治疗组合物的制作方法

专利名称：治疗组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及通过对哺乳动物施用治疗有效量的化合物组合来治疗哺乳动物HIV感染的方法。本发明还涉及包括用作HIV蛋白酶抑制剂的特定化合物和至少一种附加治疗剂的组合物。
背景技术：
获得性免疫缺陷综合征(AIDS)导致机体免疫系统逐渐衰竭，同时也使得中枢和周围神经系统逐步恶化。自80年代初它的首次确认以来，AIDS迅速传播并且现已在相对受限的部分人口中达到了流行性比例。大量研究导致发现了致病因子，人体T淋巴细胞逆转录病毒III(HTLV-III)，现在更普遍地被称为人体免疫缺陷病毒或HIV。
HIV是一类称为逆转录病毒的病毒中的一种。逆转录病毒基因组由RNA组成，RNA通过逆向转录被转化为DNA。然后此逆转录病毒性DNA稳定地结合到寄主细胞染色体中，并利用寄主细胞的复制过程，制造新的逆转录病毒性微粒并继续感染其它细胞。HIV似乎对对于机体免疫系统至关重要的人类T-4淋巴细胞具有特殊的亲合力。这些白血细胞的HIV感染使白细胞数量减少。最终，免疫系统无法有效地抵御各种伺机性疾病，例如，间质性浆细胞肺炎、卡波氏肉瘤和淋巴系统癌等。
尽管不了解HIV病毒形成和工作的确切机理，但是病毒的确认使得在控制该疾病上还是取得了一定进步。例如，已发现，叠氮胸苷(AZT)药物能够有效地抑制HIV病毒的逆转录基因组的逆转录，因而此药对于受AIDS折磨的患者可作为一种控制手段，尽管不是治疗手段。对于可以治疗或至少控制致命的HIV病毒的药物的研究仍在继续。
逆转录病毒复制的常规特点是聚合蛋白质的翻译后加工。此加工通过病毒编码的HIV蛋白酶来完成。这得到了可随后有助于感染性病毒的形成和作用的成熟多肽。如果这种分子加工被抑制，则正常的HIV制造就会终止。因此，HIV蛋白酶的抑制剂可以起到抗HIV病毒剂的作用。
HIV蛋白酶是HIV结构蛋白pol基因的翻译产物中的一种。这种逆转录病毒蛋白酶在离散位点特异地分裂其它结构多肽以释放这些新激活的结构蛋白和酶，从而赋予病毒体复制能力。因此，通过有效化合物抑制HIV蛋白酶，可以在HIV-1生命周期早期预防被感染的T淋巴细胞的前病毒整合，以及在其晚期抑制病毒的蛋白分解过程。另外，与目前可用的药物相比，该蛋白酶抑制剂的优点是更易于获取、在病毒中存活时间长且毒性小，这很可能归因于它们对逆转录病毒蛋白酶的特异性。
当前采用抑制HIV蛋白酶的化合物对HIV感染个体进行治疗，这已导致突变病毒的进化，该突变病毒具有可抵抗这些化合物的抑制效果的蛋白酶。因此，为了使之有效，新的HIV蛋白酶抑制剂必须不仅能有效抑制HIV的原生型病毒株，而且必须能有效抑制新出现的可抵抗商业可得的蛋白酶抑制剂的突变病毒株。因此，一直存在对于目标为原生型和突变型HIV株中的HIV蛋白酶的新的抑制剂的需求。

发明内容
本发明的一个方面提供了组合物，其包括(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂(NRTI)、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂(NNRTI)、HIV蛋白酶抑制剂(PI)、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了组合物，其包括4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了组合物，其包括N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV逆转录酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自非核苷类HIV逆转录酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV蛋白酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV融合抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自免疫调节剂。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自CCR5拮抗剂。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自抗感染剂。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自奈非那韦(nelfinavir)、利杜那韦(ritonavir)、洛匹那韦(lopinavir)、克立治(kaletra)、依非韦仑(efavirenz)、奈韦拉平(nevirapine)、拉米夫定(lamivudine)、齐多夫定(zidovudine)和泰诺福韦(tenofovir)。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自奈非那韦。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自利杜那韦。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自洛匹那韦。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自克立治。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自依非韦仑。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自奈韦拉平。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自拉米夫定。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自齐多夫定。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自泰诺福韦。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述HIV逆转录酶抑制剂选自阿巴卡韦(abacavir)、FTC、GS-840、拉米夫定、阿德福韦酯(adefovir dipivoxil)、β-氟-ddA、扎西他滨(zalcitabine)、去羟肌苷(didanosine)、司他夫定(stavudine)、齐多夫定、泰诺福韦、amdoxovir、SPD-754、SPD-756、racivir、reverset、MIV-210、β-L-Fd4C、阿洛夫定(alovudine)、FLT、dOTC、DAPD、恩替卡韦(entecavir)、GS-7340、恩曲他滨(emtricitabine)和阿洛夫定。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述非核苷类HIV逆转录酶抑制剂选自依非韦仑、HBY-097、奈韦拉平、TMC-120(dapivirine)、TMC-125、etravirine、地拉韦定(delavirdine)、DPC-083、DPC-961、TMC-120、capravirine、GW-678248、GW-695634和卡拉脑立德(calanolide)。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述HIV蛋白酶抑制剂选自安普那韦、CGP-73547、CGP-61755、DMP-450、奈非那韦、利杜那韦、沙奎那韦(saquinavir)、洛匹那韦、克立治、TMC-126、阿扎那韦(atazanavir)、帕利那韦(palinavir)、GS-3333、KN I-413、KNI-272、LG-71350、CGP-61755、PD 173606、PD 177298、PD 178390、PD178392、U-140690、ABT-378、DMP-450、AG-1776、MK-944、VX-478、茚地那韦(indinavir)、替拉那韦(tipranavir)、TMC-114、DPC-681、DPC-684、夫沙那韦钙(fosamprenavir calcium)、R-944、Ro-03-34649、VX-385、GS-224338、OPT-TL3、PL-100、SM-309515、AG-148、DG-35-VIII、DMP-850、GW-5950X、KNI-1039、L-756423、LB-71262、LP-130、RS-344、SE-063、UIC-94-003、Vb-19038、A-77003、BMS-182193、BMS-186318、SM-309515、JE-2147和GS-9005。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述HIV融合抑制剂选自恩夫韦地、T-1249和AMD-3100。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述免疫调节剂选自AD-439、AD-519、α干扰素、AS-101、溴匹立明(bropirimine)、醋孟南(acemannan)、CL246，738、EL10、FP-21399、γ干扰素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、IL-2、静脉免疫球蛋白、IMREG-1、IMREG-2、依木巯(imuthiol)二乙基二硫代氨基甲酸酯、α-2干扰素、蛋氨酸脑啡肽、MTP-PE、粒细胞集落刺激因子、remune、rCD4、重组可溶性人CD4、干扰素α-2、SK&F106528、可溶性T4 yhymopentin、肿瘤坏死因子(TNF)、妥卡雷琐(tucaresol)、重组人干扰素β和干扰素αn-3。
本发明的一个方面提供了上述组合物，其中所述CCR5拮抗剂选自TAK-779、SC-351125、SCH-D、UK-427857、PRO-140和GW-873140。
本发明的一个方面提供了治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了抑制被HIV感染的哺乳动物体内的HIV复制的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是顺序给药的。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是同时给药的。
本发明的另一个方面提供了上述方法，其中所述(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是作为单一的组合制剂给药的。
本发明的一个方面提供了治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了抑制被HIV感染哺乳动物体内的HIV复制的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是顺序给药的。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是同时给药的。
本发明的另一个方面提供了上述方法，其中所述4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是作为单一的组合制剂给药的。
本发明的一个方面提供了治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了抑制被HIV感染哺乳动物体内的HIV复制的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是顺序给药的。
本发明的另一个方面提供了上述方法，其中所述N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是同时给药的。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物以及所述的至少一种附加治疗剂是作为单一的组合制剂给药的。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中对所述哺乳动物的所述给药每天进行一次。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中对所述哺乳动物的所述给药每天进行两次。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中对所述哺乳动物的所述给药每天进行三次。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2500mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2250mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2000mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约200mg-2000mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2500mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2250mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2000mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约200mg-2000mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2500mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2250mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约100mg-2000mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物对所述哺乳动物的给药量为约200mg-2000mg每天。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV逆转录酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自非核苷类HIV逆转录酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV蛋白酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV整合酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV融合抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自CCR5拮抗剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV逆转录酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自非核苷类HIV逆转录酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV蛋白酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV整合酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV融合抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自CCR5拮抗剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV逆转录酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自非核苷类HIV逆转录酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV蛋白酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV整合酶抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自HIV融合抑制剂。
本发明的一个方面提供了上述方法，其中所述至少一种附加治疗剂选自CCR5拮抗剂。
本发明的一个方面提供了治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给上述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自奈非那韦、利杜那韦、洛匹那韦、克立治、依非韦仑、奈韦拉平、拉米夫定、齐多夫定和泰诺福韦的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给上述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自奈非那韦、利杜那韦、洛匹那韦、克立治、依非韦仑、奈韦拉平、拉米夫定、齐多夫定和泰诺福韦的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给上述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自奈非那韦、利杜那韦、洛匹那韦、克立治、依非韦仑、奈韦拉平、拉米夫定、齐多夫定和泰诺福韦的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了包括组合物的患者包(patient pack)，所述组合物包括(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了包括组合物的患者包，所述组合物包括4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的一个方面提供了包括组合物的患者包，所述组合物包括N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
本发明的另一方面提供了(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂在制备用于治疗需要治疗的哺乳动物体内的HIV感染的药物中的用途。
本发明还提供了4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂在制备用于治疗需要治疗的哺乳动物体内的HIV感染的药物中的用途。
本发明还提供了N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂在制备用于治疗需要治疗的哺乳动物体内的HIV感染的药物中的用途。
本文所用术语“(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺”，是指具有以下结构的化合物， 或其药物上可接受的盐或溶剂化物。
本文所用术语“4，4-氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺”，是指具有以下结构的化合物，
或其药物上可接受的盐或溶剂化物。
本文所用术语“N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺”，是指具有以下结构的化合物， 或其药物上可接受的盐或溶剂化物。
本文所用术语“奈非那韦”，是指也称为“[3S-[2(2S*，3S*)，3-α，4aβ，8aβ]]-N-(1，1-二甲基乙基)十氢-2-[2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-(苯基硫)丁基]-3-异喹啉甲酰胺单甲烷磺酸酯”的化合物。
本文所用术语“洛匹那韦”，是指也称为“[1S-[1R*，(R*)，3R*，4R*]]-N-[4-[[(2，6-二甲基-苯氧基)乙酰基]氨基]-3-羟基-5-苯基-1-(苯甲基)戊基]四氢-α-(1-甲基乙基)-2-氧代-1(2H)-嘧啶乙酰胺的化合物。
本文所用术语“利杜那韦”，是指也称为“10-羟基-2-甲基-5-(1-甲基乙基)-1-[2-(1-甲基乙基)-4-噻唑烷基]-3，6-二氧代-8，11-二(苯甲基)-2，4，7，12-四氮杂十三烷-13-酸，5-噻唑烷基甲基酯，[5S-(5R*，8R*，10R*，11R*)]”的化合物。
本文所用术语“克立治”，是指以上定义的洛匹那韦和利杜那韦的组合。
本文所用术语“泰诺福韦”，是指也称为“9-[(R)-2-[[二[[(异丙氧基碳基)氧基]甲氧基]氧膦基]甲氧基]丙基]腺嘌呤延胡索酸酯(1∶1)”的化合物。
本文所用术语“3TC”，是指也称为“拉米夫定”和“(2R，顺)-4-氨基-1-(2-羟甲基-1，3-氧硫杂环戊-5-基)-(1H)-嘧啶-2-酮的化合物。
本文所用术语“AZT”，是指也称为“齐多夫定”和3’-叠氮-3’-脱氧胸苷”的化合物。
本文所用术语“奈韦拉平”，是指也称为“11-环丙基-5，11-二氢-4-甲基-6H-二吡啶并[3，2-b∶2′，3′-e][1，4]二氮杂卓-6-酮”的化合物。
本文所用术语“依非韦仑”，是指也称为“(S)-6-氯-4-(环丙基乙炔基)-1，4-二氢-4-(三氟甲基)-2H-3，1-苯并噁嗪-2-酮”的化合物。
本文所用术语“PI”，是指本领域的普通技术人员所知的一类称为HIV蛋白酶抑制剂的化合物。
本文所用术语“nnRTI”和“NNRTI”，是指本领域的普通技术人员所知的一类称为非核苷类HIV逆转录酶抑制剂的化合物。
本文所用术语“nRTI”和“NRTI”，是指本领域的普通技术人员所知的一类称为核苷HIV逆转录酶抑制剂的化合物。
本文所用术语“抑制”，是指使用能够在体外或体内降低细胞色素P450酶或酶类活性的试剂在施用于哺乳动物(例如人类)后，使这种活性降低。通过直接结合到细胞色素P450酶或酶类的化合物，可以实现这种抑制。此外，当酶和化合物之间的直接结合并未发生时，这种细胞色素P450酶类的活性可能在这样的化合物存在下减少。此外，这种抑制可以是竞争性的，非竞争性的或无竞争性的，如T.F.Woolf，Handbook of DrugMetabolism，Marcel Dekker，Inc.，New York，1999中所述。通过本领域内的普通技术人员已知的方法，采用体内或体外系统或者两者的组合，可以确定这种抑制。
本文所用术语“生物有效性”是指施用于哺乳动物的给定量的化学化合物的系统有效性。通过在向哺乳动物施用化合物之后测量化合物不变形式的曲线下面积(AUC)或最大血清或血浆浓度(Cmax)，可以对生物有效性进行评估。AUC是对沿纵坐标(Y轴)的化合物的血清或血浆浓度对沿横坐标(X轴)的时间作图所得曲线测定的曲线下面积。通常，本领域的普通技术人员可通过已知的方法和如G.S.Banker，Modern Pharmaceutics，Drugs and the Pharmaceutical Sciences，V.72，Marcel Dekker，New York，Inc.，1996所述的方法计算特定化合物的AUC。Cmax值定义为在给哺乳动物施用化合物后在其血浆或血清中达到的化合物最大浓度。可通过本领域的普通技术人员已知的方法测量特定化合物Cmax值。在此所用的短语“提高生物有效性”，是指当与本发明的化合物共同给药时，哺乳动物中第一化合物的系统有效性(作为AUC或Cmax测量)要高于不进行这种共同给药的情况。
本文所用术语“给药”、“施用”、“剂量给药”和“剂量”，是指向哺乳动物输送化合物或其药物上可接受的盐或溶剂化物，或包含该化合物或其药物上可接受的盐或其溶剂化物的药物组合物，以使该化合物被吸收到哺乳动物的血清或血浆中。
本文所用术语“共同给药”，是指施用第一化合物和本发明的化合物或其药物上可接受的盐或溶剂化物的组合。可进行这样的共同给药，以使第一化合物和本发明的化合物构成同一组合物的一部分或同一单元剂量形式的一部分。共同给药还包括分别(但作为同一治疗方案的一部分)施用第一化合物和本发明化合物。这两种组分如果分开给药则不必基本上同时给药，但是如果需要的话可以基本上同时给药。因此，共同给药包括，例如，以单独的剂量或剂型但同时施用第一化合物或本发明化合物。共同给药还包括在不同时间以任意顺序分别给药。
除非另有说明，本文所用术语“药物上可接受的盐”包括可存在于本发明的化合物中的酸性或碱性基团的盐。
本文所用术语“溶剂化物”，是指本发明的化合物是以可使溶剂分子与本发明的分子缔合的形式存在。在本发明中特别是指，一个溶剂分子可与本发明的一个分子缔合，例如一水合物。而且，在本发明中特别是指，多于一个溶剂分子可与本发明的一个分子缔合，例如二水合物。此外，在本发明中特别指，少于一个溶剂分子可与本发明的一个分子缔合，例如半水合物。此外，本发明的溶剂化物可为保持非水合形式的化合物的生物有效性的本发明的化合物的溶剂化物。
具体实施例方式
“溶剂化物”意指特定化合物的药物上可接受的溶剂化物形式，该形式保持了该化合物的生物有效性。溶剂化物的例子包括但不限于，与水、异丙醇、乙醇、甲醇、二甲基亚砜(DMSO)、乙酸乙酯、乙酸、乙醇胺或其混合物结合的本发明化合物。
“药物上可接受的盐”意指保持特定衍生物的游离酸和碱的生物有效性的盐，该盐包含药物上可接受的阴离子，并且不是生物上或其它方面不合要求的。药物上可接受盐的例子包括但不限于，醋酸盐、丙烯酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐(例如氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸酯盐、二硝基苯甲酸盐、羟基苯甲酸盐和甲氧基苯甲酸盐)、碳酸氢盐、硫酸氢盐、亚硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、丁炔-1，4-二酸盐、乙二胺四乙酸钙、右旋樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、己酸盐、辛酸盐、克拉维酸盐(clavulanate)、柠檬酸盐、癸酸盐、二氢氯化物、磷酸二氢盐、乙二胺四乙酸盐、乙二璜酸盐(edislyate)、十二烷基硫酸盐(estolate)、乙璜酸盐、乙基琥珀酸盐、甲酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酸盐、乙醇酰基阿散酸盐、庚酸盐、己炔-1，6-二酸盐、己基间苯二酚酸盐、海巴明(hydrabamine)、氢溴化物、氢氯化物、γ-羟基丁酸盐、碘化物、异丁酸盐、异硫代硫酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸、偏磷酸盐、甲烷磺酸盐、甲基硫酸盐、磷酸一氢盐、粘液酸盐、萘璜酸盐、萘-1-磺酸盐、萘-2-磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、双羟萘酸(或embonate)、棕榈酸盐、泛酸盐、苯基乙酸盐、苯基丁酸盐、苯基丙酸盐、酞酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖酸盐、丙磺酸盐、丙酸盐、丙炔酸盐、焦磷酸盐、焦硫酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、辛二酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、磺酸盐、亚硫酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、8-氯茶碱盐、甲苯磺酸盐、三乙碘化盐(triethiodode)和戊酸盐。
本领域的普通技术人员可以理解，本发明的化合物或其药物上可接受的盐或溶剂化物可以以不同的多晶型或晶体形式存在，所有这些多晶型或晶体形式均落在本发明和特定配方的范围之内。此外，本发明的化合物及其药物上可接受的盐和溶剂化物可以作为互变体存在，所有这些互变体均落在本发明的广义范围内。
可以根据本领域的普通技术人员已知的合适的给药方式，来进行化合物或其药物上可接受的盐或溶剂化物的给药。这样的合适的给药方式的例子包括口服、鼻腔给药、肠胃外给药、局部给药、透皮给药、直肠给药或通过吸入或喷雾给药。
例如，这样的输送可以通过给哺乳动物(如人类)口服第一化合物或其药物上接受的盐和本发明的化合物或其药物上可接受的盐来实施。此外，第一化合物和本发明化合物以及其它附加化合物可以以包含无毒的、药物上可接受的载体、辅剂和载剂的药物上可接受的制剂的形式来给药。或者，第一化合物和式(I)化合物，或其药物上可接受的盐或溶剂化物可以通过其它给药途径施用于哺乳动物，这些给药途经包括但不限于，静脉给药、局部给药、舌下给药、肠胃外给药、直肠给药、或通过吸入或喷雾给药。这样的可供选择的给药可以以第一化合物和本发明化合物的单独形式或以包含无毒的、药物上可接受的载体、辅剂和赋形剂的剂量单位制剂的形式来实施。另外，本发明特别考虑到了，第一化合物和本发明的化合物可以采用各自不同的给药形式来共同给药。例如，第一化合物可局部给药，而式(1)化合物或其药物上接受的盐或溶剂化物可口服给药。施用于哺乳动物的第一化合物和本发明化合物的优选制剂和给药途径取决于哺乳动物的年龄和状况、治疗病症、第一化合物的特性、本发明化合物的特性以及本领域普通技术人员已知的其它因素。本领域普通技术人员不需要大量实验即可确定制剂和给药途径。
可接受的制备药物组合物的适当药物形式的方法，对于本领域的技术人员是已知的或可用常规手段确定。例如，药物制剂可按照药剂师的传统方法制备，包括如下步骤混合、粒化和制作片剂时所需的压缩，或混合、填充和所需成分溶解，从而得到用于口服、肠胃外给药、局部给药、阴道给药、鼻内给药、支气管给药、眼内给药、耳内给药和/或直肠给药的期望产品。
根据期望的用途，本发明的药物组合物还可包括适当的赋形剂、稀释剂、载剂和载体，以及其它药物活性剂。药物组合物中可使用固体或液体的药物可接受的载体、稀释剂、载剂或赋形剂。示例性的固体载体包括淀粉、乳糖、二水合硫酸钙、石膏粉、蔗糖、滑石、明胶、果胶、阿拉伯树胶、硬脂酸镁和硬脂酸。示例性的液体载体包括糖浆、花生油、橄榄油、盐溶液和水。载体或稀释液可包括合适的缓释材料，例如带蜡或不带蜡的单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。当使用液体载体时，制剂可以是糖浆、酏剂、乳液、软明胶胶囊、消毒可注射液体(例如溶液)或不含水或含水的悬浮液的形式。
本领域的技术人员已知或将清楚制备具有定量活性化合物的各种药物组合物的方法。例如，参考Remington′s Pharmaceutical Sciences，MackPublishing Company，Easter，Pa.，15thEdition(1975)。
应当认识到，用于本发明药物组合物中的本发明化合物或其药物上可接受的盐的实际剂量应根据所用具体试剂的性质、配制的具体组合物、给药方式、具体部位、寄主和治疗病症来选择。本领域的技术人员可以采用常规的剂量确定试验来确定给定条件下的最佳剂量。以口服给药为例，可采用的剂量为约0.001-约1000mg/kg体重，优选约0.1-约100mg/kg体重，还更优选约1-约50mg/kg体重，随着疗程以合适的时间间隔重复服用。
施用化合物的量和时间当然应该基于医生的诊断。因此，由于主体间的差异，提供的剂量只作为指导，并且本领域的普通技术人员可通过对该试剂的剂量进行滴定来获得他们认为适合不同主体的活性。当考虑所需的活性程度时，本领域的技术人员必须权衡各种因素，例如认知功能、患者年龄、先前存在疾病的存在以及其它疾病的存在(例如，心血管疾病)。
本发明组合物通常以包括至少一种本发明的化合物以及药物上可接受的载剂或稀释剂的药物组合物形式给药。因此，本发明化合物可单独给药或与第一化合物一起以任何常规剂型给药。
对于口服给药，药物组合物可采用溶液、悬浮液、药片、药丸、胶囊、粉末等形式。包含各种赋形剂(例如柠檬酸钠、碳酸钙和磷酸钙)的药片与各种崩解剂(例如淀粉、优选马铃薯或木薯淀粉和特定复合硅酸盐)以及粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明胶和阿拉伯树胶)一起服用。另外，诸如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石之类的润滑剂对于压制药片通常是有用的。相似类型的固体组合物也作为填料使用在软和硬填充明胶胶囊中；用于此目的的优选材料还包括乳糖或奶糖以及高分子量的聚乙二醇。当为了口服给药需要水悬浮液和/或酏剂时，本发明化合物可与各种甜味剂、调味剂、着色剂、乳化剂和/或悬浮剂以及诸如水、乙醇、丙二醇、甘油的稀释剂及其各种类似组合混合。
对于肠胃外给药，可使用在芝麻油或花生油中的溶液或在含水丙二醇中的溶液，以及相应的水溶性盐的消毒水溶液。这样的水溶液可按需要被适当地缓冲，并且液体稀释剂首先用足够的盐水或葡萄糖变为等渗的。这些水溶液特别适合静脉注射、肌肉注射、皮下注射和腹腔内注射。就此而论，通过本领域的技术人员已知的标准技术，容易获得所用的消毒水介质。
为了透皮(例如局部)给药，配制了稀释消毒的、水溶液或部分水溶液(浓度通常为0.1％-5％)，以及其它与上述肠胃外溶液类似的溶液。
制备各种具有定量活性成分的药物组合物的方法对于本领域的技术人员是已知的或根据本公开容易得知。例如，参考Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easter，Pa.，15th Edition(1975)。
为了对遭受HIV病毒感染、AIDS、AIDS相关综合征(ARC)或任何其它与HIV病毒感染相关的疾病或病症的哺乳动物(如人类)进行治疗，本发明的化合物可以与一种或多种附加试剂一起被给药。可与本发明的化合物组合使用的试剂包括但不限于，可用作HIV蛋白酶抑制剂、HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、CCR5抑制剂、HIV融合抑制剂的化合物、用作免疫调节剂的化合物、通过未知机理抑制HIV病毒的化合物、用作治疗疱疹病毒的化合物、用作抗感染剂的化合物以及如下所述的其它化合物。
可与本发明的化合物组合使用的用作HIV蛋白酶抑制剂的化合物包括但不限于，141 W94(安普那韦)、CGP-73547、CGP-61755、DMP-450、奈非那韦、利杜那韦、沙奎那韦(或invirase)、洛匹那韦、TMC-126、阿扎那韦、帕利那韦、GS-3333、KN I-413、KNI-272、LG-71350、CGP-61755、PD 173606、PD 177298、PD 178390、PD178392、U-140690、ABT-378、DMP-450、AG-1776、MK-944、VX-478、茚地那韦、替拉那韦、TMC-114、DPC-681、DPC-684、夫沙那韦钙(或Lexiva)、公开在WO 03053435中的的苯磺胺衍生物、R-944、Ro-03-34649、VX-385、GS-224338、OPT-TL3、PL-100、SM-309515、AG-148、DG-35-VIII、DMP-850、GW-5950X、KNI-1039、L-756423、LB-71262、LP-130、RS-344、SE-063、UIC-94-003、Vb-19038、A-77003、BMS-182193、BMS-186318、SM-309515、JE-2147、GS-9005。
可与本发明的化合物组合使用的用作HIV逆转录酶抑制剂的化合物包括但不限于，阿巴卡韦、FTC、GS-840、拉米夫定、阿德福韦酯、β-氟-ddA、扎西他滨、去羟肌苷、司他夫定、齐多夫定、泰诺福韦、amdoxovir、SPD-754、SPD-756、racivir、reverset(DPC-817)、MIV-210(FLG)、β-L-Fd4C(ACH-126443)、MIV-310(阿洛夫定，FLT)、dOTC、DAPD、恩替卡韦、GS-7340、恩曲他滨和阿洛夫定。
用作HIV逆转录酶的非核苷抑制剂的化合物包括但不限于，依非维伦、HBY-097、奈韦拉平、TMC-120(dapivirine)、TMC-125、etravirine、地拉韦定、DPC-083、DPC-961、TMC-120、capravirine、GW-678248、GW-695634、卡拉脑立德以及在WO 03062238中公开的三环嘧啶酮衍生物。
可与本发明的化合物组合使用的用作CCR5抑制剂的化合物包括但不限于，TAK-779、SC-351125、SCH-D、UK-427857、PRO-140、和GW-873140(Ono-4128，AK-602)。
可与本发明的化合物组合使用的用作HIV整合酶抑制剂的化合物包括但不限于，GW-810781、公开在WO 03062204中的1，5-二氮杂萘-3-甲酰胺衍生物、公开在WO 03047564中的化合物、公开在WO 03049690的化合物以及公开在WO 03035076中的5-羟基嘧啶-4-甲酰胺衍生物。
可与本发明的化合物组合使用的用于治疗HIV的融合抑制剂包括但不限于，恩夫韦地(T-20)、T-1249、AMD-3100以及公开在JP2003171381中的稠合三环化合物。
可与本发明化合物组合使用的用作HIV抑制剂的其它化合物包括但不限于，可溶性CD4、TNX-355、PRO-542、BMS-806、延胡索酸泰诺福韦酯和公开在JP 2003119137中的化合物。
可与本发明的化合物组合使用的用于治疗或控制除HIV病毒外的病毒感染的化合物包括但不限于，阿昔洛韦(acyclovir)、福米韦生(fomivirsen)、喷昔洛韦(penciclovir)、HPMPC、oxetanocinG、AL-721、西多福韦、细胞巨化病毒免疫球蛋白、cytovene、fomivganciclovir、泛昔洛韦(famciclovir)、膦甲酸钠、Isis 2922、KNI-272、伐昔洛韦(valacyclovir)、病毒唑利巴韦林(virazole ribavirin)、缬更昔洛韦(valganciclovir)、ME-609、PCL-016。
可与本发明的化合物组合使用的起免疫调节剂作用的化合物包括但不限于，AD-439，、AD-519、α干扰素、AS-101、溴匹立明、醋孟南、CL246，738、EL10、FP-21399、γ干扰素、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、IL-2、静脉免疫球蛋白、IMREG-1、IMREG-2、依木巯(imuthiol)二基二硫代氨基甲酸酯、α-2干扰素、蛋氨酸-脑啡肽、MTP-PE、粒细胞集落刺激因子、remune、rCD4、重组可溶性人CD4、干扰素α-2、SK&F106528、可溶性T4 yhymopentin、肿瘤坏死因子(TNF)、妥卡雷琐、重组人干扰素β和干扰素αn-3。
可与本发明的化合物组合使用的抗感染剂包括但不限于，阿托伐醌、阿奇霉素、克拉霉素、甲氧苄氨嘧啶、甲磺酸曲伐沙星、乙胺嘧啶、道诺霉素、伯氨喹氯林可霉素、氟康唑、pastill、ornidyl、依氟鸟氨酸戊双脒、利福布汀、螺旋霉素、伊曲康唑-R51211、三甲曲沙、道诺霉素、重组人红细胞生成素、重组人生长激素、乙酸甲地孕酮、睾固酮和全部肠内营养剂。
可与本发明的化合物组合使用的抗菌剂包括但不限于，阿尼芬净、C31G、卡泊芬净、DB-289、fluconzaole、依曲康唑、酮康只唑、米卡芬净、泊沙康唑和伏立康唑。
可与本发明的化合物组合使用的其它化合物包括但不限于，acmannan、袢霉素、LM427、AR177、BMS-232623、BMS-234475、CI-1012、curdlan硫酸酯、右旋糖苷硫酸酯，STOCRINE EL10，金丝桃素，洛布卡维，novapren，肽T八肽序列、膦甲酸三钠、普罗布考和RBC-CD4。
另外，本发明的化合物可以与用于诸如Kaposi肉瘤病症治疗的抗增生剂组合使用。此种试剂包括但不限于，基质金属蛋白酶抑制剂、A-007、贝伐单抗、BMS-275291、卤夫酮(halofuginone)、白细胞间介素-12、利妥昔单抗(rituximab)、紫杉醇(paclitaxel)、卟吩姆钠(porfimersodium)、rebimastat、COL-3。
一种或多种附加剂的具体选择取决于多个因素，这些因素包括但不限于，被治疗的哺乳动物病症、被治疗的具体一种或多种病症、本发明的一种或多种化合物和一种或多种附加剂的性质和用于治疗哺乳动物的任何附加化合物的性质。发明的一种或多种化合物和一种或多种附加剂的具体选择是本领域技术人员的公知常识。
为了对遭受HIV病毒感染、AIDS、AIDS相关综合征(ARC)或任何其它与HIV病毒感染相关的疾病或病症的哺乳动物(如人类)进行治疗，本发明的化合物可以与上述附加试剂组合给药。这样的组合可施用于哺乳动物以使本发明的一种或多种化合物存在于与上述附加剂相同的制剂中。或者，这样的组合可施用于遭受HIV病毒感染的哺乳动物以使本发明的一种或多种化合物存在于不同于附加剂所存在的制剂中。如果本发明的一种或多种化合物与附加剂分别给药，则这样的给药可在适当的时间段之间同时或顺序发生。选择是否在与一种或多种附加剂相同的制剂中包括本发明的一种或多种化合物属于本领域普通技术人员的公知常识。
此外，本发明的化合物可与具有增加哺乳动物对本发明化合物的暴露的效果的附加剂组合施用于哺乳动物(如人类)。本文所用术语“暴露”，是指一段时间内测量的本发明的化合物在哺乳动物血浆中的浓度。哺乳动物对特定化合物的暴露可通过如下方法测量以适当形式给哺乳动物施用本发明的化合物，在预定的时间抽出血浆样本，并且采用适当的分析技术例如液相色谱法或液相色谱/质谱法测量本发明的化合物在血浆中的量。在特定时间测定本发明的化合物在血浆中存在的量，并且对所有样本中的浓度和时间数据作图以得到曲线。计算曲线下的面积并且提供哺乳动物对化合物的暴露。术语“暴露”、“曲线下面积”和“浓度/时间曲线下面积”具有相同的含义并且可在本文中可互换使用。
可用来增加哺乳动物对本发明化合物的暴露的试剂包括那些可作为细胞色素P450(CYP450)酶的至少一种异构重整物的抑制剂的试剂。可有利地被抑制CYP450的异构重整物包括不仅限于，CYP1A2、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19和CYP3A4。可用于抑制CYP3A4的适当的试剂包括但不限于利托那韦。
这样的组合可以施用于哺乳动物以使本发明的一种或多种化合物存在于与上述附加剂相同的制剂中。或者，可对这样的组合进行给药以使本发明的化合物存在于与附加剂存在的制剂不同的制剂中。如果本发明的一种或多种化合物与附加剂分别给药，则这样的给药可在适当的时间段之间同时或顺序发生。选择是否在与一种或多种附加剂相同的制剂中包括本发明的一种或多种化合物属于本领域普通技术人员的公知常识。
实施例本发明的化合物可以通过本领域普通技术人员已知的方法和描述在以下文献中的方法来制备共同未决的美国专利申请No.10/166957(2002年6月11日提交)、No.10/166979(2002年6月11日提交)、No.10/729645(2003年12月4日提交)、No.10/728602(2003年12月4日提交)、No.60/504018(2003年9月17日提交)、No.60/527470(2003年12月4日提交)、No.60/591354(2004年7月26日提交)和No.60/527477(2003年12月4日提交)，将所有这些文献通过引用结合于此。利杜那韦和地拉韦定是商业可得的，或可由本领域的普通技术人员用本领域已知的方法制备。
CEM-SS细胞和HIV-1 RF得自美国国家健康研究院AIDS试剂计划(National Institutes of Health，AIDS Research and Reference ReagentProgram(Bethesda，MD))。
通过XTT染色还原法来测量化合物组合保护细胞免受HIV-1感染的能力，该方法在以下文献中有实质性的描述Pauwels，R.，Balzarini，J.，Baba，M.，Snoeck，R.，Schols，D.，Herdewijn，P.，Desmyter J.&De Clercq，E.，1988，“Rapid and automated tetrazolium-based colorimetric assay for thedetection of anti-HIV compounds，”J Virol Methods.20(4)309-21和Weislow，O.S.Kiser，R.Fine，D.L.Bader，J.Shoemaker，R.H.&Boyd，M.R.1989，“Newsoluble-formazan assay for HIV-1 cytopathic effectsapplication to high-fluxscreening of synthetic and natural products for AIDS-antiviral activity，”J. Natl.Cancer Inst.81577-586。以每个孔2×104个细胞将CEM-SS细胞加到含有测试化合物的1.5倍或2.0倍稀释液的96孔板中，随后对其用HIV-1 RF以0.470的感染复数进行感染或者仅用介质进行模拟感染。感染后六天，向孔中添加50μl的XTT(1mg/ml XTT四氮唑盐，0.02nM吩嗪硫酸甲脂)，并对板再次培养4小时。通过在450nm下的吸光率用分光光度法来定量生存能力(通过生成的XTT formazan的量来确定)。光密度值被输出到MacSynergyTMII(3，University of Michigan，Ann Arbor，MI)数据表，用于后续分析。
通过Prichard和Shipman技术，使用MacSynergyTMII软件(Pritchard，M.，N.，Aseltine，K.R.and Shipman，C.1992.MacSynergyTMII(version 1.0)User’s Manual.University of Michiean，Ann Arbor)来分析组合实验得到的数据。观察到的组合效果与相互作用独立发生时的预期效果之间的差异，以高于或低于表示没有相互作用的平面(即叠加平面)的体积(微摩尔×微摩尔×百分比(μM2％))来表示。在95％的置信区间下，高于叠加效果的正值表示协同增效，而低于叠加效果的负值表示对抗作用。
实施例1与(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺的组合


实施例2与4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺的组合

实施例3与N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基)-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺的组合

在下述实施例中，除非另有说明，所有温度均以摄氏度(℃)表示，并且除非另有说明，所有份数和百分比均以重量计。
各种初始物料和其它的试剂可从供应商(例如Aldrich ChemicalCompany或Lancaster Synthesis Ltd.)处购买，并且不经进一步纯化即使用，除非另有说明。
以下提出的反应是在氮气、氩气正压力下或用干燥管、在环境温度(除非另有说明)下、在无水溶剂中进行的。薄层色谱分析是在玻璃底的硅胶60_254板(Analtech(0.25mm))上进行的，并以适当的溶剂比(v/v)洗脱。通过高压液相色谱(HPLC)或薄层色谱(TLC)来检测反应，并通过初始物料的消耗来决定是否终止反应。通过UV、磷钼酸着色或碘着色以使TLC板可视化。在Bruker仪上，以300MHz操作记录1H-NMR谱，以75 MHz操作记录13C-NMR谱。以DMSO-d6或CDCl3溶液(以ppm计)，用氯仿作为参比标准(7.25 ppm和77.00 ppm)或DMSO-d6((2.50ppm和39.52ppm))，得到NMR谱。可按需要使用其它NMR溶剂。当记录多重峰时，使用以下缩写s＝单峰，d＝双重峰，t＝三重峰，m＝多重峰，br＝扩展峰，dd＝双组双重峰，dt＝双组三重峰。当给出耦合常数时，以赫兹表示。用Perkin-Elmer FT-IR光谱仪，以净油、KBr颗粒或CDCl3溶液记录红外光谱，并且以波数(cm-1)来记录。用LC/MS或APCI得到质谱。全部熔点均未修正。所有最终产物具有大于95％的纯度(用HPLC在220nm和254nm的波长下测定)。
在以下的实施例和制备方法中，“Et”是指乙基，“Ac”是指乙酰基，“Me”是指甲基″Ph″是指苯基，(PhO)2POCl是指氯磷酸二苯酯，″HCl″是指氢氯酸，″EtOAc″是指乙酸乙酯，″Na2CO3″是指碳酸钠，″NaOH″是指氢氧化钠，″NaCl″是指氯化钠，″NEt3″是指三乙胺，″THF″是指四氢呋喃，″DIC″二异丙基碳二亚胺，″HOBt″是指羟基苯并三唑，″H2O″是指水，″NaHCO3″是指碳酸氢钠，“K2CO3″是指碳酸钾，″MeOH″是指甲醇，″i-PrOAc″是指乙酸异丙基酯，″MgSO4″是指硫酸镁，″DMSO″是指二甲基亚砜，″AcCl″是指乙酰氯，″CH2Cl2″是指二氯甲烷，″MTBE″是指甲基叔丁醚，″DMF″是指二甲基甲酰胺，″SOCl2″是指亚硫酰氯，“H3PO4″是指磷酸，″CH3SO3H″是指甲烷磺酸，“Ac2O”是指乙酸酐，“CH3CN”是指乙腈，“KOH”是指氢氧化钾。
实施例4制备(4R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-羧酸叔丁酯 将(4R)-5，5-二甲基-噻唑烷-3，4-二羧酸3-叔丁酯(其可根据Ikunaka，M.et al.，Tetrahedron Asymm.2002，13，1201；Mimoto，T.et al.，J.Med.Chem.1999，42，1789和Mimoto，T.et al.，European Patent Application 0574135A1(1993)中的方法制备，250g；0.957mol)添加至氩气净化的5L烧瓶中，并溶解于EtOAc(1.25L)。该溶液被冷却至2℃，然后一次性添加(PhO)2POCl(208mL；1.00mol)。用加液漏斗逐滴添加NEt3(280mL；2.01mol)，然后在0℃下搅拌所得的悬浮液。数分钟后，逐滴添加烯丙基胺(75.4mL；1.00mol)。移开冰浴，并将悬浮液升至室温。一个半小时后，添加1 N HCl(750mL；0.750mol)。将混合物转移至4L分液漏斗中，用EtOAc(50mL)冲洗。分层。用7.2％Na2CO3水溶液(2×1.25L)洗涤有机相，然后将其转移至3L蒸馏瓶中并用EtOAc(400mL)稀释。通过在一个大气压下蒸馏EtOAc，将该溶液共沸干燥并浓缩至体积为800mL。在冷却至25℃之后，将所得的(4R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-羧酸叔丁酯的亮黄色溶液直接进行下一个步骤。取其部分并浓缩，得到白色结晶固体形式的(4R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-羧酸叔丁酯mp＝94-98℃，1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ6.12(br s，1H)，5.88(app ddt，J＝10.2，17.1，5.6 Hz，1H)，5.28(app dq，J＝17.1，1.5 Hz，1H)，5.18(app dd，J＝1.2，10.2 Hz，1H)，4.68(s，2H)，4.14(br s，1H)，3.95(br t，J＝5.4 Hz，2H)，1.62(s，3H)，1.49(s，9H)，1.46(s，3H)；13C NMR(75 MHz，CDCl3)δ170.0，154.0，134.4，116.9，82.0，73.3，54.0，48.7，42.0，30.6，28.6，24.6；MS(CI)m/z301.1599(301.1586，C14H25N2O3S，M+H+计算值)；C14H24N2O3S的元素分析，计算值C，55.97；H，8.05；N，9.32；实验值C，56.11；H，8.01；N，9.11.
实施例5制备(4R)-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺
向3L烧瓶中的(4R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-羧酸叔丁酯的EtOAc溶液中逐滴添加甲烷磺酸(155mL；2.39mol)。在室温下通宵搅拌之后，溶液被冷却至7℃，并加入H2O(400mL)。将混合物转移至4L分液漏斗中(用H2O(30mL)冲洗)，并分层。用H2O(190mL)萃取有机相。将合并的H2O萃取液转移至5L烧瓶中，并冷却至8℃。用3 N NaOH(～1.05L)将pH从0.4调至9.3。加入2-甲基四氢呋喃(1.55L)，然后添加NaCl(150g)。移开冰浴，并将混合物升至室温。用3 N NaOH(约1mL)再将pH调至9.0。将混合物转移至4L分液漏斗中(用2-甲基四氢呋喃(50mL)冲洗)，并分层。用2-甲基四氢呋喃(950mL)萃取水相。有机萃取液通过硅藻土真空过滤直接进入5L蒸馏瓶中，用2-甲基四氢呋喃(200mL)冲洗。通过在一个大气压下蒸馏2-甲基四氢呋喃，将溶液共沸干燥并浓缩至体积为1.2L。对被测量的部分进行浓缩并称重，表明溶液中存在161g(4R)-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺(84％来自(4R)-5，5-二甲基-噻唑烷-3，4-二羧酸3-叔丁酯)。然后将此溶液直接进行下一步骤。以上浓缩的部分得到结晶固体形式的(4R)-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺mp＝45-47℃，1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ6.73(br s，1H)，5.87(app ddt，J＝10.2，17.1，5.7 Hz，1H)，5.17-5.27(m，2H)，4.27(AB q，JAB＝9.7 Hz，Δv＝22.5 Hz，2H)，2.94(app tt，J＝1.5，5.8 Hz，2H)，3.51(s，1H)，1.74(s，3H)，1.38(s，3H)；13C NMR(75 MHz，CDCl3)δ169.7，134.4，116.9，74.8，57.2，51.6，41.9，29.1，27.3；MS(CI)m/z 201.1063(201.1062，C9H17N2OS，M+H+计算值)；C9H16N2OS的元素分析，计算值C，53.97；H，8.05；N，13.99；实验值C，53.93；H，8.09；N，14.07.
实施例6制备(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸
将(2S，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(其可根据Pedrosa et al.，Tetrahedron Asymm.2001，12，347；M.Shibasaki et al.，Tetrahedron Lett.1994，35，6123；和Ikunaka，M.et al.Tetrahedron Asymm.2002，13，1201；的方法制备，185g；948mmol)添加到5L烧瓶中并且悬浮于THF(695mL)中。加入H2O(695mL)，然后加入NEt3(277mL；1990mmol)。搅拌45分钟后，溶液被冷却至6℃。然后逐滴加入乙酸3-氯羰基-2-甲基-苯酯(201g；948mmol)在THF(350mL)中的溶液。一个半小时后，用6 N HCl(约170mL)将pH从8.7调至2.5。加入固体NaCl(46g)，然后移开冰浴，剧烈搅拌化合物，同时将其加热至室温。将混合物转移至4L的分液漏斗中，用1∶1 THF/H2O(50mL)转移，然后去除下方的水相。将有机相转移至5L蒸馏烧瓶中，然后用新鲜的THF(2.5L)稀释。通过在一个大气压下蒸馏THF，将溶液共沸干燥并浓缩至体积为1.3L。为完成共沸干燥，加入新鲜的THF(2.0L)，并通过在一个大气压下蒸馏，将溶液浓缩至1.85L，然后保持在55℃。用加液漏斗逐滴加入正庚烷(230mL)，然后立即向溶液中加入晶种。结晶开始后，逐滴添加额外的正庚烷(95mL)。剧烈搅拌所得的晶体浆液7分钟。然后以缓慢液流添加额外的正庚烷(1.52L)，再将晶体浆液缓慢冷却至室温并通宵搅拌。真空过滤悬浮液，然后用1∶1 THF/正庚烷(700mL)清洗滤饼。在45-50℃的真空烘箱中干燥后，得到324g(92％)的掺杂约7mol％Et3N·HCl的结晶固体状的(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸mp＝189-191℃，1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ12.65(brs，1H)，3.80(d，J＝9.7 Hz，1H)，7.16-7.30(m，6H)，7.07(dd，J＝1.1，8.0 Hz，1H)，7.00(dd，J＝1.1，7.5 Hz)，4.40-4.52(m，1H)，4.09(d，J＝6.0 Hz，1H)，2.92(app dd，J＝2.9，13.9 Hz，1H)，2.76(app dd，J＝11.4，13.9Hz，1H)，2.29(s，3H)，1.80(s，3H)；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)δ174.4，169.3，168.1，149.5，139.7，139.4，129.5，128.3，127.9，126.5，126.3，124.8，123.3，73.2，53.5，35.4，20.8，12.6；MS(CI)m/z 372.1464(372.1447，C20H22NO6，M+H+计算值)；C20H21NO6·0.07 Et3N·HCl的元素分析，计算值C，64.34；H，5.86；N，3.95；Cl，0.70；实验值C，64.27；H，5.79；N，3.96；Cl；0.86。
实施例7制备乙酸3-{(1S，2S)-3-[(4R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-基]-1-苯甲基-2-羟基-3-氧代-丙基氨基甲酰基}-2-甲基-苯基酯 将(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸(271g；731mmol)加入含有(4R)-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺(161g；804mmol)在2-甲基四氢呋喃(1.20L总溶液)中的溶液的5L烧瓶中，同时用2-甲基四氢呋喃(500mL)冲洗。加入HOBt·H2O(32.6g；241mmol)，用2-甲基四氢呋喃(50mL)冲洗。在室温中搅拌白色悬浮液10分钟。分三份(40mL+40mL+39mL)以30分钟的间隔添加二异丙基碳二亚胺(DIC)(119mL；760mmol)。添加完DIC一小时后，加入硅藻土(100g)和并将悬浮液在室温下搅拌3小时。真空过滤混合物，同时用2-甲基四氢呋喃(400mL)冲洗固体并洗涤得到的滤饼。把滤出液转移至4L分液漏斗中，用2-甲基四氢呋喃(50mL)冲洗。先用1 N HCl(1.25L)、然后用NaHCO3(27g)、NaCl(134g)和H2O(1.25L)的水溶液洗涤该溶液。将得到的有机相转移至3L蒸馏烧瓶中，并且通过在一个大气压下蒸馏2-甲基四氢呋喃将体积减至1.12L。然后用2-甲基四氢呋喃(230mL)稀释溶液使总容积达到1.35L。将溶液冷却至23℃后，粗制乙酸3-{(1S，2S)-3-[(4R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-基]-1-苯甲基-2-羟基-3-氧代-丙基氨基甲酰基}-2-甲基-苯基酯溶液直接进入下一步骤。
实施例8制备(4R)-3-[(2S，3S)-2-羟基-3-(3-羟基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酰基]-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺
在室温下，在3L烧瓶中的粗制乙酸3-{(1S，2S)-3-[(4R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-基]-1-苯甲基-2-羟基-3-氧代-丙基氨基甲酰基}-2-甲基-苯基酯(理论量405g；731mmol)的2-甲基四氢呋喃溶液中，依次添加MeOH(330mL)和K2CO3(66.9g；484mmol)。两个半小时后，添加额外的K2CO3(20g；144mmol)。三小时后，反应混合物在硅藻土垫上真空过滤，用4∶1的2-甲基四氢呋喃/MeOH(330mL)冲洗固体并洗涤滤饼。把滤出液转移到6L分液漏斗中，用4∶1的2-甲基四氢呋喃/MeOH(80mL)冲洗。用i-PrOAc(1.66L)稀释溶液，然后用NaCl(83.0g)在H2O(1.60L)中的溶液洗涤。将有机相先用0.5 N HCl(1.66L)洗涤，然后再用饱和的NaCl水溶液(400mL)洗涤。将得到的有机相转移至4L的锥形烧瓶中，并加入MgSO4(120g)。搅拌10分钟后，将混合物直接真空过滤至5L蒸馏烧瓶中，用2∶1的i-PrOAc/2-甲基四氢呋喃(600mL)冲洗分液漏斗和锥形烧瓶，并洗涤MgSO4。在一个大气压下通过蒸馏除掉2-甲基四氢呋喃，同时分五份(用总共3.60L)添加i-PrOAc，与此同时保持约为2.50L的最小瓶容量。把所得的结晶混合物冷却至75℃，并保持在此温度下30分钟。然后将悬浮液通宵缓慢冷却至室温。真空过滤悬浮液，用i-PrOAc(600mL)转移并洗涤晶体。在40℃的真空烘箱中干燥之后，得到204g结晶(4R)-3-[(2S，3S)-2-羟基-3-(3-羟基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-乙酰基]-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺(54％得自(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸)。此材料如下所述重结晶。
实施例9重结晶(4R)-3-[(2S，3S)-2-羟基-3-(3-羟基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酰基]-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺 将(4R)-3-[(2S，3S)-2-羟基-3-(3-羟基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酰基]-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺(193g，378mmol)加到5L烧瓶中，然后悬浮在EtOAc(1.28L)中。将悬浮液加热到76℃后，加入MeOH(68mL)，然后将内部温度减为70℃。向溶液中逐滴加入正庚烷(810mL)，同时保持内部温度在70℃。添加完正庚烷后，将所得的晶体悬浮液保持在70℃30分钟，然后通宵缓慢冷却到室温。真空过滤悬浮液，用1.6∶1EtOAc/正庚烷(500mL)转移并且洗涤晶体。然后在45℃的真空烘箱中干燥晶体，得到162g(回收率为84％)的经纯化的白色结晶固体状(4R)-3-[(2S，3S)-2-羟基-3-(3-羟基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酰基]-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺mp＝173-175℃，1H NMR (300MHz，DMSO-d6)显示约10∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ9.35 (s，1H)，8.04-8.15(m，2H)，7.13-7.38(m，5H)，6.96(t，J＝7.7 Hz，1H)，6.79(d，J＝7.2Hz，1H)，6.55(d，J＝7.5 Hz，1H)，5.71-5.87(m，1H)，5.45(br d，J＝6.2Hz，1H)，4.98-5.27(m，4H)，4.38-4.52(m，3H)，3.58-3.86(m，2H)，2.68-2.90(m，2H)，1.84(s，3H)，1.52(s，3H)，1.37(s，3H)[特性次要旋转异构体共振δ9.36(s)，8.21(d，J＝10.5 Hz)，7.82(5，J＝5.8Hz)，4.89(s)，4.78(AB q，JAB＝9.8 Hz，ΔV＝27.1 Hz)，4.17-4.24(m)，2.93-3.01(m)，1.87(s)，1.41(s)]；13CNMR(75MHz，DMSO-d6)显示约10∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ170.4，169.5，168.2，155.7，139.6，139.4，135.5，135.4，129.9，128.2，126.2，126.1，121.9，117.8，115.6，72.4，72.1，53.1，51.4，48.2，41.3，34.2，30.5，25.0，12.6[特性次要旋转异构体共振δ171.4，169.7，168.6，139.0，129.5，128.4，70.6，54.2，49.1，41.5，31.4，24.8]；MS(CI)m/z 512.2224(512.2219，C27H34N3O5S，M+H+计算值)，C27H33N3O5S的元素分析，计算值C，63.38；H，6.50；N，8.22；实验值C，63.19；H，6.52；N，8.10.
实施例10制备(R)-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺；氢氯化物 用氯磷酸二苯基酯(113kg，422mol)处理(R)-5，5-二甲基-噻唑烷-3，4-二羧酸3-叔丁酯(105kg，402mol)和乙酸乙酯(690L)的溶液，然后将其冷却到0℃。加入NEt3(85.5kg，844mol)同时保持温度在5℃，然后将混合物保持在此温度2小时。将混合物冷却到0℃，然后加入烯丙基胺(24.1kg，422mol)，同时保持温度在5℃。将混合物加热到20℃，然后用10wt％的HCl水溶液(310L)淬火。分层后，用8.6wt.％Na2CO3水溶液(710L)洗涤有机相。分层后，用乙酸乙酯(315L)萃取水相。含有产物的合并的乙酸乙酯萃取液通过一个大气压下的共沸蒸馏干燥，同时保持约315L的最小瓶容量。将所得的(R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-羧酸叔丁酯的悬浮液冷却至5℃。无水HCl(36.8kg，1008mol)在乙酸乙酯(263L)中的13wt.％的溶液被冷却到5℃，然后将其加到(R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-羧酸叔丁酯悬浮液中，同时保持温度在15℃。得到的悬浮液在20℃保持19小时，然后冷却到5℃并保持2小时。然后过滤悬浮液，用冷乙酸乙酯冲洗。在45℃的真空烘箱中干燥湿滤饼，得到90.5kg(95.2％)的白色固体状(R)-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺氢氯化物1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ8.94(app t，J＝5.5 Hz，1H)，5.82(ddt，J＝10.4，17.2，5.2 Hz，1H)，5.19-5.25(m，1H)，5.10-5.14(m，1H)，4.38(AB q，JAB＝9.8 Hz，Δv＝14.5 Hz，2H)，4.08(s，1H)，3.72-3.91(m，2H)，1.58(s，3H)，1.32(s，3H)；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)δ161.7，132.2，114.0，67.9，51.4，43.5，39.3，25.3，24.3；MS(CI)m/z 201.1070(201.1062，C9H17N2OS，M+H+计算值)；C9H17ClN2OS的元素分析，计算值C，45.65；H，7.24；N，11.83；Cl，14.97；实验值C，45.41；H，7.33；N，11.69；Cl，15.22.
实施例11制备(2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸 在环境温度下，将NEt3(120kg，1183mol)和H2O(414L)加入(2S，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(110kg，563mol)、NaCl(195kg)和THF(413L)的混合物中。将得到的混合物冷却至0℃。将乙酸3-氯羰基-2-甲基-苯基酯(120kg，563mol)加入到单独的反应器中，然后在THF(185L)中溶解。将得到的乙酸3-氯羰基-2-甲基-苯基酯溶液冷却到10℃，然后加到(2S，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸混合物中，同时在添加过程中保持温度低于10℃。在5℃下搅拌得到的两相混合物1小时，然后用浓HCl(62kg)将pH调到2.5-3.0。然后将混合物加热到25℃，并分层。得到的含有(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸的THF相通过在一个大气压下蒸馏被部分浓缩。然后，通过在一个大气压下蒸馏，用乙酸乙酯置换THF，同时保持1500L的最小瓶容量。将所得的溶液冷却到25℃，然后装入乙酸酐(74.8kg，733mol)和甲烷磺酸(10.8kg，112mol)。将混合物在70℃加热约3小时。将混合物冷却到25℃，然后用H2O(1320L)淬火，同时保持温度在20℃。移除水层后，将乙酸乙酯(658L)和H2O(563L)加入有机相。搅拌后，移除水相。用13wt％的NaCl水溶液(2×650L)清洗有机相两次。部分浓缩有机相并通过真空蒸馏(70-140mm Hg)将其干燥至体积约1500L。将所得溶液加热到40℃，然后加入正庚烷(1042L)，同时保持温度在40℃。在溶液中加入(2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸(0.1kg)作为晶种，然后缓慢添加额外的正庚烷(437L)。结晶混合物在40℃下保持1小时。加入额外的正庚烷(175L)，同时保持温度在40℃。将结晶悬浮液冷却到25℃，并保持1小时，然后冷却到0℃，保持2小时。过滤悬浮液，用正庚烷冲洗。在55℃的真空中干燥湿滤饼，得到174kg(74.5％)的白色固体状(2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸m.p.＝152-154℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ.7.21-7.35(m，5H)，7.13(app t，J＝7.9 Hz，1H)，7.01(app d，J＝8.1 Hz，1H)，6.94(app d，J＝7.2 Hz，1H)，5.99(d，J＝9.0Hz，1H)，5.33(d，J＝4.1 Hz，1H)，4.96-5.07(m，1H)，3.07(dd，J＝5.5，14.6 Hz，1H)，2.90(dd，J＝10.0，14.5 Hz，1H)，2.30(s，3H)，2.18(s，3H)，1.96(s，3H)；13C NMR (125 MHz，CDCl3)δ170.4，170.2，169.6，169.5，149.5，137.81，136.5，129.2，128.6，128.4，127.0，126.6，124.5，123.7，73.1，50.9，35.9，20.6，20.5，12.4；C22H23NO7的元素分析，计算值C，63.92；H，5.61；N，3.39；实验值C，64.22；H，5.68；N，3.33；MS(CI)m/z 414.1572(414.1553，C22H24NO7，M+H+计算值).
实施例12制备(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺 (2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸(140kg，339mol)、CH3CN(560L)和吡啶(64.3kg，813mol)的溶液被冷却到15℃。加入SOCl2(44.3kg，373mol)，同时保持温度在15℃。将混合物保持在15℃ 1小时。将(R)-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺氢氯化物(96.6kg，408mol)、CH3CN(254L)和吡啶(29.5kg，373mol)加入单独的反应器中，然后冷却到15℃。将(2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸氯化物溶液加到(R)-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺溶液中，同时保持温度在15℃。混合物在15℃下保持6小时。用0℃冷却套管将KOH(167kg，2709mol)和甲醇(280L)加入单独的反应器中。将所得的KOH/甲醇溶液冷却到5℃。将粗制乙酸3-{(1S，2S)-2-乙酰氧基-3-[(R)-4-烯丙基氨基甲酰基-5，5-二甲基-噻唑烷-3-基]-1-苯甲基-3-氧代-丙基氨基甲酰基}-2-甲基-苯基酯混合物加到KOH/甲醇溶液中，同时保持温度在10℃。添加完成后，将混合物在25℃下保持3小时。将H2O(840L)和乙酸乙酯(840L)加到混合物中，然后用浓HCl(85kg)酸化至pH为5-6.5，同时保持温度在20℃。分离所得层。用6.8wt％的NaHCO3(770L)水溶液、HCl/NaCl水溶液(H2O875L；浓HCl207kg；NaCl56kg)、8.5wt％的NaHCO3水溶液(322L)、再用3.8wt％的NaCl水溶液(728L)依次洗涤有机相。在一个大气压下，通过蒸馏来部分地浓缩所得有机相。通过连续蒸馏用乙酸乙酯置换溶剂，并且保持瓶温度大于等于70℃。加入乙酸乙酯以使瓶体积保持约840L。然后将溶液冷却到20℃，并保持此温度直到观察到结晶。加入正庚烷(280L)并且在15℃下搅拌悬浮液4小时。用冷的2.4∶1(v/v)乙酸乙酯/正庚烷冲洗晶体。在45℃的真空中干燥湿滤饼，得到粗制(R)-3-[(2S，3S)-2-羟基-3-(3-羟基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酰基]-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺。脱色和重结晶如下进行将粗制(R)-3-[(2S，3S)-2-羟基-3-(3-羟基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酰基]-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺、ADP碳(21kg)，Supercel(3kg)和乙酸乙酯(780L)的混合物加热到70℃。在混合物中加入CH3OH(40L)。过滤混合物，将所得的透明滤出液在一个大气压下加热至回流以开始蒸馏。依照如下置换CH3OH装入乙酸乙酯(388L)，同时保持瓶体积为约840L并且瓶温度为70℃。在溶液中缓慢加入正庚烷(316L)，同时保持温度在70℃。然后将混合物冷却到20℃，并保持此温度4小时。过滤晶体，用冷的2.1∶1(v/v)乙酸乙酯/正庚烷冲洗。在45℃的真空中干燥湿滤饼，得到103kg(59.6％)的白色结晶固体状(4R)-3-[(2S，3S)-2-羟基-3-(3-羟基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酰基]-5，5-二甲基-噻唑烷-4-羧酸烯丙基胺mp＝173-175℃，1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)显示约10∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ9.35(s，1H)，8.04-8.15(m，2H)，7.13-7.38(m，5H)，6.96(t，J＝7.7 Hz，1H)，6.79(d，J＝7.2 Hz，1H)，6.55(d，J＝7.5Hz，1H)，5.71-5.87(m，1H)，5.45(br d，J＝6.2 Hz，1H)，4.98-5.27(m，4H)，4.38-4.52(m，3H)，3.58-3.86(m，2H)，2.68-2.90(m，2H)，1.84(s，3H)，1.52(s，3H)，1.37(s，3H)[特性次要旋转异构体共振δ9.36(s)，8.21(d，J＝10.5Hz)，7.82(5，J＝5.8 Hz)，4.89(s)，4.78(AB q，JAB＝9.8 Hz，ΔV＝27.1 Hz)，4.17-4.24(m)，2.93-3.01(m)，1.87(s)，1.41(s)]；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)显示约10∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ170.4，169.5，168.2，155.7，139.6，139.4，135.5，135.4，129.9，128.2，126.2，126.1，121.9，117.8，115.6，72.4，72.1，53.1，51.4，48.2，41.3，34.2，30.5，25.0，12.6[特性次要旋转异构体共振δ171.4，169.7，168.6，139.0，129.5，128.4，70.6，54.2，49.1，41.5，31.4，24.8]；MS(CI)m/z 512.2224(512.2219，C27H34N3O5S，M+H+计算值)，C27H33N3O5S的元素分析，计算值C，63.38；H，6.50；N，8.22；实验值C，63.19；H，6.52；N，8.10实施例13制备(2S，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸；氢氯化物
在0℃下，将HCl气体(51g，1.4mol)鼓泡进入(2S，3S)-3-叔丁氧羰基氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(163g，551mmol)和CH2Cl2(2.0L)的悬浮液中。将得到的米色悬浮液加热到环境温度并通宵搅拌。浓缩样品的1H NMR分析表明，约95％转化为产物。将悬浮液冷却到0℃，并将额外的HCl气体(46g，1.3mol)鼓泡进入悬浮液。加热到环境温度后，通宵搅拌悬浮液。真空过滤悬浮液，用CH2Cl2(200mL)冲洗固体，并在45℃时的真空烘箱中干燥固体24小时，得到129g(100％)的白色固体状(2S，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸；氢氯化物1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ13.05(br s，1H)，8.25(br s，3H)，7.22-7.34(m，5H)，4.41(d，J＝2.6 Hz，1H)，3.66(br s，1H)，2.84(AB portion of ABX，JAX＝11.0 Hz，JBX＝2.8 Hz，Δv＝19.6 Hz，2H)；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)d 172.4，136.6，129.8，128.7，127.1，69.6，55.0，33.6；MS(CI)m/z 196.0979(196.0974，C10H14NO3，M-Gl-计算值).
实施例14制备(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸 将NEt3(186mL，1.34mol)加入到(2S，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸；氢氯化物(100g，432mmol)、H2O(320mL)和四氢呋喃(320mL)的悬浮液中。将悬浮液冷却到4℃并逐滴加入乙酸3-氯羰基-2-甲基-苯基酯(93.6g，440mmol)和THF(160mL)的溶液。将所得溶液加热到环境温度并搅拌1小时。将溶液冷却到10℃，并用6 N HCl(87mL)将pH调至2.0。加入NaCl(25g)和四氢呋喃(200mL)，并加热混合物至环境温度。进行相分离，将四氢呋喃相用MgSO4干燥，并将其过滤。用旋转蒸发器将滤出液浓缩至体积为330mL，然后用四氢呋喃(230mL)稀释。缓慢加入正庚烷(1.2L)，在环境温度下通宵搅拌所得的白色固体悬浮液。真空过滤悬浮液，用正庚烷(2×500mL)冲洗固体，在45℃的真空烘箱中干燥固体24小时，得到150g(93.6％)的掺杂约7.7mol％Et3N·HCl的白色固体状(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸mp＝189-191℃，1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ12.65(br s，1H)，3.80(d，J＝9.7Hz，1H)，7.16-7.30(m，6H)，7.07(dd，J＝1.1，8.0 Hz，1H)，7.00(dd，J＝1.1，7.5 Hz)，4.40-4.52(m，1H)，4.09(d，J＝6.0 Hz，1H)，2.92(app dd，J＝2.9，13.9Hz，1H)，2.76(app dd，J＝11.4，13.9 Hz，1H)，2.29(s，3H)，1.80(s，3H)；13CNMR(75 MHz，DMSO-d6)δ174.4，169.3，168.1，149.5，139.7，139.4，129.5，128.3，127.9，126.5，126.3，124.8，123.3，73.2，53.5，35.4，20.8，12.6；MS(CI)m/z 372.1464(372.1447，C20H22NO6，M+H+计算值).
实施例15制备(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺喷雾干燥分散体如下所述形成包含300g(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺、33.3g羟丙甲基纤维素琥珀酸乙酸酯(HPMCAS)和3000g甲醇的喷雾溶液。将HPMCAS和甲醇加到容器中并混合约2小时，以使HPMCAS溶解。加入全部量的聚合物后，所得混合物有轻微雾气。接下来，将(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺直接加至此混合物中，再搅拌混合物另外2小时。然后，通过使混合物通过滤孔尺寸为250μm的过滤器来过滤此混合物，从混合物中去除任何大尺寸的不可溶材料，因此形成喷雾溶液。
用高压泵将喷雾溶液泵至装有压力喷嘴(喷雾系统压力喷嘴和机身)(SK 76-16)的喷雾干燥器(具有液体进料处理容器的Niro型XP便携式喷雾干燥器(“PSD-1”))。PSD-1配备有9英寸的扩展室。将9英寸的扩展室加到喷雾干燥器上，从而增大干燥器的垂直长度。增加的长度延长了在干燥器中的停留时间，这样可使产物在到达喷雾干燥器的倾斜区之前被干燥。喷雾干燥器还配备了具有1/16英寸的钻孔的开孔面积为1％的316 SS圆形扩散板。此小的开孔面积决定了干燥气体的流量，从而使产物在喷雾干燥器中的循环最小化。操作过程中，喷嘴与扩散板平齐。Bran+Lubbe高压泵用于将液体输送到喷嘴。泵之后有脉冲缓冲器，以使喷嘴处的脉冲最小。在200psig的压力下，以约180g/min将喷雾溶液泵送至喷雾干燥器。在200℃的进口温度下，干燥气体(例如氮气)被循环通过扩散板。在60℃的温度下，蒸发溶剂和干燥气体离开喷雾干燥器。在旋风器中收集所得的固态无定型分散体。用在40℃下操作的Gruenberg单程对流板式干燥器对通过使用上述工艺形成的固态无定型分散体进行后续干燥6小时。干燥后，将分散体在环境空气和湿度(20℃/50％RH)中平衡8小时。
实施例16制备(2S)-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺；氢氯化物 将NEt3(75.2g，743mmol)缓慢加到10℃的(2S)-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-1，2-羧酸1-叔丁酯(98.3g，352mmol)、氯磷酸二苯酯(101g，376mmol)和乙酸乙酯(1.0L)的溶液中。将混合物加热至环境温度45分钟，然后冷却到10℃。缓慢加入2，2，2-三氟乙胺(39.5g，399mmol)，并在环境温度下搅拌所得混合物2.75小时。加入20％的柠檬酸水溶液(1.0L)，并且分离所得层。用乙酸乙酯(2×300mL)萃取水相。先用饱和NaHCO3水溶液(2×500mL)、然后再用饱和NaCl水溶液(300mL)洗涤合并的有机相。用旋转蒸发器将所得有机相浓缩到900g的重量。将3 N HCl/乙酸乙酯溶液(500mL)添加到浓缩物中，将混合物在环境温度下搅拌24小时。过滤所得固体，用乙酸乙酯(100mL)洗涤，并在55℃的真空烘箱中干燥，得到98.0g(93.9％)的白色固体状(2S)-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺；氢氯化物1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ10.46(br s，2H)，9.50(t，J＝6.2 Hz，1H)，4.17-4.33(m，2H)，3.68-4.02(m，3H)，1.23(app d，J＝2.1 Hz，3H)，0.97(app d，J＝2.0 Hz，3H)；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)δ165.6，127.9(dd，JCF＝250.2，257.2 Hz)，125.6(q，JCF＝279.0 Hz)，64.8，48.2(t，JCF＝33.4 Hz)，45.7(t，JCF＝21.2 Hz)，18.2(d，JCF＝7.5 Hz)，17.2(app dd，JCF＝2.3，5.8 Hz)；MS(CI)m/z 261.1015(261.1026，C9H14N2OF5，M-HCl+H+计算值)；C9H14N2OClF5的元素分析，计算值C，36.44；H，4.76；N，9.44；Cl，11.95；F，32.02；实验值C，36.45；H，4.86；N，9.43；Cl，12.06；F，32.15.
实施例17制备4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺 在环境温度下，在(2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2-甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸(193g，468mmol)和乙腈(1.6L)的溶液中加入吡啶(149g，1.89mol)，然后将混合物冷却至10℃。用15分钟添加SOCl2(62.3g，523mmol)和乙腈(50mL)的溶液，然后停止冷却。15分钟后，加入额外的SOCl2(0.80g，6.7mmol)。在环境温度下搅拌25分钟之后，混合物被冷却到10℃。用15分钟分份添加来自合成3的(2S)-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-2-羧酸(2，2，2-三氟-乙基)-酰胺；氢氯化物(139g，468mmol)。将混合物加热至环境温度1小时，然后冷却至10℃。然后用10分钟添加5℃的KOH(85％分析；186g，2.82mol)和甲醇(1.1L)的溶液，然后添加K2CO3(51.8g，375mmol)。将混合物加热至环境温度1小时，然后用旋转蒸发器浓缩到1.5kg的重量。将所得的混合物在0.5 N HCl(1.6L)和乙酸乙酯(1.4L)之间分配，并分层。将有机相依次用饱和NaHCO3水溶液(1.4L)、0.5 N HCl(1.6L)和H2O(1.4L)洗涤。用旋转蒸发器将有机相浓缩成湿固体，然后在50℃的真空烘箱中进一步干燥24小时。将得到的固体溶解于纯乙醇(800mL)，然后用旋转蒸发器浓缩。将得到的固体再次溶解于纯乙醇(600mL)，然后用旋转蒸发器浓缩，然后在50℃的真空烘箱中干燥24小时。将固体溶解于乙醇，然后缓慢加入0.11 N HCl(620mL)。缓慢添加H2O(950mL)，并将得到的晶体悬浮液通宵搅拌。过滤固体，用乙醇/H2O(1∶3，200mL)洗涤，然后在55℃的真空烘箱中干燥，得到259g(96.9％)固体4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)显示约20∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ9.34(s，1H)，8.66(app t，J＝6.3 Hz，1H)，8.13(d，J＝8.3 Hz，1H)，7.15-7.35(m，5H)，6.96(app t，J＝7.7 Hz，1H)，6.79(d，J＝7.3 Hz，1H)，6.55(d，J＝6.7 Hz，1H)，5.56(d，J＝6.4 Hz，1H)，4.26-4.54(m，5H)，3.81-4.07(m，2H)，2.86-2.90(m，1H)，2.71(app dd，J＝10.5，13.6 Hz，1H)，1.82(s，3H)，1.22(s，3H)，1.04(s，3H)[特性次要旋转异构体共振δ8.62(5，J＝6.5 Hz)，5.35(d，J＝7.6 Hz)，1.86(s)]；13C NMR (75 MHz，DMSO-d6)显示约9∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ171.5，169.6，168.6，155.7，139.6，139.4，129.8，128.2，127.9(dd，JCF＝251.7，253.5 Hz)，126.2，126.0，125.0(q，JCF＝279.2 Hz)，121.8，117.9，115.6，73.2，68.3，53.0，5 1.4(t，JCF＝32.6 Hz)，43.8(t，JCF＝20.8 Hz)，34.5，22.4(d，JCF＝4.1 Hz)，16.9(d，JCF＝7.3 Hz)，12.5[特性次要旋转异构体共振δ171.7，139.1，129.5，68.7，47.0(t)，16.5(d)]；MS(CI)m/z 572.2189(527.2184，C27H31N3O5F5，XM+H+计算值)；C27H30N3O5F5的元素分析，计算值C，56.74；H，5.29；N，7.35；F，16.62；实验值C，56.50；H，5.50；N，7.15；F，16.36.
实施例18制备4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺喷雾干燥分散体如下所述制备包含90wt％的4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰和10wt％的HPMCAS-M(AQUOT-MG，可从Shin Etsu获得)的固体无定型分散体。首先，如下所述形成包含39.0g 4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰、4.34g HPMCAS-M和390g甲醇的喷雾溶液。将HPMCAS-M加入容器中的甲醇中并搅拌。接下来，将4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰直接加至此混合物中，总共搅拌混合物2小时。添加并溶解全部成分后，所得的混合物有轻微的雾气。
将喷雾溶液加到罐中，并用压缩氮气加压以使该溶液通过内衬的过滤器(滤孔尺寸140μm)，然后进入位于实施例14所述的喷雾干燥室中的压力漩涡雾化器(Schlick #1压力喷嘴)。以约10g/min的流率，在约75psig的压力下将喷雾溶液加压。干燥气体(氮气)以约400g/min的流率进入喷雾干燥室，其内部温度约125℃。在60℃的温度下，蒸发的溶剂和干燥气体离开喷雾干燥器。在旋风分离器中收集所得的固态无定型分散体。
用在40℃/15％RH下操作的Gruenberg单程对流板式干燥器对通过上述工艺形成的固态无定型分散体进行后续干燥6小时。干燥后，将分散体在环境空气和湿度(20℃/50％RH)中平衡2小时。
实施例19制备3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酸 将吡啶(34.0mL，419mmol)和乙酸酐(150mL，1.59mol)依次添加到3-羟基-2，5-二甲基-苯甲酸(211g，1.27mol)在甲苯(1.05L)中的悬浮液中。在氩气下在50℃下，加热该混合物6小时。停止加热，在混合物仍热时加入正庚烷(2.10L)。使混合物冷却并在环境温度下通宵搅拌。过滤悬浮液，用正庚烷冲洗，并且在50℃的真空烘箱中干燥固体，得到212g(80.1％)的浅黄色固体状3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酸m.p.＝153-154℃；1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ11.5(br s，1H)，7.80(s，1H)，7.10(s，1H)，2.44(s，3H)，2.41(s，3H)，2.39(s，3H)；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)δ169.3，168.8，149.9，136.3，132.9，128.4，128.0，126.3，20.8，20.5，13.1；MS(CI)m/z 209.0822(209.0814，C11H13O4，M+H+计算值)；C11H12O4的元素分析计算值C，63.45；H，5.81；实验值C，63.54；H，5.88.
实施例20制备3-氯羰基-2，5-二甲基-苯基酯 将SOCl2(80.0mL，1.09mol)加到3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酸(206g，990mmol)、DMF(4.0mL)和CH2Cl2(1.03L)的悬浮液中。在环境温度下搅拌所得的混合物1.5小时。添加正庚烷(1.03L)，接着缓慢添加饱和NaHCO3水溶液(2.06L)，然后分层。将有机相用饱和NaCl水溶液(1.00L)洗涤，用MgSO4干燥，过滤，并用旋转蒸发器浓缩，得到193g(86.2％)的浅黄色固体状乙酸3-氯羰基-2，5-二甲基-苯基酯m.p.＝52-54℃；1HNMR(300 MHz，CDCl3)δ7.92(s，1H)，7.15(s，1H)，2.44(s，3H)，2.38(s，3H)，2.35(s，3H)；13C NMR(75 MHz，CDCl3)δ169.4，167.7，150.1，137.3，134.7，132.0，130.2，129.1，21.2，21.1，13.7；C11H11O3Cl的元素分析，计算值C，58.29；H，4.89；实验值C，58.64；H，4.89.
实施例21制备(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸 在环境温度下，将NEt3(265mL，1.88mol)加到(2S，3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酸(175g，896mmol)、四氢呋喃(875mL)和H2O(875mL)的悬浮液中。将得到的溶液冷却到0℃。缓慢添加乙酸3-氯羰基-2，5-二甲基-苯基酯(193g，854mmol)和四氢呋喃(430mL)的溶液。1小时后，加入H2O(225mL)，然后缓慢添加3 N HCl(390mL)。使所得混合物缓慢加热至环境温度并通宵搅拌。过滤固体，用H2O(430mL)冲洗。在50℃的真空烘箱干燥之后，得到301g(91.5％)的掺杂约8mol％Et3N·HCl的白色固体状(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸m.p.＝220-224℃；1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ12.65(br s，1H)，8.23(d，J＝9.0 Hz，1H)，7.15-7.30(m，5H)，6.89(s，1H)，6.79(s，1H)，5.63(br s，1H)，4.39-4.50(m，1H)，4.07(d，J＝5.9 Hz，1H)，2.91(app dd，J＝3.0，14.0 Hz，1H)，2.74(app dd，J＝11.1，14.1 Hz，1H)，2.27(s，3H)，1.24(s，3H)，1.72(s，3H)[Et3N·HCl的特性共振δ3.09(q，J＝7.3 Hz)，1.18(t，J＝7.3 Hz)]；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)δ174.4，169.2，168.2，149.4，139.4，135.9，129.5，128.3，126.3，125.6，124.7，123.5，73.2，53.5，35.4，20.8，20.6，12.2[Et3N·HCl的特性共振δ45.9，8.8]；MS(CI)m/z386.1600(386.1604，C21H24NO6，M+H+计算值)；C21H23NO6·0.08 Et3N·HCl的元素分析，计算值C，65.08；H，6.17；N，3.82；实验值C，64.88；H，6.10；N，3.68.
实施例22制备(2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸 在环境温度下，将甲烷磺酸(16.5mL，253mmol)和乙酸酐(91.0mL，960mmol)依次加到(2S，3S)-3-(3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酰基氨基)-2-羟基-4-苯基-丁酸(296g，768mmol)在乙酸乙酯(3.00L)中的悬浮液中。在75℃下加热混合物2小时，然后将得到的溶液冷却到环境温度。依次用H2O(2.0L)、半饱和NaCl水溶液(2.0L)和饱和NaCl水溶液(1.0L)洗涤该溶液。通过在一个大气压下蒸馏将所得的有机相浓缩为约一半的体积。停止加热，使溶液冷却至环境温度，得到悬浮液。加入正庚烷(3.0L)，并在环境温度下通宵搅拌该悬浮液。过滤固体，用1∶2乙酸乙酯/正庚烷(1.5 L)冲洗。在50℃的真空烘箱中干燥之后，得到316g(96.3％)的白色固体状(2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸m.p.＝185-186℃；1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ13.3(s，1H)，8.49(d，J＝8.8 Hz，1H)，7.19-7.34(m，5H)，6.91(s，1H)，6.71(s，1H)，5.11(d，J＝5.0Hz，1H)，4.61-4.72(m，1H)，2.79-2.90(m，2H)，2.27(s，3H)，2.24(s，3H)，2.14(s，3H)，1.73(s，3H)；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)δ170.3，169.7，169.2，168.5，149.4，139.1，138.5，136.1，129.4，128.5，126.6，125.4，124.7，123.8，73.9，51.1，35.2，20.9，20.8，20.6，12.1；MS(CI)m/z 428.1713(428.1709，C23H26NO7，M+H+计算值)；C23H25NO7的元素分析，计算值C，64.63；H，5.90；N，3.28；实验值C，64.79；H，5.96；N，3.15.
实施例23制备(2S)-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-2-羧酸乙胺；氢氯化物 在环境温度下，将氯磷酸二苯酯(38.4mL，185mmol)加到(2S)-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-1，2-二羧酸1-叔丁酯(48.8g，175mmol)在乙酸乙酯(490mL)中的溶液中。将溶液冷却至0℃，并逐滴加入NEt3(51.0mL，367mmol)。停止冷却，并使所得的悬浮液加热到环境温度并搅拌1小时。将悬浮液冷却到0℃，并缓慢添加H2NEt(96.0mL的2.0M的在四氢呋喃中的溶液，192mmol)。将所得的混合物加热至环境温度并搅拌2小时。添加20％的柠檬酸水溶液(490mL)，然后分层。用乙酸乙酯(125mL)萃取水相。用饱和NaHCO3水溶液(490mL)洗涤合并的有机相，然后分层。用乙酸乙酯(125mL)萃取水相。将合并的有机相用饱和NaCl水溶液(250mL)洗涤，用MgSO4干燥，然后用旋转蒸发器浓缩到体积约为500mL。加入浓HCl(61.0mL，734mmol)，并将溶液在环境温度下通宵搅拌。通过在一个大气压下蒸馏，用乙酸乙酯(3×250mL)共沸干燥所得的悬浮液。将得到的悬浮液冷却到环境温度，然后过滤，用乙酸乙酯(100mL)冲洗。在环境温度下在真空下干燥之后，得到37.4g(88.2％)的白色固体状(2S)-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-2-羧酸乙胺；氢氯化物m.p.＝238-239℃(decomp.)；1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ10.3(br s，2H)，8.70(t，J＝5.3 Hz，1H)，4.08(s，1H)，3.71-3.80(m，2H)，3.08-3.34(m，2H)，1.21(app d，J＝2.2 Hz，3H)，1.08(t，J＝7.2 Hz，3H)，0.97(app d，J＝2.1 Hz，3H)；13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)δ163.8，128.1(dd，JCF＝248.6，255.5 Hz)，64.8，48.1(t，JCF＝33.7 Hz)，45.5(t，JCF＝20.8 Hz)，34.3，18.3(d，JCF＝7.4 Hz)，17.4(app dd，JCF＝2.1，5.4 Hz)，14.8；MS(CI)m/z 207.1317(207.1309，C9H17N2OF2，M-HCl+H+计算值)；C9H17ClF2N2O的元素分析，计算值C，44.54；H，7.06；N，11.54；F，15.66；实验值C，44.40；H，7.06；N，11.65；F，15.61.
实施例24制备乙酸3-{(1S，2S)-2-乙酰氧基-1-苯甲基-3-[(2S)-2-乙基氨基甲酰基-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-1-基]-3-氧代-丙基氨基甲酰基}-2，5-二甲基-苯基酯 将SOCl2(1.90mL，25.8mmol)逐滴加到0℃的(2S，3S)-2-乙酰氧基-3-(3-乙酰氧基-2，5-二甲基-苯甲酰基氨基)-4-苯基-丁酸(10.0g，23.5mmol)、吡啶(7.60mL，93.9mmol)和CH3CN(90.0mL)的溶液中。将得到的溶液加热至环境温度1小时，然后冷却至0℃。一次性加入(2S)-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-2-羧酸乙胺；氢氯化物(5.71g，23.5mmol)。将所得的溶液加热到环境温度并搅拌2.5小时。添加饱和NaHCO3水溶液(110mL)和甲基叔丁醚(110mL)，使所得的层分离。将得到的有机相依次用20％的柠檬酸水溶液(90mL)、饱和NaHCO3水溶液(70mL)和饱和NaCl水溶液(70mL)洗涤。将活性炭(14g)加到所得的有机相中，并在环境温度下通宵搅拌混合物。在硅藻土上过滤混合物，用甲基叔丁醚冲洗。用MgSO4干燥滤出液，过滤，并用旋转蒸发器浓缩至约体积约为90mL。将此粗制乙酸3-{(1S，2S)-2-乙酰氧基-1-苯甲基-3-[(2S)-2-乙基氨基甲酰基-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-1-基]-3-氧代-丙基氨基甲酰基}-2，5-二甲基-苯基酯的溶液直接进行下一步骤。通过浓缩此溶液的样品获得分析数据m.p.＝88-93℃；1HNMR(300 MHz，DMSO-d6)显示约10∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ8.58(d，J＝8.2 Hz，1H)，8.02(t，J＝7.5 Hz，1H)，7.18-7.42(m，5H)，6.92(s，1H)，6.84(s，1H)，5.34(d，J＝3.2 Hz，1H)，4.41-4.66(m，2H)，4.19-4.32(m，2H)，3.03-3.26(m，2H)，2.95(app dd，J＝2.4，13.8 Hz，1H)，2.78(app dd，J＝11.7，13.8 Hz，1H)，2.27(s，3H)，2.25(s，3H)，1.73(s，3H)，1.22(brs，3H)，1.07(br s，3H)，1.04(t，J＝7.2 Hz，3H)[特性次要旋转异构体共振δ7.76-7.87(m)，6.72(s)，5.46(d，J＝3.7 Hz)，2.07(s)，1.79(s)]；13C NMR(75MHz，DMSO-d6)显示约10∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ170.5，169.2，169.0，166.8，166.7，149.4，139.1，138.8，136.1，129.7，128.3，127.8(dd，JCF＝25 1.2，254.9 Hz)，126.5，125.7，124.7，123.9，73.3，68.2，51.4，43.9(t，JCF＝20.5 Hz)，33.8，33.4，22.0(d，JCF＝6.0 Hz)，20.8，20.5，17.6(d，JCF＝7.0 Hz)，15.0，12.2[特性次要旋转异构体共振δ169.5，168.9，167.0，149.5，138.7，129.3，128.5，125.4，124.8，124.2，34.1，21.2，14.7]；MS(CI)m/z616.2859(616.2834，C32H40N3O7F2，M+H+计算值)；C32H39F2N3O7的元素分析，计算值C，62.43；H，6.38；N，6.83；F，6.17；实验值C，62.08；H，6.68；N，6.53；F，5.85.
实施例25制备N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺 在环境温度下，将甲醇(30.0mL)和K2CO3(7.16g，51.7mmol)加到乙酸3-{(1S，2S)-2-乙酰氧基-1-苯甲基-3-[(2S)-2-乙基氨基甲酰基-4，4-二氟-3，3-二甲基-吡咯烷-1-基]-3-氧代-丙基氨基甲酰基}-2，5-二甲基-苯基酯(得自上述实施例)的甲基叔丁醚溶液中。搅拌2小时后，将得到的黄色溶液用乙酸乙酯(140mL)、1 N HCl(50mL)和0.5 N HCl(140mL)稀释，然后分层。将所得的有机相依次用饱和NaHCO3水溶液(90mL)、0.5 N HCl(70mL)和H2O(140mL)和饱和NaCl水溶液(70mL)洗涤。然后通过在一个大气压下蒸馏将有机相浓缩至体积约为100mL，并将得到的溶液冷却到环境温度。缓慢添加二异丙醚(190mL)，并将得到的结晶悬浮液在环境温度下通宵搅拌。过滤悬浮液，用二异丙醚(50mL)冲洗。在真空下干燥之后，得到9.88g(79.1％)的白色固体状N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2 -羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺m.p.＝208-214℃；1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)显示约9∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ9.21(s，1H)，8.07(d，J＝8.2 Hz，1H)，7.90(t，J＝5.5 Hz，1H)，7.15-7.39(m，5H)，6.62(s，1H)，6.40(s，1H)，5.45(d，J＝6.3 Hz，1H)，3.95-4.50(m，5H)，3.02-3.22(m，2H)，2.89(app dd，J＝2.0，13.5 Hz，1H)，2.72(app dd，J＝10.4，13.4 Hz，1H)，2.17(s，3H)，1.78(s，3H)，1.22(s，3H)，1.05(s，3H)，1.03(t，J＝7.2 Hz，3H)[特性次要旋转异构体共振δ6.15(d，J＝8.7 Hz)，7.85(t，J＝5.7 Hz)，6.34(s)，5.31(d，J＝7.6 Hz)，4.73(s)，1.81(s)；13CNMR(75 MHz，DMSO-d6)显示约9∶1的旋转异构体混合物。主要旋转异构体共振δ171.0，169.6，167.2，155.5，139.7，139.1，135.1，129.8，128.2，128.1(dd，JCF＝251.4，254.0 Hz)，126.2，118.7，118.6，116.2，72.8，68.5，53.1，51.5(t，JCF＝32.0 Hz)，43.7(t，JCF＝20.5 Hz)，34.2，33.8，22.5(d，JCF＝4.7 Hz)，20.9，17.4(d，JCF＝7.3 Hz)，15.1，12.2[特性次要旋转异构体共振δ171.8，169.7，168.0，138.8，129.5，23.1，14.9；MS(CI)m/z 532.2614(532.2623，C28H36N3O5F2，M+H+计算值)；C28H35F2N3O5的元素分析，计算值C，63.26；H，6.64；N，7.90；F，7.15；实验值C，63.20；H，6.67；N，7.87；F，7.07.
实施例26制备N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺喷雾干燥分散体如下所述制备包含90wt％的N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺和10 wt％的HPMCAS-M(AQOAT-MG，可从Shin Etsu获得)的固体无定型分散体。首先，如下所述形成包含9.0wt％N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺、1.0wt％HPMCAS-M和90.0％甲醇的喷雾溶液。将HPMCAS-M加入容器中的甲醇中并搅拌。接下来，将N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺直接加至此混合物中，总共搅拌混合物2小时。添加并溶解全部成分后，所得的混合物有轻微的雾气。
将喷雾溶液加到罐中，并用压缩氮气加压以使该溶液通过内含的过滤器(滤孔尺寸140μm)，然后进入位于实施例14所述的喷雾干燥室中的压力漩涡雾化器(Schlick #1压力喷嘴)。以约10g/min的流率，在约75psig的压力下将喷雾溶液加压。干燥气体(氮气)以约400g/min的流率进入喷雾干燥室，其内部温度约125℃。在60℃的温度下，蒸发的溶剂和干燥气体离开喷雾干燥器。在旋风分离器中收集所得的固态无定型分散体。用在40℃/5％RH下操作的Gruenberg单程对流板式干燥器对通过上述工艺形成的固态无定型分散体进行后续干燥至少10小时。
权利要求
1.一种组合物，其包括(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
2.一种组合物，其包括4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
3.一种组合物，其包括N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
4.如权利要求1-3中任何一项的组合物，其中所述至少一种附加治疗剂选自奈非那韦、利杜那韦、洛匹那韦、克立治、依非韦仑、奈韦拉平、拉米夫定、齐多夫定和泰诺福韦。
5.一种治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
6.一种治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
7.一种治疗被感染哺乳动物体内的HIV感染的方法，其包括给所述哺乳动物施用如下组合物，所述组合物包括治疗有效量的N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及治疗有效量的选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂。
8.(4R)-N-烯丙基-3-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-5，5-二甲基-1，3-噻唑烷-4-甲酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂在制备用于治疗需要治疗的哺乳动物体内的HIV感染的药物中的用途。
9.4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2-甲基苯甲酰基)氨基]4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-N-(2，2，2-三氟乙基)-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂在制备用于治疗需要治疗的哺乳动物体内的HIV感染的药物中的用途。
10.N-乙基-4，4-二氟-1-{(2S，3S)-2-羟基-3-[(3-羟基-2，5-二甲基苯甲酰基)氨基]-4-苯基丁酰基}-3，3-二甲基-L-脯氨酰胺或其药物上可接受的盐或溶剂化物，以及选自核苷HIV逆转录酶抑制剂、非核苷类HIV逆转录酶抑制剂、HIV蛋白酶抑制剂、HIV整合酶抑制剂、HIV融合抑制剂、免疫调节剂、CCR5拮抗剂和抗感染剂的至少一种附加治疗剂在制备用于治疗需要治疗的哺乳动物体内的HIV感染的药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及通过对哺乳动物施用治疗有效量的化合物组合来治疗哺乳动物HIV感染的方法。本发明还涉及包括用作HIV蛋白酶抑制剂的特定化合物和至少一种附加治疗剂的组合物。
文档编号A61P31/18GK1938017SQ200580010030
公开日2007年3月28日 申请日期2005年1月17日 优先权日2004年1月30日
发明者詹尼弗·卢·哈蒙德, 艾米·凯瑞·巴蒂克 申请人:辉瑞有限公司