改善作用，并可显著降低空腹血糖水平；动态血糖监测提示药后21天降糖作用比较显著(7)芪黄降糖颗粒对四氧嘧啶致糖尿病小鼠的耳廓微循环障碍有明显的改善作用。(8)芪黄降糖颗粒对正常大鼠的血糖、血脂代谢亦没有显著的影响。
下述实验例用于进一步说明本发明。
实验例一、芪黄降糖颗粒对四氧嘧啶家兔糖代谢的影响取家兔30只，稳定饲养一周，其间抽测空腹血糖两次，以3.6-5.4mmol/L为入选动物标准。按文献[1]方法给四氧嘧啶120mg/kg耳缘静脉注射，造模后48-72h复测空腹血糖，以＞15.0mmol/L作为模型成功动物。
根据血糖升高幅度，随机分为水对照组、药物高、中、低剂量组，降糖灵组。分别按2.8g/kg、1.4g/kg、0.7g/kg、40mg/kg给药，给药体积为5.0ml/kg体重，对照组给等体积水灌胃，连续给药15天，试验前禁食6h，末次药后12h，耳缘静脉采血做口服葡萄糖耐量试验[2](2.0g/kg葡萄糖灌胃)，并分别在口服葡萄糖0、30、60、120分钟复测血糖水平，计算空腹及葡萄糖灌胃后60分钟血糖区线下面积(Area Under Curve)。结果进行组间统计学处理，见表1、表2。
AUC＝0.5×30分×[空腹血糖+30分血糖+30分血糖+60分血糖值]表1对四氧嘧啶模型家兔空腹血糖(mmol/L)的影响(X±S，n＝6)组别试验前血糖造模后血糖 给药后血糖水组4.12±0.2319.45±1.6817.93±1.82高剂量组4.20±0.3218.47±2.269.35±1.34***中剂量组4.25±0.2919.57±2.0711.02±2.11***&
低剂量组4.17±0.3118.38±2.2011.35±2.60***&
降糖灵组4.25±0.3419.43±1.968.63±1.35***糖脉康组4.35±0.3419.52±2.2711.08±3.06***注与自身试验前比较###示P＜0.001.
药后与造模对照组比较*示P＜0.05，***示P＜0.001.
表1结果表明芪黄降糖颗粒对四氧嘧啶模型家兔的血糖升高有明显的降低作用，高、中剂量组与模型对照组比较均有极显著性差异，低剂量组与模型对照组比较均有显著性差异；芪黄降糖颗粒对四氧嘧啶模型家兔糖代谢有明显的改善作用，对葡萄糖引起的血糖升高有明显的降低作用，高、中、低剂量组与模型对照组比较均有显著性差异。
实验例二、芪黄降糖颗粒的抗氧化作用——对STZ-DM大鼠血MDA含量的影响取大鼠70只，稳定饲养一周，其间抽测空腹血糖两次，以3.6-5.4mmol/L为入选动物标准。其中10只大鼠作为正常对照组，另外60只大鼠按文献[3]方法以0.1mol/LpH4.5柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液，在冰域中新鲜配置10mg/ml的STZ溶液，每只大鼠按50mg/kg静脉注射，造模后7-10天复测空腹血糖，以＞13.8mmol/L作为模型成功大鼠。将STZ-DM大鼠60只按血糖升高幅度随机分为水对照组、药物高、中、低剂量组，降糖灵组、糖脉康组。分别按3.24g/kg、1.62g/kg、0.81g/kg、0.009g/kg、1.35g/kg给药，给药体积为1.0ml/100g体重，对照组给等体积水灌胃，连续给药20天；眶静脉采血，按TCA-TBA法，于波长535nm检测样品吸收度A值，以反映血MDA水平，结果进行组间统计学处理，见表2表2.芪黄降糖颗粒对STZ—DM大鼠血MDA含量的影响(X±s，n＝10)组别 血MDA含量正常对照组0.071±0.023模型对照组0.148±0.024###高剂量组 0.112±0.027##**中剂量组 0.118±0.027####*低剂量组 0.124±0.022###*降糖灵组 0.121±0.033###糖脉康组 0.116±0.026###*表2结果表明MDA是组织过氧化过程中很重要的中间产物，芪黄降糖颗粒对STZ-DM大鼠的血MDA水平有明显的降低作用，高、中、低剂量组与模型对照组比较均有显著性差异。表明本品有一定的抗氧化作用。
实验例三、芪黄降糖颗粒对STZ-DM大鼠胰岛β-细胞功能的影响试验动物分组、造模、给药时间及剂量均同实验例2，试验前禁食8h，末次药后12h，在做口服葡萄糖耐量试验同时，分别在口服葡萄糖0、30、60、120分钟，眼眶静脉采血测胰岛素水平。结果进行组间统计学处理，见表3。
表3.对STZ模型大鼠血清胰岛素水平的影响(X±S，n＝8)组别 给葡萄糖后0分 给葡萄糖后30分 给葡萄糖后60分给葡萄糖后120分正常组 4.99±1.184.81±1.09 5.06∶0.593.26∶1.86模型组 1.49±0.93### 1.26±0.33 1.30∶0.40### 1.47∶0.51高剂量 3.19±2.02#* 3.75±1.33***2.93∶1.26###** 2.82∶0.71***中剂量 3.76±1.72**& 3.03±1.79#* 2.06∶0.42###** 2.19∶0.72*低剂量 1.97±0.54### 2.07±0.37###***$$& 2.13∶1.01 ###* 1.69∶0.86#$&
降糖灵 2.23±0.78### 3.51±1.83** 2.49∶0.85###** 2.78∶0.69***糖脉康 2.68±0.71###*2.83±1.53##*1.57∶0.76###$& 1.96∶0.60$&
表3结果表明给糖负荷前模型对照组血胰岛素水平明显低于正常对照组，说明STZ对胰岛β细胞造成一定损伤。药物高、中剂量组胰岛素水平明显高于模型对照组，说明药物对STZ造成的β细胞损伤有一定的修复作用。正常大鼠给糖负荷后30分钟胰岛素分泌增多，60分钟出现胰岛素分泌高峰，其后逐渐下降。药物高、中剂量组在给糖负荷后30分钟血清胰岛素水平迅速升高，且明显高于造模对照组，对于改善STZ-DM大鼠的糖代谢有一定的作用。
实施例1黄芪600g葛根400g 山药400g苍 术300g知母300g天花粉300g地黄400g马齿苋300g丹参300g鬼箭羽300g桑枝300g以上十一味，取苍术、丹参二味用6倍量95％乙醇回流提取1小时，滤过，药渣与葛根合并，用70％6乙醇回流提取三次，每次5倍量，分别提取2小时，1小时，0.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇(60~70℃，-0.08Mpa)，水液备用；取黄芪等八味药加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10~1.12(60℃)，兑入上述醇提浓缩液，加入适量糊精(约150g)搅匀，喷雾干燥(进风180~200℃，出风80~85℃)，干粉加蛋白糖5g，并加糊精至1000g，干压制成颗粒，每袋装5g，口服，一次1袋，一日3次。
实施例2本发明药物组合物颗粒剂的质量控制方法鉴别a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，30ml，30ml，15ml，15ml用乙醚分四次萃取，弃去乙醚液，30ml，30ml，15ml取水层用水饱和正丁醇分三次萃取，合并正丁醇层用1％氢氧化钠分两次洗涤，每次15ml，弃去碱液，正丁醇用正丁醇饱和的水洗至中性，取正丁醇液，浓缩至干，残渣加水5ml使溶解，加于内径1.5cm，高10cm已处理好的D101大孔树脂柱，分别用水50ml，40％乙醇30ml，70％乙醇50ml洗脱，收集70％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验；吸取供试品溶液8μl，黄芪甲苷对照品4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以13∶7∶2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热5min，至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b.取本品3g，加乙醇30ml，超声提取30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取苍术对照药材2g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液4μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G板上，以60—90℃石油醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
c.取鉴别b项下供试品溶液作为供试品溶液，另取丹参对照药材2g，加乙醇30ml，超声提取30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液。再取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19∶1苯—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。
d.取本品2g，用甲醇20ml超声30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，沸水浴回流1小时，回流液用氯仿分两次萃取，每次20ml。合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取山药对照药材2g同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9.1苯—丙酮，氨蒸气饱和，为展开剂展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热5min至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
e.取鉴别d项下供试品液作为供试品液，另取菝葜皂苷元对照品，加苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸气饱和，为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，105℃加热5min至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
含量测定照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；19∶81∶1甲醇—水—冰醋酸为流动相，检测波长为250nm。理论塔板数按葛根素峰计算应不低于4000；对照品溶液的制备，精密称取葛根素对照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加30％乙醇至刻度，摇匀，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品颗粒研细，称取1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，250w，50kHz超声提取40分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法，分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少于0.85mg。
权利要求
1.一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的黄芪400-800重量份葛根300-500重量份山药300-500重量份苍术200-400重量份知母200-400重量份天花粉200-400重量份地黄300-500重量份马齿苋200-400重量份丹参200-400重量份鬼箭羽200-400重量份桑枝200-400重量份。
2.如权利要求1所述的一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于该药物组合物是由如下原料药制成的黄芪600重量份葛根400重量份山 药400重量份苍术300重量份知母300重量份天花粉300重量份地黄400重量份齿苋300重量份丹参300重量份鬼箭羽300重量份 桑枝300重量份。
3.如权利要求1或2所述的一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于该药物组合物原料药可以制成任何临床可接受的剂型，如片剂，胶囊，颗粒剂，口服液体制剂，皮下给药制剂，栓剂。
4.如权利要求5所述的一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的制备方法为取苍术、丹参二味用4-8倍量85-95％乙醇回流提取1-2小时，滤过，药渣与葛根合并，用60-80％乙醇回流提取2-4次，每次4-7倍量，分别提取0.5-2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，水液备用；取黄芪等八味药加水煎煮2-3次，每次加8-12倍水，煎煮1-2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10~1.12/60℃，兑入上述醇提浓缩液，喷雾干燥，制成临床可接受的剂型，如片剂，胶囊，颗粒剂，口服液体制剂，皮下给药制剂，栓剂。
5.如权利要求4所述的一种治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于该药物组合物的制备方法为取苍术、丹参二味用6倍量95％乙醇回流提取1小时，滤过，药渣与葛根合并，用70％乙醇回流提取三次，每次5倍量，分别提取2小时，1小时，0.5小时，滤过，合并滤液，60~70℃，-0.08Mpa减压回收乙醇，水液备用；取黄芪等八味药加水煎煮二次，第一次加10倍水煎煮1.5小时，第二次加8倍水煎煮1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度1.10~1.12/60℃，兑入上述醇提浓缩液，加入糊精搅匀，喷雾干燥，进风180~200℃，出风80~85℃，干粉加蛋白糖，并加糊精至1000重量份，干压制成颗粒。
6.如权利要求5所述颗粒剂的质量控制方法，其特征在于该方法中包括鉴别和/或含量测定，其中鉴别包括如下方法中的一种或几种鉴别a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超声提取20-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，用乙醚分2-4次萃取，每次15-30ml，弃去乙醚液，取水层用水饱和正丁醇分2-4次萃取，每次15-30ml，合并正丁醇层用0.5～2％氢氧化钠溶液分2-3次洗涤，每次10-20ml，弃去碱液，正丁醇用正丁醇饱和的水洗至中性，取正丁醇液，浓缩至干，残渣加水5ml使溶解，加于已处理好的D101大孔树脂柱，分别用水40-60ml，30-50％乙醇20-40ml，60-80％乙醇40-60ml洗脱，收集60-80％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验；吸取供试品溶液8μl，黄芪甲苷对照品4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以11-14∶6-9∶1-2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加热5-8min，至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。b.取本品3g，加乙醇30ml，超声提取20-40分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取苍术对照药材2g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液4μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G板上，以60-90℃石油醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；c.取鉴别b项下供试品溶液作为供试品溶液，另取丹参对照药材2g，加乙醇30ml，超声提取20-40分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液。再取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以16-19∶1-4苯—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点；d.取本品2g，用甲醇20ml超声20-40分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸0.5～2ml，沸水浴回流1-2小时，回流液用氯仿分2-3次萃取，每次20ml。合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取山药对照药材2g同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸气饱和，为展开剂展开，取出，晾干，喷以5-10％硫酸乙醇溶液，100-110℃加热3-8min至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；e.取鉴别d项下供试品液作为供试品液，另取菝葜皂苷元对照品，加苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7-9∶1-3苯—丙酮，氨蒸气饱和，为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，100-110℃加热5min至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；含量测定照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；19-17∶79-82∶1-2甲醇—水—冰醋酸为流动相，检测波长为250nm；理论塔板数按葛根素峰计算应不低于4000；对照品溶液的制备，精密称取葛根素对照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加20-40％乙醇至刻度，摇匀，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品颗粒研细，称取1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声提取30-50分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法，分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少于0.85mg。
7.如权利要求6所述颗粒剂的质量控制方法，其特征在于该方法为鉴别a.取本品粉末2g，加甲醇40ml超声提取30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水15ml使溶解，30ml，30ml，15ml，15ml用乙醚分四次萃取，弃去乙醚液，30ml，30ml，15ml取水层用水饱和正丁醇分三次萃取，合并正丁醇层用1％氢氧化钠分两次洗涤，每次15ml，弃去碱液，正丁醇用正丁醇饱和的水洗至中性，取正丁醇液，浓缩至干，残渣加水5ml使溶解，加于内径1.5cm，高10cm已处理好的D101大孔树脂柱，分别用水50ml，40％乙醇30ml，70％乙醇50ml洗脱，收集70％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验；吸取供试品溶液8μl，黄芪甲苷对照品4μl，分别点子同一硅胶G薄层板上，以13∶7∶2氯仿—甲醇—水10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热5min，至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。b.取本品3g，加乙醇30ml，超声提取30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取苍术对照药材2g，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液4μl，对照药材溶液2μl，分别点于同一硅胶G板上，以60-90℃石油醚为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。c.取鉴别b项下供试品溶液作为供试品溶液，另取丹参对照药材2g，加乙醇30ml，超声提取30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为对照药材溶液。再取丹参酮IIA对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各4μl，对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19∶1苯—醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应位置上，显相同颜色的斑点。d.取本品2g，用甲醇20ml超声30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，再加盐酸1ml，沸水浴回流1小时，回流液用氯仿分两次萃取，每次20ml。合并氯仿液，水浴蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取山药对照药材2g同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸气饱和，为展开剂展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热5min至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。e.取鉴别d项下供试品液作为供试品液，另取菝葜皂苷元对照品，加苯制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各4ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9∶1苯—丙酮，氨蒸气饱和，为展开剂展开，取出，晾干，喷以5％香草醛的10％硫酸乙醇液，105℃加热5min至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)测定，色谱条件与系统适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；19∶81∶1甲醇—水—冰醋酸为流动相，检测波长为250nm。理论塔板数按葛根素峰计算应不低于4000；对照品溶液的制备，精密称取葛根素对照品10mg，置25ml量瓶中，加30％乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2ml，置10ml量瓶中，加30％乙醇至刻度，摇匀，即得，每1ml含葛根素80μg；取本品颗粒研细，称取1.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，250w，50kHz超声提取40分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法，分别精密吸取对照品与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，即得；本品每1g含葛根素(C21H20O9)，不得少于0.85mg。
10.如权利要求1或2所述的药物组合物在制备治疗糖尿病的药物中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种治疗糖尿病的药物组合物，该药物组合物是由如下原料药制成的黄芪400－800重量份，葛根300－500重量份，山药300－500重量份，苍术200－400重量份，知母200－400重量份，天花粉200－400重量份，地黄300－500重量份，马齿苋200－400重量份，丹参200－400重量份，鬼箭羽200－400重量份，桑枝200－400重量份；该药物组合物治疗糖尿病有很好的疗效。
文档编号A61P3/10GK1511576SQ0215946
公开日2004年7月14日 申请日期2002年12月31日 优先权日2002年12月31日
发明者张红, 张 红 申请人:中国中医药科技开发交流中心