专利名称：一种具有抗肿瘤活性的物质及其药物制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的物质，本发明还涉及该物质的药物制剂。
背景技术：
鸦胆子为苦木科植物鸦胆子Brucea javanica(L.)Merr.干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收。鸦胆子油为从鸦胆子中经压榨、精制而得的脂肪油或为鸦胆子经石油醚提取后所得到的脂肪油，鸦胆子油中含三油酸甘油酯约85％，其他类型结合脂肪酸约5％，非酯化部分(包括油酸、亚油酸、亚麻酸等)10％；其中非酯化部分中油酸占61.55％。三油酸甘油酯体外抑癌实验活性不高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种抗肿瘤活性显著的具有抗肿瘤活性的物质。
本发明还提供了上述物质的药物制剂。
本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，所述的物质通过以下方法得到，取鸦胆子油，先用水去除杂质，再将其进行水解，冷藏，过滤，洗涤，干燥，即得。
本发明物质中主要含亚麻酸钠、亚油酸钠和油酸钠，其中，亚麻酸钠含量2％～30％，亚油酸钠含量5％～40％，油酸钠含量25％～80％，这三种物质具有较好协同性抗肿瘤活性。不排除还含有其他未检测出的协同性抗肿瘤活性物质。
本发明所述鸦胆子油可以为市售的鸦胆子油，也可以是采用现有技术中任何一种工艺制备的鸦胆子油，包括从鸦胆子中经压榨、精制而得的脂肪油，或者鸦胆子经石油醚提取后所得到的脂肪油。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到90-100℃，缓慢注入0.5～2体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1-2体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全，冷藏、过滤、洗涤、干燥，即得。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到90-100℃，缓慢注入0.5～2体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1-2体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全；
(3)取溶液调PH值至中性，浓缩，放冷，冷藏，过滤，得固体物，取该固体物以适量乙醇或0～4℃的冷水洗涤后，干燥，即得。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，将步骤(1)重复2-4次。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，步骤(1)中所述的纯化水的温度为40-50℃。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，步骤(2)中所述的碱性溶液加入量为鸦胆子油的4～12体积倍量，浓度为0.5-1.5mol/L。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，步骤(2)中所述的碱性溶液按以下方法配制取碱性物质氢氧化钠或者氢氧化钾，或者氢氧化钙，或者氢氧化钡，或者氧化钙，加入有机试剂与水任意比混合的溶液适量，使溶解，并稀释成1000ml，用橡皮塞塞紧，静置24小时后，迅速取上清液，置具棕色塞的棕色玻瓶中，即得。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，所述的有机试剂选自甲醇、乙醇、正丁醇和丙二醇。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特点是，步骤(2)中加热回流的温度为90-95℃，时间为1-3小时。
本发明还公开了一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，其特点是，取上述任何一项技术方案中所述的具有抗肿瘤活性的物质，加入药用辅料，制成临床上可以接受的任何一种剂型的药剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
上述药物制剂可以选用现有技术中的任何一种剂型，包括片剂、胶囊剂、软胶囊、喷雾剂、凝胶剂、凝胶吸入剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂，靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂。其优选剂型为固体制剂。
实验证明，本发明物质及其药物制剂与直接从鸦胆子中提取出来的鸦胆子油相比，抗癌活性显著增强。同时，由于本发明物质为固体，可以用来制成固体口服制剂，克服了鸦胆子油口服乳剂对肠胃造成的恶腻感，也有利于服用、储存和运输。
具体实施例方式
实施例1。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下方法得到，取鸦胆子油，先用水去除杂质，再将其进行水解，冷藏，过滤，洗涤，干燥，即得。
实施例2。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到95℃，缓慢注入1体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1.5体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全，冷藏、过滤、洗涤、干燥，即得。
实施例3。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到90℃，缓慢注入0.5体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全，冷藏、过滤、洗涤、干燥，即得。
实施例4。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到100℃，缓慢注入2体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加2体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全，冷藏、过滤、洗涤、干燥，即得。
实施例5。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到90℃，缓慢注入0.5体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；
(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全；(3)取溶液调PH值至中性，浓缩，放冷，冷藏，过滤，得固体物，取该固体物以适量乙醇洗涤后，干燥，即得。
实施例6。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到100℃，缓慢注入2体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加2体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全；(3)取溶液调PH值至中性，浓缩，放冷，冷藏，过滤，得固体物，取该固体物以适量0℃的冷水洗涤后，干燥，即得。
实施例7。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到95℃，缓慢注入1.5体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1.5体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全；(3)取溶液调PH值至中性，浓缩，放冷，冷藏，过滤，得固体物，取该固体物以适量4℃的冷水洗涤后，干燥，即得。
实施例8。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，
(1)取鸦胆子油，加热到92℃，缓慢注入0.8体积倍温度为40℃的纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；重复2次；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加2体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，所述的碱性溶液加入量为鸦胆子油的4体积倍量，浓度为1.5mol/L；加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全，加热回流的温度为90℃，时间为3小时，冷藏、过滤、洗涤、干燥，即得。
其中，所述的碱性溶液按以下方法配制取碱性物质氢氧化钠，加入甲醇与水任意比混合的溶液适量，使溶解，并稀释成1000ml，用橡皮塞塞紧，静置24小时后，迅速取上清液，置具棕色塞的棕色玻瓶中，即得。
实施例9。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，，(1)取鸦胆子油，加热到98℃，缓慢注入1.8体积倍温度为50℃的纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；重复4次；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，所述的碱性溶液加入量为鸦胆子油的12体积倍量，浓度为0.5mol/L；加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全，加热回流的温度为95℃，时间为1小时，冷藏、过滤、洗涤、干燥，即得。
其中，所述的碱性溶液按以下方法配制取碱性物质氢氧化钾，加入乙醇与水任意比混合的溶液适量，使溶解，并稀释成1000ml，用橡皮塞塞紧，静置24小时后，迅速取上清液，置具棕色塞的棕色玻瓶中，即得。
实施例10。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，，(1)取鸦胆子油，加热到95℃，缓慢注入1.2体积倍温度为45℃的纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；重复3次；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，所述的碱性溶液加入量为鸦胆子油的8体积倍量，浓度为1mol/L；加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全，加热回流的温度为92℃，时间为2小时，冷藏、过滤、洗涤、干燥，即得。
其中，所述的碱性溶液按以下方法配制取碱性物质氢氧化钙，加入正丁醇与水任意比混合的溶液适量，使溶解，并稀释成1000ml，用橡皮塞塞紧，静置24小时后，迅速取上清液，置具棕色塞的棕色玻瓶中，即得。
实施例11。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，，(1)取鸦胆子油，加热到98℃，缓慢注入1.8体积倍温度为40℃纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；重复2次；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1.5体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，碱性溶液加入量为鸦胆子油的4体积倍量，浓度为0.5mol/L；加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全；加热回流的温度为90℃，时间为3小时。
(3)取溶液调PH值至中性，浓缩，放冷，冷藏，过滤，得固体物，取该固体物以适量2℃的冷水洗涤后，干燥，即得。
其中，所述的碱性溶液按以下方法配制取碱性物质氢氧化钡，加入丙二醇与水任意比混合的溶液适量，使溶解，并稀释成1000ml，用橡皮塞塞紧，静置24小时后，迅速取上清液，置具棕色塞的棕色玻瓶中，即得。
实施例12。一种具有抗肿瘤活性的物质，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到92℃，缓慢注入1.2体积倍温度为50℃纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；重复4次；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1.5体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，碱性溶液加入量为鸦胆子油的12体积倍量，浓度为1.5mol/L；加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全；加热回流的温度为95℃，时间为1小时。
(3)取溶液调PH值至中性，浓缩，放冷，冷藏，过滤，得固体物，取该固体物以适量1℃的冷水洗涤后，干燥，即得。
其中，所述的碱性溶液按以下方法配制取碱性物质氢氧化钙，加入丙二醇与水任意比混合的溶液适量，使溶解，并稀释成1000ml，用橡皮塞塞紧，静置24小时后，迅速取上清液，置具棕色塞的棕色玻瓶中，即得。
实施例13。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例1所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成片剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例14。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例2所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成颗粒剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例15。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例3所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成注射剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例16。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例4所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成滴丸，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例17。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例5所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成胶囊，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例18。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例6所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成软胶囊，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例19。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例7所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成口服液，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例20。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例8所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成散剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例21。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例9所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成冻干粉针剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例22。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例10所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成丸剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例23。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例11所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成缓释制剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实施例24。一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，取实施例12所得之具有抗肿瘤活性的物质，加入常规药用辅料，按常规工艺制成胶囊，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
实验例1。发明人取实施例24所制之胶囊(以下简称YD)所做的抗肿瘤实验。
一、对S180移植性实体瘤抑瘤率的影响。
1、实验方法无菌条件下抽取KM小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1∶3稀释，取KM小鼠60只，接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为6组，即模型组、5-Fu组、鸦胆子油口服乳液组(10ml/kg)和YD低、中、高剂量组(0.41g/kg、0.83g/kg、1.65g/kg)，每组10只，分别灌胃给予相应药物(模型组灌胃给予等容积蒸馏水)，8天后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率。实验重复三次。
2、实验结果小鼠接种S180肿瘤后，三天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大于1g，YD三个剂量组均小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(P＜0.05，P＜0.01)。抑瘤率均大于30％。与鸦胆子油口服乳液组比较，YD三个剂量组效果明显优于鸦胆子油口服乳液组。结果见表1。
表1 YD对S180移植性实体瘤抑瘤率的影响(
，n＝10)
注和模型组相比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
二、对H22移植性实体瘤抑瘤率的影响1、实验方法无菌条件下抽取KM小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1∶3稀释，取KM小鼠60只，接种稀释后的癌细胞悬液0.2ml于腋部皮下。24h后随机分为6组，即模型组、5-Fu组、鸦胆子油口服乳液组(10ml/kg)和YD低、中、高剂量组(0.41g/kg、0.83g/kg、1.65g/kg)，每组10只，分别灌胃给予相应药物(模型组灌胃给予等容积蒸馏水)，8天后处死小鼠，剥取肿瘤，称重，按下面公式计算抑瘤率。
2、实验结果小鼠接种H22肿瘤后，四天皮下即可触到肿瘤，8天后解剖肿瘤平均重量均大于1g，鸦胆子油口服乳液组、YD三个剂量组均小鼠肿瘤浸润范围均小于模型组，瘤体易剥离，肿瘤重量明显减轻(P＜0.01)。抑瘤率均大于30％。YD三个剂量组与鸦胆子油口服乳液组比较效果更优。结果见表2。
表2 YD对H22移植性实体瘤抑瘤率的影响(
)
注和模型组相比较，**P＜0.01。
三、对EAC腹水瘤生命延长率的影响1、实验方法无菌条件下抽取KM小鼠腹腔内生长8天的腹水癌细胞悬液，癌细胞悬液和灭菌生理盐水按1∶3稀释，取KM小鼠60只，每只小鼠腹腔注射接种0.3ml。24h后随机分为6组，即模型组、环磷酰胺组、鸦胆子油口服乳液组(10ml/kg)和YD低、中、高剂量组(0.41g/kg、0.83g/kg、1.65g/kg)，每组10只，YD各剂量组分别灌胃给予相应药物(模型组灌胃给予等容积蒸馏水)，环磷酰胺组ip环磷酰胺75mg/kg，从接种瘤株后第三天开始ip，隔日一次，共四次。观察记录荷瘤小鼠的生存时间。
2、实验结果模型组小鼠接种EAC腹水瘤后，七天后左右可见小鼠腹部明显增大，给药组小鼠的自主活动，精神状态荷摄食情况较模型组好，用药10天后，YD各剂量组均可以不同程度地延长EAC小鼠的生命时间和生命延长率(P＜0.05，P＜0.01)，且各剂量组疗效优于鸦胆子油口服乳液组。结果见表3。
表3 YD对EAC腹水瘤生命延长率的影响(
)
注和模型组相比较，*P＜0.05，**P＜0.01。
四、结论通过S180，H22实体瘤和EAC腹水瘤实验，提示YD均具有较强的广谱抗肿瘤作用；而与市售的鸦胆子油口服乳液比较，YD在对实体瘤动物的抑瘤率及腹水瘤动物的生命延长率均显著优于市售的鸦胆子油口服乳液。
权利要求
1.一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，所述的物质通过以下方法得到，取鸦胆子油，先用水去除杂质，再将其进行水解，冷藏，过滤，洗涤，干燥，即得。
2.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到90-100℃，缓慢注入0.5～2体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1-2体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全，冷藏、过滤、洗涤、干燥，即得。
3.根据权利要求1所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，所述的物质通过以下步骤得到，(1)取鸦胆子油，加热到90-100℃，缓慢注入0.5～2体积倍纯化水中，加热搅拌，静置分层，弃去水层；(2)取经过上述步骤处理的鸦胆子油，加1-2体积倍量乙醇振摇均匀，再加入碱性溶液，加热回流至溶液中鸦胆子油水解完全；(3)取溶液调PH值至中性，浓缩，放冷，冷藏，过滤，得固体物，取该固体物以适量乙醇或0～4℃的冷水洗涤后，干燥，即得。
4.根据权利要求2或3所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，将步骤(1)重复2-4次。
5.根据权利要求2或3所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，步骤(1)中所述的纯化水的温度为40-50℃。
6.根据权利要求2或3所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，步骤(2)中所述的碱性溶液加入量为鸦胆子油的4～12体积倍量，浓度为0.5-1.5mol/L。
7.根据权利要求2或3所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，步骤(2)中所述的碱性溶液按以下方法配制取碱性物质氢氧化钠或者氢氧化钾，或者氢氧化钙，或者氢氧化钡，或者氧化钙，加入有机试剂与水任意比混合的溶液适量，使溶解，并稀释成1000ml，用橡皮塞塞紧，静置24小时后，迅速取上清液，置具棕色塞的棕色玻瓶中，即得。
8.根据权利要求7所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，所述的有机试剂选自甲醇、乙醇、正丁醇和丙二醇。
9.根据权利要求2或3所述的一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，步骤(2)中加热回流的温度为90-95℃，时间为1-3小时。
10.一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，其特征在于，取上述权利要求1-9中任何一项所述的具有抗肿瘤活性的物质，加入药用辅料，制成临床上可以接受的任何一种剂型的药剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。
全文摘要
本发明是一种具有抗肿瘤活性的物质，其特征在于，所述的物质通过以下方法得到，取鸦胆子油，先用水去除杂质，再将其进行水解，冷藏，过滤，洗涤，干燥，即得。本发明还公开了一种具有抗肿瘤活性的药物制剂，用于广谱肿瘤的治疗或辅助治疗。本发明物质及其药物制剂与鸦胆子油制成的鸦胆子油口服乳液相比，抗癌活性显著增强。同时，由于本发明物质为固体，可以用来制成固体口服制剂，克服了鸦胆子油口服乳剂对肠胃造成的恶腻感，也有利于服用、储存和运输。
文档编号A61P35/00GK1985860SQ200510022640
公开日2007年6月27日 申请日期2005年12月24日 优先权日2005年12月24日
发明者李明慧, 丁岗, 冯颖, 沈鸣, 曹亮, 孙世顷 申请人:江苏中康药物科技有限公司