一种银杏叶总黄酮苷元口服药物制剂及其制备方法和用途的制作方法

专利名称：：一种银杏叶总黄酮苷元口服药物制剂及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种中药银杏叶提取物，尤其是一种银杏叶总黄酮苷元的提取物，以及该提取物的药物用途。属中药领域。
背景技术：
：银杏叶为银杏科银杏属植物银杏(GinkgobilobaL.)的叶。银杏原产我国，以野生种存在于我国浙江天目山、大别山等地。由于基木保持丁1.5亿年前的生态特征，又称"活化石"植物。银杏叶味甘苦、涩.性平。可益智延年、美肤护发、敛肺平喘、收涩止带。主治年老神衰、心痛、胸闷、气逆喘咳、白带、清稀等。银杏叶黄酮类具有独特的生理作用、临床治疗和保健价值，不但有扩张血管的作用，从而增加心脑血液流量，还有抗炎、镇痛、抗衰老、降血脂、抗肿瘤、抗白血病、调节内分泌等功能。有关于银杏叶黄酮报道有很多，耿秀芳等在"银杏叶总黄酮近期研究进展"(《中国中药杂志》，2003年6月，第28巻第6期)、郝涤非在"银杏及银杏黄酮的开发利用与前景"(《生物学教学》，2007年第27巻第9期)、罗兰等在"银杏黄酮类化合物提取分离和分析方法研究进展"(《莱阳农学院学报》，2003年第20巻第4期)、齐丽霞等在"银杏叶总黄酮提取方法的比较研究"(《江西农业学报》，2007年第19巻第1期)研究中表明，银杏叶中所含的黄酮类成分，具有扩血管、抗炎、镇痛、抗自由基、降血脂、抗肿瘤及抗白血病等作用，在临床上有着广泛的应用；而在CN95118737.6、CN200510036774.0、CN200510039105.9、CN200610046070.6等专利公开文献也提供了多种制备银杏叶总黄酮及其单方或复方制剂的方法。可见在中药
技术领域：
中，银杏叶中总黄酮苷类成分一直是被研究的热点。同时在钟尉方等在"银杏黄酮醇苷水解条件的正交实验研究"(《黑龙江医药科学》，2006年10月，第29巻第5期)、杜安全等在"银杏叶总黄酮苷的HPLC法分析水解条件"(《安徽医药》，2001年9月，第5巻第3期)、吴超等在"银杏叶提取物制取黄酮苷元的酶解工艺研究"(《食品与机械》，2005年11月，第21巻第6期)、专利CN03153489.9中对银杏叶中的黄酮苷元的制备方法进行研究。可见银杏叶中的黄酮苷及其苷元己成为研究的热点。但是，现有的技术都忽视了对银杏叶总黄酮苷元疗效、制剂的研究，其效果与应用情况一直处于空白状态。
发明内容本发明的第一目的在于提供一种以银杏叶总黄酮苷元为活性成分的口服药物。第二目的是提供该药物的制剂形式，特别是一种高效制剂；第三目的是提供该药物高效制剂的制备方法。最后是提供该药物在治疗冠心病、高血压、脑血栓、脑梗塞、中风、眩晕、精神病、肾炎、支气管炎、帕金森氏病、糖尿病、肿瘤、白血病中的应用。本发明目的第一目的是这样实现的-发明人提供一种口服的药物，该药物以银杏叶总黄酮苷元为活性成分。发明人发现，苷类物质其实是在植物体内产生的生物活性较低的化合物，如在化合物上添加极性基团，把具有生物活性的苷元和糖结合起来形成生理活性较低的苷类而加以储存，使之更易排出体外。同样，这些苷类化合物在人体内的生物利用度也较低，口服的苷类化合物在肠道内难以吸收、生物利用度低，多数在体内代谢并不完全，有的甚至完全以原型(苷类形式)排除体外，只有少量的苷类化合物经肠道细菌、酶分解为苷元后才发挥出疗效；非口服的苷类化合物，被人体吸收的苷还需经血液转运到肝脏，再通过肝肠循环，将苷水解为苷元再吸收入血而发挥疗效，但因为步骤较多，故也不能迅速发挥疗效。因而，针对银杏叶的药用价值，发明人提出一种新的药用物质，即银杏叶总黄酮苷元。它是按现有技术从银杏叶药材中提取得到银杏叶总黄酮苷，对该有效部位进行水解，使其中的苷类物质脱去糖基，生成更具生物活性的苷元，即成为本发明所提供的银杏叶总黄酮苷元。发明人经研究证实，苷类物质经水解后所得苷元没有了糖基，其亲脂性大大增强，因而苷元较苷更易透过肠粘膜被吸收；同时，药物的分子越小也越容易被吸收，苷水解掉所带的糖分子变成苷元后，分子变得更小，也会更易吸收。另外，以苷元直接作为药用物质，克服了以往苷类物质在体内运行时间长、转化效率低、转化结果不确定等因素，大大提高了药物的生物利用率，节约了药物资源。在本发明提供的药物中，银杏叶总黄酮苷元可以单独使用，也可以与其他药物成分联合使用，即在药物活性成分中，可以只有银杏叶总黄酮苷元纯品，也可以是银杏叶总黄酮苷元粗品，还可以是银杏叶总黄酮苷元与其他药物的混合物。本发明优选使用银杏叶总黄酮苷元粗品，即从药材中提取银杏叶总黄酮苷，再以适当方式水解，并根据需要进行精制，得到所需纯度。上述的水解方法包括了酸水解、酶水解或微生物水解，发明人经过筛选，分别提供如下几种具体的水解方法酸水解可以用110mol/L的盐酸、硫酸、醋酸及甲酸等进行水解；酶水解可以用苦杏仁酶、麦芽糖酶、转化糖酶、橙皮苷酶等进行水解；微生物可以用大肠杆菌、肠球菌、乳酸杆菌、梭状芽孢杆菌、畸形菌体、双岐杆菌及人体肠道正常菌群等进行水解。本发明的第二目的是提供上述银杏叶总黄酮苷元的药物制剂，尤其是一种高效制剂。由于本发明的第一目的中已解决了药物的吸收问题，所以本领域技术人员可以方便地将本发明的银杏叶总黄酮苷元配合适当的辅料，制备成各种常规制剂。但是发明人还注意到另一个问题，即由于苷元的脂溶性相对较强，因而其制剂应用于人体后，其中的苷元成分不易被润湿和溶出，如果不能解决这一问题，也会影响苷元的吸收。所以，针对这一问题，发明人提供了一种新技术方案，可以保证将银杏叶总黄酮苷元制成高效制剂，该技术方案是方案一一种以本发明所述银杏叶总黄酮苷元为活性成分的高效药物制剂，其辅料中中含有生物黏附剂和润湿剂，还可以含有分散剂及其他药剂学上的常规辅料，并被制成的片、胶囊、颗粒、散剂、丸等口服制剂。该技术方案的核心在于将银杏叶总黄酮苷元用于药物制剂，并通过特殊辅料保证银杏叶总黄酮苷元的高效利用。因而，体现到具体的药物制剂中，其药物活性成分中可以只有本发明的银杏叶总黄酮苷元，也可以与其他药用或非药用物质配合使用，只要其目的是将所含的银杏叶总黄酮苷元利用生物黏附剂和润湿剂，还可以利用分散剂，进行润湿、分散，以制成口服高效制剂，均应在本发明申请保护的范围内。同理，本发明技术方案选用生物黏附剂和润湿剂，还可以用分散剂作为主要辅料，目的在于使银杏叶总黄酮苷元得以充分、均匀的分散，利于吸收；在实际应用中，还可以根据需要加入其他常规辅料及成型辅料，如淀粉、微晶纤维素、羧甲淀粉钠、柠檬酸、碳酸氢钠、低取代羟丙甲纤维素、乳糖、甘露醇、枸橼酸、阿斯帕坦、糊精、硬脂酸镁等，这些均应视为在本发明技术的基础上完成的工作，也应受本发明申请的保护。在该技术方案中，生物黏附剂优选为壳聚糖、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮或它们之间的混合物；润湿剂优选为卵磷脂、泊洛沙姆或其混合物；分散剂优选为微粉硅胶、环糊精或其混合物。其中，壳聚糖、卡波姆作为生物黏附剂，具有生物黏附性能，可延长药物在胃肠道的滞留时间，显著提高药物的生物利用度。卵磷脂、泊洛沙姆等表面活性剂对银杏叶总黄酮苷元有表面润湿的作用，降低表面张力，增加脂溶性的银杏叶总黄酮昔元的溶解度，促进其迅速吸收利用，利于迅速发挥疗效。微粉硅胶、环糊精作为分散剂，其本身具有亲水性，利于苷元的润湿、分散，增强药物的稳定性。将本发明的银杏叶总黄酮苷元与上述辅料配合使用，充分混合均匀，可以增强其中银杏叶总黄酮苷元的分散性、润湿性，提高其生物利用度。在优选的情况下，本发明药物中各成分所占比例优选为活性成分2060%，生物黏附剂110%，润湿剂520%，分散剂030%，其他辅料050%。其中的其他辅料是指制剂在成型过程中的一些其他辅料，如淀粉、微晶纤维素、羧甲淀粉钠、柠檬酸、碳酸氢钠、低取代羟丙甲纤维素、乳糖、甘露醇、枸橼酸、阿斯帕坦、糊精、硬脂酸镁等。上述技术方案主要应用于口服制剂，最适宜的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂和丸剂。方案二一种以本发明所述银杏叶总黄酮苷元为活性成分的高效药物制剂，其辅料中中含有分散剂和润湿剂，还可以含有生物黏附剂及其他药剂学上的常规辅料，并被制成的软胶囊、液体硬胶囊、滴丸等口服制剂。该技术方案的核心在于将银杏叶总黄酮苷兀用于药物制剂，并通过特殊辅料保证银杏叶总黄酮苷元的高效利用。因而，体现到具体的药物制剂中，其药物活性成分中可以只有本发明的银杏叶总黄酮苷元，也可以与其他药用或非药用物质配合使用，只要其目的是将所含的银杏叶总黄酮苷元利用分散剂和润湿剂，还可以利用生物黏附剂，进行润湿、分散，以制成口服高效制剂，均应在本发明申请保护的范围内。同理，本发明技术方案选用分散剂和润湿剂，还可以用生物黏附剂作为主要辅料，目的在于使银杏叶总黄酮苷元得以充分、均匀的分散，利于吸收；在实际应用中，还可以根据需要加入其他常规辅料及成型辅料，如甘油、甘氨酸、柠檬酸、尼泊金乙酯、蜂蜡等，这些均应视为在本发明技术的基础上完成的工作，也应受本发明申请的保护。在该技术方案中，分散剂优选为植物油或聚乙二醇；润湿剂优选为卵磷脂、泊洛沙姆、丙二醇或它们之间的混合物；生物黏附剂优选为壳聚糖、卡波姆或其混合物。其中，卵磷脂、泊洛沙姆、丙二醇等表面活性剂对银杏叶总黄酮苷元有表面润湿的作用，降低表面张力，增加脂溶性的银杏叶总黄酮苷元的溶解度，促进其迅速吸收利用，利于迅速发挥疗效。植物油、聚乙二醇作为分散剂，可以将银杏叶总黄酮苷元分散均匀。壳聚糖、卡波姆作为生物黏附剂，具有生物黏附性能，可延长药物在胃肠道的滞留时间，显著提高药物的生物利用度。将本发明的银杏叶总黄酮苷元与上述辅料配合使用，充分混合均匀，可以增强其中银杏叶总黄酮苷元的分散性、润湿性，提高其生物利用度。在优选的情况下，本发明药物中各成分所占比例优选为活性成分1040%，生物黏附剂010%，润湿剂520%，分散剂5080%，其他辅料020%。其中的其他辅料是指制剂在成型过程中的一些其他辅料，如甘油、甘氨酸、柠檬酸、尼泊金乙酯、蜂蜡等。上述技术方案主要应用于口服制剂，最适宜的剂型为液体硬胶囊、软胶囊剂和滴丸剂。本发明的第三目的是提供上述高效制剂的制备方法，其中的核心技术是将银杏叶总黄酮苷元与所需辅料通过熔融、溶解、搅拌、研磨或超微粉碎混合中的任一种方法混合均匀后，再加入所需常规制剂辅料，按常规工艺制成制剂。而这里的混合方法优选振动磨超微粉碎混合的方法。只有通过有效的混合方式，才能保证提取物中所含银杏叶总黄酮苷元与特殊辅料充分分散均匀，应用于人体时才能够迅速润湿、溶出、吸收，发挥高效的作用。经发明人验证，熔融、溶解、搅拌、研磨或超微粉碎混合等方式，都能够实现本发明目的，而其中的超微粉碎方式效果最为突出。虽然超微粉碎技术早己出现，但在中药
技术领域：
的应用，一直停留于"粉碎"的概念上，始终没有突破，因而其范围很局限。发明人在实践中发现，超微粉碎技术己不仅仅是粉碎技术，更是一种高效混合技术，它可使苷元与辅料一起受到强烈的正向挤压力和切向剪切力的作用，运用高速、高能量进行粉碎、混合，所得到的粉末中心粒径由原来的75um减小到10um以下，粒度细腻、均匀，表面积增加，孔隙率增大，使药物粒子与辅料粒子充分接触、混合，既提高了药物粒子的分散度，又保证了其迅速润湿并溶出，大人提高了药物的吸收率和生物利用度，其优势是目前常规混合方法不可比拟的。在这其中，振动磨超微粉碎方式是实现本发明目的的最佳方法。有益效果本发明的银杏叶总黄酮苷元，具有扩血管、抗炎、镇痛、抗自由基、降血脂、抗肿瘤及抗白血病等作用，可用于治疗冠心病、高血压、脑血栓、脑梗塞、中风、眩晕、精神病、肾炎、支气管炎、帕金森氏病、糖尿病、肿瘤、白血病等病症。配合本发明的高效制剂手段，更可以充分发挥其功效。发明人通过以下动物实验，来说明本发明的突出效果。实验l:抗大鼠静脉血栓形成的作用1实验材料1.1动物Wister大鼠50只，雌雄各半，体重200土20g。由军事医学科学院实验动物中心提供。1.2药品供试样品的制备取银杏叶6kg，粗粉碎，加水煎煮三次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓縮至相对密度为1.101.15(60°C)，加乙醇使含醇量达70%，静置12小时，滤过，滤液回收乙醇，以水饱和正丁醇提取三次，合并正丁醇液，回收正丁醇，余液加6倍量水溶解，加于D101大孔吸附树脂柱上，分别以水、10%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，取1/4的回收乙醇的水液，减压干燥，干燥物制备银杏叶总黄酮苷制剂；其余3/4的回收乙醇的水液以2mol/L盐酸水解3小时，水解液加氧化钙适量，滤过，8并以适量乙醇洗涤沉淀，滤过，合并水液与乙醇洗液，减压回收乙醇，减压干燥，1/3干燥物制备银杏叶总黄酮苷元一般制剂，另2/3干燥物制备银杏叶总黄酮苷元高效制剂。银杏叶总黄酮苷组供试品取银杏叶总黄酮苷干燥物，加壳聚糖2.5g、泊洛沙姆10g、环糊精40g，并加羧甲淀粉钠至200g，超微粉碎混合80分钟，取其中60g以水混悬至100ml;银杏叶总黄酮苷元一般组供试品取1/3银杏叶总黄酮苷元干燥物，加淀粉至200g，混匀，取其中60g以水混悬至100ml;银杏叶总黄酮苷元高效组供试品取2/3银杏叶总黄酮苷元干燥物，加壳聚糖5g、泊洛沙姆20g、环糊精80g，并加羧甲淀粉钠至400g，超微粉碎混合80分钟。取其中60g以水混悬至100ml作为苷元高效组。2实验方法与结果取Wistar大鼠40只，雌雄各半，体重200土20g，随机分为4组，每组10只银杏叶总黄酮苷元高效组、银杏叶总黄酮苷组、银杏叶总黄酮苷元一般组，灌胃给药每天1次，给药剂量分别为10ml/kg，空白对照组灌胃给予同体积生理盐水，连续10天。末次给药后lh，各组动物腹腔注射3.5%戊巴比妥钠麻醉，剖腹分离下腔静脉，于左肾静脉下穿一丝线结扎下腔静脉管，造成淤血，关闭腹腔。6h后，用内径为lmm的玻璃毛细管插入鼠内眦静脉丛取血，至毛细管血柱达5cm，每隔30s折断毛细管一段，检查有无出现凝血丝，计算毛细管采血到出现血凝丝时间，即为凝血时间。再次打开腹腔，于结扎下方2cm处夹闭血管，纵行剖开，取出血栓，记录血栓有无并称重。结果见表l。表l对大鼠静脉血栓形成的影响(^土S)组别动物数(只)凝血时间(s)血栓湿重(mg)银杏叶总黄酮苷元高效组10126.00±17.49***13.27±1.76***银杏叶总黄酮苷元一般组10114.00±18.84**16.11±2.57*银杏叶银杏叶总黄酮苷组10102.00±15.73**18.37±3.16*空白对照组1075.00±14.1425.74±3.43与空白对照组比较(t检验)，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。以上试验结果表明，银杏叶总黄酮苷元高效制剂组可明显延长凝血时间，与空白对照组比较具有显著性差异；同时，银杏叶总黄酮苷元一般制剂组也较银杏叶总黄酮苷组效果好。实验2:对大鼠血液流变学的影响i实验材料1.1动物Wister大鼠40只，雌雄各半，体重200土20g。由军事医学科学院实验动物中心提供。1.2供试样品(同实验l)1.3仪器LBY—N6A自清洗旋转式粘度计北京普利生医疗器械科技有限公司2实验方法与结果取大鼠，随机分为4组，每组10只。按表2所示剂量灌胃给药，每日1次，连续14曰，对照组每日灌以等体积水。于末次给药后lh，各组大鼠以3%戊巴比妥钠依次麻醉后，经腹主动脉采血，肝素抗凝，置LBY—N6A自清洗旋转式粘度计上，测定全血粘度及血浆粘度。结果见表2。表2对正常大鼠血液流变学的影响(nipaS;X±SD)动物数全血粘度组别g/kg-血浆粘度(n)10S-140S-l120S-1苷元高效组3.01011.53±2.82*林6.73±1.07林*4.84±0.75***2.04±0.47苷元一般组3.01012.79±2.86**7.25±1.75**5.04±0.69**2.07±0.72总黄酮苷组3.01013.35±3.17*7.99±1.58*5.63±0.952.11±0.66空白对照组-1015.12±1.688.85±0.876.07±0.832.27±0.73与空白对照组比较(t检验)，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。以上试验结果表明，银杏叶总黄酮苷元高效组能够降低大鼠的全血粘度，与对照组比较差异显著；同时，银杏叶总黄酮苷元一般组也较银杏叶总黄酮苷组效果好。对血浆粘度影响不大。实验3:对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响l材料1.1动物动物昆明种小鼠，雄性，体重22-24g,鼠龄10-11周。由军事医学科学院实验动物中心提供。1.2供试样品供试样品的制备取银杏叶6kg，粗粉碎，加60%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，水液加于DIOI大孔吸附树脂柱上，分别以水、20%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，取l/4的回收乙醇的水液，减压干燥，千燥物制备银杏叶总黄酮苷制剂；其余3/4的回收乙醇的水液以2mol/L硫酸水解4小时，水解液加氧化钙适量，滤过，并以适量乙醇洗涤沉淀，滤过，合并水液与乙醇洗液，减压回收乙醇，减压干燥，1/3干燥物制备银杏叶总黄酮苷元一般制剂，另2/3干燥物制备银杏叶总黄酮苷元高效制剂。银杏叶总黄酮苷组供试品取银杏叶总黄酮苷干燥物，加壳聚糖5g、卵磷脂5g、微粉硅胶25g，并加微晶纤维素至200g，超微粉碎混合50分钟，取其中60g以水混悬至lOOml;银杏叶总黄酮苷元一般组供试品取1/3银杏叶总黄酮苷元干燥物，加淀粉至200g，混匀，取其中60g以水混悬至100ml;银杏叶总黄酮苷元高效组供试品取2/3银杏叶总黄酮苷元干燥物，加壳聚糖10g、卵磷脂10g、微粉硅胶50g，并加微晶纤维素至400g，超微粉碎混合50分钟。取其中60g以水混悬至100ml作为苷元高效组。1.3阳性对照药醋酸地塞米松片，天津药业有限公司出品2实验方法与结果选取50只昆明种小鼠，雄性，体重22-24g,鼠龄10-11周，按体重随机分为5组，每组10只。按表3所列药物和剂量，分别灌胃给药l次/口，连续4日。末次给药后60min，各组动物用二甲苯50ul涂于小鼠左耳廓两面致炎，致炎30min后剪下双耳，锤取双耳相同部位耳片，称重，按下式计算肿胀度和肿胀抑制率。结果见表3。肿胀度=致炎侧耳片重—非致炎侧耳片重肿胀抑制率-(对照组肿胀度一给药组肿胀度)/对照组肿胀度表3对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响组别<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注:各给药组与对照组比较。*P<0.05，**P<0.01。以上试验结果表明，银杏叶总黄酮苷元高效组能够降低二甲苯所致小鼠耳肿胀程度，与对照组比较差异显著；同时，银杏叶总黄酮苷元一般组也较银杏叶总黄酮苷组效果好。实验4:对酒石酸锑钾致小鼠扭体反应的影响l材料1.1动物昆明种小鼠，由军事医学科学院实验动物中心提供。1.2供试样品(同实验3)1.3试剂酒石酸锑钾，天津化学试剂三厂生产。2方法与结果取小鼠40只，雌雄各半，体重20土2g，随机均匀分为4组，即空白组、银杏叶总黄酮苷元高效组、银杏叶总黄酮苷元一般组、银杏叶总黄酮苷组，实验组灌胃给药剂量均为10ml/kg，空白组灌胃给予同体积的生理盐水，每天给药1次，连续给药3大，于最后l次给药后lh，每鼠腹腔注射新配制的酒石酸锑钾液，立即观察小鼠首次出现扭体反应的潜伏期及10min内小鼠扭体发生数。结果见表4。表4对酒石酸锑钾所致小鼠扭体反应的影响(X土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>以上试验结果表明，银杏叶总黄酮苷元高效组可明显延长小鼠首次发生扭体的潜伏期，减少小鼠扭体次数，与空白对照组比较具有显著性差异；同时，银杏叶总黄酮苷元一般组也较银杏叶总黄酮苷组效果好。实验5:对MCAT大鼠脑梗塞范围的影响1实验材料1.1动物Wistar大鼠，体重260-300g。由军事医学科学院实验动物中心提供。1.2供试样品供试样品的制备供试样品的制备取银杏叶3kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，水液以水饱和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，取1/3的干燥物制备苷制剂；其余2/3的干燥物加水溶解，115'C灭菌20min，以乳酸菌菌种发酵水解72小时，水解液加于D101大孔吸附树脂柱上，分别以水、30%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，减压干燥，干燥物备用。银杏叶总黄酮苷组供试品取苷干燥物，加卡波姆4g、内二醇10g、泊洛沙姆5g，并加聚乙二醇400至200g，超微粉碎混合80分钟，取其中60g以水混悬至100ml;银杏叶总黄酮苷元高效组供试品取苷元干燥物，加卡波姆8g、丙二醇20g、泊洛沙姆10g，并加聚乙一醇400至400g，超微粉碎混合80分钟，取其中60g以水混悬至100ml作为苷元高效组。1.3试剂与仪器FeCI3(A.R.)，批号20020128，广东山头市西陇化工厂红四氮唑(TTC)，A.R.,北京化学试剂公司AO光学显微镜，美国产品；愠温水浴，HH.W21.Cu600，上海跃进医疗器械厂；电子天平，JUPITERS2160A型，日本生产。2实验方法2.1分组及给药取Wistar大鼠40只，分为4组(即假手术组、MCAT模型组、银杏叶总黄酮苷元组、银杏叶总黄酮苷组)，每组10只，雌雄各半。实验组灌胃给药剂量均为10ml/kg，假手术组、MCAT模型组灌胃给予同体积的生理盐水，每天给药1次，连续给药5天。造模，造模成功后实验组灌胃给药剂量均为10ml/kg，假手术组、MCAT模型组灌胃给予同体积的生理盐水，每天给药1次，连续给药5天。2.2实验方法大鼠腹腔注射3%异戊巴比妥0.lml/100g麻醉。按Tamura方法，稍加改进。大鼠右侧卧位固定，在眼外眦和耳道连线中点作一弧形切口，长约1.5cm，夹断颞肌并切除，暴露颞骨，用牙科钻在颧骨和颞骨接合处靠近口侧lmm处作一直径2.5mm骨窗，清理残渣，暴露大脑中动脉(位于嗅束及大脑下静脉之间)。置一小片塑料薄膜保护血管周围组织。将吸有50%三氯化铁溶液10W的小片定量滤纸敷在此段大脑中动脉上，30min后取下滤纸，用生理盐水冲洗局部组织，逐层缝合，回笼词养。假手术组大鼠除不滴加三氯化铁溶液外，其余手术步骤同模型组。2.3脑梗塞范围测定最后一次给药12小时后，断头取脑。去掉嗅球、小脑和低位脑干，剩余部分在4'C以下冠状切成5片。迅速将脑片置于TTC染液中(每5ml染料中含4。/。TTC1.5ml，1MK2HP040.lml)，37。C避光温孵30min，再取出，置于甲醛中避光保存。经染色后非缺血区为玟瑰红色，梗塞区为白色。将白色组织仔细挖下称重，以梗塞组织重量占总脑重量的百分比作为脑梗塞范围。模型组脑梗塞范围一给药组脑梗塞范围脑组织梗塞范围抑制率(％)=-X100%模型组脑梗塞范围3实验结果试验结果进行组间比较，t检验，结果见表5。表5对MCAT大鼠脑组织梗塞范围的影响(X±SD)会目别给药量(g/kg)动物数(只)梗塞范围(％)抑制率(％)假手术组生理盐水100.00±0.000.0模型组生理盐水89.23±1.750.0银杏叶总黄酮苷元组6.084.03±1.05**56.34银杏叶总黄酮苷组6.095.64±1.43**38.89与模型组相比，*P<0.05，林P<0.01。结果显示，除假手术组未见异常改变外，血栓模型组大鼠及各给药组大鼠均有不同程度梗塞灶。银杏叶总黄酮苷元组均可明显减少梗塞程度，与模型组比较有显著差异，较银杏叶总黄酮苷组效果好。具体实施例方式下面列举实施例，进一步说明本发明，各实施例仅用于说明本发明，并不限制本发明-实施例1取银杏叶总黄酮苷元100g，加入壳聚糖20g、聚乙烯吡咯烷酮20g、卡波姆10g、泊洛沙姆50g、卵磷脂50g、微粉硅胶50g、倍他环糊精100g、淀粉100g，振动磨超微粉碎混合30分钟，分装，制成散剂。实施例2取银杏叶总黄酮苷元70g、葛根总黄酮苷元10g，加入壳聚糖5g、卡波姆5g、泊洛沙姆"g、卵磷脂10g、微粉硅胶10g、倍他环糊精20g、羧甲淀粉钠6g，微晶纤维素50g，重压式研磨超微机超微粉碎30分钟，加70%乙醇合坨10分钟，制丸条、分粒与搓圆，干燥，打光，分装，制成丸剂。实施例3取银杏叶总黄酮苷元80g、银杏叶总内酯40g，加入壳聚糖2g、卵磷脂10g，再加糊精66g、阿斯帕坦2g，搅拌均匀，干压制粒，分装，制成颗粒剂。实施例4取银杏叶总黄酮苷元60g，加入壳聚糖10g、聚乙烯吡咯烷酮2g、泊洛沙姆8g、倍他环糊精20g、淀粉100g，过筛混合均匀，制粒，装肠溶胶囊，制成胶囊剂。实施例5取银杏叶总黄酮苷元80g、赤芍总苷20g,加入聚乙烯吡咯烷酮10g、泊洛沙姆20g、卵磷脂10g、微粉硅胶10g、倍他环糊精50g，振动磨超微粉碎混合50分钟，制粒，压片，包衣，制成片剂。实施例6取银杏叶总黄酮苷元20g，加入丙二醇10g、泊洛沙姆10g、卵磷脂20g、壳聚糖10g、卡波姆10g、加入120g聚乙二醇400，振动磨超微粉碎20分钟，使混合均匀，制成液体硬胶囊，即得。实施例7取银杏叶总黄酮苷元30g,加入卵磷脂10g、甘氨酸10g，甘油30g，再加入120g聚乙二醇600，振动磨超微30分钟，使混合均匀，压制成软胶囊，即得。实施例8取银杏叶总黄酮苷元50g，加入壳聚糖10g、卵磷脂20g、泊洛沙姆4g、尼泊金乙酯lg，蜂蜡5g，并加入大豆油110g，搅拌，过筛混匀，压制成软胶囊，即得。实施例9取50g聚乙二醇6000和50g聚乙二醇4000，加入银杏叶总黄酮苷元80g、丙二醇10g、甘油10g，振动磨超微50分钟，使混合均匀，滴制成滴丸，即得。实施例10取银杏叶总黄酮苷元100g、卵磷脂25g、尼泊金乙酯2.5g，蜂蜡47.5g，并加入大豆油325g，振动磨超微40分钟，使混合均匀，压制成软胶囊，制成1000粒，即得。实施例11取银杏叶2kg，粗粉碎，加水煎煮三次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓縮至相对密度为1.101.15(60°C)的清膏，加入乙醇，使含醇量达70%，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇，水液加于DIOI大孔吸附树脂柱上，分别以水、20%乙醇、70。/。乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，减压回收乙醇，余水液加硫酸使含酸量达2mol/L，加热水解3小时，放冷，滤过，残渣以水洗涤至近中性，减压干燥，得到银杏叶总黄酮苷元160g(含银杏叶总黄酮苷元30%以上，其余为未水解的苷和未水解完全的次生苷及其他副产物)，加入卡波姆15g、壳聚糖5g、卵磷脂10g、泊洛沙姆10g、丙二醇30g，并加入450g聚乙二醇600，振动磨超微80分钟，使混合均匀，制成液体硬胶囊，制成1000粒，即得。实施例12取银杏叶4kg，粉碎，加60%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，滤液回收乙醇，余水液加于D101大孔吸附树脂柱上，分别用水、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，回收乙醇，余水液加盐酸使含酸量达2mol/L，加热水解4小时，加氢氧化钠调节pH至中性，加于D101大孔吸附树脂柱上，分别用水、20%乙醇、80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，回收乙醇，减压干燥，得到银杏叶总黄酮苷元150g(含银杏叶总黄酮苷元60%以上，其余为未水解的苷和未水解完全的次生苷及其他副产物)，加入丙二醇30g、甘油10g、尼泊金乙酯lg，并加入200g聚乙二醇400,搅拌混匀，压制成软胶囊，即得。实施例13取银杏叶3kg，粗粉碎，加水煎煮三次，每次2小时，滤过，合并滤液，减压浓縮至相对密度为1.101.15(60°C)的清膏，加入乙醇，使含醇量达60%，静置12小时，滤过，滤液减压回收乙醇，水液以水饱和正丁醇提取三次，正丁醇液蒸干，干燥物加水溶解，115。C灭菌20min，以双岐杆菌菌种发酵水解72小时，减压浓縮，减压干燥，得到银杏叶总黄酮苷元112g(含银杏叶总黄酮苷元40%以上，其余为未水解的苷和未水解完全的次生苷及其他副产物)，加入100g聚乙二醇6000、250g聚乙二醇4000、银杏叶总内酯20g，卡波姆5g、丙二醇40g、卵磷脂5g、泊洛沙姆5g，振动磨超微35分钟，加热熔融，使混合均匀，滴制成滴丸，即得。实施例14取银杏叶药材2.5kg，粉碎，加10倍量水煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，浓縮，70%乙醇沉淀，回收乙醇，水液用正丁醇萃取3次，回收正丁醇液，余水液115。C灭菌15-20min，大肠杆菌菌种用无菌水配制成每毫升含108个分生孢子的悬浮液，以孢子悬液的形式按V/W为3-10%的比例接入培养基，于26-30°C，摇床转速140-220rpm的条件下震荡，培养时间72-96h;终止发酵后，过滤，滤饼用5倍量80%乙醇回流提取2次，每次30分钟，合并滤液，减压回收乙醇，剩余水液过D101大孔树脂柱，分别用水、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，回收乙醇，浓縮，干燥，得到银杏叶总黄酮苷元91g(含银杏叶总黄酮苷元55。/0以上，其余为未水解的苷和未水解完全的次生苷及其他副产物)，加入卡波姆5g、卵磷脂25g、倍他环糊精25g、淀粉105g，振动磨超微粉碎混合20分钟，制粒，装胶囊，制成胶囊剂。实施例15取银杏叶药材5kg，粗粉碎，加70%乙醇回流提取三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇，剩余水液以正丁醇萃取三次，合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣以水溶解，加于DIOI大孔吸附树脂柱上，先以水、30%乙醇洗脱，弃去洗脱液，再以70%乙醇洗脱，洗脱液回收乙醇，余液加入盐酸使含酸量达lmol/L，水解3小时，放冷，以氢氧化钠中和剩余的酸，干燥，干燥物用乙醇回流提取，所得乙醇液回收乙醇，干燥，得到银杏叶总黄酮苷元128g(含银杏叶总黄酮苷元65%以上，其余为未水解的苷和未水解完全的次生苷及其他副产物)，加入壳聚糖25g、泊洛沙姆45g、微粉硅胶30g、倍他环糊精30g、羧甲淀粉钠10g，振动磨超微粉碎混合80分钟，制粒，压片，包衣，制成1000片，即得。实施例16取银杏叶药材3kg，粉碎，加60%乙醇回流提取3次，每次1小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，余水液过D101大孔树脂柱，分别用水、65%乙醇洗脱，收集65%乙醇洗脱液，回收乙醇，水液加盐酸300ml，加热水解4小时，水解液加氢氧化钠中和，过AB-8大孔树脂柱，分别用水、65%乙醇洗脱，收集65%乙醇洗脱液，回收乙醇，喷雾干燥，得到银杏叶总黄酮苷元70g(含银杏叶总黄酮苷元70%以上，其余为未水解的苷和未水解完全的次生苷及其他副产物)，加入葛根总黄酮苷元20g、壳聚糖5g、卡波姆5g、泊洛沙姆5g、卵磷脂15g、淀粉50g，振动磨超微粉碎混合40分钟，制粒，装胶囊，制成胶囊剂。实施例17取银杏叶药材3.5kg，粉碎，加70%乙醇渗滤提取，渗滤液，回收乙醇，水液加0.5%活性炭脱色，滤过，滤液过moi大孔树脂柱，分别用水、20%乙醇、60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，回收乙醇，用麦芽糖苷酶、苦杏仁苷酶水解24小时，水解液过D101大孔树脂柱，分别用水、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱液，回收乙醇，十燥，得到银杏叶总黄酮苷元101g(含银杏叶总黄酮苷元60%以上，其余为未水解的苷和未水解完全的次生苷及其他副产物)，加入壳聚糖5g、聚乙烯吡咯烷酮10g、卡波姆5g、泊洛沙姆15g、卵磷脂15g、淀粉150g、羧甲淀粉钠5g，振动磨超微粉碎混合40分钟，制粒，压片，包肠溶衣，制成片剂。实施例18取实施例13所制滴丸治疗32例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者。治疗方案每日3次，每次0.5g，连用3个月，有效率69%。自觉症状，如胸闷、心悸、心绞痛以及心电图等，均有不同程度的改善。实施例19取实施例12所制软胶囊治疗28例慢性支气管炎患者。治疗方案每日3次，每次2粒,连用l个月，有效率71%。实施例20取实施例3所制颗粒治疗36例大脑功能不全综合患者。治疗方案每日2次，每次5g。连用12周。据医师评价有25例(69%)显著改善，病人自觉改善者有30例(83%)。1权利要求1、一种以银杏叶总黄酮苷元为活性成分的口服药物。2、根据权利要求1所述的药物，其特征在于所述活性成分中可以只有银杏叶总黄酮苷元，也可以是银杏叶总黄酮苷元与其他药物成分联合使用。3、根据权利要求2所述的药物，其特征在于所述银杏叶总黄酮苷元是通过水解银杏叶总黄酮苷而得到的。4、根据权利要求3所述的药物，其特征在于水解方法为酸水解、酶水解或微生物水解。5、根据权利要求1至4中任一项所述的药物，其特征在于药物活性成分与药剂学上可接受的辅料配合使用。6、根据权利要求5所述的药物，其特征在于辅料中含有生物黏附剂和润湿剂。7、根据权利要求6所述的药物，其特征在于辅料中还可含有分散剂。8、根据权利要求7所述的药物，其特征在于辅料中的生物黏附剂是指壳聚糖、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮中的任一种或二种以上的组合物；润湿剂是指卵磷脂和/或泊洛沙姆；分散剂是指微粉硅胶和/或环糊精。9、根据权利要求8所述的药物，其特征在于药物活性成分及辅料的组成比例为活性成分2060%，生物黏附剂110%，润湿剂520%，分散剂030%，'其他辅料050%。10、根据权利要求9所述的药物，其特征在于被制成片剂、胶囊剂、颗粒剂或丸剂。11、根据权利要求5所述的药物，其特征在于辅料中含有润湿剂和分散剂。12、根据权利要求ll所述的药物，其特征在于辅料中还可含有生物黏附剂。13、根据权利要求12所述的药物，其特征在于辅料中的润湿剂是指丙二醇、卵磷脂、泊洛沙姆中的任一种或二种以上的组合物；分散剂是指聚乙二醇或植物油；生物黏附剂是指壳聚糖和/或卡波姆。14、根据权利要求13所述的药物，其特征在于药物活性成分及辅料的组成比例为活性成分1040%，生物黏附剂010%，润湿剂520%，分散剂5080%，其他辅料020%。15、根据权利要求14所述的药物，其特征在于被制成软胶囊剂、液体硬胶囊剂或滴丸剂。16、制备权利要求6至15中任一项所述药物的方法，其特征在于将药物活性成分与所需辅料通过熔融、溶解、搅拌、研磨或超微粉碎混合中的任一种方法混合均匀后，再加入所需常规制剂辅料，按常规工艺制成制剂。17、根据权利要求16所述的制备方法，其特征在于将药物活性成分与所需辅料通过振动磨超微粉碎方法混合。18、权利要求1至4中任一项所述药物在制备用于治疗冠心病、高血压、脑血栓、脑梗塞、中风、眩晕、精神病、肾炎、支气管炎、帕金森氏病、糖尿病、肿瘤或白血病的药物中的应用。全文摘要本发明公开了一种银杏叶总黄酮苷元口服制剂及其制备方法和用途，属中药领域。该发明是将从银杏叶中提取的总黄酮苷进行水解，得到银杏叶总黄酮苷元，并将银杏叶总黄酮苷元配合特殊的辅料制成高效制剂，可以大大提高银杏叶总黄酮苷元的生物利用度。该制剂在治疗冠心病、高血压、脑血栓、脑梗塞、中风、眩晕、精神病、肾炎、支气管炎、帕金森氏病、糖尿病、肿瘤、白血病等病症中有明显的疗效。文档编号A61K47/34GK101518553SQ20081010100公开日2009年9月2日申请日期2008年2月27日优先权日2008年2月27日发明者张佳余,李钦青申请人:北京凯瑞创新医药科技有限公司