专利名称：：一种治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种治疗类风湿性关节炎的药物组合物，具体地，是以姜黄、肉桂为原料制备而成的药物组合物。属中药领域。
背景技术：
：类风湿性关节炎(RheumatismArthritis,RA)是一种以慢性进行性关节病变为主的自身免疫性疾病，为对称性的多关节炎，以双手、腕、肘、膝、踝和足关节受累最常见。类风湿关节炎可反复发作，迁延多年，最终导致关节畸形及功能丧失。类风湿关节炎是一个世界范围内的疾病，分布于所有种族和民族，患病率为0.4%1.0%，患病率有黑种人高于白种人、欧美人高于日本人的倾向。类风湿性关节炎可以发生在任何年龄，但是随着年龄增大，其患病率也随之增高，高发年龄为4060岁。性别与类风湿关节炎发病有很大关系，资料显示，女性发病率约为男性的3倍。据1994年第15届国际关节炎与自身免疫病会议报道，我国类风湿性关节炎的患病率约为0.3%。根据SFDA南方医药经济研究所调査数据显示，近两年，在我国治疗类风湿关节炎的三大类药物中，非甾体抗炎药一直是类风湿治疗药物的主要用药类别，同时慢作用药物和中成药的市场份额近两年均有所增长，说明这两类药物的使用范围正在扩大。由于类风湿关节炎疾病具有慢性、长期、难彻底根治的特点，患者需要长期服药，不少患病多年的老患者通过自身的用药经验和医生的处方，而自行转向零售市场购药。通过SFDA南方所调查数据显示，医院市场和零售市场的药品使用格局有所差异。医院市场中非甾体抗炎药占有的市场份额最高，其次是慢作用药，最后为中成药。而零售市场中也是非甾体抗炎药所占的市场份额最高，其次是中成药，最后是慢作用药。2003年，全国非甾体类风湿治疗药物仍然以COX-2新型非甾体抗炎药为主，该类药物的市场份额进一步上升，其中辉瑞的西乐葆和默克的万络占据了非甾体抗炎药将近47%的巿场份额；慢作用药中，苏州长征-欣凯的爱若华(来氟米特)上市时间虽然不长，但其市场份额上升很快，2003年以31.79%的市场份额成为慢作用药巿场的领头羊，其余品牌的市场均非常小，而且较去年有所下降，对其形成不了威胁。而中成药市场中，雅安三九的帕夫林以小比例的优势居首位，竞争格局呈分散的形态，各品牌之间的市场份额差距不大，市场竞争激烈。类风湿性关节炎属于中医"痹证"范畴。中医认为类风湿病的发生，外因以风、寒、湿邪为主，兼有饮食、情志等因素。内因是人体肝肾亏虚使寒湿、瘀血集于经络、肌肉，导致经络塞滞.肢体萎縮变形。现代医学认为类风湿关节炎属自身免疫性疾病，主要病变为慢性滑膜炎，增生形成血管翳。侵犯关节软骨、软骨下骨、韧带和肌腿等，造成关节软骨、骨和关节囊破坏，最终导致关节畸形和功能丧失。主要临床表现为关节肿胀，疼痛，活动受限，晨僵现象。后期造成关节强直、畸形、功能丧失甚至残废。中国医学认为风湿，痹证之属。系正气不足，风寒湿热燥乘虚而人，致肢体、关节、肌肉疼痛、重着、麻木、肿胀、屈伸不利，甚或关节变形，或累及脏腑。本病因虚致痹，因痹致虚，虚邪痰瘀杂至，"不通"、"不荣"并见。鉴于临床，用药当行气活血、温经通络。风湿性关节炎是一种与溶血性链球菌感染有关的变态反应性疾病，以全身结缔组织的炎症病变为特点，链球菌感染后，链球菌的毒素和代谢产物为抗原，机体产生相应抗体，抗原和抗体在结缔组织结合，使之发生炎症变性和破坏，从而形成风湿性关节炎。2007年初发生的法国安万特公司所生产的来氟米特不良反应事件以及万络召回事件给非甾体抗炎药和慢作用药物市场造成了较大的冲击，但与此同时也给中成药带来了发展的机遇，中成药以其毒性小、安全性高的特点将会在市场上占据更大的份额，市场地位将会进一步提升，类风湿关节炎治疗药物的市场格局也将随之产生变化。目前尚无单独将中药材姜黄、肉桂配伍用于治疗风湿、类风湿性关节炎的相关报道。
发明内容本发明的技术方案是涉及一种治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明提供了一种治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄l-9份、肉桂9-l份。进一步优选地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂姜黄l-5份、肉桂l-2份。更进一步优选地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂姜黄l-5份、肉桂1份。更进一步优选地，它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂姜黄2份、肉桂1份。本发明药物组合物是由姜黄、肉桂的水或有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂。其中，所述的药剂为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液或颗粒剂。其中，所述的药剂中每制剂单位含姜黄素(C21H8。06)的重量百分含量为不少于7.0%。本发明还提供了一种制备该药物组合物的方法，它包括如下步骤a、取药材姜黄、肉桂；b、姜黄加入乙醇提取，乙醇浓度为》65%;肉桂采用水蒸汽蒸馏，得挥发油，合并两种提取物，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的药剂。其中，b步骤所述的乙醇浓度为70%乙醇，提取方法为乙醇渗滤法。本发明提供了该药物组合物在制备治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。本发明还提供了该药物组合物在制备治疗风湿性关节炎的药物中的用途。本发明药物原料中姜黄辛苦温通，功专行气活血止痛，肉桂辛热温散，可温经通络止痛，二药同用，可使寒去瘀通，气血畅行，则诸痛可止，与中医"风湿"、"痹证"病机相符，故可用于风湿、类风湿性关节炎的治疗，且药效明确，具有协同增效作用。具体实施方式实施例1本发明药物的制备姜黄2000g肉桂1000g以上二味原料药材共制成胶囊1000粒。以上二味，姜黄粉碎成粗粉，照流浸膏与浸膏剂项下渗滤法(中国药典2005年版一部附录I0)用70%乙醇作溶剂，浸润半小时后进行渗滤，俟滤液达到12000ml，停止渗滤，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.351.38(60°C)的清膏；肉桂切成粗颗料，加水5倍量，水蒸汽蒸馏提取5小时，收集挥发油。浸膏、挥发油加到聚乙二醇400中，填装软胶囊，制成1000粒，即得。实施例2本发明药物的制备姜黄卯00g肉桂1000g以上二味原料药材共制成胶囊1000粒。以上二味，姜黄粉碎成粗粉，照流浸膏与浸膏剂项下渗滤法(中国药典2005年版一部附录I0)用65%乙醇作溶剂，浸润半小时后进行渗滤，俟滤液达到12000ml，停止渗滤，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.351.38(60°C)的清膏；肉桂切成粗颗料，加水5倍量，水蒸汽蒸馏提取5小时，收集挥发油。浸膏、挥发油加到聚乙二醇400中，填装软胶囊，制成1000粒，即得。实施例3本发明药物的制备姜黄1000g肉桂9000g以上二味，姜黄粉碎成粗粉，照流浸膏与浸膏剂项下渗滤法(中国药典2005年版一部附录I0)用80%乙醇作溶剂，浸润半小时后进行渗滤，俟滤液达到12000ml，停止渗滤，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.351.38(60°C)的清膏；肉桂切成粗颗料，加水5倍量，水蒸汽蒸馏提取5小时，收集挥发油。浸膏、挥发油挥合，装入胶囊剂中，制成1000粒胶囊，即得。实施例4本发明药物的制备姜黄1000g肉桂1000g以上二味，姜黄粉碎成粗粉，照流浸膏与浸膏剂项下渗滤法(中国药典2005年版一部附录IO)用90%乙醇作溶剂，浸润半小时后进行渗滤，俟滤液达到12000ml，停止渗滤，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.351.38(60°C)的清膏；肉桂切成粗颗料，加水5倍量，水蒸汽蒸熘提取5小时，收集挥发油。挥发油经环糊精包合，与浸膏混合，加入辅料，压片，得1000片。实施例5本发明药物的制备姜黄5000g肉桂2000g以上二味，姜黄粉碎成粗粉，照流浸膏与浸膏剂项下渗滤法(中国药典2005年版一部附录I0)用95%乙醇作溶剂，浸润半小时后进行渗滤，俟滤液达到12000ml，停止渗滤，滤液减压回收乙醇，浓縮至相对密度为1.351.38(60°C)的清膏；肉桂切成粗颗料，加水5倍量，水蒸汽蒸馏提取5小时，收集挥发油。浸膏、挥发油混合，制备成口服液，1000支，每支lml。实施例6本发明药物的制备姜黄5000g肉桂1000g按实施例1所述的方法制备成软胶囊。实施例7本发明药物的质量控制方法姜黄素照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；异丙醇水冰醋酸(20:27:48:5)为流动相；检测波长为420nm。理论塔板数以姜黄素峰计算应不低于2000。对照品溶液的制备精密称取在6(TC减压干燥4小时的姜黄素对照品适量，加甲醇制成每lml含15txg的溶液，即得。供试品溶液的制备精密称取本品内容物25mg，置100ml容量瓶中，加甲醇溶解，摇匀，定容，即为供试品溶液。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明药物软胶囊内容物含姜黄素(C21H8()06)应不少于7.0°/。。以下通过药效学试验证明本发明有益效果。1、实验目的与实验设计本发明药物有由姜黄等中药组成的现代复方制剂，能散寒、除湿、止痛等作用，用于类风湿关节炎、风湿关节炎。药效评价部分采用能较好反映RA症状表现的佐剂性关节炎模型(AA)，以及多种急、慢性炎症模型，疼痛模型等全面评价其作用。雷公藤多雷公藤多苷湖北湔江制药厂，批号060422。罗通定片国药准字H51021203。规格30mg/片，100片/瓶。成都市湔江制药厂，批号050602。地塞米松片:国药准字H4424469。规格0.75mg/片，100片/瓶。广东华南制药厂，批号030501。冰乙酸分析纯，500ml/瓶(525g)，成都长联化工试剂有限公司，批号20050321。二甲苯分析纯，500ml/瓶。成都化学试剂厂，批号20001206。苯酚规格500g/瓶。成都科龙化工试剂厂，批号20040202。梭甲基纤维素规格500g/袋。成都科龙化工试剂厂，批号20031201。戊巴比妥钠规格25g/瓶。上海行知化工厂，SERVA进口分装。批号921019。注射用环磷酰胺国药准字H32020857。规格0.2g/瓶，5瓶/盒。江苏恒瑞医药股份有限公司出品，批号06030412，印度墨汁规格50ml/瓶。北京市西中化工厂，批号980331生理盐水(0.9。/。氯化钠注射液)国药准字H51021158。四川科伦大药厂有限责任公司产品冻干皮上划痕用卡介苗上海生物制品研究所雷公藤多贰片由湖南协力药业有限公司生产，国药准字243020138大鼠肿瘤坏死因子-a定量ELA试剂盒(进口分装)，上海森雄公司大鼠肿瘤白介素-ip定量ELA试剂盒(进口分装)，上海森雄公司超氧化物歧化酶(SOD)测试盒:南京建成生物工程研究所丙二醛(MDA)测定试剂盒:南京建成生物工程研究所提供.一氧化氮(NO)测定试剂盒:南京建成生物工程研究所提供.一氧化氮合成酶(NOS)测定试剂盒:南京建成生物工程研究所提供3实验动物与环境3.1实验动物Km(昆明种)小鼠，清洁级，SCXK(川)2005—19号，由四川省中药研究所实验动物中心提供。SD大鼠，清洁级，SCXK(川)2005—19号，由四川省中药研究所实验动物中心提供。3.2实验环境实验环境符合国家小鼠、大鼠、豚鼠、兔屏障系统使用设施标准(四川省实验动物管理会许可证第100号)。4、实验仪器EB-3200D电子天平(日本岛津)；JA1003A电子天平(上海精天电子仪器有限公司)；金雀牌电子秒表(上海手表五厂)；温度计(HANNAinstmments'H198501)RF-5301荧光分光光度计(日本岛津)XZC—2B型自控温度热板仪，(由山东省医学科学院设备维修供应站)电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)PV—200足趾肿胀仪(四川泰盟)酶标仪ZS-3(北京航薪)，2500E型C02培养箱(无锡科达)试验例1本发明药物原料配伍筛选试验(不同配伍比例组合对小鼠二甲苯耳肿胀的影响)昆明种小鼠90只，雌雄各半，体重1822g，按体重随机分成9组，每组10只。第一组为模型对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(扑炎痛，5g/dl)，三至九组为本发明药物不同配伍比例组合，给药剂量8g(原生药)/kg。灌胃容积为0.lml/10g体重，每日1次，连续3天。末次给药后40min，将二甲苯(0.015ml/只)均匀涂抹于小鼠右耳正反两面致炎(阴性对照组除外)，20分钟后处死，沿耳廓基线剪下两耳，以两耳片重量之差作为肿胀度(mg)，计算各组肿胀抑制率(％)。肿胀度(mg)=右耳片重一左耳片重模型组耳片肿胀度一给药组耳片肿胀度肿胀抑制率(％)=-X100°/o模型组耳片肿胀度由下表1实验结果显示，本发明药物不同重量配伍比例组合(姜黄肉桂=9:11:9)均对二甲苯耳肿胀有抑制作用(p<0.050.01)或者抑制作用趋势(p>0.05)，抑制率在11.5433.40%之间。以姜黄(1-5):肉桂(1-2)配伍为优选配比范围，进一步优选姜黄肉桂为2:1时，对二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制作用最强，具有显著抗炎作用。表1本发明药物原料不同配伍比例组合对小鼠二甲苯耳肿胀的影响(hs)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>与模型组比较*p>0.05**p<0.05;***p<0.01.试验例2不同配伍比例组合对醋酸所致小鼠扭体次数的影响昆明种小鼠90只，雌雄兼有，体重1822g，按体重随机分成9组，每组10只，第一组为阴性对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(罗通定片，0.08g/kg)，三至九组为本发明药物不同配伍比例组合，给药剂量8g(原生药)/kg。每日定时灌胃小鼠一次，连续3天。末次给药40分钟后，各鼠腹腔均注射0.75%醋酸，0.2ml/只。观察注射后20分钟内各组出现扭体反应(腹部内凹，伸展后肢，臀部抬高)的次数。由下表2实验结果显示，本发明药物不同配伍比例组合(姜黄肉桂=(9:1)(1:9))均对小鼠扭体次数有抑制作用(p<0.050.01)或者抑制作用趋势(p>0.05)，以姜黄肉桂(1-5):(1-2)时，配伍为优选配比范围，进一步优选为姜黄肉桂(1-2):1，其中以姜黄肉桂为2:1时，抑制作用最强，对乙酸腹腔注射引起的大面积深部疼痛有显著对抗作用。敦本发明药物原料不同配伍比例组合对醋^^f至小鼠扭体次数的影响()<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>与模型组比较*p>0.05**p<0.05;***p<0.01.结论综合考虑以上2个实验结果，说明姜黄、肉桂配伍使用，发挥了协同增效的作用，其中以姜黄肉桂为2:1配伍组抗炎作用、镇痛作用最强，为最佳配伍比例组。试验例3本发明药物的抗炎作用下述试验使用的本发明药物，lg提取物相当于原生药7.78g，由实施例1制备而成。批号2006043;临床用量0.4g(原生药)/kg(体重)。配成80%、40%、20%三个浓度溶液，给药剂量分别为8、4、2g(原生药)/kg，相当于临床剂量的20、10、5倍。用法口服，1ml/100g(BW)。1、对小鼠二甲苯耳肿胀的影响(1)目的给小鼠耳壳涂抹一定浓度的二甲苯可引起诱发小鼠耳壳急性炎性水肿。该模型可观察本发明药物对炎症早期的对抗作用。(2)方法昆明种小鼠50只，雌雄各半，体重1822g，按体重随机分成5组，每组10只。第一组为模型对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(扑炎痛，5g/dl)，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。灌胃容积为O.lml/10g体重，每日1次，连续3天。末次给药后40min，将二甲苯(0.015ml/只)均匀涂抹于小鼠右耳正反两面致炎(阴性对照组除外)，20分钟后处死，沿耳廓基线剪下两耳，以两耳片重量之差作为肿胀度(mg)，计算各组肿胀抑制率(％)。肿胀度(mg)=右耳片重一左耳片重模型组耳片肿胀度一给药组耳片肿胀度肿胀抑制率(％)=--X100%模型组耳片肿胀度(3)实验结果由表3，本发明药物大剂量组小鼠耳廓肿胀度均显著低于模型对照(p<0.05)，故认为本发明药物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀具有抑制作用。_表3本发明药物对小鼠二甲苯耳肿胀的影响(^s)组别动物数剂量肿胀度肿胀抑制(只)(g/kg*d)(ml)(%)模型对照组1039.63±9.26本发明药物组108X329.65±10.22**25.74本发明药物组104X331.40±15.54*15.3本发明药物组102X339.25±16.32*10.4扑炎痛照组100.005X320.33±11.24林*42.89与模型组比较*p>0.05**p<0.05;***p<0.01.2、对大鼠角叉菜胶足爪肿胀的影响(1)目的选择在注入后24小时肿胀达峰值的中效致炎剂角叉菜胶局部注射诱发大鼠足爪肿胀，该模型的特点是致炎局部PG合成增加，并与血管活性物质和激肽类一起诱发水肿。通过测量致炎前后大鼠足肿胀容积的变化来观察本发明药物的抗炎作用。(2)方法取大鼠50只，全雄，体重100120g，按体重随机分成5个组，每组10只。第一组为阴性对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(扑炎痛片，0.6g/kg)，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。每日定时灌胃小鼠一次，连续3天。末次用药前l天，用记号笔在大鼠右后肢踝关节周围做一标记，用排水法测定每只大鼠右后肢正常足跖容积。末次给药30niin后，分别在大鼠右后肢足跖皮下注射1%角叉菜胶混悬液0.05ml/只致炎。分别于致炎后l、2、4、6、8h，5个时点皆各测一次右后肢足跖容积，观察致炎前后足容积变化，并计算肿胀率。致炎后容积一致炎前容积<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>(3)实验结果由表4可见，本发明药物大剂量组在至炎后l、2小时，本发明药物中剂量组在至炎后1小时，足爪体积显著小于模型组。故可认为本发明药物对角叉菜胶局部注射诱发大鼠肿胀具有明显抑制作用，主要作用于角叉菜胶局部注射后1小时足爪肿胀形成期。表4本发明药物对角叉菜致大鼠足跖肿胀的影响(3T±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>与模型组比较*P〉0.05**p<0.05;***p<0.01.3、对小鼠棉球肉芽肿的影响(1)目的将高压灭菌的棉球植入小鼠蹊部皮下，可产生与炎症后期病理相似的结缔组织增生。该模型可观察本发明药物对抗炎症后期结缔组织增殖作用。(2)方法小鼠60只，雌雄各半，体重1822g，按体重随机分成5组，每组12只。第一组为模型对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(地塞米松，15mg/dl)，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg麻醉小鼠，仰卧固定，碘酒、酒精消毒下腹部皮肤，沿腹中线剪开长约0.5cm切口，将2个灭菌棉球(每个棉球10mg)高压灭菌，分别滴加800u/ml青霉素和650u/ml各0.05ml，5(TC烘干)分别植入小鼠左、右蹊部皮下。术后当日开始采用等容积不等浓度药液灌胃给药，每日1次，连续7天。末次给药后lh颈椎移位处死动物，将棉球连同周围结缔组织一起取出，剔除脂肪组织，置于55r烘箱24hr烘干，冷却后称重。干重减去原棉球重量，即得肉芽组织重量。肉芽肿重量以mg(肉芽肿)/10g(体重)表示。(3)实验结果由表5，本发明药物大剂量组肉芽重量和肉芽指数显著小于模型对照组异(p<0.05)，故该药可抑制棉球肉芽组织的形成，对慢性炎症有一定抑制作用。表5本发明药物对小鼠棉球肉芽肿的影响(3T±S)动物数剂量肉芽重量肉芽重量组别(只)(g/kg永d)(mg)(mg/10g体重)模型对照组1223.65±10.587.28±2.66本发明药物128X719.95±7.22**5.86±1.13**本发明药物124X723.00±3.94*6.54±2.13*本发明药物122X724.25±4.177.24±1.44*地塞米松组120.015X715.5±4.12***4.23±1.03***与模型组比较*P>0.05**p<0.05;林*卩<0.01.4、对小白鼠腹腔毛细血管通透性的影响(1)目的采用低浓度醋酸作致炎因子，引起腹腔急性炎症反应。再从尾静脉注入染料伊文思兰，测定腹腔染料的通透量可代表炎性渗出的多少。通过分光光度计测定给药后腹腔染料的OD值来判断药物的抗炎效果(2)实验方法取小鼠60只，1822g，雄性，按体重随机分为5组，每组12只，第一组为模型对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(阿斯匹林，0.02g/kg)，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。每日定时灌胃一次，连续3天。末次给药后40min，尾静脉注射l%伊文思兰0.lml/10g，同时腹腔注射0.6y。醋酸0.2ml/只，20min后断头处死，剪开腹腔后用5ml生理盐水反复冲洗腹腔，用吸管吸取腹腔洗出液，最后加入生理盐水定容至10ml，3000r/min离心10min，取上清液3ml于分光光度计590nm处测吸光度A。(3)实验结果由表6可见，本发明药物大剂量组和中剂量组吸光度A值明显低于模型组(P〈0.05)。故可认为本发明药物可降低O.6%醋酸所至小鼠腹腔毛细血管通透性。表6本发明药物对小白鼠腹腔毛细血管通透性的影响(3T±S)组别动物数(只)剂量(g/kg)A值抑制率(％)模型组90.18±0.11阿司匹林100.02X30.04±0.02"*76.63大剂量98X30.05±0.04'"73.36中剂量104X30.05±0.04"*73.46小剂量102X30.12±0.09*33.3与模型组比较*P>0.05**p<0.05;林*卩<0.01.5、本发明药物对大鼠胸腔白细胞游走的影响(1)目的采用角叉菜胶作致炎因子，引起腹腔急性炎症反应。测定腹腔渗出液量和渗出液中白细胞总数，评价本发明药物对炎细胞的抑制作用。(2)实验方法SD大鼠50只，100—120g，雌雄兼有，按体重随机分为5组，第一组为模型对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(阿斯匹林，0.02g/kg，为临床剂量的10倍)，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。每日定时灌胃一次，连续3天末次给药后1小时，将大鼠用乙醚浅麻醉，仰位固定在手术台上，从大鼠右侧胸腔角注入0.5y。角叉莱胶0.05ml/只。5小时后断头处死大鼠，在横隔周边部打开胸膛，用注射器吸出胸腔液测量渗出液量，用细胞计数仪测定渗出液中白细胞总数(3)实验结果由表7可见，本发明药物大、中剂量组渗出液白细胞总数显著低于模型组(P<0.01),本发明药物大剂量组渗出液体积显著低于模型组(p<0.05)。故可认为，本发明药物对0.5°/。角叉莱胶所至大鼠胸腔白细胞游和液体渗出有抑制作用。_表7本发明药物对大鼠胸腔白细胞游走的影响(BS)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>试验例4本发明药物的镇痛作用1、对醋酸所致小鼠扭体次数的影响(1)目的给小鼠腹腔注射一定浓度的乙酸可诱发小鼠腹腔深部大面积而较持久的疼痛，致使小鼠产生扭体反应。该模型可观察本发明药物的非特异性镇痛作用。(2)实验方法小鼠50只，雌雄兼有，体重1822g，按体重随机分成5组，每组10只，第一组为阴性对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(罗通定片，0.08g/kg)，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。每日定时灌胃小鼠一次，连续3天。末次给药40分钟后，各鼠腹腔均注射0.75%醋酸，0.2ml/只。观察注射后20分钟内各组出现扭体反应(腹部内凹，伸展后肢，臀部抬高)的次数。(3)实验结果由表8，本发明药物大、中剂量组小鼠扭体次数低于模型对照组小鼠，并有显著性差异(P〈0.05)。故可认为本发明药物对乙酸腹腔注射引起的大面积深部疼痛有对抗作用。表8本发明药物对醋酸所至小鼠扭体次数的影响(BS)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>2、对热板所至小鼠疼痛反映的影响(1)实验方法按体重随机分成5组，每组IO只。第一组为正常对照(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(罗通定片，0.04g/kg，为临床剂量的IO倍)，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。每日定时灌胃小鼠一次，连续3天。预先调节热板仪，使温度恒定在60土0.3t:，热板需预热10分钟。筛选合格雌性小鼠(放上热板至出现添后足所需时间作为该鼠的痛阈值，凡添足时间小于5秒或大于30秒或跳跃者弃之不用)50只，重复测正常痛阈值，取两次正常痛阈平均值，作为该鼠给药前的痛阈值。末次给药后测定小鼠30、60、90、120分钟的痛阈值。如60秒钟小鼠仍无反应，将小鼠取出，以免烫伤，其痛阈以60秒计算。给药后痛阈值一给药前痛阈值计算镇痛百分率(％)=-X100%给药前痛阈值实验结果由表9可见，本发明药物大剂量组在30min、60min以及中剂量组30min小鼠痛阈值高于正常对照组小鼠痛阈值，具有显著性差异(P<0.05)，故可认为本发明药物热板所致非特异性疼痛有一定抑制作用。表9本发明药物对热板所至小鼠疼痛反映的影响()<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>与正常对照组比较*p>0.05;**p<0.05;***p<0.01.试验例5本发明药物的免疫调节作用1、本发明药物对2.4—二硝基氯苯(DNCB)所致小鼠迟发性变态反应的影响(1)目的观察本发明药物对小鼠迟发变态反应的影响，可反映药物对机体特异免疫反应的调节作用。(2)实验方法取昆明种小鼠50只，雌雄各半，18—22g，按体重随机分为5组。第一组为模型对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组，隔天皮下注射O.015g/kg环磷酰胺，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。其余各组每天给药l次，连续灌胃给药7天。DNCB配制致敏或攻击前以丙酮和麻油l:l为溶剂新鲜配制。给药前3d每鼠背部脱毛3X3cm;给药当日将50ully。DNCB溶液均匀涂抹于小鼠背部，于次日再强化l次。致敏7d后，将20ulP/oDNCB溶液均匀涂抹于均匀涂抹于每只小鼠右耳进行攻击，24h后脱颈处死动物，称重，沿耳廓基线剪下两耳称重，并取胸腺、脾脏称重。以左右耳片重量之差表示肿胀度，并计算脾指数，胸腺指数。胸腺重量(mg)胸腺指数-X100%体重(g)脾重(mg)脾指数二-~X100%体重(g)(3)实验结果由表IO，本发明药物大剂量组肿胀度显著小于模型组对组(p<0.05)，故认为本发明药物对DNCB所致小鼠迟发性变态反应有抑制作用。表IO本发明药物对2.4—二硝基氯苯所致小鼠迟发性变态反应的影响(3T±S)动物数剂量胸腺指数脾脏指数肿胀度组另IJ(只)(g/kg*d)(mg/10g)(mg/10g)(mg)模型对照组10一0.52土0.0800.39±0.02047.22±10.30本发明药物组108X30.41±0.03**0.33±0,021*35.56±11.14**本发明药物组104X30.47±0.09*0.35±0.074*40.76±10.33*本发明药物组102X30.49±0.11*0.38±0.055*44.38±8.82*环磷酰胺组100.02X70.31±0.16*氺承0.25±0.034***12.14±9.95林*与模型组比较*p〉0.05**p<0.05;***p<0.01.2、对小鼠网状内皮系统吞噬功能的作用(l)目的观察本发明药物对小鼠单核巨噬细胞系统吞噬功能的影响，可反映药物对机体非特异免疫反应的调节作用。(2)方法昆明种小鼠72只，雌雄各半，体重1822g，按体重和性别随机分成6组，每组12只。第一组为模型对照组(灌胃色拉油)，第二组为阳性对照组(地塞米松，10mg/dl)，三至五组为本发明药物大、中、小剂量组。灌胃容积为O.lml/10g体重，每日1次，连续7天。末次给药后l小时，尾静脉注射印度墨汁(l:4稀释)0.lml/10g体重，注射后30s和10min分别从眶后静脉丛取血50ul，加入O.线Na2C03ml溶液中，摇匀，675nm波长比色，读取光密度A^和Ah^，按下式计算吞噬指数k和校正吞噬指数a。lgA30s—lgAI0Blin吞噬指数k二-t「t！—体重(g)校正吞噬指数。=3vl^X-肝脾合重(g)(3)实验结果本发明药物各剂量组均能降低吞噬指数，大剂量组有显著差异(p<0.05)。该药对小鼠网状内皮系统吞噬功能的作用有抑制作用。表ll本发明药物对对小鼠网状内皮系统吞噬功能的作用(i±s)组别动物数(只)剂量(g/kg*d)吞噬指数k校正吞噬指数a模型对照组122.023±0.2192.07±0.50本发明药物组128X70.309±0.063**1.25±0.16**本发明药物组124X70.430±0.328*1.60±0.23*本发明药物组122X71.934±0.611*1.90±0.35*地塞米松组120.010X70.284±0.161林*l.OO土O.23**与模型组比较*p〉0.05**p<0.05;***p<0.01.3、对小鼠溶血素抗体生成的影响(1)目的给小鼠腹腔注射5%鸡红细，诱发体内产生抗体，评价本发明药物对机体非特异免疫反应的调节作用。(2)实验方法取昆明种小鼠60只，雌雄各半，按体重随机分为6组。连续给药3天后每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞悬液0.3ml/只进行免疫。第一组给等体积色拉油作为空白对照组;第二组为环磷酰胺；第三组为雷公藤组；第三组第四至六组支灌胃本发明药物高、中、低浓度的药液作为给药组,连续给药7天。环磷酰胺组分别于第2.4.6天皮下注射环磷酰胺0.02g/kg，免疫后7天即摘除眼球取血进行溶血素抗体测定。鸡血细胞的制备:无菌条件下，取鸡血于盛有Alsever's溶液的灭菌锥形瓶中，鸡血与Alsever's溶液比例为1:5，混匀，4"C冰箱保存。使用时以生理盐水洗涤3次，前两次离心速度1000r/min，离心5min，弃上清液和界面白细胞层，最后应连续两次离心(1500r/min，5min)，直至红细胞压积值恒定，按比值用生理盐水配成所需浓度的红细胞悬液。免疫后7天即摘除眼球取血进行溶血素抗体测定。取血约后，2000r/min离心10min，取血清10u1用生理盐水lml稀释100倍，然后取稀释血清lml于试管内，与5%鸡红细胞悬液0.5ml和l:10稀释后的新鲜豚鼠血清O.5ml混合，混匀，立即放入37。C恒温水浴锅恒温30min，然后立即取出放入冰浴中终止反应，离心，取上清液于540nm处比色，以lml生理盐水加5%鸡红细胞悬液0.5ml，10%豚鼠血清0.5ml作为空白对照，分别测定吸光度(A)值。(3)实验结果由表12可见，本发明药物大剂量组光密度值显著低于模型对照组(p<0.05)，表明该药对小鼠溶血素抗体生成具有抑制作用。表12对小鼠溶血素抗体生成的影响(3T±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>结论综上所述，本发明药物灌胃给药，对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、对角叉菜胶局部注射诱发大鼠足爪肿胀、大鼠胸腔白细胞游走、小白鼠腹腔毛细血管通透性以及小鼠棉球肉芽肿均有明显抑制作用，表明本发明药物具有抗炎作用。本发明药物灌胃给药，可以显著抑制热板法所致小鼠添足次数，对抗热板所致非特异性疼痛；还可显著抑制醋酸法致小鼠扭体次数，对乙酸腹腔注射引起的大面积深部疼痛具有对抗作用。本发明药物灌胃给药对正常小鼠网状内皮系统吞噬作用有明显抑制作用；对DNCB诱发DTH反应及血清溶血素抗体生成都有明显抑制作用。本发明药物灌胃给药，对完全弗氏佐剂致大鼠关节炎(AA)原发病变和继发病变有明显改善作用，可以减轻滑膜增生、纤维组织增生、减少多种炎细胞浸润等多种病理学改变。能降低佐剂性关节炎大鼠(AA)血清中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)含量，及一氧化氮合成酶(NOS)活力；提高超氧化物歧化酶(SOD)活力。表现一定抗氧化作用。可降低佐剂性关节炎大鼠(AA)血清中炎性细胞因子TNF-a、IL-P含量。本发明药物抗类风湿的机理或与抗氧化、调节炎性细胞因子有关。综上，本发明药物具有抗炎作用、镇痛作用，免疫调节及抗氧化作用，对佐剂关节炎动物模型有显著改善作用，故可用于治疗风湿、类风湿性关节炎治疗。权利要求1、一种治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂姜黄1-9份、肉桂9-1份。2、根据权利要求1所述的治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂姜黄l-5份、肉桂l-2份。3、根据权利要求2所述的治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂姜黄l-5份、肉桂1份。4、根据权利要求3所述的治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于它是由下述重量配比的原料制备而成的药剂姜黄2份、肉桂1份。5、根据权利要求l-4任一项所述的治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于它是由姜黄、肉桂的水或有机溶剂提取物为活性成分，加上药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的药剂，所述的药剂为胶囊剂、片剂、丸剂、口服液或颗粒剂。6、根据权利要求5所述的治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于所述的胶囊剂为软胶囊，每粒含姜黄素C2iH8o06的重量百分含量为不少于7.0%。7、一种制备权利要求l-6任一项所述的治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物的方法，它包括如下步骤a、取药材姜黄、肉桂；b、姜黄加入乙醇提取，乙醇浓度为》65%;肉桂采用水蒸汽蒸馏，得挥发油，合并两种提取物，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的药剂。8、根据权利要求7所述的治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，其特征在于b步骤所述的乙醇浓度为70%乙醇，提取方法为乙醇渗滤法。9、权利要求1所述的药物组合物在制备治疗类风湿性关节炎的药物中的用途。10、权利要求1所述的药物组合物在制备治疗风湿性关节炎的药物中的用途。全文摘要本发明提供了一种治疗风湿、类风湿性关节炎的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂姜黄1-9份、肉桂9-1份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物治疗风湿、类风湿性关节炎，药效明确，姜黄与肉桂配伍使用，发挥了协同增效的作用，为临床提供了一种新的选择。文档编号A61K9/10GK101229353SQ20081010123公开日2008年7月30日申请日期2008年2月29日优先权日2008年2月29日发明者杨安东,赵军宁申请人:四川省中医药科学院