专利名称：消炎和抗氧化协同作用的膳食补充组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及那些用于治疗和预防哺乳动物中由脂氧合酶介导、自由基介 导的身体失调和各种肌骨退化疾病，如风湿性关节炎和骨关节炎的协同组合
物。本发明还涉及那些对诱导型环氧合酶-2(COX-2)和5-脂氧合酶(5-LOX)具 有协同抑制作用的组合物。这些组合物优选含有一种浓縮的3-0-乙酰基-ll-酮-P-乳香酸(AKBA)、浓縮的去甲基姜黄素，并选择性地含有其它具有消炎 和抗氧化协同特性的成分。
背景技术：
炎症性疾病影响了过50万美国人。在过去十到十五年中对分子和细胞免 疫的基础研究使得这些免疫系统疾病的诊断、治疗和预防方法发生明显的变 化。其中一个实例是一种诱导型环氧合酶的发现。结构型环氧合酶(COX)， 于1976年被首次纯化并于1988年被克隆，它利用花生四烯酸(AA)合成前 列腺素合成(PGs)。在它被纯化后的第三年，具有C0X活性的诱导型酶被发现 并被命名为C0X-2,而结构型环氧合酶被命名为C0X-1。
C0X-2的基因是在促炎性细胞因子和生长因子控制下表达的。因此，可 以推论出C0X-2既产生炎症，又控制细胞生长。而C0X-2在许多组织中都可 以发生诱导，它存在于大脑和脊髓中进行疼痛和发烧的神经传输。环氧合酶 是两个异构体的结构几乎相同，它们的不同之处在于各自的底物和选择性抑 制剂不同，以及它们在细胞内的位置不相同。由C0X-1合成的保护性PGs用 于保护胃壁完整，在肾损害时保持正常的肾功能。另一方面，免疫细胞中的 C0X-2合成的PGs集中在炎症区域。C0X-2的发现可以用于设计生产一种新的 药物和协同作用的组合物，它们可以在不去除胃和肾脏中由C0X-1合成的保 护性PGs的情况下，减轻炎症。
白三烯和5(s)-HETE是炎症、过敏和阻塞进程的重要介质。白三烯能增
5加微型血管的通透性，是有效的趋化剂。抑制5-脂氧合酶能间接地降低 TNF-a的表达。因此5-脂氧合酶是用于识别各种抑制剂的靶标酶，这些抑制 剂有可能在各种炎症和超敏类人类疾病，包括哮喘、关节炎、肠疾病如溃疡 性结肠炎和如休克及缺血等循环系统疾病中被复制。
自由基在多数病理疾病，如癌症、阿尔茨海默氏症、帕金森症和心血管 疾病的产生及恶化过程中起到了一个关键的作用。发现自由基在食品工业中， 会使食物在加工和储存过程中发生变质。因此食物中的抗氧化添加物和为生 物系统清除自由基的抗氧化补充剂受到关注。
从姜黄属植物的根部分离得到的黄色提取物中含有双肉桂甲垸类的姜黄 素。姜黄素在原料中的含量为3_5%。它们被认为是最重要的有效成分并被认 为作用于姜黄属的生物活性。虽然它们的主要活性是消炎，但是据报道，姜 黄素具有抗氧化、抗过敏、愈合伤口、解痉、抗细菌、抗真菌、抗肿瘤和抗 HIV活性。姜黄素于1815年被分离出来，并在1910年确定结构。从姜黄属 植物中分离出的其它重要姜黄素包括脱甲氧基姜黄素和双脱甲氧基姜黄素。 姜黄素也可以在除姜黄属之外的植物中被发现，如莪术。姜黄素具有公知的 消炎活性。姜黄在印度草医学中是一种最古老的消炎药。
药物代谢动力学涉及姜黄及其成分的安全性、毒性、剂量范围和生物学 特性，包括姜黄素是的生物特性，而姜黄可用于各种食品的储存。
姜黄素的消炎特性显示于它可以抑制大鼠腹腔中嗜中性粒细胞的5-脂 氧合酶活性，并能抑制人类血小板中的12-脂氧合酶和环氧合酶活性 (Amnion, H. P， T.等，J. Ethopharmacol, 1993， 38， 113-119)。姜黄素对槲皮素诱 导的核DNA损伤、脂质过氧化和蛋白质降解没有显著的影响，因此它们根据 所处的生物环境中的氧化还原态，既可以具有亲氧性又可以具有抗氧性的独 特特性。(Saura， C.等.，CancerLetters, 1992， 63, 237-241)。
资料库的专利参考目录中涉及的含有姜黄素的细胞保护剂，其中姜黄从 姜黄属、抗坏血酸和/或超氧化物歧化酶(DS0)中获得，最有趣的为 FR2，655，054。姜黄素有一个已知的相互协同作用的抗氧化、抗坏血酸和DS0 作用。
植物锯齿状乳香树(橄榄科)中的树脂胶在印度药学系统中一直被印度
6草医学者用于治疗类风湿关节炎和痛风。树脂胶的各种提取tr在动物实验和
临床试验中表现出强消炎和抗关节炎活性(Atal， C. K.等.，Ind. J. Pharm.， 1980， 12， 59;Pach謹da， V. K.等.,Ind. J. Pharm. ， 1981， 13, 63)。在具体的药理 学研究中，辛格等人已确定锯齿状乳香树中树脂胶的乙醇提取物在大鼠和小 鼠的反角叉菜胶诱导以及大鼠葡聚糖水肿中表现出明显的消炎活性 (Singh， G. B.等.，AgentsandAction， 1986, 18， 407)。过去人们也认识到锯齿状 乳香树中树脂胶的乙醇提取物能抑制大鼠腹腔嗜中性球中的白三烯B4 。白三 烯B4是炎症反应中的重要药物(Ammon， H. P. T.等.，PlantaMedica， 1991， 57， 203)。
至今未发现用于维护关节健康，治疗关节炎或其它炎症，并具有C0X-2 和5-L0X特异性，由浓縮的去甲基姜黄素，浓縮的3-O-乙酰基-L左旋酮-P-乳香酸(AKBA)以及其它选择性成分组成的一种组合物。并且至今也还未发 现能高特异性地协同抑制C0X-2和5-L0X，具有支持关节功能正常化，含有 去甲基姜黄素、AKBA和其它选择性成分的一种组合物。
因此，非常需要开发出适于病患的膳食组合物，通过协同作用产生比各 单独成分效果总和更好的效果，此外也可以在炎症和现有技术中的标准化临 床治疗中协同作用，在炎症疾病中尚没有这样的协同性5-脂氧合酶。
因此本发明的目的之一是提供一种无毒的膳食补充组合物，用于预防或 治疗5-脂氧合酶介导的身体失调，如炎症疾病(如类风湿关节炎、骨关节炎 和牙周疾病)、哮喘、肠疾病如溃疡性结肠炎和如休克及缺血等循环系统疾病。
本发明还有一个目的是提供用于防止自由基介导的身体失调，如癌症、 阿尔茨海默氏症、帕金森症和心血管疾病的一种组合物。
因此，确定一种能特异性地抑制或防止C0X-2和5-L0X协同作用的浓缩 天然组合物是有益的。该组合物含有浓縮的去甲基姜黄素和浓縮的AKBA，用 于维护关节健康，治疗关节炎或其它炎症、哮喘、肠疾病如溃疡性结肠炎和 如休克及缺血等循环系统疾病，这在之前是没有被发现的。
美国专利6， 521， 271公开了能提高皮肤病患者的皮肤对所用的一种姜黄 成分和乙醇酸利用率的方法。
美国专利6， 264， 995公开了一种通过抑制环氧合酶-2来减轻骨、关节炎症的草药组合物。该组合物由圣罗勒、姜黄、姜、绿茶、迷迭香、虎杖、黄 连、伏牛花、牛至和黄芩制成。
美国专利6， 841， 177公开了姜黄提取物的抗增殖和光敏化活性，以及它 在如牛皮癣等增殖疾病中用于降低血浆纤维蛋白原和载脂蛋白B/载脂蛋白 AI份额，同时不改变其他凝血参数。
美国专利6， 440， 468公开了一种制备非极性和极性姜黄提取物的方法及 其应用。一种制备非极性提取物的方法包括(a)用一种有机溶剂提取根；(b) 过滤并蒸发干燥提取物；(c)在高温下分散树脂油，迅速冷却并过滤固体物质； (d)干燥结晶，获得姜黄素纯度高于90%的产品。 一种制备极性提取物的方法 包括(i)用50-7(TC的水提取根，(ii)过滤并蒸发掉水。并公开了这些化合 物及其制备方法应用于自由基收集剂和抗衰老剂，以及降低人体油脂过氧化 物血浆水平的降低剂。
美国专利5， 494， 668公开了一种治疗动物，尤其是人类肌骨变性疾病， 如风湿性关节炎和骨关节炎的方法，包括将植物心叶牛青胆(印度人参)、撒 布(印度乳香)、姜黄(中药植物姜黄)、和生姜(中国生姜)按预定比例混 合，再加入或不加入生物活性有机成分，如硫酸锌，进行浓缩提取，然后通 常用方便的剂型，以治疗有效量为动物给药。并公开了一种新的制备浓縮植 物提取物的方法。
美国专利5， 629， 351公开了一种含有乳香酸混合物的新成分，其中该成 分具有消炎和抗溃疡活性。还公开了一种具有消炎、防风湿和抗溃疡活性的 新型乳香酸混合物。
美国专利20030152585A1公开了草药组合物，它混合了如心叶青牛胆、 库拉索芦荟、姜黄、催眠睡茄、土牛膝、圣罗勒和库洛胡黄连等草药，用于 治疗血液系统恶性肿瘤。
美国专利6， 979， 470公开了多个姜黄素组合物，包括姜黄素品种的一个 有效量和二萜内酯、三萜或其衍生物品种的一个有效量，具有特异性抑制诱 导型COX-2活性的协同作用，并并具有C0X-1的最小效用。
美国专利20040247700A1公开了对环氧合酶-2的表达及/或活性具有协 同抑制作用的姜黄素组合物，该组合物用于治疗如炎症或关节炎，它包括姜
8黄素和二萜内酯或三砲，并对诱导型环氧合酶-2 (COX-2)活性具有特异性抑制 作用。
美国专利20030096027A1和20050129791A1公开了对环氧合酶的表达及/ 或活性具有协同抑制作用的姜黄素组合物。此外还公幵了这种组合物用于治 疗如炎症或炎症类疾病，它包括姜黄素品种和a-酸(蛇麻草植物产物)或
P-酸(蛇麻酮)。
美国专利20030108628A1公开了对环氧合酶的表达及/或活性具有协同 抑制作用的姜黄素组合物。还公开了该组合物用于治疗如炎症或关节炎，它 包括姜黄素和二萜内酯或三萜，并对诱导型环氧合酶-2 (C0X-2)活性具有特异 性抑制作用。
美国专利20050191375A1公开了具有协同作用的消炎类药物组合物及使 用姜黄素或甲基黄嘌呤的相关方法。还公开了能减轻炎症或治疗如疼痛、癌 症、风湿性关节炎、牛皮癣、溃疡性结肠炎和结膜炎的组合物，它含有从蛇 麻草和甲基黄嘌呤中分离提取的成分。
美国专利20050123632A1公开了一种特殊姜黄提取物的消炎活性。还公 开了姜黄油混合物制成的药物或保健品组合物，用于治疗炎症如风湿性关节 炎，它含有正己垸可溶性成分。
美国专利20050123632A1公开了具有抗氧化活性的新型多羟基姜黄素， 这些新型多羟基姜黄素用于抗氧化。
欧洲专利1133992A1公开了姜黄属提取物的新型药理活性。组合物中使 用了姜黄属的水乙醇提取物，其具有如光敏性、防增生和降低纤维蛋白原水 平活性，还公开了它可以用于治疗牛皮藓。
专利W003007975A1公开了对环氧合酶-2的表达及/或活性具有协同抑制 作用的姜黄素组合物。还公开了该组合物用于治疗如炎症或关节炎，它包括 姜黄素和二萜内酯或三萜，并对诱导型环氧合酶-2 (C0X-2)活性具有特异性抑 制作用。
专利W006062681A1公开了对环氧合酶-2的表达及/或活性具有协同抑制 作用的姜黄素组合物。其含有有效量的作为第一组分的一种姜黄素品种和一 种有效量的第二组分，其中第二组分选自一种a-酸品种(蛇麻草植物产物)
9或3-酸(蛇麻酮)或其衍生物。
专利W005084230A2公开了协同作用的消炎药物组合物及使用姜黄素或 甲基黄嘌呤的相关方法。该组合物用于消除炎症或治疗如疼痛、癌症、风湿 性关节炎、牛皮癣、溃疡性结肠炎和结膜炎，它含有从蛇麻草和甲基黄嘌呤 中分离提取的成分。
专利GB2388539A1公开了用于治疗癌症的两种多草药配方，包括六种或 四种草药的混合物，或草药有效成分提取物或合成物的混合。首选配方包括 大豆、番茄、大蒜、姜黄、亚麻和田旋花相混合。次选配方包括金果蕨，催 眠睡茄，余甘子和声^草相混合。
美国专利5， 629， 351公开了乳香酸组合物及其制备方法。该组保物包括 一种新的含有公知乳香酸和新型2- a ， 3- ct -二羟基乌苏-12-烯-24-酸的成 分，它用作协同作用的消炎剂、治风湿剂和抗溃疡剂。
专利AU0075253A5公开了姜黄属提取物的新型药物活性。组合物中使用 了姜黄属的水乙醇提取物，并具有如光敏性、防增生和降低纤维蛋白原的活 性，并公开了其用于治疗牛皮藓。
美国专利申请20040166178A1公开了在一种局部组合物中的3-0-乙酰基 -ll酮-乳香酸或及提取物，用于预防并治疗皮肤铍纹及放松皮肤。该专利还 公开了将这种含有锯齿状乳香树提取物的组合物局部滴旋到皮肤上，作为软 化皮肤皱纹及/或放松皮肤的试剂。
专利W00057893A1公开了含有乳香树提取物和载体的组合物，用于减少 毛发及皮肤的疼痛。
专利W00062751A2公开了含有乳香树提取物、载体和香料成分的组合物， 用于治疗口腔疼痛或炎症。
专利W003077860A2公开了含有浓縮3-0 -乙酰基-11-酮-P-乳香酸 (AKBA)的乳香组合物用于治疗炎症。还公开了它的制备过程，将一种锯齿状 乳香树五环萜烃酸性成分提取物制备3- P -乙酰基-11-酮-P -乳香酸。
专利IN0182615A公开了一种从锯齿状乳香树的树胶脂中分离出一种新 型乳香酸的方法。还公开了含有乳香树提取物和载体的该组合物用于毛发和 皮肤上减少疼痛。美国6， 589， 516公开了含有乳香树提取物的组合物。还公开了含有乳香 树提取物和载体的该组合物用于毛发和皮肤上减少疼痛。
因此在现有技术中没有涉及有关一种含有浓縮AKBA提取物和浓縮去甲 基姜黄素的组合物，该组合物具有协同抑制5-脂氧合酶的作用。
因此本发明的目的之一是提供一种无毒膳食补充组合物，它可以预防或 治疗COX-2和5-脂氧合酶介导的身体失调、炎症疾病如类风湿关节炎、牙周 疾病、哮喘、肠道疾病如溃疡性结肠炎等、如休克及缺血等循环系统身体失 调疾病，自由基介导的身体失调疾病如癌症、老年痴呆症、帕金森症和心血 管疾病。
发明概述
本发明提供了一种新型的具有协同作用的膳食补充组合物，它能预防脂 氧合酶和自由基介导的身体失调。
本发明提供了一种由源于锯齿状乳香树的浓缩3-0-乙酰基-ll-酮-e-乳香酸(AKBA)和源于姜黄属的浓缩去甲基姜黄素混合而成的具有协同作用的 膳食混合物。
本发明还提供了一种具有协同作用的膳食混合物，它含有源于锯齿状乳 香树的浓縮3-0-乙酰基-11-酮-0 -乳香酸(AKBA)和源于姜黄属的浓缩去甲 基姜黄素，并可以选择性地含有葡糖胺，白藜芦醇，大蒜提取物，软骨素， 甲磺酰甲烷，菠萝蛋白酶，舍雷肽酶，栎醇中的一种或多种。
本发明进一步提供了一种用于预防或治疗炎症疾病，如风湿性关节炎、 骨关节炎、牙周疾病、哮喘、肠疾病如溃疡性结肠炎和如休克及缺血等循环 系统疾病的组合物。
本发明进一步提供了一种用于预防自由基介导的身体失调，如癌症、阿 尔茨海默氏症、帕金森症和心血管疾病的组合物。
本发明提供了一种由源于锯齿状乳香树的浓縮3-0-乙酰基-ll-酮-P-乳香酸(AKBA)提取物和源于姜黄属的浓缩去甲基姜黄素提取物混合而成的 具有协同作用的膳食混合物，其中所述的源于锯齿状乳香树的提取物是浓縮 到100%的AKBA。
ii本发明提供了一种由源于锯齿状乳香树的浓缩3-0-乙酰基-il-酮-P-乳香酸(AKBA)和源于姜黄属的浓縮去甲基姜黄素提取物混合而成的具有协同
作用的膳食混合物，其中所述的源于姜黄属的提取物是浓縮到100%的去甲基 姜黄素。
本发明提供了一种由源于锯齿状乳香树的浓缩3-0-乙酰基-11-酮-e-乳香酸(AKBA)和源于姜黄属的浓縮去甲基姜黄素混合而成的具有协同作用的
膳食混合物，其中所述的组合物是通过协同作用抑制5-L0X和C0X-2的可诱 导性和/或活性。
我们在2004年04月15日申请的与本申请同时待审的申请US2004073060 中，公开了一种从锯齿状乳香树提取物中浓缩获得30-95% AKBA的方法。浓 縮后的AKBA提取物对5-脂氧合酶的抑制作用是商用乳香树提取物的几倍。 对乳香酸必要结构的具体研究表明，在所有的六种酸中，3-0-乙酰基-11-酮-e-乳香酸，下文中将简称为AKBA (图l)具有最强的抑制5-L0X活性。
图l.AKBA的化学结构
5-Loxin是一种AKBA含量不低于30%的乳香树提取物的商标，它用于制 备同样可以使用的AKBA含量为2-95%的组合物和提取物。
我们在2005年10月13日申请的与本申请同时待审的申请PCT/IN05/ 00337中，公开了一种浓縮获得100%去甲基姜黄素的方法。浓缩后的去甲基 姜黄素具有很强的抑制5-脂氧合酶和自由基作用。图2所示的是浓縮的去甲 基姜黄素中的成分。去甲基姜黄属提取物中含有的去甲基姜黄素是这种组合 物中使用的去甲基姜黄素(结构l-4)总量的15-100%。结构3
结构4
图2:浓缩后的去甲基姜黄素中所含成分的化学结构
浓缩后的去甲基姜黄素中所含成分均为天然产物。这些化合物(结构l、
3和4)均是姜黄属中的次级天然产物(Mimura， A.等.，US5， 266, 344和Jiang， H.等.，J. ChromatographyA, 2006, 1111,21-31)。化合物(结构2)是从姜黄 属中分离出来的(Nakayama， R.等.，Phytochemistry, 1993， 33， 501-502)。
此外，美国国家癌症研究所的科学家还检测出姜黄素和去甲基姜黄素具 有抗HIV活性。他们发现去甲基姜黄素(结构1)的抑制HIV-1整合酶的IC50 值低于IO微米。
该混合物中的去甲基姜黄素是本发明所述的组合物中使用的去甲基姜黄 素(结构1-4)总量的15-100%。
发明内容
本发明提供了可以减轻炎症的组合物和方法。本发明尤其提供了一种含 有源于锯齿状乳香树的浓縮3-0-乙酰基-11-酮-e -乳香酸(AKBA)和源于姜 黄属的浓縮去甲基姜黄素的具有协同作用的组合物。本发明将锯齿状乳香树 提取物浓縮获得的AKBA与浓縮的去甲基姜黄素联合使用来治疗需要预防的 疾病及/或病患身上的炎症。
本发明还提供了一种组合物，它含有源于锯齿状乳香树的浓縮AKBA和源 于姜黄属的浓縮去甲基姜黄素，并可以选择性地含有葡糖胺，白藜芦醇，大 蒜提取物，软骨素，甲磺酰甲垸，菠萝蛋白酶，舍雷肽酶，栎醇中的一种或
13多种。
非类固醇消炎药(NSAE's)通常作为治疗风湿性疾病的药物使用。但是NSAID's的常规使用会加重胃和十二指肠溃疡。因此，尽管在数十年里进行了各种培养，但是由于天然NSAID's的安全性和高效性，其需要还在激增。
本发明的组合物由天然提取物组成，并通过数十年的使用被验证在传统的用药系统中是安全的。此外，锯齿状乳香树提取物具有公知的抗溃疡活性。
在一个优选的实施例中，本发明的组合物含有浓缩的AKBA和浓縮的去甲基姜黄素，并可以选择性地含有葡糖胺，白藜芦醇，大蒜提取物，软骨素，甲磺酰甲烷，菠萝蛋白酶，舍雷肽酶，栎醇。
在本发明一个优选的实施例中，本发明的组合物含有2-95%的3-O-乙酰基-ll-酮-e-乳香酸。
在本发明一个更优选的实施例中，所述的浓缩的乳香树提取物含有30%的AKBA，如商用的5-Loxin 。
具有协同作用的新型膳食补充组合物含有浓缩的AKBA和浓縮的去甲基姜黄素，前后两者的比例为9:1-1:9。
在本发明一个优选的实施例中，本发明的组合物含有浓縮的3-0-乙酰基-11-酮-3-乳香酸(AKBA)和浓縮的去甲基姜黄素，前后两者的比例为5:1-l:l(w/w)，该组合物具有协同抑制5-脂氧合酶活性的作用(表l)。
所述的膳食补充组合物可以选择性地含有葡糖胺，白藜芦醇，大蒜提取物，生姜提取物，软骨素，甲磺酰甲烷，菠萝蛋白酶，舍雷肽酶，栎醇中的一种或多种。
所述的葡糖胺可以选自葡糖胺盐酸盐或葡糖胺硫酸盐或N-乙酰葡糖胺。所述的口服膳食补充组合物含有10-90%的浓縮AKBA和90-10%的浓縮去
甲基姜黄素。
所述的口服膳食补充组合物含有30-50%的浓縮AKBA提取物，10-20%的浓縮去甲基姜黄素和40-50%的葡糖胺盐酸盐。
所述的膳食补充组合物含有30-40%的浓縮AKBA提取物，5-20%的浓縮去甲基姜黄素，50-60%的葡糖胺盐酸盐和5-10%的白藜芦醇。
所述的口服膳食补充组合物含有30-60%的浓缩AKBA提取物，5_20%的浓縮去甲基姜黄素和5-20%的白藜芦醇。
所述的口服膳食补充组合物含有30-60%的浓縮AKBA提取物，5-20%的浓縮去甲基姜黄素，10-30%的甲磺酰甲垸。
所述的口服膳食补充组合物含有30-60%的浓縮AKBA提取物，5_20%的浓缩去甲基姜黄素，10-30%的大蒜提取物。
所述的膳食补充组合物含有20-30%的浓縮AKBA提取物，5-10%的浓缩去甲基姜黄素，40-50%的葡糖胺盐酸盐，5-10%的白藜芦醇，10-15%的大蒜提取物和10-15%的生姜提取物。
所述的膳食补充组合物含有20-30%的浓縮AKBA提取物，5-10%的浓缩去甲基姜黄素，30-40%的葡糖胺盐酸盐，5-10%的软骨素硫酸盐，10-15%的甲磺酰甲烷和5-10%的菠萝蛋白酶。
本发明还提供了一种具有良好抗氧化活性的药用或食用/保健品用或化妆品用组合物，它含有浓縮的AKBA，浓縮的去甲基姜黄素，没食子酸，咖啡酸和绿茶提取物。
所述的膳食补充组合物含有30-50%的浓縮AKBA提取物，5_10%的浓缩去甲基姜黄素，5-10%的没食子酸，5-10%的咖啡酸和20-30%的绿茶提取物。
本发明还涉及的组合物含有源自锯齿状乳香树的浓縮AKBA和源自姜黄属的浓缩去甲基姜黄素，并选择性地含有非类固醇消炎剂如阿司匹林(乙酰基水杨酸)，布洛芬[a -甲基-4_ (2-甲基异丁基)苯乙酸]等中的一种或多种。
所述的膳食补充组合物含有30-50%的浓縮AKBA提取物，5_20%的浓縮去甲基姜黄素和10-30%的阿司匹林。
所述的膳食补充组合物含有30-50%的浓縮AKBA提取物，5_20%的浓缩去甲基姜黄素和10-30%的布洛芬。
所述的膳食补充组合物含有浓縮的AKBA和浓縮的去甲基姜黄素，并选择性地含有其它具有良好抗氧化活性的成分(表2)。
一种治疗由炎症疾病引起病人疼痛的方法，其中所述的炎症疾病是由生物分子引起的，该生物分子选自有活性的颗粒状柱状细胞，所述的炎症疾病包括骨关节炎，癌症，纤维肌痛，动脉粥样硬化，炎症性肠道疾病，间质性膀胱炎，肠易激综合症，哮喘，偏头痛，心绞痛，慢性前列腺炎，湿疹，关节炎，多发性硬化症，牛皮癣，日晒病和牙周疾病，该方法包括向病人分阶段注入有效剂量(如治疗的一个有效剂量，缓慢治疗等)的所述组合物。
一种预防由自由基介导的疾病引起病人疼痛的方法，其中所述的自由基介导的疾病是由身体里的基团引起的，所述的自由基介导的疾病包括癌症、阿尔茨海默氏症、帕金森症和心血管疾病，该方法包括向病人分阶段注入有效剂量的所述组合物。
本发明的活性膳食补充组合物由这里所述的方法或本领域技术人员对其进行改良的方法制备而成。
本发明的另一个方面是描述了一种药物配方，该配方含有一种组合物及一种药物可接受载体(如一种水溶性或非水溶性载体)。
本发明所述的不同组合物的优选实施例如下表所示
组合物l: 一种膳食补充组合物由下述成分按单位剂量混合而成
浓縮的AKBA提取物 5g
浓縮的去甲基姜黄素lg
组合物2: 一种膳食补充组合物由下述成分的单位剂量混合而成
浓縮的AKBA提取物 5g浓縮的去甲基姜黄素lg
组合物3: 一种膳食补充组合物由下述成分的单位剂量混合而成-浓縮的AKBA提取物 2g浓縮的去甲基姜黄素2g
组合物4: 一种膳食补充组合物由下述成分的单位剂量混合而成
浓縮的AKBA提取物 2g浓縮的去甲基姜黄素0.5g葡糖胺盐酸盐 2.5g
组合物5: 一种膳食补充组合物由下述成分的单位剂量混合而成
16浓縮的AKBA提取物 1.5g浓縮的去甲基姜黄素0.25g
葡糖胺盐酸盐 3g
白藜卢醇 0.25g
组合物6: 一种膳食补充组合物由下述成分的单位剂量混合而成:
浓縮的AKBA提取物 1.5g
浓縮的去甲基姜黄素0.25g
葡糖胺盐酸盐 2g
白藜声醇 0.25g
大蒜提取物 lg
组合物7: 一种膳食补充组合物由下述成分的单位剂量混合而成:
浓縮的AKBA提取物 1.5g
浓縮的去甲基姜黄素0.25g
葡糖胺盐酸盐 2g
白藜芦醇 0.25g
大蒜提取物 0.75g
生姜提取物 0.75g
组合物8: 一种膳食补充组合物由下述成分的单位剂量混合而成:
浓缩的AKBA提取物
浓縮的去甲基姜黄素
没食子酸
绿茶提取物
2. 5g0. 5g0. 5g0. 5g
lg
下述实例将进一步说明本发明例l:
17协同抑制5-脂氧合酶活性
用比色法检测所述的新型膳食补充组合物的抑制5-脂氧合酶能力。分析混合物含有50mM磷酸盐缓冲液(pH 6.3)， 5-脂氧合酶，溶于中、总体积为0.5mL的二甲亚砜和亚麻酸溶液，溶液中含有各种浓度的待测组合物(5 ii g， 10 u g， 20 u g)，待上述反应混合物混合5分钟后，加入0. 5mL铁二甲酚橙剂，两分钟后用分光光度计检测其585nm下的OD值。然后将待测组合物溶液换成载体按上述方法再测对照值。根据待测组合物的吸光率和对照组的吸光率计算出抑制百分率。
结果如下表所示
表1.抑制5-脂氧合酶活性
序号化合物名称抑制率(％)5吗IO吗20吗
1组合物l22.434.149.7
2组合物229.339.949.2
3组合物344.557.564.14
4组合物419.427.345.1
5组合物59.114.934.9
6组合物615.622.736.5
7组合物717.124.144.5
8组合物812.525.653.2
9浓縮的AKBA提取物012.532.7
10浓縮的去甲基姜黄素33.962.967.5
抑制率％越高，活性越高。
上述5-脂氧合酶抑制率(表l)清楚地说明该组合物的协同作用。例如,浓度为5 u g时，浓缩的去甲基姜黄素和浓缩的AKBA提取物的抑制率分别为33. 9%和0%。而含有质量比1:1的浓缩去甲基姜黄素和浓縮AKBA提取物的组合物3，其抑制率为44. 5%。该组合物的抑制率高于各单独成分的抑制率。
例2
组合物的抗氧化活性
用超氧自由基清除法检测所述的膳食补充组合物的抗氧化活性。所述的超氧自由基清除活性由NBT (硝基四氮唑蓝)法确定。反应混合物含有EDTA(6.6mM)， NaCN(3ug)，核黄素(2uM)， NBT(50uM)，总体积为3ml乙醇
18溶液，溶液中含有各种浓度的待测组合物和磷酸盐缓冲液(58mM，pH7.8)。检测560nm的光密度。将试管在白炽灯下均匀照射15分钟后，再次检测560nm的光密度。根据待测组合物的吸光率和对照组的吸光率计算出抑制百分率和过氧化物基团产生百分率。
用DPPH法检测所述的膳食补充组合物的抗氧化活性。DPPH(l， 1-二苯基-2-三硝基苯肼)基团清除活性是根据有色的DPPH甲醇溶液的减少量来测定的。加入了 DPPH甲醇溶液的待测组合物乙醇溶液，其自由基清除能力是与DPPH溶液在516mn下初始与最终吸收率之差成反比的。反应混合物含有1 X10—4mMDPPH甲醇溶液，各种浓度的待测药物。根据待测组的吸光率和对照组的吸光率计算出抑制百分率。
结果如下表所示.-
表2.抗氧化活性:
序号化合物名称过氧化物(NBT)DPPH
ICso吗IC50吗
1组合物126.02.88
2组合物216.52.62
3组合物37.51.33
4组合物450.013.06
5组合物573.028.75
6组合物679.626.85
7组合物774.027.43
8组合物88.75
9浓縮的AKBA提取物>100—
10浓縮的去甲基姜黄素2.8—
IC50值越低，抗氧化活性越高。
上述抗氧化活性值(表2)说明所有的组合物都具有良好的抗氧化活性。此外，较之商用抗氧化剂，如维生素E等，这些组合物也可以被制成抗氧化剂。
例3:
组合物-1的协同消炎活性将测试动物(老鼠，200-300g)不论雌雄，随机分组，每组5只。在老鼠的膳食中每P/nCMC补充去甲基姜黄素(50mg/kg)或浓缩的AKBA提取物(50mg/kg)或组合物1(50mg/kg)，连续补充28天。对
19照组用同样体积的载体(1。/。CMC)，一种标准药物，氢化波尼松(10mg/kg， 口月艮)。 在第14天时，向左后肢的种植区皮下注射14，100ul弗氏完全佐剂(FCA)。 分别在FCA激发的前一天和试验终止的那天，即激发后第14天收集每个动物 的血液标本。在第28天时，测量鼠爪体积，并解剖动物，切除肝脏组织并保 持储存在-8(TC中。测定促炎性指标，如亚硝酸盐、血清IL-IP和鼠爪水肿。
例4:
组合物7的协同消炎活性将测试动物(老鼠，200-300g)不论雌雄， 随机分组，每组5只。在老鼠的膳食中按1%CMC补充去甲基姜黄素(50mg/kg) 或浓縮的AKBA提取物(50mg/kg)或葡糖胺(50mg/kg)或白藜芦醇(50mg/kg)或 大蒜提取物(50mg/kg)或生姜提取物(50mg/kg)或组合物7 (50mg/kg)，连续补 充28天。对照组用同样体积的载体(:^CMC)， 一种标准药物，氢化波尼松 (10mg/kg， 口服)。在第14天时，向左后肢的种植区皮下注射14，100ul弗 氏完全佐剂(FCA)。分别在FCA激发的前一天和试验终止的那天，即激发后 第14天收集每个动物的血液标本。在第28天时，测量鼠爪体积，并解剖动 物，切除肝脏组织并保持储存在-8(TC中。
抑制率如下
去甲基姜黄素42. 3%
浓縮的AKBA提取物36. 5%
葡糖胺5. 5%
白藜戸醇20. 5%
大蒜提取物25. 2%
生姜提取物20. 2%
组合物749. 5%
图l、 2和3分别总结了 IL-1P，亚硝酸盐和鼠爪水肿各自的结果。 图1的柱形图所示的分别是试验的第13天(FCA激发之前)和第28天 (激发后第14天)，不同组别中动物的血清IL-10的对比。l.CMC对照；2.氢化波尼松；3.95。/o姜黄素(50mg/kg体重)；4.去甲基姜黄素(10mg/kg); 5. 浓缩的AKBA提取物(50mg/kg); 6.浓縮的AKBA提取物和天然姜黄素的混合物 (50mg/kg); 7.组合物1(50mg/kg)。每条柱分别代表所测的每组5只动物的 士SD值。
图2的柱形图所示的分别是试验的第13天(FCA激发之前)和第28天 (激发后第14天)，不同组别中动物的血清亚硝酸盐的对比。l.CMC对照； 2.氢化波尼松；3.95yQ姜黄素(50mg/kg体重)；4.去甲基姜黄素(10mg/kg); 5.浓縮的AKBA提取物(50mg/kg); 6.浓縮的AKBA提取物和天然姜黄素的混合 物(50mg/kg); 7.组合物1 (50mg/kg)。每条柱分别代表所测的每组5只动物 的士SD值。
图3的柱形图所示的是向左后肢的种植区接种弗氏完全佐剂后第14天， 不同组别中动物发生鼠爪水肿的抑制百分率。l.氢化波尼松；2.95%姜黄素 (50mg/kg体重)；3.去甲基姜黄素(10mg/kg) ; 4.浓縮的MBA提取物 (50mg/kg); 5.浓縮的AKBA提取物和天然姜黄素的混合物(50mg/kg); 6.组合 物1 (50mg/kg)。每条柱分别代表相对于CMC对照组的抑制百分率。
对于本领域的技术人员来说，上文根据附图所述的实例不能用于限制本 发明，并且本发明可以在其保护的范围内以各种特殊的方式实施，因此可以
根据权利要求，甚至是上文所述的内容，从附图中多方面变换本发明的实施 例，而不受任何限制，因此本发明包括所有对权利要求进行的等同变换。
2权利要求
1、膳食补充和协同治疗组合物，其用于治疗和/或控制5-脂氧合酶和自由基介导的疾病，含有从锯齿状乳香树提取物中浓缩得到的3-O-乙酰基-11-酮-β-乳香酸(AKBA)和从姜黄属提取物中浓缩得到的去甲基姜黄素，所述的组合物还含有葡糖胺，白藜芦醇，大蒜提取物，生姜提取物，软骨素，甲磺酰甲烷，菠萝蛋白酶，舍雷肽酶，栎醇中的任意一种或多种。
2、 如权利要求l所述的组合物，其特征在于所述的浓縮得到的AKBA提取物 含有2-95%的3-0-乙酰基-ll-酮-0 -乳香酸，优选浓縮得到的AKBA提取物含 有30%。
3、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于浓縮的去甲基姜黄素含有去甲基 姜黄素总量的15-100%。
4、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于浓縮的去甲基姜黄素是将姜黄属 提取物去甲基后获得的。
5、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于所述的葡糖胺为葡糖胺盐酸盐或 葡糖胺硫酸盐或N-乙酰葡糖胺。
6、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于其含有10-90%的浓縮AKBA提取 物和90-10%的浓縮去甲基姜黄素。
7、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于其含有30-50%的浓縮AKBA提取 物，10-20%的浓縮去甲基姜黄素和40-50%的葡糖胺盐酸盐。
8.
9、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于其含有30-60%的浓縮AKBA提取 物，5-20%的浓縮去甲基姜黄素和5-20%的白藜芦醇。
10、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于其含有30-60%的浓縮AKBA提 取物，5-20%的浓縮去甲基姜黄素和10-30%的甲磺酰甲垸。
11、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于其含有30-60%的浓缩AKBA提 取物，5-20%的浓縮去甲基姜黄素和10-30%的生姜提取物。
12、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于其含有20-30%的浓缩AKBA提 取物，5-10%的浓缩去甲基姜黄素和40-50%的葡糖胺盐酸盐和5-10%的白藜芦 醇，10-15%的大蒜提取物和10-15%的生姜提取物。
13、 如权利要求1所述的组合物，其特征在于其含有20-30%的浓缩AKBA提 取物，5-10%的浓縮去甲基姜黄素，30-40%的葡糖胺盐酸盐，5-10%的软骨素 硫酸盐，10-15%的甲磺酰甲烷和5-10%的菠萝蛋白酶。
14、 具有协同作用的口服膳食补充组合物，其特征在于其含有从锯齿状乳香 树提取物中浓縮得到的3-0-乙酰基-11-酮-0 -乳香酸(AKBA)和从姜黄属提 取物中浓縮得到的去甲基姜黄素，所述的组合物还含有天然抗氧化剂，如没 食子酸，咖啡酸，绿茶提取物中的任意一种或多种。
15、 如权利要求14所述的组合物，其特征在于其含有30-50%的浓縮AKBA提 取物，5-10%的浓缩去甲基姜黄素，5-10%的没食子酸，5-10%的咖啡酸和 20-30%的绿茶提取物。
16、 具有协同作用的口服膳食补充组合物，其特征在于其含有从锯齿状乳香 树提取物中浓縮得到的3-0-乙酰基-ll-酮-P -乳香酸(AKBA)和从姜黄属提 取物中浓縮得到的去甲基姜黄素，所述的组合物还含有非类固醇消炎剂，如 阿司匹林和布洛芬中的任意一种或多种。
17、 如权利要求16所述的组合物，其特征在于其含有30-5(m的浓縮AKBA提 取物，5-20%的浓縮去甲基姜黄素和10-30%的阿司匹林。
18、 如权利要求16所述的组合物，其特征在于其含有30-50%的浓缩AKBA提 取物，5-20%的浓縮去甲基姜黄素和10-30%的布洛芬。
19、 如权利要求1或14或16所述的组合物，其特征在于其所形成的药物配 方用于预防及/或治疗炎症。
20、 如权利要求1或14或16所述的组合物，其特征在于其所形成的药物配 方用于预防自由基介导的身体失调。
21、 如权利要求1或14或16所述的组合物，其特征在于其所形成的药物配 方用于预防心血管疾病。
22、 如权利要求1或14或16所述的组合物，其特征在于其形成一种膳食或 保健品配方。
23、 如权利要求1或14或16所述的组合物，其特征在于其形成一种化妆品 配方。
24、 一种治疗由炎症疾病引起病人疼痛的方法，其特征在于所述的炎症疾病是由生物分子引起的，该生物分子包括有活性的颗粒状柱状细胞，所述的炎 症疾病包括骨关节炎，癌症，纤维肌痛，动脉粥样硬化，炎症性肠道疾病， 间质性膀胱炎，肠易激综合症，偏头痛，心绞痛，慢性前列腺炎，湿疹，关 节炎，多发性硬化症，牛皮癣，日晒病和牙周疾病，该方法包括向病人分阶段注入如权利要求1或14或16所述的组合物的一个有效剂量。
25、 一种预防由自由基介导的疾病引起病人疼痛的方法，其特征在于所述的 自由基介导的疾病是由身体里的基团引起的，所述的自由基介导的疾病包括 癌症、阿尔茨海默氏症、帕金森症和心血管疾病，该方法包括向病人分阶段 注入如权利要求1或14或16所述的组合物的一个有效剂量。
26、 一种药物配方，其特征在于含有至少一种如权利要求1或14或16所述 的组合物和药物可授受的载体。
27、 如权利要求26所述的药物配方，其特征在于所述的载体是一种水溶性或 非水溶性载体。
全文摘要
本发明公开了新型膳食补充组合物，它们含有浓缩的3-O-乙酰基-11-酮-β-乳香酸和浓缩的去甲基姜黄素，其中这些组合物具有消炎、抗溃疡和抗氧化活性。本发明还公开了新型组合物，它们含有浓缩的3-O-乙酰基-11-酮-β-乳香酸和浓缩的去甲基姜黄素，并对COX-2和5-LOX活性具有协同特异性抑制作用，它们可以选择性地含有葡糖胺，白藜芦醇，大蒜提取物，软骨素，甲磺酰甲烷，菠萝蛋白酶，舍雷肽酶，栎醇，没食子酸，咖啡酸，绿茶提取物，阿司匹林和布洛芬。
文档编号A61K31/12GK101686725SQ200780052521
公开日2010年3月31日 申请日期2007年4月3日 优先权日2007年4月3日
发明者刚迦·拉贾·高卡拉贾, 楚莫图鲁·高拉考提, 维达特斯瓦鲁·萨姆帕利 申请人:刚迦·拉贾·高卡拉贾