抑制nkt细胞的机能的糖脂衍生物作为有效成分的治疗剂的制作方法

专利名称：抑制nkt细胞的机能的糖脂衍生物作为有效成分的治疗剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及适用于下述疾病的含有新型糖脂或其可药用的水合物 或者溶剂合物的治疗药；所说的疾病包括多发性硬化症、重症肌无 力症、关节风湿病、少年性关节风湿病、原发性痛风、全身性红斑狼 疮、干燥综合征、硬皮病、结合混合结締组织病、胰岛素依赖型糖尿 病、特发性血小板减少性紫癜、桥本氏曱状腺炎、巴塞多氏病、恶性 贫血、阿狄森氏病、萎缩性胃炎、溶血性贫血、溃疡性结肠炎、克罗 恩病、自身免疫性肝炎、天疱疮、类天疱疮、血管炎综合征、自身免 疫性溶血性贫血、Goodpastures氏综合征、白塞氏病、类肉瘤病、器 官移植排异反应等慢性炎症性疾病以及支气管哞喘、特应性哞喘、特 应性皮炎、过敏性鼻炎、荨麻疹、花粉症、药物过敏、接触性皮炎等 过敏性疾病。
背景技术：
免疫系统能够识别本来自体和非自体的成分，对于非自体的成分， 通过免疫反应将其排除，而对于自体的成分，则诱导对其不产生免疫 反应，从而维持机体的稳态。另外，如果对自体成分不产生免疫反应 的维持出现障碍，免疫系统就会对自体发起攻击，成为一种病态，这 种病态是"自体免疫性疾病"，对于非自体的抗原(外来异物)引起 的免疫反应，由于过度的反应而使机体产生异常，由此形成的病态可 认为是"过敏性"疾病。
包括自体免疫性疾病在内的各种慢性炎症性疾病和过敏性疾病的 传统治疗方法，主要集中在糖皮质激素和称为免疫抑制剂的非特异性 免疫抑制疗法。但是，这些治疗法的副作用很大，因此迫切希望升发出一种自体抗原特异性免疫抑制剂。近年来，已经尝试了自体抗原的 多肽疗法，但是，多肽是一种富于多态性并与主要组织相适合的基因
复合体(MHC)，因此，对不同个体的差异很大，虽然有得到改善的病例， 但也发现加重的病例，最终的结果表明，多肽难以应用于临床。
NKT细胞是一种表现出NK细胞的标记(NKT受体)和T细胞抗原 受体(TCR)两方面作用的淋巴细胞，它能识别T细胞与主要组织适合 抗原(MHC)相结合的多肽，与此不同，它对在非多态性的CDld分子 中显示的糖脂则作为抗原来识别，当存在来自TCR的刺激时，就能在 极短的时间内产生大量的细胞因子。
例如，由式(II):
表示的oc-半乳糖基神经酰胺(a-GC)最初曾被作为一种能使显 示CDld约束性的NKT细胞活化的糖腊配体来报导，这表明已经发现它 具有抗肿瘤活性和免疫赋活作用(参照T. Kawano等、Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1998， 95， 5690.以及日本专利公报第3088461号)。另 外，本发明人等曾报导，通过使ot-GC的鞘氨醇碱的碳链长度缩短而 成的，
由式(III):
<formula>formula see original document page 6</formula>表示的0CH能够促进Th2型细胞因子的产生，能使Thl/Th2的免 疫平衡偏向于Th2，因此对于多发性硬化症的动物模型小鼠实验的 自身免疫性脑脊髓炎(EAE)、以及慢性关节风湿病的动物模型胶原 诱发关节炎(CIA)显示出明显的有效性(参照K. Miyamoto等、Nature 2001， 413， 531.， A. Chiba等、Arthritis Rheum. 2004， 50, 305.， T. Yamamura等、Curr. Top. Med. Chem. 2004， 4， 561.以及 WO2003/016326号公报)。即，由式(III )表示的OCH对上述自体免 疫性疾病动物模型所起作用的发现，可以认为是基于由作为担负免疫 细胞的NKT细胞导致的Th2型的抑制性细胞因子产生的所谓"活化 抑制"作用而达到的。
另一方面，曾有报告称，NKT细胞对于关节炎等自体免疫性疾病 模型或支气管哮喘模型来说是作为 一种与病态恶化有关的效应细胞起 作用的(参照O. Akbari等、Curr. Opin. Immunol. 2003， 15， 627.)。 因此可以认为，如果能对这种病态确立一种抑制NKT细胞机能的药物 疗法，就不仅能够预防和治疗自体免疫性疾病，而且也可以治疗过敏 性疾病。但是，迄今为止，尚不知道任何以对NKT细胞的机能抑制作 为作用机理的有效的药物治疗法。

发明内容
在以上背景下，本发明的目的在于，提供通过抑制NKT细胞的机 能，对于已知与慢性炎症性疾病、过敏性疾病以及NKT细胞发生病态 恶化有关的疾病有效的治疗药。
本发明的目的还在于，提供含有作为CDld约束性的NKT细胞的配 体起作用、而几乎不诱导NKT细胞产生IL-4、 IFN-Y等细胞因子、可 用作上述药物的新的糖脂(I)及其可药用的水合物或者溶剂合物作为 有效成分的治疗药。
本发明人等曾经合成了迄今为止具有控制自身免疫应答能力的糖 脂，该糖脂可用于开发自体免疫性疾病的治疗药(WO2003/016326; WO2004/072091; Karl 0. A. Yu等、Proc. Natl. Acad. Sci. USA,2005, 102， 3383 )。其中，在糖脂的鞘氨醇碱的碳链长度比oc-GC( II) 还要长的衍生物中，本发明人等惊人地发现了对抗体诱导性关节炎的 抑制效果很强的，由式(I):
<formula>formula see original document page 8</formula>
表示的糖脂衍生物(以下称为SGL ( Suppressor glycolipid))， (式中，W表示吡喃醛糖残基；R2表示氢原子或者羟基；A表示-CH2-、 - CH(0H) -(^2-或者-0(^012-; x表示13 16的整数；y 表示0~25的整数)。
由式(I)表示的SGL虽然稍微诱导NKT细胞的增殖反应和IFN-Y等细胞因子的产生，但通过事先给药就能显著抑制对于NKT细胞的 再刺激的反应性(免疫不应答)。曾有报告称，抗体关节炎模型能使 不存在NKT细胞的小鼠的关节炎的发病减轻(J. Exp. Med. 2005， 201， 41-7; Arthritis Rheum. 2005， 52， 1941),而采用本发明中所述 的糖脂，可以强烈地抑制其关节炎的发病。进而，由式(I)表示的 SGL，对于支气管哞喘的动物模型，抑制以嗜酸性粒细胞为主体的对于 呼吸道的细胞浸润，抑制肺泡清洗液中的IL-5、 IL-13等细胞因子产 生，抑制呼吸道过敏性。即，本发明人等发现，由式(I)表示的SGL 是可用于制备能够有效地抑制自身抗体惹起的炎症反应、自身免疫性 关节炎等自体免疫性疾病、支气管哞喘等过敏性疾病的治疗药的糖脂 衍生物，从而达到本发明的目的。


下面参照

本发明。
图1为示出合成糖脂衍生物对由于引入K/BxN血清所导致的关节炎的抑制效果(临床评分)的曲线图。
图2为示出合成糖脂衍生物对于不存在NKT细胞的Jocl8基因缺 损的小鼠由于引入K/BxN血清而诱发的关节炎所起到的抑制效果(临 床评分)的曲线图。
图3为示出合成糖脂衍生物对于胶原诱导性关节炎的抑制效果 (临床评分)的曲线图。
图4为示出本发明化合物对NKT细胞的影响的曲线图。
图5为示出本发明化合物在事先给药时对NKT细胞的影响的曲线图。
图6为示出本发明化合物在支气管哮喘模型中对于肺泡清洗液中 的细胞浸润的抑制效果的曲线图。
图7为示出本发明化合物在支气管哮喘模型中对于肺泡清洗液中 的细胞因子的抑制效果的曲线图。
图8为示出本发明化合物在支气管哮喘模型中对于肺病病理所观 察到的抑制效果的曲线图。
图9为示出本发明化合物在支气管哮喘模型中对于肺泡清洗液中 的细胞因子的抑制效果的曲线图。
具体实施例方式
在本发明中，作为慢性炎症性疾病，可列举出例如，多发性硬化 症、重症肌无力症、关节风湿病、少年性关节风湿病、原发性痛风、 全身性红斑狼齊、干燥综合征、硬皮病、结合混合结締组织病、胰岛 素依赖型糖尿病、特发性血小板减少性紫癜、桥本氏曱状腺炎、巴塞 多氏病、恶性贫血、阿狄森氏病、萎缩性胃炎、溶血性贫血、溃疡性 结肠炎、克罗恩病、自身免疫性肝炎、天疱疮、类天疱疮、血管炎综 合征、自身免疫性溶血性贫血、Goodpastures氏综合征、白塞氏病、 类肉瘤病、器官移植排异反应等。另外，作为本发明中的过敏性疾病， 可列举出例如，支气管哮喘、特应性哮喘、特应性皮炎、过敏性鼻炎、 荨麻疹、花粉症、药物过敏、接触性皮炎等。在本发明的由式(I):
<formula>formula see original document page 10</formula>(I)
(式中，R1、 R2、 A、 x和y与上述定义相同)表示的化合物中， 作为由r表示的吡喃醛糖残基的优选例，可列举出oc-D-葡糖基、oc -D-半乳糖基、a-D-甘露糖基、D-葡糖基、p-D-半乳糖基、P-D-甘露糖基、2-脱氧-2-氨基-a-D-半乳糖基、2-脱氧-2-氨基-P -D-半 乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-a-D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-P-D-半乳糖基、口匕°， 乂P—D-7VI/卜口匕°， 7'二A、 P-D-4卜、》》等，特别优选为oc-D-葡糖基、a-D-半乳糖基、oc-D-甘露糖基、2-脱氧-2-氨基-a -D-半乳糖基、2-脱氧-2-乙酰氨基-a -D-半乳糖基等a取代体。R2表示氢原子或者羟基，优选为氢原子。A表 示-CH2 - 、 - CH (OH) - CH2 -或者-CH=CHCH2 -，优选为-CH2 -或者 -CH (OH) - CH2 -，特别优选为-CH(OH) - CH2-。 x表示13 16的整 数，优选为14~16的整数。n表示0~25的整数，优选为15~25,更 优选为18~25，最优选为20~25的整数。
在上述由式(I)表示的化合物中，可列举出下面特别优选的例子。 即，可列举出2-二十六酰氨基-l一0- ot -D-他喃半乳糖基-D-核糖-l，3，4-二十二烷三醇、2-二十六酰氨基-l-O- a -D-p比喃 半乳糖基-D -核糖-1， 3， 4 - 二十一烷三醇、2 - 二十六酰氨基-1-0 -oc - D-吡喃半乳糖基-D-核糖-l，3，4-二十烷三醇、2-二十六 酰氨基-1-0- a-D -吡喃半乳糖基-D -核糖-1， 3， 4 -十九烷三 醇、2-二十五酰氨基-1-0 - a - D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1， 3,4-二十二烷三醇、2-二十五酰氨基-1 - 0 - a -D-吡喃半乳糖基- D -核糖-1， 3, 4 - 二十一烷三醇、2 - 二十五酰氨基-1 - 0 - a -D -吡喃半乳糖基-D -核糖-1， 3， 4 - 二十烷三醇、2 - 二十五酰氨基 -1-0 - a -D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1， 3，4-十九烷三醇、2-二十四酰氨基-l-O - oc - D-吡喃半乳糖基-D-核糖-l，3，4-二 十二烷三醇、2-二十四酰氨基-1 - 0 - a -D-吡喃半乳糖基-D-核 糖-1，3，4-二十一烷三醇、2-二十四酰氨基-1-0 - ct - D-吡喃半 乳糖基-D -核糖-1, 3， 4 - 二十烷三醇、2 — 二十四酰氨基-1 - 0 - a
- D -吡喃半乳糖基-D -核糖-1， 3， 4 -十九烷三醇、2 — 二十七酰氨 基-l-O - a -D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1，3，4-二十二烷三醇、 2-二十七酰氨基-1-0 - oc -D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1， 3，4-二十一烷三醇、2-二十七酰氨基-1-0- ot -D-吡喃半乳糖基-D -核糖-1，3，4-二十烷三醇、2-二十七酰氨基-1-0- oc -D-p比喃 半乳糖基-D -核糖—1， 3， 4 —十九烷三醇、2 一 二十八酰氨基-1 - 0
- oc - D -吡喃半乳糖基-D —核糖-1， 3， 4 - 二十二烷三醇、2 - 二十 八酰氨基-1-0 - a-D -吡喃半乳糖基-D -核糖-1， 3， 4 - 二十一 烷三醇、2-二十八酰氨基-1-0 - a -D-吡喃半乳糖基-D-核糖-l，3，4-二十烷三醇、2-二十八酰氨基-l-O- a - D-吡喃半乳糖基 -D-核糖-1，3，4-十九烷三醇、2-二十九酰氨基-1-0 - a -D-吡喃半乳糖基-D-核糖- 1， 3，4-二十二烷三醇、2-二十九酰氨基-1-0 - ot -D-吡喃半乳糖基-D-核糖-1，3，4-二十一烷三醇、2-二十九酰氨基-1-0-a-D -吡喃半乳糖基-D -核糖-1， 3， 4 - 二 十烷三醇、2-二十九酰氨基-1-0- ot -D-吡喃半乳糖基-D-核糖 -l，3，4-十九烷三醇等。
由式(I)表示的糖脂可以采用各种方法来合成，也可以按照例如 以下记载的方法来合成。以下，依次说明这些方法。
首先，由公知的起始物质(IVa) (W02004/072091; K. Murata 等、J. Org. Chem. 2005， 70， 2398 )获得化合物(Via)。另外， 按照公知的方法(例如，M. Morita等、J. Med. Chem. 1995， 38， 2176)， 获得化合物(IVb) 、 ( IVc)，将化合物(IVb)的双键部分还原，使其转变成化合物(VIb)(工序1)。由化合物(Via) 、 (VIb)、 (IVc) 获得化合物(Vila) 、 (VIIb) 、 (VIIc)(工序2);利用叠氮基 的选择性还原和接着进行的酰胺化反应，获得化合物(VIIIa)、
(Vnib) 、 (Vine)(工序3)。通过使化合物(Vila) 、 (VIIb) 或者(VIIc)与化合物(IX)进行糖基化反应，获得化合物(Xa)、
(Xb ) 、 ( Xc )(工序4 )。通过化合物(Xa ) 、 ( Xb ) 、 ( Xc )的 叠氮基的选棒性还原和接着进行的酰胺化反应，获得化合物(XIa)、
(XIb) 、 (XIc)。另夕卜，4t合物(XIa) 、 (XIb) 、 ( XIc )也可以 通过使化合物(VIIIa) 、 (VIIIb)或者(VIIIc)与化合物(IX)进 行糖基化反应来获得(工序5)。最后，通过将化合物(XIa)、 (XIb)、
(XIc)的保护基脱保护，获得作为目的产物的化合物(I)(工序6)。 工序1:
可以由公知的起始原料(IVa)来合成化合物(Via)。而且，按 照公知的方法，可以获得化合物(IVb)和(IVc) ， (IVb)可以转变 成化合物(VIb)。2CuM (Va) CH3(CH2)XM / CuZ (Vb) 又li CH3(CH2)XM / BF3 (Vc)<formula>formula see original document page 12</formula>(IVa)
(Via)
R50.
还原
(CH2)XCH3
(CH2)XCH3
(式中，X与上述定义相同，R'和W可以相同或不同，表示氢原 子、可被甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟曱基、氯原子、氟原子<formula>formula see original document page 12</formula>等取代的烷基；可被曱基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟甲基、甲氧 曱基、氯原子、氟原子、溴原子、碘原子、硝基等取代的芳基；可被 曱基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟曱基、甲氧甲基、氯原子、氟原 子、溴原子、碘原子、硝基等取代的芳烷基；或者113和114一起表示由 它们键合而成为环状结构的亚丙基、亚丁基、亚戊基；115表示节基、 对甲氧基爷基、对硝基千基、对甲氧甲基羟节基、对节基羟节基、3，4-二甲氧基节基、二苯基甲基、二(对硝基苯基)甲基；M表示Li、 MgCl、 MgBr、 Mgl; Z表示氯原子、溴原子、碘原子)。
在由化合物(IVa)转变成化合物(VIa)的工序中，在碘化铜(I )、 溴化铜(I)、氯化铜(I)或者氟化硼的乙醚、四氢呋喃、二噁烷、 甲苯、二甲苯、己烷、环己烷等惰性溶剂或者它们的混合溶剂中，在 -78~0°C、优选-50~ - IO'C下，加入相对于化合物(IVa)为1~6 当量的烷基锂试剂或者Gr ignard试剂，在相同温度下搅拌1 ~ 5小时， 向其中加入化合物(IVa),再搅拌1 5小时，由此获得作为目的产 物的化合物(Via)。另外，在由化合物(IVb)转变成化合物(VIb) 的工序中，通过在乙醚、二甲氧基乙烷、四氢呋喃、二喁烷、甲苯、 二甲苯、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、甲醇、水、乙醇、异丙醇等惰 性溶剂或者它们的混合溶剂中，根据需要，在乙酸钠、乙酸钾、碳酸 钠、碳酸氢钠等碱的存在下，将化合物(IVb)与肼或者甲苯磺酰基肼 一起在30 150X:下搅拌，或者通过在Pd-C、 Pd-CaC03-Pb、 Pd-BaSO" Pt02等的存在下，在室温下加氢，可以将化合物(VIb)转变成化合物 (IVb)。
通过本反应获得的化合物，可以直接用作下一个工序的原料，也 可以根据需要，利用通常使用的精制方法、例如重结晶或柱色谱精制 后再加以利用。
工序2:
可以由工序1中获得的化合物(Via)转变成化合物(Vila)或者 (VIIb)。另外，可以由工序1中获得的化合物(VIb)或者(IVc) 转变成化合物(VIIc)。<formula>formula see original document page 14</formula>
(式中，x和RS与上述定义相同，W和！^可以相同或者不同，表
示氢原子、可被甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟曱基、氯原子、
氟原子等取代的烷基；可被甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟曱基、 甲氧甲基、氯原子、氟原子、溴原子、碘原子、硝基等取代的芳基； 可被甲基、乙基、异丙基、甲氧基、三氟曱基、甲氧甲基、氯原子、 氟原子、溴原子、碘原子、硝基等取代的芳坑基；或者115和116—起表 示由它们键合而成为环状结构的亚丙基、亚丁基、亚戊基；A，表示-
CH2 -或者-CH=CHCH2 -)。
在二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、乙腈、乙醚、四 氢呋喃、二噁烷、苯、曱苯、二曱苯、乙酸乙酯等惰性溶剂中，在三 乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氢钾 等碱的存在下，在-20 100X:、优选-10 80'C下，使化合物(Via) 与1 5当量的曱磺酰氯、甲磺酸酐、乙磺酰氯、l-丙磺酰氯、1-丁磺 酰氯、三氟甲磺酰氯、a-甲苯磺酰氯、苯磺酰氯、对甲苯磺酰氯、对 甲苯磺酸酐、4-甲氧基苯磺酰氯、4-氯苯磺酰氯、2-硝基苯磺酰氯、 3-硝基苯磺酰氯、4-贿基苯磺酰氯等磺酰基化剂进行反应例如1小 时~72小时，按照常规方法进行脱缩醛化。脱缩醛的条件可以采用在 《Protective Groups In Organic Synthesis》 (John Wiley & Sons 社)等中记载的各种方法。在例如盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、三氟乙 酸、甲磺酸、三氟甲磺酸等无机酸或者有机酸与甲醇、乙醇、2 —丙醇、二喁烷、二氯甲烷、1,2-二氯乙烷、氯仿、四氯化碳、苯、甲苯、二
甲苯等惰性溶剂的混合液中，在-io ioox:、优选o~50。c下进行搅 拌，由此可以获得目的产物。接着，在乙腈、乙醚、四氢呋喃、二嚙 烷、苯、甲苯、二曱苯、二甲亚砜、二甲基甲酰胺等惰性溶剂中，使
获得的化合物与1~50当量的叠氮化钠、叠氮化锂在0~ 200'C、优选 20~ 120。C下进行反应。此时，也可以根据需要，添加三乙胺、二异丙 基乙胺、吡啶、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸钾、碳酸氩钾等碱。通过将 获得的化合物缩醛化，获得化合物(Vila)。缩醛的条件，可以采用 在《Protective Groups In Organic Synthesis》 (John Wiley & Sons 社)等中记载的各种方法。即，在有机酸或者无机酸的存在下，在无 溶剂条件下，或在乙醚、二"恶烷、苯、甲苯、二曱苯等惰性溶剂中， 使化合物与缩醛化试剂在0~ 200°C、优选20~ 12(TC下进行反应，由 此可以获得作为目的产物的化合物(Vila)。此时，作为缩醛化试剂， 可以使用丙酮、2,2-二甲氧基丙烷、2-甲氧基丙烯、2-乙氧基丙烯、 苯甲醛、苯曱醛二甲缩醛、环己酮、环己酮二甲缩醛、环戊酮、环戊 酮二曱缩醛等。另外，对于叠氮化后获得的化合物，对其伯羟基进行 三苯曱基化、接着对其他的仲羟基进行芳基甲基化后，通过脱三苯甲 基化，可以获得化合物(VIIb)。作为三苯曱基化的条件，可列举出 例如，在乙醚、四氢呋喃、二噁烷、苯、甲苯、二曱苯、二甲基曱酰 胺、二甲亚砜等惰性溶剂中，在碳酸锂、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、 碳酸氢钾、氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、氢化钾、钠、 钾、三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶等碱的存在下，在-50-120X:、优选-20~80*€下使0. 8~2当量的三苯曱基溴或者三苯 曱基氯进行反应的条件。另外，作为芳基甲基化剂，可列举出苄基氯、 苄基溴、对曱氧基苄基氯、间甲氧基苄基氯、对硝基苄基氯、对硝基 节基溴等，作为芳基甲基化的反应条件，可以采用上述的三苯甲基化 的条件。另外，作为脱三苯甲基化的条件，可以采用在《Protective Groups In Organic Synthesis》 (John Wiley & Sons社)等中记载 的各种方法，可列举出例如，在无溶剂条件下，或者在二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、苯、甲苯、二曱苯、二喁烷、水、曱醇、乙醇、 2-丙醇、叔丁醇等溶剂中，在甲酸、乙酸、三氟乙酸、盐酸、硫酸、 硝酸等酸或者硫酸铜(II)的存在下，在-5(TC ~150t:、优选-20 °C ~ IO(TC下进行反应的条件。
通过本反应获得的化合物，可以直接用作下一个工序的原料，也 可以根据需要，利用通常使用的精制方法、例如重结晶或柱色语精制 后再加以利用。
工序3:
通过将工序2中荻得的化合物(Vila) 、 (VIIb) 、 (VIIc)的 叠氮基还原为氨基后，再转变成酰胺基，可以获得化合物(VIIIa)、 (Vnib) 、 (<formula>formula see original document page 16</formula>
(式中，R2、 R5、 R6、 R7、 x、 y和A，与上述定义相同)。 首先，通过将化合物(Vila) 、 (VIIb)或者(VIIc)用锌/盐 酸、氢化锂铝等金属试剂或三苯基膦、三甲基膦、三乙基膦、三丁基 膦等三芳基膦或者三烷基膦进行处理，或者通过在Pd-C、Pd-CaC03-Pb、 Pd-BaS04、 Pt(h等的存在下，在室温下加氢，将叠氮基选择性还原为 氨基，接着，通过与羧酸的酰胺化反应，可以使其衍生为化合物 (Villa )、 ( VIIIb )或者(VIIIc )。酰胺化反应可以釆用在《Compendiumfor Organic Synthesis》(Wiley - Inter science; A Division of John Wiely & Sons社)等中记载的多种方法。如果列举一例，通过将胺类 化合物在二氯曱烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、乙醚、四氢呋喃、二喁烷、 乙腈、苯、曱苯、二曱苯、二甲基甲酰胺等惰性溶剂中，在羧酸的活 性剂存在下，在-50'C ~ 120°C、优选-20'C ~ 80'C下，使其与对应的羧 酸进行反应，可以获得作为目的产物的化合物(Villa) 、 (VIIIb) 或者(VIIIc)。作为羧酸的活化试剂，可列举出四氯化硅、乙酸酐、 乙酰氯、氯代碳酸乙酯、碘化2-碘-l-曱基吡啶镇、碘化2-氯-l-曱基 吡啶错、二苯基氧膦基氯、N，N， -二环己基碳化二亚胺(DCC) 、 N-羟基苯并三唑/DCC、盐酸l-乙基-3-(3-二乙氨基丙基)碳化二亚胺、 乙氧基乙炔、三甲基甲硅烷基乙氧基乙炔、碳化二咪唑、二苯基磷酰 基叠氮化物、二乙基磷酰基氰酸酯等。另外，也可以根据需要，加入 对甲苯磺酸、多磷酸等的酸或者三乙胺、二异丙基乙胺、N-甲基吗啉、 吡啶、2，6-二甲基吡啶等的碱6
通过本反应获得的化合物，可以直接用作下一个工序的原料，也 可以根据需要，利用通常使用的精制方法、例如重结晶或柱色谱精制 后再加以利用。
工序4:
通过使工序2中获得的化合物(Vila) 、 (VIIb)或者(VIIc) 与化合物(IX)进行苷化反应，可以获得化合物(Xa) 、 (Xb)或者 (Xc )。<formula>formula see original document page 17</formula>(式中，R2、 R5、 R6、 R7、 x和A，与上述定义相同；118表示其中的 羟基或氨基已被保护起来的吡喃醛糖残基；L表示氯原子、溴原子、 氟原子或者碘原子。)
通过将化合物((Vila) 、 (VIIb)或者(VIIc)在己烷、环己 烷、二氯曱烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、乙醚、四氢呋喃、乙腈、笨、 曱苯、二曱苯、二鳴烷、二甲基甲酰胺、二氯曱烷等惰性溶剂或者它 们的混合溶剂中，在三氟化硼、高氯酸银、氯化锡(II)、四氯化钛、
四氯化锡等路易斯酸的存在下，或者在四正丁铵等卣化铵盐的存在下， 在例如-IOO'C 50'C、优选-78°C ~ 30匸下，使其与化合物(IX)进 行反应，可以获得化合物(Xa) 、 (Xb)或者(Xc)。用于本反应的 路易斯酸或卣化铵盐，可以单独使用或者几种组合使用，另外，此时 也可以根据需要添加分子筛。
另外，作为由R8表示的其中的羟基或氨基已被保护起来的吡喃醛 糖残基，可列举出2， 3， 4, 6-四-0-苄基-D-葡糖基、2，3，4，6-四-0-苄 基-D-半乳糖基、2，3，4，6-四-O-千基-D-甘露糖基、3，4，6-三-0-苄基 -2-脱氧-2-脱氧-2-(叔丁氧基羰基氨基)-D-半乳糖基、3， 4， 6-三-0-千基-2-脱氧-2-乙酰氨基-D-半乳糖基、2， 3， 4， 6-四-0-苄基-D-:r 口 l:。 ，乂 '〉7"、 2， 3,4， 6-四-0-千基-p-D-:TA卜口匕° ， 乂 '〉/" 2， 3,4， 6— 四-O-苄基-P -D-4卜''〉/1^、 3， 4， 6-三-0-苄基-2-脱氧-2- ( 二苄基氨 基)-D-半乳糖基等。
通过本反应获得的化合物(Xa) 、 (Xb)或者(Xc)，可以直接 用作下一个工序的原料，也可以根据需要，利用通常使用的精制方法、
例如重结晶或柱色谦精制后再加以利用。 工序5:
通过将工序4中获得的化合物(Xa) 、 (Xb)或者(Xc)的叠氮 基还原为氨基，然后将其转变成酰胺基，可以获得化合物(XIa )、 ( XIb ) 或者(XIc)。另夕卜，通过使工序3中获得的化合物(VIIIa)、 (VIIIb) 或者(VIIIc )与化合物(IX)进行苷化反应，可以获得化合物(XIa )、 (XIb)或者(XIc)。(Xa)或(Xb)
i)聰
(Villa)或(Vlllb)
(IX)
R2^v^ (CH2)yCH3
0=
R8-0
(CH2)XCH3
R2\^(CH2)yCH3 0二
NH OR5
R8-0
或
(CH2)XCH3
(Xlb)
(式中，R2、 R5、 R6、 R7、 R8、 x、 y和A，与上述定义相同)。 由化合物(Xa) 、 (Xb)或者(Xc)向化合物(XIa) 、 (Xlb) 或者(XIc)的转变，可以采用与工序3相同的方法来进行。另外，由 化合物(Villa) 、 ( VIIIb)或者(VIIIc)向化合物(XIa) 、 (Xlb) 或者(XIc)的转变，可以采用与工序4相同的方法来进行。
通过本反应获得的化合物，可以直接用作下一个工序的原料，也 可以根据需要，利用通常使用的精制方法、例如重结晶或柱色谱精制 后再加以利用。 工序6:
通过将工序5中获得的化合物(XIa)脱缩醛化以及脱芳基甲基化， 或者将化合物(Xlb )或者(XIc )脱芳基甲基化，可以获得化合物U )。
R2
脱財
Hy—CO——CH—(CH2)y-CH3
H
(Xla)'(Xlb)or(Xlc) -^ R1-0-CH2——C——C——A——(CH2)x-CH3
H J
OH
(I)(式中，R1、 R2、 R5、 R6、 R7、 R8、 x、 y、 A和A，与上述定义相同)。
作为脱缩醛化和脱芳基曱基化的条件，可以釆用《Protective Groups In Organic Synthesis》 (John Wiley & Sons社)等中记载 的各种方法。例如，作为脱缩醛化的条件，可以采用在工序2中所示 的方法来实施。另外，作为脱芳基曱基化的条件，可列举出在甲醇、 乙醇、2-丙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、二曱基甲酰胺等不参与反应的 溶剂中，在Pd-C、 Pd(0H)2、 Pt02等的存在下，加入4-曱基环己烯， 加热回流，或者在室温加氢的条件。
通过本反应获得的化合物，可以根据需要，利用通常使用的精制 方法、例如重结晶或柱色镨来精制。
本发明的由式(I)表示的化合物，可以将其本身单独给药，也可 以根据希望，与其他的通常可药用的公知常用的载体一起，制备以治 疗某些疾病或者改善由这些疾病所引起的症状为目的的制剂，所说疾 病包括慢性炎症性疾病、过敏性疾病或者那些已知由于NKT细胞引起 或者由于对NKT细胞的刺激而引起病态恶化的疾病等。例如将有效成 分单独地或者与常用的赋形剂一起制戒胶嚢剂、片剂、注射剂等适宜 的剂型，经口或者非经口地给药。所说胶嚢剂可以通过例如将粉末状的 原化合物与乳糖、淀粉或其衍生物、纤维素衍生物等赋形剂混合，装 入明胶胶嚢来制备。另外，除了上述赋形剂以外，还可以加入羧甲基 纤维素钠、海藻酸、阿拉伯树胶等粘合剂和水进行混炼，根据需要制 成颗粒后，再添加滑石、硬脂酸等润滑剂，使用通常的压片机来制备。 当采用注射进行非经口给药时，将有效成分与助溶剂一起溶解于灭菌 蒸馏水或者灭菌生理食盐水中，封入安瓿瓶中，制成注射制剂。根据 需要，也可以使其含有稳定剂、緩沖物质。
本发明的药物可以用于治疗下述疾病或者改善由其引起的症状， 所说疾病包括慢性炎症性疾病、过敏性疾病或者已知由NKT细胞引起 或者由于对NKT细胞的刺激而引起病态恶化的疾病等，该情况的改善 药、治疗药的给药量，依赖于各种主要因素、例如所需治疗的患者的症状、年龄、给药途径、剂型、给药次数等，但通常以0. OOlmg ~ 5000mg /日/人、优选0. 01mg~ 500mg/日/人、更优选0. lmg~ 100mg/日 /人为宜。
实施例
下面，基于参考例和实施例来更具体地说明本发明，但本发明的 范围不受这些实施例的限定。
参考例1: 1， 3-0-亚爷基-D-阿拉伯糖醇(化合物1 )的合成
将D-阿拉伯糖醇(300g, 1. 97mol)和苯曱醛(261g， 2. 46mol ) 混合，吹入氯化氢气体50分钟，在氩气流中搅拌。静置一夜后，将得 到的固体粉碎，加入5%氨水溶液(900ml)和甲苯(600ml)，搅拌1 小时。过滤收集得到的结晶，然后按照冷水(600ml)、甲苯(600ml x 2 )的顺序洗涤，减压下干燥，获得标题化合物295g (收率62. 4% )。
mp 130-131° C;力-NMR (CD3OD) 5: 7.51-7.30 (m， 5H) ， 5.58 (s， 1H)， 4.18 (d， 1H， J=12Hz)， 4.11 (d， 1H， J=12Hz)， 3.87—3.28 (m， 5H);匪S-FAB (m/z): [M+H] +
计算值C12H1705， 241.1076;实测值241. 1086。
参者例2: 1， 3-0-亚爷基-5-0-甲苯磺酰基-D-阿拉伯糖醇(化合 物2)的合成
在氩气流中，在0 5t:下，向参考例1中合成的化合物1 (30g, 125mmo1)的二氯甲烷(240ml )溶液中加入氧化二正丁锡(623mg， 2.50mmol )、对曱苯磺酰氯(23. 8g， 125mmo1 )和三乙胺(12. 9g， 127mmo1 )。在室温下搅拌20小时后，将有机层用水洗涤(100ml x 3)， 用硫酸钠干燥。将溶剂浓缩，将得到的残渣用柱色谱(二氯甲烷甲 醇=40: l)精制，得到粗结晶。最后，将粗结晶重结晶(正己烷乙 酸乙酯=1: 1)，获得标题化合物39. 7g (收率80. 8% )。
力-NMR (DMSO-(U 5: 7.73 (d, 2H， J=8.2Hz)， 7.37-7. 24 (m， 7H)， 5.43 (s， 1H)， 5.34 (d， 1H， J=6. 1Hz) ， 4.77 (d， 1H， J=6. 5Hz)， 4.11 (dd， 1H， J=9. 8， 1.9Hz)， 4. 04-3. 85 (m， 4H)， 3.71 (d， 1H，J=9.2Hz)， 3.59 (d， 1H， J=5.7Hz), 2.32 (s， 3H);
"C-纖(CDCU 5: 145.1， 137.3， 132.5, 129.9， 129.1， 128.2 128.0， 125.8， 101.0， 77.9， 72.4， 70.9, 67.6， 62.7， 21.6; MS-ESI (m/z): 395 [M+H]+; HRMS-FAB (m/z): [M+H]+计算值 C19H2307S， 395.1164;实测值395. 1189。
参考例3: 4，5-脱水-1,3-0-亚苄基-D-阿拉伯糖醇(化合 物3)的合成
在氩气流中，将参考例2中合成的化合物2 ( 30g， 76mmo1 )的无 水四氢呋喃(191ml )溶液冰冷， 一边保持3~ 5TC的温度， 一边花20 分钟向其中添加^f又丁醇钾(9. llg, 8L2mmo1)。在相同温度下搅拌 1.5小时后，在冰冷下加入水(76ml)，用1M盐酸中和(pH=7.5)， 用二氯甲烷(76ml x 3)萃取。将有机层用硫酸钠千燥后，将溶剂浓缩， 将得到的残渣用柱色谱(二氯甲烷曱醇=50: l)精制，得到粗结晶。 最后，向粗结晶中加入正己烷(90ml)，在室温下搅拌30分钟，获得 标题化合物15. 9g (收率94 % )。
力-醒R (CDCh) 5: 7.52-7.34 (m， 5H), 5.57 (s， 1H)， 4.25 (dd， 1H， J=12， 1.8Hz)， 4.08 (dd， 1H， J=12， 1.2Hz)， 3. 78-3. 75 (m， 2H)， 3.35-3.31 (m， 1H)， 2.93-2.84 (m， 3H); 13C-NMR (CDC13) 5: 137.4， 129.3， 128.4， 126.0， 101.4， 79.7， 72.3， 64.4， 50.8， 45.9; MS-ESI (in/z): 223 [M+H]+; HRMS-FAB (m/z): [M+H]+计算值 C12H1504， 223.0971;实测值223. 0895。
实施例1: 1，3-O-亚爷基-D-阿糖基-1,2，3，4-二十二烷四 醇(化合物4)的合成
在-40X:下，向碘化铜(I) (3.2g, 16. 8mmo1)的脱水四氢呋喃 (210ml)悬浮液中，滴下1. 58M溴化正十七烷基镁(6"7mmo1的四氢呋 喃溶液)，在-15匸下搅拌30分钟。接着，在-20'C下，滴下参考例 3中合成的化合物3 ( 5g， 22. 5mmo1)的脱水四氢呋喃(100ml)溶液， 在相同温度下搅拌4. 5小肘后，在室温下搅拌一夜。向反应混合液中 加入饱和氯化铵水溶液，用乙酸乙酯萃取生成物，将有机层用饱和食盐水洗涤，用硫酸钠千燥，过滤后，减压浓缩。将得到的残渣用硅胶
柱色谱(氯仿乙酸乙酯=2: 1~1: 2)精制，获得标题化合物3. 75g (收率36%)。白色粉末；丄H-腿(CDCU 5: 7.53 (d， 2H)， 7.39 (m， 3H), 5.60 (s， 1H)， 4.28 (dd， 1H)， 4.05 (d， 1H)， 4.00-3.80 (m， 2H)， 3.27 (d， 1H)， 2.39 (d， 1H) ， 1.85-1,20 (m， 34H),0.89 (t，
3H)。
实施例2: 1,3-0-亚苄基-2 - 0 -甲磺酰基-D -阿糖基一 1, 2， 3， 4 - 二十二烷四醇(化合物5 )的合成
在-5。C下，向实施例1中合成的化合物4 ( lg， 2. 2mmol)的脱 水吡啶(30ml)和脱水四氢呋喃(20ml)的溶液中，緩慢滴下甲磺酰氯 (0. 38g， 3. 3mmo1)。在相同温度下搅拌18小时后，向反应混合物中滴 下5ml的曱醇，以便消耗掉过剩的甲磺酰氯，在室温下搅拌一夜。将 反应混合物减压下浓缩，接着用庚烷使其共沸(2次)，然后，将得 到的残渣溶解于氯仿(500ml)中，用水洗涤(2次)。将有机层分离 收集，用硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色 镨(氯仿乙酸乙酯=10:1 )精制，获得标题化合物780mg(收率66. 7°/。)。 白色粉末；力-NMR (CDC1》5: 7. 49 (d， 2H) ， 7.37 (m， 3H) ， 5.59 (s， 1H), 4.99 (m， 1H), 4.52 (dd， 1H) ， 4.16 (d, 1H) ， 3. 90-3.70 (m， 2H), 3.19 (s， 3H)， 2.78 (d， 1H) ， 1.90-1. 20 (m， 34H), 0.88 (t， 3H)。
实施例3: 2-0-甲磺酰基-D-核糖-l，3，4-二十二烷三醇(化 合物6)的合成
向实施例2中合成的化合物2 (10g， 18.5mmol)的曱醇(110ml)、 氯仿(180ml )和脱水四氢吹喃(150ml )的混合溶液中，加入20%Pd (0H)2 /C (1.7g)，在常压下，在45E下进行加氢。反应结束后，加入氯仿 (200ml )，过滤除去催化剂，将滤液减压浓缩，获得标题化合物8. 27g (收率98. 8% )。白色粉末；力-NMR (DMSO-d6) 5 : 4. 73 (t, 1H) ， 3. 64 (m， 2H)， 3.38 (m， 2H) ， 3.16 (s， 3H) ， 1.75-1.15 (m， 34H)， 0.86 (t， 3H)。实施例4: 2 —叠氮基-D -核糖-1， 2， 3， 4 - 二十二烷三醇(化合 物7)的合成
向实施例3中合成的化合物6 (8.26g， 18. 24mmol)的脱水二曱基 甲酰胺(150ml)溶液中，加入叠氮化钠(2. 37g， 36.41mmo1),在 下搅拌5小时，然后在室温下搅拌一夜。向反应混合物中加入水(1L), 用乙酸乙酯(2L)萃取。用硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩，将得到 的粗结晶用硅胶柱色谱(正己烷乙酸乙酯-3: 2)精制，获得标题 化合物5. 33g (收率70%)。淡褐色固体；力-NMR (DMS0-d6) 5 : 4. 99 (d， 1H), 4.87 (t， 1H)， 4.51 (m， 1H)， 3.80-3.70 (m， 1H)， 3.65-3.45 (m， 2H)， 1.65-1.15 (m， 34H)， 0.85 (t， 3H)。
实施例5: 2-叠氮基-3，4-0-异亚丙基-D-核糖-l,3，4-二 十二烷三醇(化合物8)的合成
向实施例4中合成的化合物7 (7.19g， 18mmol)的丙酮(150ml)溶 液中加入浓硫酸(O. lg)，在室温下搅拌3小时。反应结束后，加入三 乙胺(3. 64g， 36mmo1 ),在室温下搅拌1小时，接着，向反应混合物 中加入水(800ml ),用乙酸乙酯(800ml)和甲苯(400ml)萃取。用 硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩，将得到的粗结晶用硅胶柱色谱(正 己烷乙酸乙酯=8: 1~6: 1)精制，获得标题化合物44. 04g (收率 50.5%)。白色粉末；^-NMR (CDCh) 5: 4.17 (m， 1H)， 4.05-3.91 (m， 2H)， 3.86 (m， 1H) ， 346 (m， 1H) ， 2.11 (m， 1H) ， 1.65-1.15 (m， 34H), 1.43 (s, 3H)， 1. 34 (s， 3H) ， 0.88 (t， 3H)。
实施例6: 2 —叠氮基一 1 - 0 - (2， 3, 4， 6 -四-0 -苄基-oc - D -吡喃半乳糖基)-3, 4 - 0 -异亚丙基-D -核糖-1, 3， 4 - 二十二烷三 醇(化合物9)的合成
向经过干燥处理的分子筛(4A，粉末)(250mg)中，加入实施例5 中合成的化合物8 (101mg， 0. 23mmo1)和溴化2， 3， 4， 6-四-0-苄基-a -D-吡喃半乳糖基(280mg， 0. 46mmo1 )的甲苯(4. 5ml)和二甲基 甲酰胺(4. 5ml)的溶液，接着，加入溴化四正丁铵(218mg， 0. 68mmo1)， 搅拌4天。向反应混合物中加入乙酸乙酯(200ml)，用饱和碳酸氢钠水溶液和水洗涤。将有机层用硫酸钠干燥，过滤后，减压浓缩，将得
到的残渣用硅胶柱色语(正己烷乙酸乙酯-25: 1 ~ 8: l)精制，获 得标题化合物107mg (收率48%) 。 'H-NMR (CDCU 5 : 7. 39-7. 23 (m， 20H)， 4.96-4.92 (m， 2H) ， 4.85 (d， 1H， J=12Hz)， 4.80 (d， 1H， J=12Hz)， 4.73-4.68 (m， 2H) ， 4.57 (d， 1H， J-12Hz)， 4.48 (d， 1H， J=12Hz)， 4.40 (d, 1H， J-12Hz)， 4.12-3.91 (m， 7H) ， 3.72 (dd， 1H， J=10. 8， 6. 6Hz)， 3.54-3.44 (m, 3H), 1.59-1.20 (m，權)，0.88 (t， 3H， J=6.8Hz); MS-ESI (m/z): 985 (M+Na)。
实施例7: 2 —氨基-1 - 0 - (2， 3， 4， 6 -四-0 -爷基-oc - D - p比 喃半乳糖基)-3， 4 - 0 -异亚丙基-D -核糖-1， 3， 4 - 二十二烷三醇 (化合物10)的合成
向实施例6中合成的化合物9 (87mg， 0. 09mmo1)的乙醇(9ml)和 二氯曱烷(3ml)的溶液中，加入钯-碳酸钙(铅被毒化完毕)(林德 拉催化剂)(280mg)，通过在常压、室温下搅拌一夜来进行加氢。过滤 除去催化剂，将滤液减压浓缩，获得标题化合物80mg (收率94%)。 ^-NMR (CDC1》5 : 7. 39-7. 13 (m， 20H)， 4.95-4. 92 (m， 2H)， 4.83-4. 78 (in, 2H)， 4.74 (d, 1H， J-12Hz)， 4.68 (d， 1H， J-12Hz)， 4.47 (d， 1H， J-12Hz)， 4.40 (d， 1H， J=12Hz)， 4.11-4.04 (m， 2H)， 3.99-3.91 (m， 4H) ， 3.87 (dd， 1H， J=9. 0， 5. 5Hz)， 3.55-3.52 (m， 2H)， 3.39 (dd, 1H， J-10. 2， 7.6Hz), 3. 07-3,02 (m， 1H)， 1.53-1.20 (m， 40H), 0.88 (t， 3H， J-6.8Hz); MS-ESI(m/z): 937 (M+H)。
实施例8: 2-二十六酰氨基-1-0- (2，3，4，6-四-0-苄基-oc -D-吡喃半乳糖基)-3，4-0-异亚丙基-D-核糖-1,3,4-二十
二烷三醇(化合物11)的合成
在冰冷下，向实施例7中合成的化合物10 (560mg， 0.6mmo1)、 正二十六烷酸(270mg， 0. 69mmo1)、以及1 -羟基氮杂苯并三唑(12mg， 0. 087mmo1)的二甲基甲酰胺(45ml)和二氯甲烷(25ml)的混合悬浮液 中，加入三乙胺(0. 2ml、 1.4mmo1) 、 1-乙基-3 - (3-二甲氨基丙 基)碳化二亚胺盐酸盐(210mg， l.lmmol)，在室温下搅拌5天。将反应混合物用乙酸乙酯(1. 5L)稀释后，用饱和碳酸氢钠水溶液、水洗涤, 将有机层用硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色 谱(正己烷乙酸乙酯=4: l)精制，获得标题化合物340mg(收率 4 3%)。白色粉末；力-NMR (CDCU 5: 7.41-7.23 (m， 20H)， 6.27 (d， 1H， J=8.7Hz)， 4.92 (d， 1H， J=12Hz)， 4.90 (d， 1H, J=3. 7Hz)， 4.83-4. 78 (m， 2H) ， 4.75 (d， 1H, J=12Hz)， 4.66 (d， 1H， J=llHz), 4.58 (d， 1H， J-12Hz)， 4.49 (d， 1H， J=12Hz)， 4.37 (d， 1H， J=12Hz)， 4.12-4.02 (m， 4H) ， 3.98 (t， 1H, J=6. 2Hz) ， 3.93-3.88 (m, 3H)， 3.62-3.52 (m， 2H) ， 3.36 (dd， 1H, J=9. 4， 5.5Hz)， 2.08-1.96 (m， 2H)， 1.54-1.39 (m， 7H)， 1.31—1.22 (m， 79H)， 0.90-0.86 (m， 6H); MS-ESI (m/z): 1338 (M+Na)。
实施例9:2- 二十六酰氨基-1 - 0 - (2， 3， 4， 6 -四-0 -爷基— oc - D -吡喃半乳糖基)-D -核糖-1， 3， 4 - 二十二烷三醇(化合物 12)的合成
在室温下，将实施例8中合成的化合物11 (53mg， 0. 04mmol)的 甲醇(1.5ml) /二氯甲烷(6ml) / 4N盐酸-二喁烷(120p 1)混合溶液 搅拌2小时后，减压浓缩。将得到的残渣用硅胶柱色傳(己烷乙酸 乙酯=2: 1)精制，获得标题化合物35mg (收率68%)。白色粉末； W-腿(CDC13)TM: 7. 40-7. 25 (m， 20H), 6.38 (d， 1H， J-8.4Hz)， 4.93-4.87 (m， 2H) ， 4.84 (d， 1H， J=3. 8Hz) ， 4. 79-4. 73 (m， 2H)， 4.67 (d， 1H， J=12Hz)， 4.56 (d， 1H， J-llHz)， 4.47 (d， 1H， J=12Hz)， 4.38 (d， 1H， J=12Hz)， 4.21-4.18 (m， 1H) ， 4.04 (dd， 1H， J=10， 3. 8Hz)， 3.97 (d， 1H， J=1.9Hz)， 3.89—3.84 (m， 4H) ， 3.81 (d， 1H， J-8.3Hz)， 3.51-3.43 (m， 4H) ， 2.13-2.10 (m, 3H) ， 1.62-1. 54 (m， 4H)， 1.46-1. 25 (m， 76H)， 0.90-0.86 (m， 6H); MS-ESI (m/z): 1275 (M+H)。
实施例10: 2-二十六酰氨基-1-0- a - D-吡喃半乳糖基-D -核糖-1,3，4-二十二烷三醇(化合物13)的合成
向实施例9中合成的化合物12 (325mg， 0. 255mmo1)的甲醇(70ml)/ 二氯甲烷(40ml)的混合溶液中，加入氢氧化钯(150mg)，通过在常压、 室温下搅拌4小时来进行加氢。过滤除去催化剂，将滤液减压浓缩， 获得标题化合物206mg (收率88%)。白色粉末(用乙醇重结晶)Rf 值(TLC) =0. 22(氯仿:甲醇=7: 1 ) ; ^-NMR (py-d5) 5 : 8. 50 (d， 1H， >8. 8Hz)， 6.98 (brs， 1H)， 6.64 (brs， 1H)， 6.56 (brs， 1H)， 6.46 (brs， 1H)， 6.34 (brs， 1H)， 6.10 (brs, 1H)， 5.60 (d， 1H， J=3.8Hz)， 5.32-5.25 (m， 1H) ， 4.71-4.67 (m， 2H) ， 4.57-4.51 (m， 2H)， 4.44-4.33 (m， 6H) ， 2.45 (t， 2H， J=7.4Hz)， 2.35-2.25 (m， 1H)， 2.00-1.62 (m， 5H)， 1.50-1.18 (m， 74H)， 0.90-0.85 (m， 6H); MS-ESI (m/z): 915 (M+H); MS-MALDI (m/z): [M+Na]+计算值C^HmNO, Na， 937. 418;实测值937. 09。
合成糖脂对由于引入K/BxN血清而诱发的关节炎的抑制效果
(A) 向C57BL/6J小鼠(8周龄、雌)的腹腔中注入K/BxN血清 150 pl，诱发关节炎。关节炎的评分，根据观察，按照以下标准进行 判定。
关节炎评分为，0:无症状；1:四肢的指头等小关节只有1个肿 胀发红；2:小关节2个以上、或者手腕或踝关节等比较大的关节肿胀 发红；3: 1只手或脚全体肿胀发红；4:如果1只手或脚全体的肿胀 达到最大限度，则在判断时，将两手、两脚的合计作为点数。
将化合物溶解于10仰MSO/PBS中，从注入血清的当日算起按照每 周2次，每次2jag/只小鼠注入小鼠腹腔内。对于对照组，只注入 10%DMSO/PBS。实验结果表明，通过注入化合物，可显著降低关节炎的 评分(参照图1)。
(B) 对于不存在NKT细胞的Jal8基因缺损小鼠，观察不到化合
27物对由于引入K/BxN血清而诱发的关节炎的抑制效果。由此看出，为 了发挥本发明的化合物对关节炎的抑制效果，必须存在NKT细胞(参 照图2 )。
合成糖脂对胶原诱导性关节炎的抑制效果
向DBA1小鼠(8周龄、雄)的皮下， 一起注入牛II型胶原与完 全弗洛伊德医药佐剂，3周后,从皮下一起注入牛II型胶原与不完全 弗洛伊德医药佐剂，诱发关节炎。关节炎的评分，根据观察，按照以 下标准进行判定。
关节炎评分为，0:无症状；1:四肢的指头等小关节只有1个肿 胀发红；2:小关节2个以上、或者手腕或踝关节等比较大的关节肿胀 发红；3: 1只手或脚全体肿胀发红；4:如果1只手或脚全体的肿胀 达到最大限度，则在判断时，将两手、两脚的合计作为点数。
将化合物溶解于10%DMSO/PBS中，从注入血清的当日算起按照每 周2次，每次2Mg/只小鼠注入小鼠腹腔内。对于对照组，只注入 10。/。DMSO/PBS。通过注入化合物，可显著降低关节炎的评分(参照图3)。
化合物对NKT细胞的影响
将单核细胞从C57BL/6J小鼠(8周龄、雌)肝脏中分离出来，将 其与化合物一起培养48小时，采用ELISA法测定上清中的细胞因子， 通过掺入氚标志胸苷来测定细胞增殖反应。a-GC引起了细胞增殖、 IFN-Y产生、IL-4产生，但是，本发明的化合物则不会引起任何反应 (参照图4)。
事先注入化合物对NKT细胞的影响
向C57BL/6J小鼠(8周龄、雌)的腹腔注入KRN血清150 p 1,诱 发关节炎。将化合物按照在每隔2天以3次、每次2jig/只小鼠注入 小鼠腹腔中。对于对照组，只注入10%DMSO/PBS。在最终注入的2天 后，将单核细胞从肝脏分离出来，将其与ot-GC—起培养、8小时，采 用ELISA法测定上清中的细胞因子，通过掺入氚标志胸苷来测定细胞 增殖反应。对于事先注入化合物的组，观察不到由于ot-GC引起的细 胞增殖、IFN-v产生、IL-4产生。由此可以看出，本发明的化合物能够抑制NKT细胞对抗原刺激的反应(参照图5)。
对于支气管哮喘模型的肺泡清洗液中细胞浸润的抑制(C57BL6J 小鼠)
按照Ovalubumin (0VA) 50jLig/只小鼠与Alum 2. 25mg/只小鼠 将其混合后，分别在第O天、第7天向C57BL6J小鼠(8周龄、雌) 的腹腔内注入。从第18天开始连续3天，让小鼠按10 mg/ml的浓度 吸入OVA。在吸入前，将化合物按照2Mg/只小鼠注入到小鼠腹腔内。 在最终吸入日的次日，对其进行肺泡清洗并对细胞成分进行研究。与 对照组(OVA/DMSO)相比，化合物给与組的细胞浸润被显著抑制。另 外，对于呈现哞喘特征的嗜酸性粒细胞的浸润也显著受到抑制(参照 图6)。
对于支气管哮喘模型的肺泡清洗液中细胞因子的抑制(C57BL6J 小鼠)
按照OVA 50jug/只小鼠与Alum 2. 25mg/只小鼠将其混合后，分 别在第0天、第7天向C57BL6J小鼠(8周龄、雌)的腹腔内注入。 从第18天开始连续3天，让小鼠按10 mg/ml的浓度吸入0VA。在吸 入前,将化合物按照2jag/小鼠注入到小鼠腹腔内。在最终吸入日的 次日，釆用ELISA法进行肺泡清洗并测定肺泡清洗液中的细胞因子。 与对照组(0VA/DMS0)相比，化合物给与组的IL-5、 IL-13均受到显 著抑制(参照图7)。
对于支气管哮喘模型的肺病病理所显示的抑制(C57BL6J小鼠) 按照OVA 40Mg/只小鼠与Alum 2. 25mg/只小鼠将其混合后，分 别在第0天、第7天向C57BL/6J小鼠(8周龄、雌)的腹腔内注入。 从第18天开始连续3天，让小鼠按IO mg/ml的浓度吸入OVA。在吸 入前，将化合物按照2jag/只小氣注入到小鼠腹腔内。在最终吸入日 的次日，釆集肺组织，进行病理学解析。与对照组(0VA/DMS0)相比， 化合物给与组的细胞浸润、PAS阳性杯形细胞的增殖被优先抑制(参 照图8)。组织评分按照以下标准进行判定。即，细胞浸润评分为，0: 正常；1:少数细胞浸润；2: —层细胞浸润；3: 二 四层细胞浸润；5:四层以上细胞浸润。另外，PAS评分为，0:杯形细胞为肺泡圆周 的5%以下；1:杯形细胞为肺泡圆周的5%-25%; 2:杯形细胞为肺泡 圆周的25%-50%; 3:杯形细胞为肺泡圆周的50 % -75%; 4:杯形细胞 为肺泡圆周的75%以上。
对于支气管哮喘模型的肺泡清洗液中细胞因子的抑制(Balb/c小
鼠)
按照0VA 20jug/只小鼠与Alum 2. 25mg/只小鼠将其混合后，分 别在第0天、第7天向Balb/c小鼠(8周龄、雌)的腹腔内注入。从 第18天开始连续3天，让小鼠按5mg/ml的浓度吸入OVA。在吸入前， 将化合物按照2 jag/只小鼠注入到小鼠腹腔内。在最终吸入日的次日， 采用ELISA法进行肺泡清洗并测定肺泡清洗液中的细胞因子。与对照 组(0VA/DMS0)相比，化合物给与组的IL-5、 IL-13均受到显著抑制 (参照图9)。
产业上的可利用性
本发明中所涉及的由上述式(I )表示的糖脂衍生物SGL可以抑 制由自身抗体引起的炎症反应，可以用作自身免疫性关节炎等慢性炎 症性疾病、支气管哮喘等过敏性疾病以及由NKT细胞引起病态恶化的 疾病的治疗药。
权利要求
1.由NKT细胞引起或者由于对NKT细胞的刺激而引起病态恶化的疾病的治疗药，其中含有由式(I)表示的糖脂衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分(式中，R1表示吡喃醛糖残基；R2表示氢原子或者羟基；A表示-CH2-、-CH(OH)-CH2-或者-CH＝CHCH2-；x表示13～16的整数；y表示0～25的整数)。
2. 用于过敏性疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所述的糖脂 衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分。
3. 用于慢性炎症性疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所述的 糖脂衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分。
4. 由NKT细胞引起或者由于对NKT细胞的刺激而引起病态恶化的 疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所述的糖脂衍生物或者其可药用 的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中，在式(I)中，Ri表示oc -D-吡喃半乳糖基。
5. 用于过敏性疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所迷的糖脂 衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中，在式(I)中，R'表示a - D-吡喃半乳糖基。
6. 用于慢性炎症性疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所述的 糖脂衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中， 在式(I)中，W表示oc -D-吡喃半乳糖基。
7. 由NKT细胞引起或者由于对NKT细胞的刺激而引起病态恶化的 疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所述的糖脂衍生物或者其可药用 的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中，在式(I)中，Rt表示cc -D -吡喃半乳糖基，A表示—CH2 -或者-CH (OH) - CH2 -。
8. 用于过敏性疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所述的糖脂 衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中，在式(I)中，W表示a -D-吡喃半乳糖基、A表示-CH2-或者-CH(0H)-CH2-。
9. 用于慢性炎症性疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所述的 糖脂衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中， 在式(I)中，W表示oc -D-吡喃半乳糖基，A表示-CH2-或者-CH(0H) - CH2 - 。
10. 由NKT细胞引起或者由于对NKT细胞的刺激而引起病态恶化的 疾病的治疗药，其中含有权利要求l中所述的糖脂衍生物或者其可药用 的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中，在式(I)中，R'表示a -D-吡喃半乳糖基，R2表示氢原子，A表示-CH2 -或者-CH (OH) - CH2
11. 用于过敏性疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所述的糖脂 衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中，在式(I)中，W表示a -D-吡喃半乳糖基，112表示氢原子，A表示-CH2-或者-CH(0H) -CH2-。
12. 用于慢性炎症性疾病的治疗药，其中含有权利要求1中所迷的 糖脂衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分，其中， 在式(I)中，Ri表示ct -D-吡喃半乳糖基，R2表示氲原子，A表示-CH2-或者-CH(0H) -CH2-。
13. 由式(I，)<formula>formula see original document page 4</formula>(r)表示的糖脂衍生物及其可药用的水合物或者溶剂合物(式中，W表 示a-D-吡喃半乳糖基；112表示氢原子；A表示-CH (OH) - CH2 - ; x 表示13 16的整数；y表示0 25的整数)。
14.权利要求13中所述的糖脂衍生物及其可药用的水合物或者溶 剂合物，其中，上述糖脂衍生物为2-二十六酰氨基-1 -0 - oc - D-p比 喃半乳糖基-D -核糖-1， 3， 4 - 二十二烷三醇、2 — 二十六酰氨基—1 -0 - a - D-吡喃半乳糖基-D-核糖-l，3，4-二十一烷三醇、2 - 二十 六酰氨基-l- O- a- D-吡喃半乳糖基-D -核糖-1， 3， 4 - 二十烷三 醇或者2 一 二十六酰氨基-1 - 0 - ot - D -吡喃半乳糖基-D -核糖— 1， 3,4-十九烷三醇。
全文摘要
本发明提供由NKT细胞引起或者由于对NKT细胞的刺激而引起病态恶化的疾病的治疗药，其中含有由式(I)表示的化学合成的糖脂衍生物或者其可药用的水合物或者溶剂合物作为有效成分(式中，R¹表示吡喃醛糖残基；R²表示氢原子、或者羟基；A表示-CH₂-、-CH(OH)-CH₂-或者-CH＝CHCH₂-；x表示13～16的整数；y表示0～25的整数)。
文档编号A61P11/02GK101316599SQ20068004450
公开日2008年12月3日 申请日期2006年10月27日 优先权日2005年10月28日
发明者三宅幸子, 山村隆, 案浦洋一 申请人:国立精神神经中心主席代表的日本国;阿斯比奥制药株式会社