专利名称：治疗肝脏功能损害的二氯乙酸二异丙胺注射剂及其制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种医药配制品及其制备工艺，具体地说，是一种化学名称为二氯乙酸与N-(1-甲基乙基)-2-丙胺化合物，其结构式为 其分子式为C6H15N·C2H2Cl2O2，其分子量为230.13的治疗肝脏功能损害的药物二氯乙酸二异丙胺制成的供注入体内的灭菌溶液，以及供临用前配成溶液的无菌冻干粉针。
背景技术：
肝脏好比人体内的一个巨大“化工厂”，在代谢、胆汁生成、解毒、凝血、免疫、热量产生及水与电解质调节中均起着非常重要的作用，表现在一、代谢功能1.糖代谢。饮食中的淀粉和糖类消化后变成葡萄糖经肠道吸收后，肝脏就能将它合成肝糖原并贮存于肝脏。当血液中血糖浓度变化时，肝脏具有调节作用。
2.蛋白质代谢。肝脏是人体白蛋白唯一的合成器官；除Υ球蛋白以外的球蛋白、酶蛋白以及血浆蛋白质的生成、维持及调节都要肝脏参与；氨基酸代谢如脱氨基反应、尿素合成及氨的处理均在肝脏内进行。
3.脂肪代谢。中性脂肪的合成和释放、脂肪酸分解、酮体生成与氧化、胆固醇与磷脂的合成、脂蛋白合成和运输均在肝内进行。
4.维生素代谢。许多维生素如A、B、C、D和K的合成与储存均与肝脏密切相关。肝脏明显受损时会出现维生素代谢异常，如继发维生素A缺乏时出现夜盲或皮肤干燥综合征。
5.激素代谢。肝脏参与激素的灭活。当肝功能长期损害时可出现性激素失调，往往有性欲减退，腋毛、阴毛稀少或脱落，阳痿、睾丸萎缩、月经失调以及肝掌及血管痣。
二、胆汁生成和排泄功能胆红素的摄取、结合和排泄，胆汁酸的生成和排泄都由肝脏承担。肝细胞制造、分泌的胆汁，经胆管输送到胆囊。正常情况下，每天肝脏制造800～1000ml的胆汁。胆囊仅起浓缩和排放胆汁的功能，以帮助小肠内脂肪的消化和吸收。
三、解毒功能人体代谢过程中所产生的一些有害废物及外来的毒物、毒素，包括药物的代谢和分解产物，均要在肝脏解毒。肝细胞对一切毒物通过氧化、还原、水解和结合等方式变为无害物质排放体外。
四、免疫功能肝脏是最大的网状内皮细胞吞噬系统，它能通过吞噬、隔离和消除、改造入侵和内生的各种抗原，所以与人体的免疫能力密切相关。
五、血液凝固功能几乎所有的凝血因子都由肝脏制造。肝脏在人体凝血和抗凝两个系统的动态平衡中起着重要的调节作用。因此肝功破坏的严重程度常与凝血障碍的程度相平行。肝功衰竭者常死于出血。
另外，肝脏参与人体血容量的调节、热量的产生和水及电解质的调节。如肝脏损害时对钠、钾、铁、铜、钙、镁、磷、锌等电解质调节失衡，尤其常见是水钠在体内潴留，引起水肿。
病毒性感染、药物中毒、遗传基因缺陷所致代谢功能障碍及自身免疫抗体反应异常均可引起肝脏病变，导致急、慢性肝炎、肝硬化、肝性脑病(肝昏迷)及诱发肝细胞癌变。其中由肝炎病毒感染引起的病毒性肝炎发病率高、危害性大，已在全世界广泛流行，是严重威协我国人民健康和下一代体质的疾病。
目前，全国有1200万人患有慢性肝炎，每年有30万人被肝病夺走生命。值得关注的是，近年来脂肪肝患病率出现上升态势，经B超检查，患病率竟高达30％。
在病毒性肝炎中，甲型和戊型主要表现为急性肝炎，乙、丙、丁型主要表现为慢性肝炎并可发展为肝硬化和肝细胞癌。近年又发现了已型肝炎和庚型肝炎。上述各型病毒的主要病变都在肝脏，都具有相类似的临床表现，也都具有传染性强、病程较长及危害性大的共性。除此之外，药物性肝炎、细菌性肝炎、酒精性肝炎所致的肝功能损害都严重危害人类的身体健康。因此，研制、开发治疗肝脏疾病的药物及辅助治疗药物显得尤为重要。
二氯乙酸二异丙胺为维生素B15(维肝乐)的活性成份；具有抗脂肪肝，改善肝功能，提高组织细胞呼吸及氧呼吸率的作用，对受损的肝细胞有促进其再生的作用。其作用机制如下1.本品通过抑制丙酮酸脱氢酶激酶来激活丙酮酸脱氢酶复合物，同时增加肝细胞氧摄取，促进乳酸氧化，降低血液乳酸水平，改善机体的酸碱代谢平衡，补充能量，从而改善肝细胞的能量代谢。
2.本品代谢产物甘氨酸，通过甘氨酸裂解酶作用生成CO2、NH3和N5N10-CH2-FH4。为肝细胞代谢提供能量，并为胆碱合成提供甲基；同时，二异丙胺在ATP作用下提供甲基，促进胆碱合成。胆碱与肝脂肪作用，生成卵磷脂；卵磷脂、肝脂肪、胆固醇与载脂蛋白结合成脂蛋白；脂蛋白易溶于血浆，从而将脂肪由肝内转运到肝外，减少肝内脂肪聚集。
3.本品能降低动脉中的甘油及游离脂肪酸的浓度，减少肝脏对甘油的吸收，同时刺激甘油三酯以VLDL形式分泌入血，从而有效抑制肝脏甘油三酯的合成。
4.本品能阻碍合成胆固醇限速酶(HMGCoA还原酶)的活性。通过抑制HMGCoA还原酶作用的多个步骤而共同影响胆固醇和脂肪酸的合成。
5.本品能改善肝脏机能。促进膜磷脂的序贯甲基化，增强肝细胞膜的流动性，提高作为胆汁分泌和流动之主要动力的Na+-K+-ATP酶的活性。促进受损肝细胞的修复，提高组织细胞呼吸功能及氧利用率。提高脂肪酸的代谢活性，加速脂肪酸的氧化，为肝脏功能恢复创造条件。
6.本品是典型的靶向性制剂，90％以上在肝细胞内参与生化反应。
7.本品可延迟二氯醋酸的释放，降低血糖和乳酸水平。抑制肝脏甘油三酯和胆固醇的合成。
药代动力学研究结果表明，静脉给予0.8mg/kg的二氯乙酸二异丙胺，尿中的药物浓度在给药后半小时达到高峰，之后先是快速下降，再缓慢下降；至给药后3小时尿中不能检测出药物，尿中排泄药物的总量占投药量的11％左右，马血中未检测出药物。
临床研究结果表明，二氯乙酸二异丙胺最初应用于慢性肝炎及酒精性肝硬化的治疗，其后通过研究验证了对心脏疾病、风湿性疾病、动脉硬化症等亦有疗效。临床报告表明，这些作用是以二氯乙酸二异丙胺对调节细胞内氧化的酵素群产生作用为基础的。下面就试着将针对这些本质上与二氯乙酸二异丙胺生理作用相同的物质的临床报告进行归纳。
1.肝脏疾病对形成腹水的六个肝硬化病例和4个酒精性慢性肝炎病进行治疗，每日肌肉注射二氯乙酸二异丙胺20mg或服用40mg，报告显示对出肝硬化引起的充血肝病例除可见利尿外，血清蛋白有所增加，r-球蛋白有所减少，还可以改善A/G比。
给肝硬化患者每日注射50mg的二氯乙酸二异丙胺，可见尿量有明显增加，尿中的17-Keto steroid的排泄量亦有增加，肝机能检查可见改善，肌酸酐及肌酸的尿中排泄量都有增加。
2.循环系统疾病针对冠心病，每隔三日肌肉注射5～10mg的二氯乙酸二异丙胺，先连续六日注射Arginine pangamate 70mg，再改剂量为35mg注射两周，证明使用二氯乙酸二异丙胺可以减轻心功能不全及狭心症的发作。此外，针对20例有脑血管疾病的患者连续5日使用25mg的二氯乙酸二异丙胺进行治疗。间隔数日后再重复一个疗程。如此2-3次后，患者意识症状改善，步行障碍和半身麻痹者也较治疗前能轻松行动。
给心功能不全和狭心症患者肌肉注射10mg或内服30mg的二氯乙酸二异丙胺，都可看到症状改善。连续20～30日肌肉注射50mg药，可见其对冠状动脉供血不足的自我感觉症状的改善，对EKG有少许改善。
3.风湿性疾病给300例以上的风湿性关节炎患者肌肉注射或口服二氯乙酸二异丙胺，试验报告表明症状均等到缓解。该种情况下，二氯乙酸二异丙胺的作用虽不及ACTH或可的松强，但药效持续时间长，临床可见改善情绪、增进食欲、头脑清楚、肌肉疼痛消退等作用。
4.高胆固醇血症(高血脂)肌肉注射10mg或口服30mg二氯乙酸二异丙胺进行治疗，其中，患动脉硬化症的8例患者中的4例，以及患糖尿病的8例患者中的6例，都可见血清总胆固醇和酯型胆固醇减少，而且还可以改善a-酮酸代谢。
临床效果1.对自我感觉症状的效果针对急性肝炎5例、慢性肝炎11例、肝硬化症4例共计20例患者，每日以二氯乙酸二异丙胺为摄取方式，每日30～60mg给药20～61天，取得的效果如下所示，大多数患者症状均得到改善。
①食欲不振现象消失......对13例中的8例(61.5％)有效。
②腹部涨满感消失......对8例中的5例(62.5％)有效。
③恶心症状消失......对5例中的4例(80％)有效。
④全身倦怠感消失......对3例中的2例(66.6％)有效。
此外，对9例肝脏疾病以二氯乙酸二异丙胺为摄取方式，每日给药20～60mg，据临床观察，6例(66.6％)自我感觉症状有所改善。
2.对他觉症状的效果在上述20例肝脏疾病的临床报告中，二氯乙酸二异丙胺给药前，肝大一至四指，给药后有8例肝脏缩小，有5例肝脏的硬度得到软化。
此外，对9例肝脏疾病的报告中有3例发现肝肿缩小。
3.对肝机能的效果对15例各类肝脏疾病进行二氯乙酸二异丙胺的给药(其中大多数每日内服相当于30mg的二氯乙酸二异丙胺)，给药前后对肝机能的测定结果如表1所示，可见对急性肝炎的全部病例、对慢性肝炎的57.1％的病例，对肝硬变33.3％的病例都有改善效果。
表1.二氯乙酸二异丙胺给药后的肝机能改善状况
4.对各类疾病的效果①急性肝炎......给急性肝炎患者使用二氯乙酸二异丙胺后，黄疸症状迅速减轻，自、他觉症状和肝功能检查结果(特别是血清蛋白像)都有明显好转。
一位16岁急性肝炎患者使用二氯乙酸二异丙胺前后的对比。可见二氯乙酸二异丙胺的摄取方式为每日给药60mg后肝功能的检查结果。
②慢性肝炎......给7例慢性肝炎患者每日给二氯乙酸二异丙胺30mg(仅有一例给药60mg)，15～35日后，根据报告可见2例有显著改善，1例有改善。对4例进行肝功能检查后，结果表明有3例得到改善。
③肝硬化让肝硬化患者每日服用40mg二氯乙酸二异丙胺。报告显示，有一例病例自我感觉症状有所改善，17日后经检查证实血清蛋白分析有变化即β、γ球蛋白有所减少，α2球蛋白有所增加，Kunkel硫酸亚铁试验可见好转。另有一例，15日后白蛋白从30.7％上升到36.2％，A/G比从0.44上升到0.57。
还有一个让27岁的肝硬化患者每日服用40mg二氯乙酸二异丙胺的病例，报告表明黄疸有消退，BSP值20日后30分值下降到15％，A/G比两周后由0.47改善到0.65，尿量持续超过1,000cc，可见其利尿效果，已无须做腹水穿刺排除。
④班齐综合症给2例班齐综合症患者每日使用60mg二氯乙酸二异丙胺，临床症状和肝机能检查结果的好转如表2所示。
表2.二氯乙酸二异丙胺给药效果(每日用量相当于二氯乙酸二异丙胺60mg)
由此可见，二氯乙酸二异丙胺适用于急性肝炎和慢性肝炎、脂肪肝、黄疸、肝硬化、肝腹水、肝癌及其它疾病引起的肝功能损害。
发明目的本发明通过制备二氯乙酸二异丙胺供注入体内的灭菌溶液，以及供临用前配成溶液的无菌冻干粉末的方法，达到治疗急性、重症肝脏疾病所致的肝脏功能严重损害的目的。
发明内容
为达到上述目的，本发明采用如下技术方案注射剂的活性成分为二氯乙酸二异丙胺，其化学名称为二氯乙酸与N-(1-甲基乙基)-2-丙胺化合物，结构式为
分子式为C6H15N·C2H2Cl2O2，分子量为230.13。
本发明二氯乙酸二异丙胺注射剂中二氯乙酸二异丙胺的单次给药剂量为10mg至100mg。
将二氯乙酸二异丙胺加注射用水和附加剂可以制成供注入体内的灭菌溶液。
将二氯乙酸二异丙胺加注射用水和附加剂，经冷冻干燥，可以制成供临用前配成溶液的无菌冻干粉针。
用作本发明注射剂的附加剂有抗氧剂、金属络合剂、惰性气体、pH调节剂、等张调节剂、填充支架剂等。
本发明注射剂中的抗氧剂包括但不限于焦亚硫酸盐(钾或钠)、亚硫酸盐、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、甲醛合次硫酸氢钠、硫脲、抗坏血酸、硫代甘油、谷胱甘肽、丙氨酸、半胱氨酸、没食子酸及其酯类(丙酯、辛酯)、叔丁基对羟基茴香醚、二叔丁对甲酚、生育酚(α、β、δ)、去甲二氢愈创木酸、抗坏血酸棕榈酸酯等。
本发明注射剂中的金属络合剂包括但不限于乙二胺四乙酸二钠或枸椽酸、酒石酸之类二羧酸化合物等。
本发明注射剂中的惰性气体包括但不限于氮、氩、氖、氪气体及二氧化碳气体等。
本发明注射剂中的pH调节剂包括但不限于甲磺酸、马来酸、盐酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、磷酸盐、醋酸及其盐、枸橼酸及其盐、氨基酸及其盐等。
本发明注射剂中的等张调节剂包括但不限于葡萄糖(5％)和/或氯化钠(0.9％)、甘油(2.25％)、硫酸钠(1.6％)等。
本发明注射剂中的填充支架剂包括但不限于半胱氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、水解明胶、甘氨酸、山梨醇、乳糖酸钙、牛血清白蛋白、右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮或乳糖与甘露醇1∶1混合物、水解明胶与甘露醇混合物等。
本发明注射剂制备工艺为取二氯乙酸二异丙胺加入注射用水使溶解，加热，炭脱，粗滤，调节溶液的pH值，精滤，灌装入1ml至20ml安瓿中，充氮气，流通蒸汽灭菌，制成1ml至20ml的灭菌小容量注射液。
本发明注射剂制备工艺为取二氯乙酸二异丙胺、等张调节剂(5％葡萄糖和/或0.9％氯化钠)，加注射用水使溶解，加热，炭脱，粗滤，调节溶液的pH值，精滤，灌装入50ml至500ml输液瓶中，流通蒸汽灭菌，制成50ml至500ml的灭菌大容量注射液。
本发明注射剂制备工艺为取二氯乙酸二异丙胺、填充支架剂加注射用水使溶解，调节溶液的pH值，滤过，分装，冷冻干燥制成供注射用的无菌冻干粉针。
研究结果表明，本发明的二氯乙酸二异丙胺注射剂质量稳定可控、安全有效。
下面经过检测说明本发明的有益效果检测指标及方法1.有关物质取本发明样品，加甲醇稀释成每1mL含30μg的溶液，作为对照溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版二部附录VB)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲醇-醋酸乙酯-冰醋酸(2∶2∶1)为展开剂，展开后，晾干，喷以茚三酮试液，置105℃加热20分钟以上，至出现红棕色斑点。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不得更深。
2.含量测定精密取本发明样品(约相当于二氯乙酸二异丙胺25mg)，置量瓶中，加水，超声5分钟使溶解，放冷，用水稀释到刻度，摇匀；精密量取上述溶液置量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，作为供试品溶液；另精密称取二氯乙酸二异丙胺对照品适量，用水制成每1ml中约含50μg的溶液作为对照品溶液。精密量取供试品溶液、对照品溶液及水各3.0ml，分别置25ml纳氏比色管中，各加亚硝酸钠溶液(1→2)3ml，置50-60℃水浴中，分别于振摇下各加冰醋酸3ml，加塞保温15分钟后，用水冷却，用吸耳球吹去液层上空三氧化二氮棕色气体，振摇下，分别加入氢氧化钾溶液(1→2)7.5ml，继续水冷却至室温并吹去残余三氧化二氮气体，分另精密加入环己烷7.5ml，加塞振摇5分钟以上，静置分层，取供试品与对照品的环己烷提取液，照分光光度法(中国药典2000年版二部附录IV A)，用上述水溶液作为空白，在232nm波长处分别测定吸收度，计算，即得。
检测结果一、实例1样品检测结果1.有关物质未见杂质斑点。
2.含量103.2％。
二、实例2样品检测结果1.有关物质未见杂质斑点。
2.含量99.7％。
三、实例3样品检测结果1.有关物质未见杂质斑点。
2.含量100.3％。
四、实例4样品检测结果1.有关物质未见杂质斑点。
2.含量98.6％。
五、实例5样品检测结果1.有关物质未见杂质斑点。
2.含量101.9％。
具体实施例方式
一、实例1处方二氯乙酸二异丙胺 40g0.1mol/L盐酸溶液 适量注射用水加至1000ml，分装成1000支，1ml/支制备工艺取二氯乙酸二异丙胺、加适量注射用水使溶解，加入活性炭，加热，搅拌，粗滤，调节溶液的pH值，精滤，灌装入安瓿，充入氮气，封口，流通蒸汽灭菌，即得。
二、实例2处方二氯乙酸二异丙胺 0.4g氯化钠 9g0.1mol/L盐酸溶液 适量注射用水加至1000ml，分装成10瓶，100ml/瓶三、实例3处方二氯乙酸二异丙胺 0.4g葡萄糖 50g0.1mol/L盐酸溶液 适量注射用水加至1000ml，分装成10瓶，100ml/瓶四、实例4处方二氯乙酸二异丙胺 0.4g氯化钠 9g葡萄糖 50g0.1mol/L盐酸溶液 适量注射用水加至1000ml，分装成10瓶，100ml/瓶上述实例样品制备工艺取二氯乙酸二异丙胺、氯化钠和/或葡萄糖，加适量注射用水使溶解，加入活性炭，加热，搅拌，粗滤，调节溶液的pH值，精滤，灌装，轧盖，流通蒸汽灭菌，即得。
五、实例5处方二氯乙酸二异丙胺 40g山梨醇 适量0.1mol/L盐酸溶液 适量分装成1000支制备工艺取二氯乙酸二异丙胺、山梨醇，加注射用水使溶解，调节溶液的pH值，滤过，灌装，冷冻干燥，轧盖，即得。
权利要求
1.二氯乙酸二异丙胺注射剂及其制备工艺，其特征在于以二氯乙酸二异丙胺和附加剂，加注射用水制成的供注入体内的灭菌溶液，以及以二氯乙酸二异丙胺和附加剂，加注射用水使溶解，经冷冻干燥制成的供注射用无菌冻干粉针。
2.根据权利要求1所述的二氯乙酸二异丙胺注射剂及其制备工艺，其特征在于二氯乙酸二异丙胺的化学名称为二氯乙酸二异丙胺，其化学名称为二氯乙酸与N-(1-甲基乙基)-2-丙胺化合物，结构式为 分子式为C6H15N·C2H2Cl2O2，分子量为230.13。
3.根据权利要求1所述的二氯乙酸二异丙胺注射剂及其制备工艺，其特征在于二氯乙酸二异丙胺加注射用水和附加剂，例如pH调节剂、惰性气体制成小容量灭菌注射液。
4.根据权利要求1所述的二氯乙酸二异丙胺注射剂及其制备工艺，其特征在于二氯乙酸二异丙胺加注射用水和附加剂，例如pH调节剂、等张调节剂制成大容量灭菌注射液。
5.根据权利要求1所述的二氯乙酸二异丙胺注射剂及其制备工艺，其特征在于二氯乙酸二异丙胺加注射用水和附加剂，例如pH调节剂和填充支架剂，经冷冻干燥制成供注射用无菌冻干粉针。
6.根据权利要求1所述的二氯乙酸二异丙胺注射剂及其制备工艺，其特征在于附加剂为pH调节剂、等张调节剂、惰性气体和填充支架剂等。
7.权利要求6所述的pH调节剂，包括但不限于甲磺酸、马来酸、盐酸、氢氧化钠、碳酸氢钠、磷酸盐、醋酸及其盐、枸橼酸及其盐、氨基酸及其盐等。
8.权利要求6所述的等张调节剂，包括但不限于5％葡萄糖和/或0.9％氯化钠、2.25％甘油、1.6％硫酸钠等。
9.权利要求6所述的惰性气体，包括但不限于氮、氩、氖、氪气体及二氧化碳气体等。
10.权利要求6所述的填充支架剂包括但不限于半胱氨酸、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氯化钠、乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、水解明胶、甘氨酸、山梨醇、乳糖酸钙、牛血清白蛋白、右旋糖酐、聚乙烯吡咯烷酮或乳糖与甘露醇1∶1混合物、水解明胶与甘露醇混合物等。
全文摘要
本发明涉及一种治疗肝脏功能损害药物二氯乙酸二异丙胺注射剂及其制备工艺，它是以二氯乙酸二异丙胺、附加剂和注射用水制成的供注入体内的灭菌溶液，例如小容量灭菌注射液、大容量灭菌注射液，以及以二氯乙酸二异丙胺、附加剂、注射用水经冷冻干燥制成的供注射用的无菌冻干粉针。
文档编号A61K9/08GK1513441SQ0310878
公开日2004年7月21日 申请日期2003年3月30日 优先权日2003年3月30日
发明者刘孝乐, 朱丹 申请人:南昌弘益科技有限公司