阿魏酸哌嗪的新剂型及其制备方法

专利名称：阿魏酸哌嗪的新剂型及其制备方法
技术领域：
本发明属于药物技术领域，一种内皮素受体拮抗剂注射剂及制备方法，用于内皮 素所致冠心病、脑梗死、肾脏疾病、糖尿病血管并发症等疾病的预防和治疗，具体地说，涉及 一种阿魏酸哌嗪的新剂型及其制备方法。
背景技术：
阿魏酸哌嗪，化学名称为3-甲氧基_4羟基桂皮酸哌嗪，通过阿魏酸与哌嗪化学合 成而来。阿魏酸是普遍存在的一种酚酸，在植物细胞壁中，与多糖和木质素交联构成细胞壁 的一部分，是阿魏、当归、川芎、升麻等中药的有效成分之一，因其具有较强的抗氧化活性和 防腐作用而被广泛应用于医药、农药、保健品、化妆品原料和食品添加剂方面。近几年来，在 其生理活性方面广泛深入地研究，发现阿魏酸及其衍生物具有抗血拴、降血脂、消炎、防癌 等生物活性。1999年中国人民解放军空军总医院王峰等研究报道，阿魏酸盐是一种新的非肽类 内皮素受体拮抗剂，证实了阿魏酸类物质能与内皮素受体竞争性结合，具有波生坦(内皮 素受体拮抗药物，2001年美国上市)相同的拮抗内皮素效应。内皮素是一种具血管活性的 多肽，由21个氨基酸组成，是人类进化史中残留基因的产物。现代医学研究证实，它是强大 的致病因子，与血管心脑肾等疾病发生发展密切相关，能强烈的收缩血管，其强度是血管紧 张素II的10倍，是去甲肾上腺素的100倍；能促进血管平滑肌细胞、内皮细胞、肾小球系膜 细胞的强烈增殖，促进动脉粥样硬化、肾小球硬化的形成；还促高凝状态形成，致心脑急性 事件的发生。阿魏酸类药物主要包括阿魏酸钠、阿魏酸川芎嗪、阿魏酸哌嗪。其中以阿魏酸 哌嗪的临床疗效和安全性最优，且已作为基础用药广泛应用于冠心病、脑梗死、糖尿病血管 并发症、肾脏疾病等疾病的治疗，并被我国药典2005年版二部收录。阿魏酸哌嗪制剂目前已上市品种有阿魏酸哌嗪片、阿魏酸哌嗪分散片、阿魏酸哌 嗪胶囊，均为口服制剂。但阿魏酸哌嗪是一种难溶性物质，在水中溶解度很低，且极微溶于 乙醇，不溶于三氯甲烷。因此，阿魏酸哌嗪口服制剂存在明显的不足，如药物崩解难、药物溶 出度低、生物利用度差、起效慢，因而对于重症脑梗死、肾病、冠心病、糖尿病血管并发症患 者、吞咽困难患者均不适用，或在一定程度上限制了其临床效果。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种能够克服现有技术中阿魏酸哌嗪口服制 剂药物溶出度差、生物利用度低、起效慢等缺点的阿魏酸哌嗪新制剂及其制备方法，即阿魏 酸哌嗪注射剂，能显著提高阿魏酸哌嗪生物利用度，起效更为迅速，为重症冠心病、脑梗死、 肾病、糖尿病血管并发症等疾病患者提供一种更为理想的治疗药物。本发明解决上述问题所采用的技术方案是阿魏酸哌嗪的新剂型，以阿魏酸哌嗪 为药用成份溶解于溶剂中，通过PH调节剂调节溶剂PH值为5. 0-8. 0使阿魏酸哌嗪完全溶 解，制成注射剂，所述阿魏酸哌嗪的含量为27-200mg/ml。
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本发明的另一目的就是克服现在技术中阿魏酸哌嗪溶解性低的问题。阿魏酸哌嗪 属于难溶性物质，在水中溶解度很低。这也限制了阿魏酸哌嗪给药方式的改变。本发明研 究发现，阿魏酸哌嗪可以通过调节溶剂PH值增强其溶解性。本发明的阿魏酸哌嗪注射剂，是指临床上可接受的药剂学可行的注射剂型，包括 小容量注射液、大容量注射液、注射用粉针剂。本发明的阿魏酸哌嗪注射剂的溶剂为水，包 括且不限于纯化水、氯化钠输液、葡萄糖输液。本发明的阿魏酸哌嗪注射剂，所采用的增溶方法是通过PH调节剂调节溶剂PH值 来实现的，使其溶剂PH值范围为5. 0-8. 0，优选PH范围为5. 5-7. 5。IOmlPH值为5. 5的水 溶液至少能溶解500mg阿魏酸哌嗪。本发明涉及的上述PH调节剂，可以是碱性物质、强碱弱酸盐。碱性物质，包括且不 限于氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙一种或一种以上。强碱弱酸盐，包括且不限于碳酸钠、碳 酸氢钠、乳酸钠、碳酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾一种或一种以上。本发明进一步涉及阿魏酸哌嗪注射剂还可以根据制剂需要加入药学上可接受的 辅料，如助溶剂、等渗调节剂、抗氧化剂，以增强药物的溶解性、稳定性、有效性。进一步地， 该阿魏酸哌嗪注射剂还可采用药学上可接受的方式制成冻干制剂，包括加入冻干支架、冻 干保护剂。一种上述阿魏酸哌嗪注射剂的制备方法，包括下述步骤A.称取80_300g阿魏酸哌嗪；B.将阿魏酸哌嗪加入1500-3000ml注射用水，搅拌，缓慢加入PH调节剂调节PH值 为5. 5-8. 0，使阿魏酸哌嗪完全溶解；C.在上述阿魏酸哌嗪溶液中加入活性炭，室温搅拌10-60分钟后脱炭过滤；D.上述滤液再用微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；分装于棕色安瓿中，熔封， 经热压灭菌，即得到阿魏酸哌嗪小容量注射液。E.若分装于IOOml玻瓶中，加塞、轧盖，经热压灭菌，即得阿魏酸哌嗪大容量注射 液。F.若分装于IOml西林瓶中，冻干，即得阿魏酸哌嗪注射用粉针剂。G.上述B步骤中，阿魏酸哌嗪溶液还可根据需要抗氧化剂5_50g、助溶剂10_150g、 等渗调节剂10-100g、冻干保护剂10-100g。综上所述，本发明的有益效果是1、本发明拓展了阿魏酸哌嗪的临床适用范围，具有药物溶解性高、生物利用度高、 给药迅捷、起效更迅速，治疗作用更强等特点，尤其适用于重症脑梗死、肾病、冠心病、糖尿 病血管并发症患者、吞咽困难患者的防治。2、本发明能够克服了现在技术中阿魏酸哌嗪溶解性低的问题，通过PH调节剂调 节溶剂PH值可以实现阿魏酸哌嗪的增溶，10ml PH值为5. 5的水溶液至少能溶解500mg阿
魏酸哌嗪。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，但本发明的实施方式不限于此。实施例1
阿魏酸哌嗪小容量注射液的制备A.称取80阿魏酸哌嗪；B.将阿魏酸哌嗪加入1800ml注射用水，搅拌，缓慢加入20%碳酸钠溶液调节PH 值，使溶液PH值达到6. 2，此时阿魏酸哌嗪完全溶解；C.在上述阿魏酸哌嗪溶液中加入适量的活性炭，室温搅拌30分钟后脱炭过滤；D.上述滤液再用微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；分装于IOml棕色安瓿中， 熔封，经热压灭菌，即得到阿魏酸哌嗪小容量注射液。实施例2 阿魏酸哌嗪注射用粉针剂的制备A.称取300g阿魏酸哌嗪；B.将阿魏酸哌嗪加入3000ml注射用水，搅拌，缓慢加入2mol/L氢氧化钠溶液调节 PH值，使PH值为7. 5，使阿魏酸哌嗪完全溶解；再加入200g甘露醇，搅拌，使完全溶解；C.在上述阿魏酸哌嗪溶液中加入活性炭，室温搅拌60分钟后脱炭过滤；D.上述滤液再用微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；分装于IOml西林瓶中，冻 干，即得注射用阿魏酸哌嗪粉针剂。实施例3 阿魏酸哌嗪大容量注射液的制备A.称取IOOg阿魏酸哌嗪；B.将阿魏酸哌嗪加入2000ml注射用水，搅拌，缓慢加入乳酸钠溶液调节PH值，使 PH达到5. 8，搅拌，阿魏酸哌嗪完全溶解。C.在上述阿魏酸哌嗪溶液中加入活性炭，室温搅拌30分钟后脱炭过滤；D.上述滤液再用微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量；分装于IOOml玻瓶中，加 塞、轧盖，经热压灭菌，即得阿魏酸哌嗪大容量注射液。实施例4 急性毒性实验(1)腹腔注射阿魏酸哌嗪测得LD5tl为3135mg 士 759mg/公斤体重/小鼠，相当于 临床拟定成人剂量的313倍。(2)静脉注射阿魏酸哌嗪测定其LD5tl为2484mg 士 638mg/公 斤体重/小鼠，相当于临床拟定成人剂量的248倍。充分说明阿魏酸哌嗪注射剂安全性非 常高，由片剂改为注射剂是完全可行的。。实施例5 大鼠致畸致突变试验用阿魏酸哌嗪进行了大鼠致畸胎试验、Ames试验、小鼠骨髓微核试验和染色体畸 变试验，证明阿魏酸哌嗪在大剂量下仍无致畸和致突作用。实施例6 亚急性毒性试验用阿魏酸哌嗪给狗每支每次静注400mg(相当于临床拟定成人剂量的3倍)隔日 一次，共30次，给药时间为2个月，并继续观察4个月，共计进行了半年的观察。休重、红 细胞、白细胞、血小板、血红蛋白、白细胞分类计数、血清转氨酶、碱性磷酸酶、血液过氧化物 酶、胆固醉、甘油三脂、血总脂、非蛋白氮、蛋白电泳、总蛋白、清蛋白、等与对照组比较，均无显著性差异，病理组织观察也未见异常病变。实施例7:阿魏酸哌嗪对MCAO大鼠局部脑血流量的影响1材料与方法1. 1动物分组选取健康雄性Wistar大鼠120只，12周龄，体重(300士 20) g，随机分为5组，即假 手术组、模型对照组(简称模型组)、阿魏酸哌嗪注射剂A组、阿魏酸哌嗪注射剂B组、阿魏 酸哌嗪片剂组，每组各24只。按处死时间点，每组又分为术后1周、2周、3周组，各8只。1.2动物的造模模型组和阿魏酸哌嗪注射剂A组、阿魏酸哌嗪注射剂B组、阿魏酸哌嗪片剂组动物 行右侧近端大脑中动脉电凝术，制作大脑中动脉闭塞MCAO模型，假手术组大鼠行同样开颅 术，但不凝闭MCA，其余操作同模型组。1. 3给药方法阿魏酸哌嗪注射剂A组、阿魏酸哌嗪注射剂B组动物分别腹腔注射阿魏酸哌嗪 15mg/kg/日、10mg/kg/日；阿魏酸哌嗪片剂组灌胃给予阿魏酸哌嗪片10mg/kg/日。假手术 组、模型组分别腹腔注射同等量生理盐水，共2周。于造模成功后7天给药，固体饲料和水 自由摄取。1. 4标本制备各实验组动物分别在相应的时间结束喂药，末次测定梗死侧额叶局部脑血流量 后，断头取脑，沿冠状面平均每隔2mm分成数层，4%多聚甲醛固定，梯度酒精脱水，石蜡包 埋。切片机上行厚度为4 μ m连续冠状切片，切片分组备用。1. 5指标的检测本实验选取梗死灶及其周围组织作为观察主要区域。采用激光多普勒血流仪 (LDF)测定梗死侧额叶局部脑血流量。1. 6统计学分析将所有数据输入微机，应用SAS8. 1软件包进行统计分析。计量数据以χ士s表示， 计量资料比较采用单因素方差分析，Newman-Keuls检验。指标间的相关性采用直线相关分 析。2 结果实验大鼠右侧额叶局部脑血流量(rCBF)及阿魏酸哌嗪的影响，结果见表1。表1各组大鼠右侧额叶皮质rCBF测定(AU，. χ士 s)
组别术后1周术后2周术后3周假手术组112. 48±11. 99116.46±12. 05116. 89±12. 57模型组84. 62±7.一〗※※87. 51±7.斗了※※86. 25±6.石之※※阿魏酸哌嗪注射剂A组99. 22±6. 51 ▲108. 97±7. 02 ▲▲113. 68±7. 25 ▲▲
6 注与同期假手术组比较，※※卩< 0. 01 ；与同期模型组比较，▲ P < 0. 05。结果显示，与假手术组比较，模型组动物术后1周、2周、3周梗死侧额叶皮质rCBF 值显著下降，表明本实验造模成功。而经阿魏酸哌嗪治疗梗死侧额叶皮质的rCBF出现不同 程度的回升，提示阿魏酸哌嗪无论是口服还是注射给药，都能扩张脑血管，增加脑血流量， 改善缺血区域供血不足。但在防治效果方面，以注射给药更为显著。与模型组比较，在术后 1周阿魏酸哌注射剂A组、阿魏酸哌注射剂A组动物梗死侧额叶皮质rCBF值回升显著(P < 0. 05)；而阿魏酸哌嗪片组动物梗死侧额叶皮质rCBF值回升不明显(P > 0. 05)。术后2 周、3周，阿魏酸哌注射剂A组、阿魏酸哌注射剂A组动物梗死侧额叶皮质rCBF值继续增大， 与模型组比较具有极显著性差异(P <0.01)；而阿魏酸哌嗪片组动物梗死侧额叶皮质rCBF 值，与模型组比较P > 0. 05。结果表明，阿魏酸哌嗪无论是口服还是注射给药，都能扩张脑 血管，增加脑血流量，改善缺血区域供血不足。但在相同剂量下，注射给药治疗效果更为显
-frh-
者O实施例8 阿魏酸哌嗪注射剂对大鼠血栓形成及血粘度的影响1材料与方法1. 1 材料健康雄性Wi star大鼠50只，体重252 士 18g。体外血栓形成仪(SDZ2A1型)，江 苏无锡县电子仪器厂产品；L GPABER血小板聚集凝血因子仪、L G2R220型血液粘度测定仪， 均系北京中勤世帝科学仪器公司产品。1. 2实验药物阿司匹林肠溶片(Aspirin，ASP)，25mg/片，北京第八制药厂生产；冻干凝血酶试 剂盒、凝血活酶试剂盒、部分凝血活酶试剂盒为上海医科大学华山医院技协试剂所产品；戊 巴比妥钠，上海进口分装。1. 3实验步骤将大鼠随机分为5组(每组10只)(1)对照组蒸馏水10ml/kg ；⑵阿魏酸哌 嗪注射剂大剂量组，剂量15mg/kg/日；(3)阿魏酸哌嗪注射剂小剂量组，剂量10mg/kg/日； (4)阿魏酸哌嗪片组，剂量10mg/kg/日；(5)阿司匹林组，剂量50mg/kg)对照组用IOml/ kg动物体重的蒸馏水腹腔注射，阿魏酸哌嗪片组、阿司匹林组用相同体积的药液灌胃，其 余组均用相应的等体积药液腹腔注射，连续7天，每日一次，末次给药后lh，用戊巴比妥钠 (30. Omg/kg动物体重)麻醉，剖腹，用硅化注射器从腹主动脉取血以测定实验指标。1.4实验指标及测定方法2ml血用于体外血栓形成测定，即按照Chandler体外法，立刻将血注入旋转环内， 注入的血量充满旋转环1/2以下(1.8ml)，迅速密封，置体外血栓形成仪上，旋转IOmin (实 验温度为37°C )，倾出血栓，生理盐水洗涤，测量长度，称量湿重，将血栓条置80°C烘箱3h， 恒重后称其干重；1. 8ml血(3. 8%枸橼酸钠抗凝)测定血浆凝血酶原时间(PT)、白陶土部 分凝血酶原时间(KPTT)、凝血酶时间(TT)，其操作方法按试剂盒说明书进行。
1. 5统计学处理实验数据以均数士标准差(χ士s)表示，由SPSS10. 0软件处理，采用组间方差分 析得出P值。2 结果2. 1 一般情况实验期间各组动物摄食量无显著差异，各组体重相似(P > 0. 05)。2. 2阿魏酸哌嗪对大鼠体外血栓形成的影响，结果见表2。与对照组比较，阿魏酸 哌嗪片剂组有缩短血栓长度和减轻血栓湿重及干重的趋势(P > 0. 05)，而阿魏酸哌嗪注射 剂大小剂量组能缩短血栓长度和减轻血栓湿重及干重，作用明显(P < 0.05)，其中阿魏酸 哌嗪大剂量组作用最为显著(P <0.01)，与阿司匹林组相当。表明阿魏酸哌嗪能有效缩短 血栓长度和减轻血栓湿重及干重，但注射给药比口服给药药理作用更强。提示阿魏酸哌嗪 注射给药能提高其生物利用度，起效更迅速，疗效更显著。表2阿魏酸哌嗪对大鼠体外血栓形成的影响(χ士s，η = 10) 注与对照组组比较，*Ρ < 0. 05 ；**Ρ < 0. 052. 3阿魏酸哌嗪对大鼠凝血时间的影响，结果见表3。与对照组比较，阿魏酸哌嗪 注射剂大剂量组、阿魏酸哌嗪注射剂小剂量组的PT、KPTT、TT均明显延长，其中阿魏酸哌嗪 注射剂大剂量组PT、KPTT, TT延长更为显著(ρ < ο. 01)，与阿司匹林组相当。而阿魏酸哌 嗪片剂组的ΡΤ、ΚΡΤΤ、ΤΤ只有延长趋势(P > 0. 05)。提示阿魏酸哌嗪具有延长大鼠凝血时 间效应。其作用强度与给药方式、给药剂量相关。注射给药优于口服给药；给药剂量越大， 药理效应越强。表3阿魏酸哌嗪对大鼠凝血时间的影响 注与对照组组比较，*P < 0. 05 ；< 0. 05心脑血管病在老年患者中尤为常见，是引起死亡的常见病。资料显示，血液粘度随 年龄增长而增高，并且容易导致血栓形成，增强凝血活性，促进病情发生、发展。血液粘度 增大，能使动脉血流速度减慢及外周阻力增加，引起心脑供血不足，诱发或加重心脑血管疾 病。血管内血栓形成则是心肌梗死、脑梗死发生的直接原因。因此，临床上常采用药物以改 善血液粘度、抗凝、抗血栓来防治心脑血管病。阿魏酸哌嗪能缩短血栓长度和减轻血栓湿重 及干重，且能使PT、KPTT、TT均明显延长；其中阿魏酸哌嗪注射剂作用效果明显强于阿魏酸 哌嗪片剂。而且其药理作用强度与给药剂量密切相关。给药剂量越大，药理作用越强。本 实验结果表明，我们通过增强阿魏酸哌嗪的溶解性，制剂成注射剂，能提高阿魏酸哌嗪的生 物利用度，增强其药理作用强度，从而提高治疗效果如上所述，便可较好的实现本发明。
权利要求
阿魏酸哌嗪的新剂型，其特征在于，以阿魏酸哌嗪为药用成份溶解于溶剂中，通过PH调节剂调节溶剂PH值为5.0 8.0使阿魏酸哌嗪完全溶解，制成注射剂，所述阿魏酸哌嗪的含量为27 200mg/ml。
2.根据权利要求1所述的阿魏酸哌嗪的新剂型，其特征在于，所述溶剂PH值为 5 · 5 rJ · 5 ο
3.根据权利要求1或2所述的阿魏酸哌嗪的新剂型，其特征在于，所述PH调节剂为碱 性物质和/或强碱弱酸盐。
4.根据权利要求3所述的阿魏酸哌嗪的新剂型，其特征在于，所述碱性物质为氢氧化 钠、氢氧化钾、氢氧化钙中的一种或上述多种以任意比例构成的混合物。
5.根据权利要求3所述的阿魏酸哌嗪的新剂型，其特征在于，所述强碱弱酸盐为碳酸 钠、碳酸氢钠、乳酸钠、碳酸钾、枸橼酸钠、枸橼酸钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二钾中的一种或上 述多种以任意比例构成的混合物。
6.上述阿魏酸哌嗪的新剂型的制备方法，其特征在于，包括下述步骤A.称取80-300g阿魏酸哌嗪；B.将阿魏酸哌嗪加入1500-3000ml注射用水，搅拌，缓慢加入PH调节剂调节PH值为 5. 5-8. 0，使阿魏酸哌嗪完全溶解；C.在上述阿魏酸哌嗪溶液中加入活性炭，室温搅拌10-60分钟后脱炭过滤；D.将步骤C的滤液再用微孔滤膜过滤，补加注射用水至全量即得阿魏酸哌嗪注射液。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述B步骤中，阿魏酸哌嗪溶液还加入抗 氧化剂5-50g。
8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述B步骤中，阿魏酸哌嗪溶液还加入有 助溶剂10-150g。
9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述B步骤中，阿魏酸哌嗪溶液还加入有 等渗调节剂IO-IOOg
10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述B步骤中，阿魏酸哌嗪溶液还加入有 冻干保护剂10-100g。
全文摘要
本发明公开了一种阿魏酸哌嗪的新制剂及其制备方法。阿魏酸哌嗪的新剂型，是以阿魏酸哌嗪为药用成份溶解于溶剂中，通过pH调节剂调节溶剂pH值为5.0-8.0使阿魏酸哌嗪完全溶解，制成注射剂，所述阿魏酸哌嗪的含量为27-200mg/ml。本发明拓展了阿魏酸哌嗪的临床适用范围，具有药物溶解性高、生物利用度高、给药迅捷、起效更迅速，治疗作用更强等特点，尤其适用于重症脑梗死、肾病、冠心病、糖尿病血管并发症患者、吞咽困难患者的防治；并且克服了现在技术中阿魏酸哌嗪溶解性低的问题，通过pH调节剂调节溶剂pH值可以实现阿魏酸哌嗪的增溶，10ml pH值为5.5的水溶液至少能溶解500mg阿魏酸哌嗪。
文档编号A61P13/12GK101919812SQ20101016308
公开日2010年12月22日 申请日期2010年5月5日 优先权日2010年5月5日
发明者唐楷 申请人:四川宝盛康药业有限公司