专利名称：苦杏仁苷在制备促进心脑胰及伤口血液循环的苦杏仁苷制剂中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及含有机有效成分的医药配制品的医药用途，具体是一种苦杏仁苷的制备方法和苦杏仁苷在制备促进心脑胰及伤口血液循环的苦杏仁苷制剂中的应用。
背景技术：
桃仁、苦杏仁均为中国药典收录的品种，资源丰富。
杏仁(苦杏仁)，属蔷薇科(Rosaceae)味苦，微温，有小毒。具有止咳平喘，润肠通便的功能。治疗剂量的本品经口服后，其有效成分苦杏仁苷在体内缓慢水解，逐渐生成微量氢氰酸，后者对呼吸中枢呈镇静作用，使呼吸运动趋于安静而呈现镇咳和平喘的作用。为常用的止咳、平喘中药。其化学成分含苦杏仁苷(amygdalin)、脂肪油、苦杏仁酶(emulsin)、苦杏仁苷酶(amydgalase)、樱叶酶(prunase)、雌酮、α-雌二醇、链甾醇等。
临床上常将苦杏仁做成丸剂、片剂、糖浆剂等剂型应用。
桃仁，属蔷薇科(Rosaceae)，味苦甘平。功能主治破血行瘀，润燥滑肠。治经闭，热病蓄血，风痹，疟疾，跌打损伤，瘀血肿痛，血燥便秘。其化学成分含苦杏仁苷(amygdalin)、苦杏仁酶(emulsin)、脂肪油等。
桃仁在中成药制剂中也是常用的原料之一。
中国专利1319431公开了一种“含苦杏仁苷物质抗肿瘤活性的增进方法机组和物和评价方法”，系通过红外焙烤、清酒曲发酵和涂布油增进含苦杏仁苷枇杷种子等抗癌功效。在添加和增加含苦杏仁苷的经处理过的产物的浓度条件下，通过紫外线照射二碳六烯酸在体系中增加过氧化物脂质的形成。过氧化物脂质形成得越多，评价和预测口服途径中的抗癌功效越强。用此方法来评价含苦杏仁苷物质的功效。
中国专利1365979公开了一种“有效成分苦杏仁苷的提取分离及精制方法”系将苦杏仁压榨去油，加3-6倍量的乙醇提取3次，减压过滤，合并滤液，减压回收乙醇，放置、析出苦杏仁苷，过滤得粗品；苦杏仁苷粗品经乙醇溶解、过滤、冷藏、放置、析出白色簇状结晶，减压过滤，用少量乙醚与乙醇洗涤，得纯度为99％以上的苦杏仁苷定量对照品。该发明解决了长期以来苦杏仁苷以苦杏仁酶酶解或水解而使有效成分被破坏、疗效降低的难题。对照品得纯度高，具有广泛应用价值。
发明内容
本发明是为了解决中药桃仁中有效成分所具有的医药效果，而提供一种药源更为广泛的苦杏仁苷在制备促进心脑胰及伤口血液循环的苦杏仁苷制剂中的应用；同时还提供了一种苦杏仁苷的制备方法。
本发明原理桃仁、杏仁在功能主治方面虽有不同，但是其所含的化学成分有极大的共同性。在通过正交筛选确定桃仁明确的活血化瘀作用后，确定提取桃仁中的主要成分-苦杏仁苷，并进行了定性分析苦杏仁苷及含量测定，由于苦杏仁苷也存在于苦杏仁中，而且苦杏仁作为药用时已经过压油的工艺，因此提取处理更为方便，所以在苦杏仁苷的实验研究中，均使用从苦杏仁饼中提取苦杏仁苷。
苦杏仁的主要有效成分为苦杏仁苷，苦杏仁苷易被同存于苦杏仁中异细胞的苦杏仁酶酶解，其化学性质为易溶于热乙醇，难溶于乙醇，故选用已压榨除去绝大部分油的杏仁饼，采用乙醚进一步脱脂，乙醇回流提取的方法，快速、简单地提制苦杏仁苷。
苦杏仁苷的制备方法压榨去油后的苦杏仁1Kg加乙醚4000-5000ml分2次加热回流脱脂，过滤备用；将药渣挥尽乙醚后加95％乙醇回流提取三次，每次3000-5000ml，趁热过滤，合并滤液，减压回收乙醇至生药量的1-2倍量体积，放置至室温，再加入1/2量的乙醚，容器底层析出沾壁的油状沉淀，转出上清液，放置，析出结晶，抽滤，得苦杏仁苷粗品；将苦杏仁苷粗品加20-40倍乙醇溶解、过滤、放置、析出苦杏仁苷白色片状结晶，减压过滤，用100-200mL乙醇洗涤结晶，即得苦杏仁苷纯品，收率4％以上，纯度达90％以上。
所述的制备方法，其苦杏仁苷粗品可反复处理1-2次，但每次乙醇量须减半。
一种在制备促进脑血液循环作用的苦杏仁苷制剂中的应用。
一.苦杏仁苷对脑血液循环的作用。
1.治疗因血粘稠度升高所致的脑缺血。苦杏仁苷静脉输入均可增加大鼠软脑膜及脑实质两部位的循环血流，说明两部位的血管扩张反应具有同步性；作用显现较晚，从静脉注射后30分钟开始，作用逐步增加，直至60分钟时与给药前有明显差异。为此，在造成血流降低之前给予苦杏仁苷，能拮抗葡聚糖的致病作用。
2.对脑微循环障碍的影响。用于如注射肾上腺素、垂体后叶素及中脑动脉结扎的预防和治疗。
一种在制备治疗心力衰竭的苦杏仁苷制剂中的应用。
苦杏仁干可在较长时间内维持大鼠离体心脏冠脉流量、心缩力及收缩频率保持不变。应用苦杏仁苷灌流可使离体心脏在较长时间里维持心脏正常功能，对心脏功能衰竭有保护作用。
一种在制备治疗急性胰腺炎的苦杏仁苷制剂中的应用。
苦杏仁苷对胰腺血流及氧耗有较好的影响，能降低重型急性胰腺炎时白细胞滚动及粘附数增加，能增加血液流速及壁切率；通过抑制白细胞内皮细胞过度粘附，减少白细胞在组织内的聚集，从而对胰外脏器起保护作用；对急性胰腺炎时大鼠血清NO的过渡升高有降低作用。
一种在制备促进伤口愈合的苦杏仁苷制剂中的应用。
改善皮下组织氧分压，增加皮肤组织微循环血流，使伤口愈合加快，提高切口断裂强度，有益于缺血皮肤切口的愈合。
这样制备的苦杏仁苷产率高、纯度高、制备方法简便。
如上制备的苦杏仁苷经动物实验表明具有预防和治疗因血粘稠度升高所致的脑缺血，对心脏功能衰竭有保护作用，对急性胰腺炎的治疗和促进伤口愈合的作用，并具有显著的效果。因此，本发明为医学临床提供了一种新的药物制剂，并为该制剂提供了新的医药用途。
图1为本发明样品色谱2为对照品色谱3为生理盐水对大鼠软脑膜(上)及脑实质(下)微循环的影响。
图4为苦杏仁苷对大鼠软脑膜(上)及脑实质(下)微循环的影响。
图5为高分子葡聚糖引起的大鼠软脑膜(上)及脑实质(下)微循环变化。
图6为苦杏仁苷对高分子葡聚糖引起的大鼠软脑膜(上)及脑实质(下)微循环障碍的预防作用。
图7a为YHI+苦杏仁苷对胰组织微循环变化。
图7b为生理盐水对胰组织微循环变化。
具体实施例方式
直接取杏仁饼1Kg，适当粉碎后过20目筛，加乙醚4000mL，分2次加热回流脱脂，过滤，将药渣挥尽乙醚后加95％乙醇回流提取三次，每次5000mL，趁热过滤，合并滤液，减压回收乙醇至1500mL，稍放置至室温，再加入1/2量的乙醚，放置，容器底层析出沾壁的油状物质，将上清液转出，继续放置，析出结晶，抽滤，得苦杏仁苷粗品61g。将苦杏仁苷粗品加1200mL乙醇加热溶解、过滤、放置、析出苦杏仁苷白色片状结晶，减压过滤，用少量乙醇洗涤结晶，用200mL乙醇洗涤2次，得苦杏仁苷纯品41g，纯度达90％以上。
药物剂型注射用粉制剂。
注射用苦杏仁苷粉制剂的推荐临床使用剂量为2ml/kg/h，输液剂量与一次注入剂量的换算方法待定。
一.苦杏仁苷定性及定量检测1.薄层色谱取苦杏仁苷标准品(中国生物制品检定所，批号820-9401)，用甲醇配制成1mL含2mg的溶液，作为对照品溶液。取本发明提制的苦杏仁苷，同样用甲醇配制成1mL含2mg的溶液，作为供试品溶液。分别吸取上述两种溶液10uL，点于同一硅胶GF254薄层板(烟台市化学工业研究所)上，展开剂为水饱和氯仿∶甲醇(2∶1)，展开、取出、晾干，置紫外灯(UV254)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的暗斑点。
2.HPLC法测定苦杏仁苷含量色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为含0.1％磷酸的水∶甲醇(80∶20)；检测波长为210nm，流速为0.9mL/min，理论塔板数按苦杏仁苷计算应不低于5000。
取苦杏仁苷标准品(批号820-9401)，用甲醇配制成1mL含约0.2mg的溶液，作为对照品溶液。再取本发明制得苦杏仁苷用甲醇配制成1mL含约0.2mg的溶液，作为供试品溶液。
标准曲线的绘制按上述色谱条件，分别进样4ul、8ul、10ul、12ul、16ul，得出面积积分值，以ug为横坐标，面积为纵坐标，绘制标准曲线图，为一直线，线性方程为Y＝8.893e-007X+1.686e-002，R＝0.9999按外标法测定供试品，进样10ul，对照品与供试品的液相色谱图保留时间一致。苦杏仁苷含量为98.4％。
采用高效液相法的归一化法进行纯度检查，与上述所测含量基本一致。标准品含量为97.70％，本发明提制的苦杏仁苷含量为99.18％。
二.苦杏仁苷的药理作用(一)促进脑血液循环，治疗因血液粘度升高所致的脑缺血。
1.对脑微循环的影响目的为测定苦杏仁苷静脉输入对大鼠软脑膜及脑实质微循环的影响。
方法健康II级Wistar大鼠40只，分为4组，每组10只。实验时将大鼠以10％乌拉坦腹腔注射麻醉(1ml/100g体重)，头顶部矢壮缝两侧颅骨钻孔后穿破硬脑膜，分别置入激光多普勒微循环电极，测定软脑膜及脑实质血流。血流稳定后于各组分别静脉输入生理盐水(对照组)和低、中、高剂量苦杏仁苷(1.5％、3％及6％，2ml/h)。观察两部位微循环血流变化1小时。
结果生理盐水无影响，三剂量苦杏仁苷均可增加两部位血流，以高剂量作用最明显。
结论苦杏仁苷静脉输入可增加大鼠软脑膜及脑实质微循环血流。(表1、2)表1苦杏仁苷等对大鼠软脑膜微循环血流(PU)的影响(x±s)
与给药前比较*p＜0.05 ()动物数表2苦杏仁苷等对大鼠脑实质微循环血流(PU)的影响(x±s)
与给药前比较*p＜0.05 ()动物数
2.对脑微循环障碍的影响目的研究苦杏仁苷对高分子葡聚糖引起的大鼠脑微循环障碍的保护作用。
方法应用10％葡聚糖尾静脉注射(9ml/kg)引起大鼠脑微循环障碍，与此同时(治疗组)或前30min(预防组)尾静脉输入苦杏仁苷，观察其对脑微循环障碍的治疗与预防作用。脑血流变化应用激光多普勒血流仪(LDF，瑞典，5001系列)进行测定。
结果高分子葡聚糖使大鼠脑微循环明显降低，苦杏仁苷未表现明显治疗作用，但有显著的预防作用。
结论苦杏仁苷对高分子葡聚糖引起的大鼠脑微循环障碍有明显的预防作用。(表3、4；图5、6)表3苦杏仁苷对脑微循环障碍大鼠软脑膜微循环血流(PU)变化(x±s)
与给药前比较*p＜0.05；**p＜0.01()动物数表4苦杏仁苷对脑微循环障碍大鼠脑实质微循环血流(PU)变化(x±s)
与给药前比较*p＜0.05；**p＜0.01()动物数(二).治疗心力衰竭目的观察了苦杏仁苷对大鼠离体心脏心缩力、冠脉流量及收缩频率的影响。
方法应用改良的Langendorff离体心脏灌流法。稳定期后，以含苦杏仁苷的灌流液进行灌流，观察预定指标变化。
结果对照组(离体心脏灌流液)由于离体灌流标本的条件限制对照组10分钟后即见冠脉流量下降，苦杏仁苷给药组(应用含苦杏仁苷的灌流液灌流)至实验末期(50、60分钟)冠脉流量才开始下降。若与赤芍提取液合用则可在60分钟观察期内维持冠脉流量不变；苦杏仁苷对心脏收缩频率及收缩力基本无影响。
结论随灌流时间的延续，心脏冠脉流量逐渐降低，给予苦杏仁苷可在较长时间内维持大鼠离体心脏冠脉流量、心缩力及收缩频率保持不变。(表5)表5苦杏仁苷等对大鼠离体灌流心脏冠脉流量的影响
注*与给药前比较P＜0.05**与给药前比较P＜0.01(三).治疗急性胰腺炎1.对家兔实验性急性胰腺炎的保护作用应用家兔重型急性胰腺炎(SAP)模型证明，抑酶注射液(YHI)及苦杏仁苷合并静脉注射(1g/kg，溶于10mL生理盐水中给予)，有增加家兔存活时间、和五天存活率的趋势(对照组33.3％；治疗组83.3％)。药物使动物血清淀粉酶明显下降(表6)。胰组织微循环明显改善(图7)，并使SAP严重性指标IL-6明显低于对照组(表7)。病理检查结果也显示白细胞浸润、脂肪坏死、出血等指标均较对照组为轻(表8)。实验提示，YHI与苦杏仁苷联合应用对家兔SAP有保护作用。
表6抑酶注射液(YHI)及苦杏仁苷对重症急性胰腺炎家兔血清淀粉酶(U/L)的影响(x±s)
**与SAP前比较P＜0.01；*与AP前比较P＜0.02；()动物数〔〕存活数表7YHI及苦杏仁苷对SAP家兔血清IL-6水平的影响(x±s)
白细胞介素-6单位U/mL〔〕动物数*与对照组比较P＜0.05表8抑酶注射液(YHI)及苦杏仁苷对重症急性胰腺炎家兔病理变化的影响
苦杏仁苷是经正交实验证明对肠血流及氧耗作用最强的药物，后经实验证实对胰腺血流及氧耗亦有较好的影响。本实验用抑酶注射液与苦杏仁苷合用治疗家兔急性重型胰腺炎，获得满意的结果，这和它们抑制胰酶，改善胰腺血液循环有关。(表8)2.机制分析(1)对白细胞粘附的影响①苦杏仁苷对大鼠活体微循环的影响目的观察苦杏仁苷对大鼠肠系膜活体微循环的影响。
方法大鼠麻醉后开腹，找出近结肠部空肠系膜铺于特制的保温鼠版上，进行显微镜观察。将观察到的毛细血管后静脉微循环记录于录像带留作分析。苦杏仁苷尾静脉注射(2ml/kg)，重型急性胰腺炎(SAP)应用胰管注射牛磺酸钠法引起。
结果SAP使微循环各项指标(白细胞滚动数、粘附数、平均血流速度、和壁切率)明显恶化，于AP造模时给予苦杏仁苷可防止微循环障碍结论苦杏仁苷可降低大鼠SAP时的白细胞滚动及粘附数增加，能增加血液流速及壁切率。(表9)表9苦杏仁苷对SAP大鼠肠系膜活体微循环的影响(x±s)
注仅AP后0min及10min壁切与AP前比较，P＜0.05，()动物数②苦杏仁苷对急性重型胰腺炎(SAP)大鼠胰腺、肺白细胞聚集的影响目的对实验性SAP大鼠胰腺、肺的白细胞聚集进行定量研究。
方法SAP造模方法同①，造模前经颈静脉注入99mTc标记的白细胞，记录SAP后胰腺、肺的放射性，测量各脏器髓过氧化物酶(MPO)活性，进行白细胞聚集定量，并观察组织病理改变。
结果SAP大鼠3小时时胰腺、肺白细胞聚集明显增加，并逐渐增多。苦杏仁苷能明显抵制白细胞在胰腺、肺的聚集。
结论苦杏仁苷通过抑制白细胞内皮细胞粘附，减少白细胞在组织的聚集，从而对胰外脏器起保护作用。(表10)表10SAP大鼠肺组织放射量变化(％ID/G)
与SAP组、SAP+丹参组相比*P＜0.05，**P＜0.01，③苦杏仁苷对SAP大鼠CD11b/CD18表达的影响目的研究苦杏仁苷对SAP大鼠CD11b/CD18表达的影响。以探讨其调节白细胞募集的机理。
方法将大鼠随机分为模型组、治疗组。治疗组在引发SAP后经颈静脉输入苦杏仁苷0.1ml/100g，治疗后1、3、6及24小时处死动物，取肺及胰腺组织标本，免疫组化法测定CD118/CD18表达。
结果各组胰腺组织中均未测出活性，于模型组动物见SAP后3小时肺表达增加，治疗组动物治疗后1小时见肺CD11b表达明显下降，3、6、12小时进一步降低。
结论苦杏仁苷可使SAP大鼠升高的肺CD11b/CD18表达明显降低。推论认为其调节白细胞在组织中的募集至少与粘附分子CD11b/CD18表达有关(表11、12)。
表11各组动物肺组织CD11b表达(阳性细胞/视野)
**与SAP组、SAP+丹参组相比P＜0.01；★与前一时间段相比P＜0.05；★★与前一时间段相比P＜0.01；※与SAP组、SAP+丹参组相比P＜0.05；※※与SAP组、SAP+丹参组相比P＜0.01。
表12各组动物肺组织CD18表达(阳性细胞/视野)
同上④苦杏仁苷对大鼠肺微血管内皮与白细胞粘附率的影响目的观察苦杏仁苷对细胞因子诱发的体外培养大鼠肺微血管内皮与白细胞粘附的影响。
结果表明肺微血管内皮细胞与含肿瘤因子及IL-1β培养基共同孵育后，可显著增加白细胞与内皮细胞的相互粘附作用。在培养基中加入苦杏仁苷或苦杏仁苷含药血清后，粘附率明显下降。
结论抑制白细胞内皮细胞的过度粘附是苦杏仁苷重要的作用机理之一。(表13)表13大鼠肺微血管内皮与白细胞粘附率
*与正常对照组相比P＜0.05**与正常对照组相比P＜0.01△△与相应模型组相比P＜0.01▲▲与苦杏仁苷组相比P＜0.01(2)对血清一氧化氮的影响目的NO是重要的血管活性因子，但其过度升高也对血运不利。本实验于急性胰腺炎大鼠观察了苦杏仁苷对血清一氧化氮(NO)浓度的影响。
方法应用胆管内逆行注射牛磺酸钠的方法引起大鼠急性胰腺炎，收集血标本并用NO测定试剂盒测定治疗前后血清NO浓度。
结果苦杏仁苷能使之明显降低。
结论苦杏仁苷急性胰腺炎时大鼠血清NO的过度升高有降低作用。(表14)表14苦杏仁苷对急性胰腺炎大鼠血清NO浓度的影响(x±s，μmol/L)
注与胰腺炎前比较，*p＜0.05，**p＜0.01(四)促进伤口愈合缺血是伤口愈合过程中的重要不利影响因素，本实验应用兔耳缺血皮肤切口模型对苦杏仁苷对伤口愈合的作用进行了研究。
模型及方法家兔12只，麻醉后将一侧兔耳脱毛，按WU氏法制作一侧耳部缺血模型。再于该耳侧面作一5cm、垂直的、深至软骨的外科缺口，用5#丝线缝合。术后3、5、7、10、14及28天分别测定紧邻切口边缘的皮肤微循环(激光多普勒血流计法)及皮下组织氧分压(组织测氧计法)，于第28天取切口皮肤，仔细切去脂肪，应用三段8mm宽的皮片以简易法测定组织段列强度。
结果实验证明苦杏仁苷可改善皮下组织氧分压，增加皮肤组织微循环血流，使切口愈合加快，提高切口断列强度。
1.一般情况，缺血兔耳对照组至12天仍未恢复皮肤正常颜色，而苦杏仁苷组于第10天皮肤由紫转微红色。
2.皮下组织氧分压(PO2)致缺血后对照组明显降低，10天时稍有恢复。14-28天仍低于操作前，治疗组于第7天开始恢复，至10天时基本恢复正常。(表15)
3.微循环检查两组致缺血模型后均见皮肤微循环明显降低，对照组至术后10天仍未恢复，而治疗组则于术后10天明显恢复，至14天时基本恢复正常。(表16)4.切口断裂强度第28天时治疗组切口断裂强度明显高于对照组。(表17)结论苦杏仁苷有益于缺血皮肤切口的愈合。
表15皮肤组织氧分压(PO2)变化(x±s)
*与治疗前比较P＜0.05表16兔耳皮肤微循环血流变化(x±s)
*与治疗前比较P＜0.05表17皮肤切口断裂强度(x±s)
*与对照组比较P＜0.05本发明制备的苦杏仁苷，经天津市中西医结合急腹症研究所病理生理研究室、天津市中西医结合急腹症研究所药物研究室所作的毒性试验报告如下。
一.苦杏仁苷急性毒性试验
1.实验方法预实验结果显示，最大浓度苦杏仁苷一般无致死性，故采用最大浓度、最大容积给药法。并证明苦杏仁苷最大溶解度为19％。
取健康昆明种小鼠20只，雌雄各半。实验日每只小鼠经尾静脉注射19％苦杏仁苷0.5ml，连续观察七天。
药物由本所药物研究室制备，临用前用生理盐水配制。
2.实验结果给药后即刻未见动物有呼吸困难、抽搐、大小便失禁等急性中毒症状，动物毛光滑、活动自如，有探究反射。七天观察过程中动物食欲良好，能自然进食、进水，未见呕吐、腹泻现象，七天末动物体重增加(给药前平均27.05±1.克，给药后平均30.9±1.91克)。七天全部观察过程中无任何动物死亡。
3.结论小鼠对苦杏仁苷的最大耐受剂量为19％，0.5ml。按小鼠平均体重为25克/只计算，总给予药量为3.8g/kg，一次给予(约5秒内注射完毕)。临床推荐用量为3％、2ml/kg/h，即2.7×10-3ml/kg/5sec，也就是8.3×10-5g/kg。因此本次实验所得小鼠最大耐受量相当临床推荐用量的45783.13倍。(以上为粗略计算，未将连续输入药物的蓄积作用估计在内。
二.苦杏仁苷长期毒性试验(一)动物和材料1.动物健康wistar大鼠(清洁级)80只，购自军事医学科学院四所，体重250克左右。试验共分4组，每组20只，雌雄各半。试验前观察一周，记录食量及体重。
2.试验药物苦杏仁苷，白色粉末，由本所药物研究室制备，试验前以生理盐水配成溶液。
(二)试验方法1.试验分组试验共分四组，即空白组9(不加处理)、对照组(生理盐水组)、高剂量组(9％苦杏仁苷)、低剂量组(3％苦杏仁苷)。
2.给药方法后三组动物每天分别经腹腔注射生理盐水、苦杏仁苷各1ml，连续两周。
3.观察指标每天观察饮食、二便、毛发及活动情况。隔日测量体重。试验末将大鼠断头处死，取血标本测定肝、肾功能和血象变化，并取心、肝、脾、肺、肾、睾丸及卵巢组织标本进行病理组织检查，称重计算脏器系数。
(三)试验结果1.血象给药后14天大鼠红细胞计数(RBC)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白(HGB)、细胞比积(HCT)、平均细胞容积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)及平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)与空白组比较均无明显差别，唯血小板计数(PLT)有变化，低剂量组明显升高(827±89.8vs 670±174×109/μl，p＝0.01)，但生理盐水组也比空白组升高(805.4±88.92vs 670±174×109/μl，p＝0.038)，因此可能为偶然变化。(表18、19)2.肝功能腹腔内连续注射苦杏仁苷两周对大鼠肝功能无毒性作用，试验末各组可见谷-丙转氨酶降低，包括生理盐水组(p＜0.05)、总蛋白及白蛋白升高。总胆红素无变化。(表20)3.肾功能腹腔内连续注射苦杏仁苷两周对大鼠肾功能无任何毒性作用，血尿素氮及肌酸酐与空白组动物比较无明显差别。(表21)4.体重苦杏仁苷腹腔注射两周后大鼠体重明显增加，生理盐水组动物体重也增加，唯对照组不明显，但也有增加趋势。(表22)5.脏器重量和脏器系数各组间的各脏器系数无明显差别。(表23)表21.苦杏仁苷长期注射对大鼠肾功能的影响
注Urea尿素；Cr肌酸酐表22.苦杏仁苷长期注射对大鼠体重的影响(克)
P值试验前后比较表18苦杏仁苷长期注射对大鼠血象的影响
注RBC红细胞计数；WBC白细胞计数；HGB血红蛋白；PLT血小板表19苦杏仁苷长期注射对大鼠血象的影响
注HCT血球比积；MCV平均细胞容积；MCH平均红细胞血红蛋白量；MCHC平均红细胞血红蛋白浓度表20苦杏仁苷长期注射对大鼠肝功能的影响
注ALT丙氨酸转氨酶；TP总蛋白；ALB白蛋白；T-BIL总-胆红素表23苦杏仁苷长期注射对大鼠心脏系数的影响(x±s)
6.病理组织检查结果空白组、生理盐水组及苦杏仁苷低和高剂量组动物之心、肝、脾、肾和生殖腺(睾丸或卵巢)均无任何病理改变。肺泡内出血(可能系断颈处死时吸入的结果)、轻度间质细胞增生、肺泡间隔增宽、组织实变等在各组均不同程度地存在，因此认为是动物本身的问题，不是苦杏仁苷的慢性毒性作用。
四.结论苦杏仁苷连续腹腔注射，1ml/d.(3％或9％)，共2周，对大鼠未产生慢性毒性作用*。
*苦杏仁苷推荐临床使用剂量为2ml/kg/h(目前仍为实验用剂量，进行临床试验治疗时还须进一步推敲)本次使用慢性毒性试验的剂量为1ml一次注入，因此剂量可能偏大。肺病理检查所见轻微异常或许与此有关。输液剂量与一次注入剂量的换算方法尚不十分明确。慢性毒性试验所应用的剂量由于可能偏大，所得试验结果(无毒性作用)因而更可靠。
权利要求
1.苦杏仁苷在制备促进脑血液循环作用的苦杏仁苷制剂中的应用。
2.苦杏仁苷在制备治疗心力衰竭的苦杏仁苷制剂中的应用。
3.苦杏仁苷在制备治疗急性胰腺炎的苦杏仁苷制剂中的应用。
4.苦杏仁苷在制备促进伤口愈合的苦杏仁苷制剂中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种苦杏仁苷在制备促进心脑胰及伤口血液循环的苦杏仁苷制剂中的应用，属于含有机有效成分的医药配制品的医药用途。本发明提供了一种使用苦杏仁苷预防和治疗因血粘稠度升高所致的脑缺血；对心脏功能衰竭有保护作用；用于治疗急性胰腺炎；增加皮肤组织微循环血流，促进伤口愈合的苦杏仁苷注射用粉制剂的医药用途，并具有显著的效果。
文档编号A61P9/00GK1989973SQ20061017029
公开日2007年7月4日 申请日期2003年12月24日 优先权日2003年12月24日
发明者吴咸中, 伍孝先, 赵连根, 王兴民, 刘俊红, 陈玉玲, 刘大全, 李棣华, 崔乃强 申请人:天津市南开医院