专利名称：暗消藤抗肺癌活性提取物及其化合物的制备工艺的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及暗消藤抗肺癌活性提取物及其化合物 的制备工艺。该提取物及其活性成分均具有抗肺癌活性，用于制备抗肺癌 药物。
技术背景-.
癌症严重威胁着人类的生命。据世界卫生组织统计，全世界每年死于 癌症的患者约500万，肺癌的发病率和死亡率均居癌症之首。西医在治疗肺 癌时，主要采取的是手术切除，由于手术不可能绝对彻底地消灭癌细胞， 于是必须辅之于化疗或者放疗，但化疗或放疗却存在着在杀死癌细胞的同 时，也杀死了大量正常细胞的问题，存在严重的副作用。因此，新型抗肿 瘤药物研究势在必行。近年来新抗癌药不断出现，紫杉醇和喜树碱衍生物 抗肿瘤治疗作用的证实被誉为90年代抗癌药物研究的重大发现。也使全世
界的药物学家将抗癌药物研究的重点放在天然药物研究上。
在前期的研究中，发现萝摩科马莲鞍属植物暗消藤的提取物显示了很 强的抑制人肺腺癌A549细胞、纤维肉瘤HT-1080细胞增殖的活性，尤其是在 抑制人肺腺癌A549细胞增殖方面，好于5-氟尿嘧啶；同时对正常小鼠初代 肝细胞无毒性。通过活性跟踪，对该植物的活性部位化学成分进行研究， 分离、纯化、鉴定了18个化合物，其中14个为强心苷类化合物，通过单体 的体外活性测试，确定暗消藤中的抗癌活性成分为强心苷类物质。
发明内容
本发明的目的是提供暗消藤提取物及其制备工艺。暗消藤经适当的工 艺处理后得到的提取物及单体化合物，具有治疗肺癌的活性。
暗消藤植物来源为萝摩科暗消藤5Yrej roca W朋力/ze/7"i"。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的
1. 暗消藤药材的提取工艺
(i)暗消藤根粗粉，加xy。醇回流提取，提取液减压回收醇至无醇味， 浓缩为密度0. 80-1. io的浓缩液，得到溶液i备用。
(2 )暗消藤根粗粉，加水回流提取，提取液减压浓缩为密度0. 80-1. 10
的浓缩液n,备用。
本发明涉及到暗消藤活性部位的提取方法，其中x。/。是指醇浓度在 1%-100%的醇性溶液，所述的醇指具有以下通式的饱合一元醇或不饱合一元
醇CJk』H或C H2n—丄0H(n〈5)。
2. 暗消藤中的活性部位的富集工艺
该方案可通过如下(1) - (4)工艺完成，也可以通过(1) - (4)工艺 的两个或三个组合实现，如工艺(5)- (16)。
(1)将溶液I或溶液II上样于釆用常规方法事先处理好的HPD-100柱 (以下的都同样处理好)，用30%， 60%,90%乙醇洗脱，得到的60%乙醇洗
(S)溶液i或溶液n上样于釆用常规方法事先处理好的聚丙烯酰胺柱(以下的都同样处理好)，用10°/ 乙醇，95%乙醇洗脱，得到的10%洗脱物。
(3) 溶液I蒸干，用热水溶解，分别用乙醚(或氯仿，二氯甲烷等弱极 性溶剂)萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁醇萃取液。溶液n同法操作制 得的正丁醇部分，为暗消藤的活性部位。
(4) 溶液I或溶液II蒸干，用有机溶剂溶解，上样于硅胶柱，氯仿-甲 醇或二氯甲烷-甲醇3: l洗脱，得到的洗脱物为暗消藤的活性部位。
(5) 将溶液I或溶液II上样于事先处理好的HPD-100柱，用30%, 60%， 90%乙醇洗脱，得到的60%乙醇洗脱物。将60%洗脱物上样于事先处 理好的聚丙烯酰胺柱，用10%乙醇，95%乙醇洗脱，得到的1W洗脱物。
(6) 将溶液I或溶液II上样于事先处理好的HPD-100柱，用30%, 60%， 90%乙醇洗脱，得到的60%乙醇洗脱物。将60%洗脱物蒸干后用热水 溶解，分别用乙醚(或氯仿，二氯甲烷等弱极性溶剂)萃取后，正丁醇萃 取，得到的正丁醇萃取液。
(7) 将溶液I或溶液II上样于事先处理好的HPD-100柱，用30%, 60%, 90%乙醇洗脱，得到的60%乙醇洗脱物。60%洗脱物蒸干，用有机溶 剂溶解，上样于硅胶柱，氯仿-甲醇或二氯甲烷-甲醇3: l洗脱，得到的洗 脱物强心苷活性部位。
C8)溶液I或溶液II上样于事先处理好的聚丙烯酰胺柱，用l(W乙醇， 95%乙醇洗脱，得到的.IOV洗脱物。:10%洗脱物浓缩至无醇味,密度为 0. 80-1. 10的浓缩液，上样于事先处理好的HPD-100柱，用30%, 60%, 90% 乙醇洗脱，得到的60%乙醇洗脱物。
(9) 溶液I或溶液II上样于事先处理好的聚丙烯酰胺柱，用1W乙醇， 95%乙醇洗脱，得到的10%洗脱物。10%洗脱物浓缩至无醇味，分别用乙醚
(或氯仿，二氯甲烷等弱极性溶剂)萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁醇 萃取液。
(10) 溶液I或溶液II上样于事先处理好的聚丙烯酰胺柱，用10%乙醇， 95%乙醇洗脱，得到的l(W洗脱物。10%洗脱物蒸干，用有机溶剂溶解，上 样于硅胶柱，氯仿-甲醇或二氯甲烷-甲醇3: l洗脱，得到的洗脱物为暗消 藤活性部位。
溶液I蒸干，用热水溶解，分别用乙醚(或氯仿，二氯甲烷等弱 极性溶剂).'萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁醇萃取液。溶液II同法操作 制得的正丁醇部分。正丁醇萃取液蒸干，水溶解，上样于事先处理好的 HPD-100柱，用30%， 60%,90%乙醇洗脱，得到的60%乙醇洗脱物。
U2)溶液I蒸干，用热水溶解，分别用乙醚(或氯仿,二氯甲烷等弱 极性溶剂)萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁醇萃取液。溶液II同法操作 制得的正丁醇部分。正丁醇萃取液蒸干，水溶解，上样于事先处理好的聚 丙烯酰胺柱，用10%乙醇，95%乙醇洗脱，得到的10%洗脱物。
U3)溶液I蒸干，用热水溶解，分别用乙醚(或氯仿，二氯甲烷等弱 极性溶剂)萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁醇萃取液。溶液II同法搡作 制得的正丁醇部分。正丁醇萃取液蒸干，用有机溶剂溶解，上样于硅胶柱，氯仿-甲醇或二氯甲烷-甲醇3: l洗脱，得到的洗脱物强心苷活性部位。
(14)溶液I或溶液II蒸干，用有机溶剂溶解，上样于硅胶柱，氯仿-甲醇或二氯甲烷-甲醇3: l洗脱，得到的洗脱物蒸干，用水溶解上样于事 先处理好的HPD-100柱，用30%, 60%, 90%乙醇洗脱，得到的60%乙醇洗
(15-)溶液I或溶液II蒸干，用有机溶剂溶解，上样于硅胶柱，氯仿-甲醇或二氯甲烷-甲醇3: 1洗脱，得到的洗脱物蒸干，用水溶解上样于事 先处理好的聚丙烯酰胺柱，用10%乙醇，95%乙醇洗脱，得到的10%洗脱物。
(16)溶液i或溶液n蒸干，用有机溶剂溶解，上样于硅胶柱，氯仿-甲醇或二氯甲烷-甲醇3: 1洗脱，得到的洗脱物蒸干，用水溶解分别用乙 醚(或氯仿，二氯甲烷等弱极性溶剂)萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁 醇萃取液。
本发明涉及暗消藤抗肺癌活性提取部位的富集工艺。为暗消藤的水或 醇的简单提取物通过上述工艺1-4单步或1-4工艺组合制备而成，上述路 线中仅列出路线1-4的两两组合，未得到更高含量的强心苷含量，路线可 以进行更多组合。所得暗消藤总强心苷含量可在10%-90%，适应不同的制 备需要。所列的溶剂为下列溶剂中的一种或几种不多于10个碳原子的卣 代烷、醇、酮、酯、醚或其混合物等，其中卤代烷具有以下通式CnH2n + 1R、 CJUl2或CJ^R3 (n<10; R = C1, Br, I )，醇类溶剂具有以下通式CnH2n + 0H或CnH2n —,OH (n<10),酮类及醚类溶剂具有以下通式CnH2n0或CJk-20 (n<10)，酯类溶剂具有以下通式:CJU)2或CnH2n—202 (n<10)。
药效实验将暗消藤提取部位及单体强心苷化合物与人肺癌腺细胞 A549共同培养，证实此提取部位及其强心苷类化合物具有抗肺癌细胞增殖 活性。随后的动物体内实验表明暗消藤提取物对荷瘤小鼠具有较强的抑瘤 率。所以我们认为暗消藤75%乙醇提取物经HPD-100大孔树脂柱后60%乙醇 洗脱物为暗消藤的活性提取部位，暗消藤强心苷也为活性物质。
3.活性成分的提取工艺
活性部位富集工艺路线5所得样品经硅胶柱层析，用CHCL3-MeOH梯度 洗脱，得到6个流份，将流份2、 3、 4、 5、 6分别经正相柱层析法、反相 柱层析法、正相薄层层析法、反相薄层层析法、重结晶等方法得到的各单 体化合物。
本发明暗消藤活性成分是指以暗消藤活性提取部位为原料，釆用正相 柱层析色谱法、反相柱层析色谱法"正相制备薄层层析法、反相制备薄层 层析法，反复重结晶法，制备液相色谱法等一种或几种分离纯化方法得到 的强心苷类单体化合物包括acovenosigenin A 3-^" -digitoxopyran os ide (1) ， digi toxigenin gent iobios ide (2), dig i toxigenin 3--glucopyranosyl-(1 — 6) —-glucopyranosyl-(1 — 4) 一3—<9~acetyl- — -digitoxopyranoside ] (3), digitoxigenin 3--glucopyranoy 1 — 6)--glucopyranosyl-(1 — 4)-(9" -digi toxopyranosyl-(1 — 4) 一 —cymaropyranos ide (4) ， periplogenin 3—0—(4—-glucopyrAno
sy卜 -digitalopyranoside) (5), acovenosigenin A (6), periplogenin 3-( " -digi toxoside (7), periplocymarin (8) ， periplogenin (9),
digi tox
igenin (10)， digitoxigenin 3- 6^[6^ -D—glucopyranosyl-(1 — 6)
-D_glucopyranosyl-(1 — 4)-6*~ _D-digi toxopyranoside (11), digitoxigenin sophoroside (12)， echujin(13), periplogenin glucoside (14) , corchorusoside C (15), sualpinoside (16)(结构式如 下)。所述的柱层析色谱填料为下列填料中的一种或多种硅胶、氧化铝、 聚酰胺、吸附树脂、葡萄糖凝胶、0DS、硅藻土；制备薄层板的吸附剂为硅 胶G、硅胶H、硅胶GF254、氧化铝、聚酰胺等吸附剂中的一种或几种。所 列的溶剂为下列溶剂中的 一种或多种或与水以任意比例混合的溶剂不多 于10个碳原子的卤代烷、醇、酮、酯、醚或其混合物等，其中卣代烷具有 以下通式CJk + 1R、 CJUl2或CJk —Jl3 (n<10; R = C1， Br， I )，醇类溶剂 具有以下通式CJk + ,0H或CnH2n —,OH (n<10)，酮类及醚类溶剂具有以下通 式CnH2n0或CnH2n — 20 (n<10),酯类溶剂具有以下通式CnH2n02或CnH2n —202 (n<10)。溶剂洗脱方式包括单一溶剂的正相、反相或梯度洗脱。
以下是提取的强心苷类单体化合物的结构式
<formula>formula see original document page 7</formula><formula>formula see original document page 8</formula>
4.暗消藤提取物及单体化合物抑制人肺癌细胞A549生长实验
将处于对数生长期的人肺腺癌A549细胞用含有10。/。FCS(小牛血清)的EME 培养基调成2xl()3个/ml,铺在96孔细胞培养板中，在37°C、加湿、加 5y。C02条件下，培养24小时，加入按照施例l制得的暗消藤活性提取物及 分离得到的单体化合物(每个浓度4个孔)，培养72小时后，加入MTT培 养2小时，然后将生成的沉淀用150 1DMS0溶解后，用Bio Assay Reader 在550皿处测量吸光度，同时设置阳性对照组(五氟脲嘧P定)和空白组。以空白组的吸收度为100%计算，细胞增殖率=[加药吸收度/空白吸收度]
xlO(W。活性提取物的IC5Q=1.44 g/mL，单体化合物的105。分别为1 ( IC5。=0. 31 m) ， 2 ( IC5。=0. 65m ), 3 ( IC5。=0. 17 m ) , 4 (IC5 =0. 091 m) ， 5,(IC5。=0. 27m) ， 6 ( IC5。=0. 39m), 7 ( IC5。=0. 031 m) ,8 (IC5。=0.026 m) , 9 ( IC5。=0. 26m), 10 ( IC5。=0. 53m), 11
(ICO. 020 m),12 (IC5。=0. 16 m) , 13 (IC5 =0. 016 m),14 ( IC5。=0. 040m) ， 15 (IC5。=0. 037m), 16 (IC50=0. 080 m)。
5.暗消藤活性提取物对小鼠肺癌移植瘤的抑制作用
将液氮冻存的小鼠lewis肺癌细胞复苏后，先接种于三只C57BL/6小鼠 右腋皮下传代；两周后，处死小鼠，取出肿瘤组织并制成小鼠lewis肺癌无 菌单细胞悬液，调整细胞浓度至1x107台盼蓝拒染实验示活细胞数大于 95%。取30只实验小鼠，将上述细胞悬液接种于小鼠右腋皮下(2ml/只)， 并将小鼠随机分为3组暗消藤提取物组，替加氟组和生理盐水组，各组 间小鼠体重差异无显著性。接种后第二天开始灌胃，中药治疗组每天一次 灌注0. 4ml稀释液(相当于生药量6g/kg);替加氟组每天一次灌注0. 4ml 稀释液(相当于替加氟药量.78mg/kg);生理盐水组每天一次灌注0. 4ml生 理盐水。连续灌胃给药3周后，脱颈推处死，'完整拨取皮下肿瘤，电子天 平称量瘤重，计算抑瘤率(公式抑瘤率=(C-T) /O100%,C、 T分别为对 照组，实验组的瘤重)。实验结果如表l。通过单因素方差分析统计表明， 暗消藤提取物具有抗肺癌活性，其活性大小与替加氟相似。
表1 消积饮对小鼠Lewis肺癌的抑制作用(5 ± s )
组别鼠数(只)瘤重(g) 抑瘤率(%)
生理盐水103.43±0. 55
暗消藤提取物-101.95 ±0.39" 43.09
替加氟 10 1.77 ±0.30" 48.32
本发明的有益效果是(1)、本发明提供了从天然植物暗消藤中提取抗 肺癌活性较强的提取部位的提取工艺，此工艺简单，搡作方便，生产成本 较低。(2)、本发明提供了暗消藤中具有抗肺癌活性的活性成分的提取工艺，
并且找到了含量大、活性强的化合物echujin。 (3)、这些工艺制备的提取
物及化合物可以为制备抗肺癌药物提供优质原料产品。
具体实施例方式
(1)具有抗肺癌活性的提取物的提取富集工艺 实施例1:暗消藤10克，粉碎成100 - 200目左右的粗粉，加100ml75。/。乙 醇回流提取二次，每次1小时，溶液浓缩至无醇味，此提取物通过大孔吸
与生理盐水组比较*叶<0. 01
9附树脂柱，用水一醇混合溶剂洗脱得到的含30 - 60 %醇洗脱物，得浸膏 0. 7g,总强心苷含量为10%。
实施例2:暗消藤10克，粉碎成100 - 200目左右的粗粉，加10001175%乙 醇回流提取二次，每次1小时，溶液浓缩至无醇味，此提取物通过大孔吸 附树脂柱，用水一醇混合溶剂洗脱得到的含30 - 60 %醇洗脱物，此提取物 再通过聚丙烯酰胺柱，用水一醇混合溶剂洗脱得到的含Q-10%醇洗脱物， 得浸膏O.'lg,总强心苷含量为20%。
实施例3:暗消藤10克，粉碎成100~ 200目左右的粗粉，加100ml75。/。乙 醇回流提取二次，每次1小时，溶液浓缩至无醇味，蒸干，用热水溶解， 分别用乙醚(或氯仿，二氯甲烷的弱极性溶剂)萃取后，正丁醇萃取，得 到的正丁醇萃取液，蒸干，得浸膏率为O. 12g。总强心苷含量为20%。
(2)具有抗肺癌活性的化合物的提取工艺 实施例4:
将16克暗消藤6(W乙醇部位，上样于事先处理好的聚丙烯酰胺柱，用水-醇梯度洗脱得到的含0-10%醇洗脱物，蒸干后干燥，称重为llg，有机溶 剂溶解上样，二氯甲垸-曱醇(25:l-l:5),得到6个流份(Fr. l-Fr. 6 ), 流份2、 3、 4、 5、 6经反复硅胶柱层析、反相薄层制备、大孔树脂柱层析、 重结晶等方法得到16个强心苷类化合物，分别为acovenosigenin A 3-^"digitoxopyranoside(1), digitoxigenin gentiobioside (2), digi toxigenin 3-< -[( ~ -glucopyranosyl-(1— 6)-(？"
-glucopyranosy1-(1 — 4) _3-<9~acetyl- -digi toxopyranos ide ](3)， (iigitoxigenin 3-^"[< ~ -glucopyranosyl-(1— 6)_6^
-glucopyranosyl-(1 — 4)--digi toxopyranosyl-(1 — 4)--cymaropyranoside (4), periplogenin 3-0-(4-<9~- glucopyranosyl--(Jigitalopyranoside) (5), acovenosigenin A (6), periplogenin 3--digitoxoside (7)， periplocymarin(8), periplogenin (9)， digitoxigenin(10)， digitoxigenin 3- ^"[6^ -D-glucopyranosyl-(1 — 6)-6*" -D-glucopyranosyl-(1 — 4)-< ~
-D-digitoxopyranoside (11), digitoxigenin sophoroside (12), echuj in (13) ， periplogenin glucos ide (14) ， corchorusos ide C(15), sualpinoside(16)。并运用核磁共振(丽R),质谱(MS),红外(IR), 气相(GC)等光谱、色谱手段，确定了它们的结构、相对及绝对构型。
权利要求
1、暗消藤提取物，包括活性提取部位与活性成分，其特征在于含有下列化合物中的一种或多种，acovenosigenin A 3-O--digitoxopyranoside，digitoxigenin gentiobioside，digitoxigenin3-O-[O- -glucopyranosyl-(1→6)-O- -glucopyranosyl-(1→4)-3-O-acetyl- -digitoxopyranoside]，digitoxigenin 3-O-[O--glucopyranosyl-(1→6)-O- -glucopyranosyl-(1→4)-O--digitoxopyranosyl-(1→4)- -cymaropyranoside，periplogenin3-O-(4-O- -glucopyranosyl- -digitalopyranoside)，acovenosigenin A，periplogenin 3-O- -digitoxoside，periplocymarin，periplogenin，digitoxigenin，digitoxigenin 3-O-[O- -D-glucopyranosyl-(1→6)-O- -D-glucopyranosyl-(1→4)-O- -D-digitoxopyranoside，digitoxigenin sophoroside，echujin，periplogenin glucoside，corchorusoside C，sualpinoside。
2、暗消藤提取物，其特征在于所述的暗消藤其植物来源为萝摩科 暗消藤5Yre/^ocs"7o 2 乂'罪e/7&s的干燥根。
3、 一种如权利要求1所述的暗消藤提取物的制备工艺，其特征在于 通过制备方法一所得的暗消藤水或醇的简单提取物通过大孔吸附树脂柱 或聚丙烯酰胺柱或硅胶柱或经过萃取，或上述步骤组合进行，得到的适应 不同要求含量不同的总强心苷活性部位；'其制备方法如下一. 暗消藤药材的提取工艺(1) 暗消藤根粗粉，加X。/。醇回流提取，提取液减压回收醇至无醇味， 浓缩为密度O. 80-1. IO的浓縮液，得到溶液I备用；(2) 暗消藤根粗粉，加水回流提取，提取液减压浓缩为密度 0. 80-1. IO的浓缩液II，备用；二. 暗消藤中的活性部位的富集工艺(1) 将溶液I或溶液II上样于事先处理好的HPD-100柱，用30%， 60%， 90%乙醇洗脱，得到的60%乙醇洗脱物；(2) 溶液I或溶液n上样于事先处理好的聚丙烯酰胺柱，用10%乙醇， 95%乙醇洗脱,得到的10%洗脱物；(3) 溶液I蒸干，用热水溶解，分别用乙醚(或氯仿，二氯甲烷的弱 极性溶剂)萃取后，正丁醇萃取，得到的正丁醇萃取液，溶液n同法操作 制得的正丁醇部分，为暗消藤的活性部位；(4) 溶液I或溶液II蒸千，用有机溶剂溶解，上样于硅胶柱，氯仿-甲醇或二氯甲垸-甲醇3: l洗脱，得到的洗脱物为暗消藤的活性部位。
4、 根据权利要求3所述的暗消藤提取物的制备工艺，其特征在于 所述的富集工艺还可以为上述富集路线1-4之间的两个或三个互相组合。
5、 根据权利要求3或4所述的暗消藤提取物的制备方法，其特征在于可以从活性部位中提取分离并鉴定出活性化合物，其制备方法如下 将16克暗消藤60%乙醇部位，上样于事先处理好的聚丙烯酰胺柱，用水-醇梯度洗脱得到的含0-10%醇洗脱物，蒸干后干燥，称重为llg, 有机溶剂溶解上样，二氯甲烷-甲醇(25:1-1:5),得到6个流份 (Fr. l-Fr. 6),流份2、 3、 4、 5、 6经反复硅胶柱层析、反相薄层制备、 大孔树脂柱层析、重结晶分离得到单体化合物，并运用核磁共振,质谱，红 外，气相手段，确定了结构、相对及绝对构型。
6、根据权利要求3所述的暗消藤提取物的制备工艺，其特征在于 xy。是指醇浓度在1%_100%的醇性溶液，所述的醇指具有以下通式的饱和一 元醇或不饱和一元醇CJk+力H或CnH2n—力H(n〈5);在混合洗脱剂中，醇所 占的百分含量在1% -95%之间；所述的吸附树脂为苯乙烯类、苯丙酸类、 丙稀酰胺类或氧化氮类大孔树脂冲的一种或几种。
7、 根据权利要求5所述的暗消藤提取物的制备方法，其特征在于 其活性部位及成分的提取是以植物暗消藤的干燥根为原料,釆用溶剂提取 法、溶剂萃取法、树脂吸附法、正相柱层析法、反相柱层析法、正相制备 薄层层析法、反相制备薄层层析法、反复重结晶法、反相制备液相色谱法 等工艺中的一种或者多种工艺，得到的一种或多种成分的提取物。
8、 根据权利要求7所述的暗消藤提取物的制备方法，其特征在于 所述的溶剂及重结晶及制备液相过程中所用溶剂为下列溶剂中的 一种或 几种不多于IO个碳原子的卤代烷、醇、酮、酯、醚或其混合物，其中 卤代烷具有以下通式CnH2n + 1R、 CnfUl2或CnH2nMR3 (n<10; R-Cl, Br, I ), 醇类溶剂具有以下通式CJL+力H或CJk —!0H(n〈10),酮类及醚类溶剂具 有以下通式CJU)或CnH2n — 20 (n<10)，酯类溶剂具有以下通式CnH2n02 或CnH2n-202 ( n〈10:),溶剂洗脱方式包括单一溶剂的正相、反相或梯度洗脱。
9、 根据权利要求7或8所述的暗消藤提取物的制备方法，其特征在 于在柱层析过程中用到的色谱填料为硅胶、氧化铝、聚酰胺、吸附树脂、 葡萄糖凝胶、ODS、硅藻土中的一种或多种；制备薄层板的吸附剂为硅胶 G、硅胶H、硅胶GF254、氧化铝、聚酰胺、ODS等吸附剂中的一种或几种； 在重结晶及制备液相过程中所用溶剂还可以为所述溶剂与水任何比例的 混合溶剂。
10、 暗消藤提取物在制备抗肺癌药物中的应用。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，公开暗消藤提取物及其制备工艺，具体涉及暗消藤抗肺癌活性提取部位及其活性成分的提取工艺。该工艺以暗消藤干燥根为原料，采用溶剂提取法、树脂吸附法、正相柱层析法、反相柱层析法等工艺中的一种或者多种工艺制备成的总强心苷含量在10％-90％的提取物。并且以中药暗消藤活性提取物为原料，应用正相柱层析色谱法、反相柱层析色谱法，正相制备薄层层析法、反相制备薄层层析法，重结晶法，制备液相色谱法等多种分离纯化方法中的一种或几种，得到的一个或多个单体化合物。该发明工艺简单，操作方便，生产成本较低，得到的暗消藤活性提取部位及部分单体化合物具有抗肺癌活性。
文档编号A61P35/00GK101537027SQ200810010690
公开日2009年9月23日 申请日期2008年3月18日 优先权日2008年3月18日
发明者李松波, 军 殷, 娜 韩 申请人:沈阳药科大学