专利名称：姜黄提取物及其制备方法、药物组合物和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种姜黄提取物及其制备方法、药物组合物和用途，属于药物技术领域。
背景技术：
姜黄(Curcuma longa L.)为姜科植物姜黄的干燥根茎，是西南地区特有常用药，具有悠久的药用历史。根据苗族民间用药经验，其根茎可药用，具有破血行气、通经止痛等功能。姜黄既可单用，也可入复方。在苗族民间，姜黄与黄柏90、生大黄、白芷、天花粉、厚朴、陈皮、甘草、生姜黄、生南星等配伍，主治风湿痹阻引起的肌肉酸痛、关节红肿疼痛、屈伸不利等症。
目前，姜黄的提取一般采用的是常规的水提醇沉法或醇提法，但对于姜黄提取物的药理学研究尚未见报道。申请人经过广泛深入的研究发现，通过将姜黄用有机溶剂、含水有机溶剂或水提取得到的姜黄提取物具有抑制胶原和肾上腺素引起的血小板聚集作用、抗炎作用、降血脂作用、抗肿瘤作用、保护胃黏膜作用、抗早孕、利胆作用。并显示出良好的治疗心血管系统疾病、妇科疾病、外科疾病和自身免疫性疾病的作用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种姜黄提取物及其制备方法、药物组合物和用途。本发明姜黄提取物具有显著的抑制胶原和肾上腺素引起的血小板聚集作用、抗炎作用、降血脂作用、抗肿瘤作用、保护胃黏膜作用、抗早孕、利胆作用，特别是对内科胸胁疼痛；经闭、痛经、癥积；跌打损伤、瘀血肿痛、痈疡疮癣；上肢风湿痹痛具有治疗作用。
本发明是这样实现的姜黄提取物的制备方法为将新鲜采集的姜黄根茎晾干粉碎，得到姜黄粗粉，然后用有机溶剂、含水有机溶剂或水加热回流或渗滤提取2～4次，提取液浓缩干燥后得到姜黄提取物。
所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮、三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙醚、石油醚或汽油。
具体的说，姜黄水提取物的制备方法为取姜黄适量，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至60℃测相对密度为1.30，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置过夜，取上清液减压浓缩至相对密度为1.25的稠膏，75℃减压干燥，即得。
姜黄醇提取物的制备方法为取姜黄适量，粉碎成粗粉，加8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，余液浓缩至相对密度为1.25的稠膏，减压干燥，即得。
按上述姜黄提取物制备方法提取得到的姜黄提取物。
由上述姜黄提取物组成的药物组合物包括作为活性成分的姜黄提取物和一种或多种药用载体或赋形剂。
本发明姜黄提取物用于制备治疗心血管系统疾病的药物。
所述的心血管系统疾病为内科胸胁疼痛。
本发明姜黄提取物用于制备治疗妇科疾病的药物。
所述的妇科疾病为经闭、痛经或癥积。
本发明姜黄提取物用于制备治疗外科疾病的药物。
所述的外科疾病为跌打损伤、瘀血肿痛或痈疡疮癣。
本发明姜黄提取物用于制备治疗自身免疫性疾病的药物。
所述的自身免疫性疾病为上肢风湿痹痛。
本发明姜黄提取物可单独或以药物组合物形式使用，因此还涉及含有作为活性成份的有效剂量的姜黄提取物以及常规药物赋形剂或辅剂的药物组合物。通常本发明药物组合物含有0.1-90％重量的姜黄提取物。药物组合物可根据本领域已知的方法制备。如果需要，可将姜黄提取物与一种或多种固体或液体药物赋形剂和/或辅剂结合，制成可作为人用的适当的施用形式或剂量形式。
本发明的姜黄提取物或含有它的药物组合物可以单位剂量形式给药，给药途径可为肠道或非肠道，如口服、肌肉、皮下、鼻腔、口腔粘膜、皮肤、腹膜或直肠等。给药剂型例如片剂、胶囊、滴丸、气雾剂、丸剂、粉剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、脂质体、透皮剂、口含片、检剂、膏剂、贴剂、注射剂、冻干粉针剂等。可以是普通制剂、缓释制剂、控释制剂及各种微粒给药系统。为了将单位给药剂型制成片剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体例如稀释剂与吸收剂，如淀粉、糊精、硫酸钙、乳糖、甘露醇、蔗糖、氯化钠、葡萄糖、尿素、碳酸钙、白陶土、微晶纤维素、硅酸铝等；湿润剂与粘合剂，如水、甘油、聚乙二醇、乙醇、丙醇、淀粉浆、糊精、糖浆、蜂蜜、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶浆、羧甲基纤维素钠、紫胶、甲基纤维素、磷酸钾、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解剂，如干燥淀粉、海藻酸盐、琼脂粉、褐藻淀粉、碳酸氢钠与枸橼酸、碳酸钙、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等；崩解抑制剂，如蔗糖、三硬脂酸甘油酯、可可脂、氢化油等；吸收促进剂，如季铵盐、十二烷基硫酸钠等；润滑剂，如滑石粉、二氧化硅、玉米淀粉、硬脂酸盐、硼酸、液体石蜡、聚乙二醇等。还可以将片剂进一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、肠溶包衣片，或双层片、多层片。为了将给药单元制成丸剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体例如稀释剂与吸收剂，如葡萄糖、乳糖、淀粉、可可脂、氮化植物油、聚乙烯吡咯烷酮、高岭土、滑石粉等；粘合剂如阿拉伯胶、黄蓍胶、明胶、乙醇、蜂蜜、液糖、米糊或面糊等；崩解剂，如琼脂粉、干燥淀粉、海藻酸盐、十二烷基磺酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素等。为了将给药单元制成检剂，可以广泛使用本领域公知的各种载体例如聚乙二醇、卵磷脂、可可脂、高级醇、高级醇的酯、明胶、半合成甘油酯等。为了将给药单元制成胶囊，将有效成分姜黄提取物与上述的各种载体混合，并将由此得到的混合物置于硬的明胶囊或软胶囊中。也可将有效成分姜黄提取物制成微囊剂，混悬于水性介质中形成混悬剂，亦可装入硬胶囊中或制成注射剂应用。为了将给药单元制成注射用制剂，如溶液剂、乳剂、冻干粉针剂和混悬剂，可以使用本领域常用的所有稀释剂，例如水、乙醇、聚乙二醇、1，3-丙二醇、乙氧基化的异硬脂醇、多氧化的异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯等。另外，为了制备等渗注射液，可以向注射用制剂中添加适量的氯化钠、葡萄糖或甘油，此外，还可以添加常规的助溶剂、缓冲剂、pH调节剂等。
此外，如需要，也可以向药物制剂中添加着色剂、防腐剂、香料、矫味剂、甜味剂或其它材料。
本发明姜黄提取物的给药剂量取决于许多因素，例如所要预防或治疗疾病的性质和严重程度，患者或动物的性别、年龄、体重及个体反应，所用的具体化合物，给药途径及给药次数等。上述剂量可以单一剂量形式或分成几个，例如二、三或四个剂量形式给药。
为了验证本发明制备方法的合理性，申请人对姜黄的提取工艺进行了试验研究和筛选，具体如下一、姜黄水提取工艺的研究影响煎煮的主要因素有药材粉碎粒度、煎煮次数、加水量及煎煮时间等，申请人经过研究发现通过以下方法优选出的提取工艺可以认为是姜黄的最佳水提取工艺，所得的提取物疗效最好。
取姜黄药材适量，按下表1试验，以出膏率及姜黄的药理活性评分作为评价指标进行提取工艺的优选，结果见表2、表3表1姜黄提取工艺研究的因素水平表
表2姜黄提取工艺优选结果表
表3正交试验方差分析表
注F0.05(2，2)＝19.00研究结果表明各因素对姜黄水提取工艺影响大小的顺序为C＞B＞A＞D，其中B、C两个因素有显著性差异，B2＞B3＞B1，C2＞C3＞C1，因此，提取次数选2次，加水量选10倍；A、D两个因素没有显著性差异，但考虑到生产实际，选择粗粉，以方便过滤提取液，煎煮时间第一次定为2小时，第二次定为1.5小时。
因此，姜黄水提取物的最佳提取工艺为取姜黄适量，粉碎成粗粉，加10倍量的水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液。
姜黄药材经水提浓缩后，除杂相当关键，申请人采用不同浓度的乙醇进行醇沉以除去杂质，方法如下取姜黄粗粉，按优选的水提煎煮条件煎煮提取，减压浓缩(60-75℃，-0.08Mpa)至相对相密度1.30(60℃)，摇匀，量取一定量浓缩液，加乙醇，使乙醇含量为60％、70％、80％，醇沉24小时，取上清液减压回收乙醇，挥干，减压干燥(65-80℃，-0.08Mpa)，称醇提物重量；醇沉物减压干燥(65-80℃，-0.08Mpa)，称杂质重量。测定醇提物的药理活性，试验结果见表4。
表4除杂工艺研究结果表
研究结果表明醇沉浓度为70％时，除去的杂质最多，同时药理活性最高，因此，选用70％的乙醇浓度作为去除杂质的浓度。
浓缩工艺的研究申请人考察了减压浓缩和常压浓缩两种方法，经过优选发现，减压浓缩和常压浓缩两种方法比较，减压浓缩较常压浓缩快，节约时间，且药理活性比常压浓缩高，因此，选择减压浓缩作为本提取物制备的浓缩方法。
干燥工艺申请人研究发现，干燥温度对提取物的药理活性有一定的影响，本提取物在75℃减压干燥的药理活性最好，因此，选择75℃减压干燥作为本提取物的干燥方法。
二、姜黄醇提取工艺的研究影响提取的主要因素有提取次数、溶媒用量、溶媒浓度及提取时间等，申请人经过研究发现通过以下方法优选出的提取工艺可以认为是姜黄的最佳醇提取工艺，所得的提取物疗效最好。
取姜黄药材适量，粉碎成细粉，按表5进行试验，结果见表6、表7表5姜黄醇提取工艺研究的因素水平表
表6姜黄醇提取工艺优选结果表
表7正交试验方差分析表
注F0.05(2，2)＝19.00研究结果表明各因素对姜黄醇提取工艺影响大小顺序为C＞B＞A＞D，通过直观分析，选择C2、B2、A2、D2作为最佳提取工艺，即姜黄适量，粉碎成粗粉，加8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，余液浓缩至相对密度为1.25的稠膏，减压干燥，即得姜黄醇提取物。
为了确保本发明的效果，申请人对所述姜黄提取物进行了生物活性实验，具体如下观察指标姜黄提取物对小白鼠的镇痛作用(扭体法)、姜黄提取物对体外大鼠全血血小板聚集的影响、对高脂血症小鼠血脂的影响、鸡蛋清致大白鼠足跖肿胀实验(抗炎作用)、对大鼠肝匀浆过氧化脂质作用的影响。
该生物活性实验所采用的姜黄提取物均为用乙醇作为提取溶剂得到的提取物。
1.姜黄提取物对小白鼠的镇痛作用(扭体法)方法及结果昆明种小白鼠40只，体重18-22g，♀♂各半，将小白鼠腹部的毛剪掉，随机分为2组，每组20只。给药组灌服姜黄提取物0.5g/10g，对照组灌服等量生理盐水。给药后30min，各鼠腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2ml/只。观察并记录注射醋酸溶液后15-30min内出现扭体反应的次数及时间。计算姜黄提取物的镇痛百分率。结果见表8。
结果表明姜黄提取物对醋酸所致小白鼠扭体反应有明显的抑制作用。
表8对醋酸所致小白鼠扭体反应的影响(x±s)
2.姜黄提取物对体外大鼠全血血小板聚集的影响方法及结果取体重200-250g大白鼠，用3％戊巴比妥钠(0.1ml/100g)腹腔注射麻醉后，从腹主动脉取血，注入盛有3.8％枸橼酸钠溶液的试管中(血与抗凝剂之比为9∶1)，轻轻摇匀后，用微量加样器吸取抗凝血0.5ml置平底玻璃试管中，再加入0.5ml台氏液作1∶1稀释，混匀，放入小磁棒，将试管置于全血血小板聚集仪的预温孔内，5-6min后进行测试，测试时把电铂电极插入试管中，开启/搅拌0！按下/测量键0调零，按下/幅度0键调幅度。给药管将20μl药液加入抗凝管中混匀调零(对照管加入20μl生理盐水)，再加入ADP10μl，记录5min的电阻值(欧姆)。结果见表9表9姜黄提取物对体外大鼠全血血小板聚集的影响(x±s)
结果表明姜黄提取物具有显著的抑制血小板聚集作用。
3.姜黄提取物对高脂血症小鼠血脂的影响方法与结果动物高脂血症模型制备取1-2d新鲜鸡蛋，去除蛋清，加生理盐水搅拌均匀配成75％蛋黄乳液，于末次用药后2h除对照组外，每鼠ip0.5ml。
取小鼠40只，随机分为空白对照组、高脂模型组、血脂康组、以及姜黄提物组，每组10只。各给药组每天灌胃给药1次，对照组和模型组给予等体积的蒸馏水，连续10d。于末次给药后2h，除对照组外，其余各组小鼠均腹腔注射75％蛋黄乳液0.5ml/只造成实验性高脂血症。腹腔注射蛋黄乳液后禁食18-20h，摘除眼球取血，按试剂盒方法检测TC、TG的含量。结果见表10结果表明姜黄提取物具有良好的降血脂作用。
表10姜黄提取物对小鼠高脂血症的影响
注**P＜0.01*P＜0.054.姜黄提取物对鸡蛋清致大白鼠后足跖肿胀的影响方法及结果取Wistar大白鼠30只，称重，用苦味酸标记，分为3组，将大鼠右后肢用手固定，在其踝关节处用圆珠笔作一标志，动物的右后肢浸入足容量测量装置内，浸入深度以标志处为界。从该装置的刻度吸管处所读取的数值即为动物右足的正常体积。连续测两次，求其平均值。给3组动物分别灌胃以下药物姜黄提取物制得的溶液，氢化可的松，生理盐水，容量均为1ml/100g。30min后在每鼠右后肢掌心向踝关节方向进针，皮下注射10％鸡蛋清液0.1ml/只。其后每0.5小时分别测定鼠右后肢的容积，连续3次。
实验结果(表11)表明，姜黄提取物具有良好的抗炎作用(比氢化可的松强)。
表11姜黄提取物对鸡蛋清致大白鼠后足跖肿胀的影响
注**表示与生理盐水组比较差异极显著(P＜0.01)5.姜黄提取物对大鼠肝匀浆过氧化脂质作用的影响。
方法与结果取250-300g大白鼠称重后断头处死，取出肝脏，用滤纸吸去残血，剪成小碎块；称取5g，加生理盐水至100ml，用匀浆机制匀浆(8000-10000r/min)。将离心试管编号，取新鲜大鼠肝匀浆(50mg/ml)1.5ml分别加入离心试管内。实验管加入姜黄提取物溶液0.1ml，对照管加入生理盐水0.1ml，于37℃振摇温育1.5h，取出后加入1.5ml三氯醋酸(0.2g/ml)。另设空白对照管，温育前加入1.5ml20％三氯醋酸，同上述二种实验管同样振摇(此管作为光电比色计调零时用)。混匀后静置10min，离心50s-1(3000rpm)min。取上清液1.5ml，加1ml硫代巴比妥酸，沸水浴加热10min。冷却后在721分光光度计532nm波长比色测定。以四乙氧基丙烷为标准，计算每克湿肝组织过氧化脂质生成量。结果见表12表12姜黄提取物对大鼠肝匀浆过氧化脂质生成的影响
实验结果表明姜黄提取物对大鼠肝匀浆过氧化脂质生成量具有明显的抑制作用。
结论上述五个实验结果表明，姜黄提取物对醋酸致小鼠疼痛反应具有明显的抑制作用；具有明显的抑制血小板聚集作用；具有显著的降血脂作用；具有良好的抗炎作用；对大鼠肝匀浆过氧化脂质生成量具有明显的抑制作用。
具体实施例方式本发明的实施例1姜黄水提取物的制备取姜黄根茎干品10kg，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至60℃测相对密度为1.30，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置过夜，取上清液减压浓缩至相对密度为1.25的稠膏，75℃减压干燥，即得姜黄水提取物290g。
本发明的实施例2姜黄乙醇提取物的制备取姜黄根茎干品10kg，粉碎成粗粉，加8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，余液浓缩至相对密度为1.25的稠膏，减压干燥，即得姜黄乙醇提取物450g。
本发明的实施例3姜黄石油醚提取物的制备将姜黄根茎干品10kg粉碎后，用石油醚加热回流提取，每次用石油醚40L，提取3次，合并提取液，减压蒸发至干，得到石油醚提取物310g。
本发明的实施例4姜黄乙酸乙酯水溶液提取物的制备将姜黄根茎干品10kg粉碎后，用乙酸乙酯水溶液加热回流提取，每次用乙酸乙酯水溶液60L，提取2次，合并提取液，减压蒸发至干，得到乙酸乙酯水溶液提取物246g。
本发明的实施例5姜黄三氯甲烷提取物的制备
将姜黄根茎干品10kg粉碎后，用三氯甲烷渗滤提取，每次用三氯甲烷30L，提取4次，合并提取液，减压蒸发至干，得到三氯甲烷提取物233g。
本发明的实施例6含姜黄提取物的药物组合物1按下述配比称取原料姜黄醇提取物250g、植物油200g、土温-80 4g。用胶体磨混匀，压制成1000粒软胶囊。本制剂口服，每次4粒，一日3次，用于治疗内科胸胁疼痛等心血管系统疾病。
本发明的实施例7含姜黄提取物的药物组合物2按下述配比称取原料马齿苋120g、牡丹皮120g、鱼腥草150g、大黄炭100g、生黄芪120g、竹茹100g、小蓟炭100g、地榆炭120g、炒白扁豆120g、荠菜花120g、红藤150g、生甘草50g，加水煎煮二次，每次2小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20(60℃)，加乙醇至浓度为70％，静置过夜，取上清夜，浓缩，减压干燥，干膏与姜黄提取物100g混合后粉碎，加入淀粉等辅料适量，采用常规工艺压制成1000片。本制剂口服，每次2-4片，每日三次，用于治疗经闭、痛经或癥积等妇科疾病。
本发明的实施例8含姜黄提取物的药物组合物3按下述配比称取原料天花粉50g、黄柏50g、大黄30g、姜黄50g、白芷30g、厚朴30g、陈皮20g、甘草20g、苍术20g、天南星20g。以上药物共磨为散，临证应用时或用茶调，或用葱汁调，或用黄酒调，或用蜜调，或用板蓝根捣汁调，或麻油炸膏。用于治疗痈俎，发背，诸般疔肿，跌扑损伤，湿痰流毒，大头时肿，流疮，火丹，风热天疮，肌肤赤肿，干湿脚气，妇女乳痈，小儿丹毒等外科疾病。
本发明的实施例9含姜黄提取物的药物组合物4按下述配比称取原料威灵仙15g，木瓜30g，独活10g，牛膝10g，姜黄10g，桂枝10g，忍冬藤30g，当归20g，炙甘草10g。此方按传统汤剂制备方法制备汤液，每日1剂，头煎加水500mL，煎取药液200mL，二煎加水300mL，煎取药液100mL，两煎相混，分多次少量温服，一般服用7～21剂。用于治疗上肢风湿痹痛等自身免疫性疾病。
本发明的实施例10姜黄提取物单方制剂称取姜黄提取物200g、植物油156.8g、蜂蜡3.2g混匀，用胶体研磨机研磨均匀，用压制法罐装成软胶囊，制成1000粒，每粒0.4g。本制剂口服，一次4粒，一日3次。用于治疗血瘀气滞引起的心、腹、胸、胁痛及跌打损伤、风湿肩臂痛等。
权利要求
1.姜黄提取物的制备方法，其特征在于将新鲜采集的姜黄根茎晾干粉碎，得到姜黄粗粉，然后用有机溶剂、含水有机溶剂或水加热回流或渗滤提取2～4次，提取液浓缩干燥后得到姜黄提取物。
2.按照权利要求1所述姜黄提取物的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮、三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙醚、石油醚或汽油。
3.按照权利要求1或2所述姜黄提取物的制备方法，其特征在于取姜黄适量，粉碎成粗粉，加10倍量水煎煮2次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩至60℃测相对密度为1.30，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置过夜，取上清液减压浓缩至相对密度为1.25的稠膏，75℃减压干燥，即得姜黄水提取物。
4.按照权利要求1或2所述姜黄提取物的制备方法，其特征在于取姜黄适量，粉碎成粗粉，加8倍量75％的乙醇回流提取2次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，余液浓缩至相对密度为1.25的稠膏，减压干燥，即得姜黄醇提取物。
5.如权利要求1所述姜黄提取物制备方法提取得到的姜黄提取物。
6.如权利要求5所述的姜黄提取物组成的药物组合物，其特征在于包括作为活性成分的姜黄提取物和一种或多种药用载体或赋形剂。
7.如权利要求5所述的姜黄提取物用于制备治疗心血管系统疾病的药物。
8.按照权利要求7所述姜黄提取物的用途，其特征在于所述的心血管系统疾病为内科胸胁疼痛。
9.如权利要求5所述的姜黄提取物用于制备治疗妇科疾病的药物。
10.按照权利要求9所述姜黄提取物的用途，其特征在于所述的妇科疾病为经闭、痛经或癥积。
11.如权利要求5所述的姜黄提取物用于制备治疗外科疾病的药物。
12.按照权利要求11所述姜黄提取物的用途，其特征在于所述的外科疾病为跌打损伤、瘀血肿痛或痈疡疮癣。
13.如权利要求5所述的姜黄提取物用于制备治疗自身免疫性疾病的药物。
14.按照权利要求13所述姜黄提取物的用途，其特征在于所述的自身免疫性疾病为上肢风湿痹痛。
全文摘要
本发明提供了一种姜黄提取物及其制备方法、药物组合物和用途。姜黄提取物是将新鲜采集的姜黄根茎晾干粉碎，得到姜黄粗粉，然后用有机溶剂、含水有机溶剂或水加热回流或渗滤提取2～4次，提取液浓缩干燥后得到的。本发明姜黄提取物具有显著的抑制胶原和肾上腺素引起的血小板聚集作用、抗炎作用、降血脂作用、抗肿瘤作用、保护胃黏膜作用、抗早孕、利胆作用，特别是对心血管系统疾病，如内科胸胁疼痛；妇科疾病，如经闭、痛经、癥积；外科疾病，如跌打损伤、瘀血肿痛、痈疡疮癣；自身免疫性疾病，如上肢风湿痹痛具有治疗作用。
文档编号A61P9/00GK1931353SQ20061020092
公开日2007年3月21日 申请日期2006年9月27日 优先权日2006年9月27日
发明者周欣, 陈华国, 赵超, 李明 申请人:贵州师范大学