一种米糠来源的天然阿魏酸的制备方法
【专利摘要】一种米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，包括以下步骤：提取：以脱脂米糠为原料，利用包含有纤维素酶、蛋白酶和黑曲酶的复合酶，进行发酵酶解；过滤：酶解完成后，将酶解液进行初步固液分离，初滤液利用超滤仪进行精滤，得到精滤液备用；富集：精滤液通过反相树脂进行富集，然后用含水醇进行洗脱；收集洗脱液，浓缩，结晶得到阿魏酸粗品；纯化：阿魏酸粗品加入活性炭，用90-100度热水回流，然后过滤，滤液放凉结晶，得到阿魏酸产品。本发明克服现有技术存在的污染环境、安全性差和工业化生产成本高的问题。
【专利说明】一种米糠来源的天然阿魏酸的制备方法【技术领域】[0001]本发明涉及一种米糠来源的天然阿魏酸的制备方法。【背景技术】[0002]阿魏酸(Ferulic Acid)的化学名称为4羟基3甲氧基肉桂酸，是桂皮酸(又称肉桂酸，3苯基2丙烯酸，分子结构)的衍生物之一。阿魏酸(阿魏酸钠)具有抗血小板聚集，抑制血小板5-羟色胺释放，抑制血小板血栓素a2 (txa2)的生成，增强前列腺素活性，镇痛， 缓解血管痉挛等作用。是生产用于治疗心脑血管疾病及白细胞减少等症药品的基本原料。[0003]它在阿魏、当归、川芎、升麻、酸枣仁等中药材中的含量较高，是这些中药的有效成分之一，已经作为中成药的质量指标之一。在食品原料中，咖啡、谷壳、香兰豆、麦麸、米糠中阿魏酸含量也较高。近几年在药理药效方面的研究发现了许多阿魏酸及衍生物的药理作用和生物活性，且毒性较低，因而在医药、保健品、化妆品原料和食品添加剂等方面有着广泛的用途。[0004]目前，阿魏酸的制备工艺主要分为两类，一类是从含有阿魏酸的中药里提取，另一类是米糠来源阿魏酸。其中，米糠来源阿魏酸的制备工艺，主要依次进行酶解、碱水解、过滤、滤液上离子交换树脂、洗脱或者有机溶剂萃取、浓缩结晶、纯化等步骤。[0005]综上，传统的阿魏酸制备工艺存在以下不足:1.污染环境:在制备过程中需要使用大量的甲醇乙醇等有机溶剂以及大量的酸碱，对环境污染大，安全性差；2.工业化生产成本过高:现有碱水解工艺操作步骤繁琐、复杂，需要高温水解4-8h，设备要求高、投资大， 水电煤汽等用量大，成本高。3、浪费中草药资源。
【发明内容】
[0006]本发明提供一种米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，以克服现有技术存在的污染环境、安全性差和工业化生产成本高的问题。[0007]为了克服现有技术存在的问题，本发明所提供的技术方案是:[0008]一种米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，主要包括以下步骤:[0009](I)提取:以脱脂米糠为原料，利用包含有纤维素酶、蛋白酶和黑曲酶的复合酶，进行发酵酶解；[0010](2)过滤:酶解完成后，将酶解液进行初步固液分离，初滤液利用超滤仪进行精滤， 得到精滤液备用；[0011](3)富集:精滤液通过反相树脂进行富集，然后用含水醇进行洗脱；收集洗脱液， 浓缩，结晶得到阿魏酸粗品；[0012](4)纯化:阿魏酸粗品加入活性炭,用90-100度热水回流,然后过滤,滤液放凉结晶，得到阿魏酸产品。[0013]基于上述基本方案，本发明还作如下优化限定和改进:[0014]上述步骤(1)中，纤维素酶、蛋白酶、黑曲霉量分别为脱脂米糠质量的0.3-0.5%、0.3-0.5%、0.9-1%。[0015]上述步骤(1)是在40-45 °C、pH为4.5-5条件下酶解反应6_8小时。[0016]上述步骤(3)中，所述含水醇优选60-75% (醇浓度V/V)甲醇或乙醇。[0017]上述步骤(4)中，加入阿魏酸粗品质量5%的活性炭，96度热水回流半小时。[0018]上述步骤(3)中在洗脱前，先米用2Βν自来水洗杂。[0019]与现有技术相比，本发明的优点是:[0020]1:对环境友好:提取工艺中，选用复合酶发酵酶解，环境污染小，由于取消了强碱 (氢氧化钠、氢氧化钾)高温水解，减少了煤碳的使用及强碱对环境的影响；富集工艺中，不用萃取方法，减少了乙酸乙酯、氯仿有机溶剂的使用，因此可有效保护环境；[0021]2、安全性好:大幅度减少强碱及低碳醇、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂的使用量，保证了工业化生产中的操作安全。[0022]3、适宜进行大规模的工业化生产:(1)使用超滤仪过滤，减少了离心、滤纸过滤等步骤，缩短了生产周期，同时还打到初步除杂的目的，使得一些分子量大的物质达到初步分离；(2)溶剂消耗少，减少了低碳醇及乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂的使用，生产成本大大降低。【具体实施方式】:[0023]下面将结合实施例对本发明进行详细地说明。[0024]实施例1:[0025]一、提取:取500g米糠，加入1.5g纤维素酶、1.5g蛋白酶、及4.5g黑曲霉，加5升水，调节ph4.5-5，40度条件下，酶解反应6小时。[0026]二、过滤:酶解液用板框压滤机初步过滤，初滤液经超滤仪过滤，得到精滤液。[0027]三、富集:精滤液过反相填料色谱柱，监测流出液，至流出液有阿魏酸时停止上样， 2Bv自来水洗杂，然后用60%乙醇水洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，放置结晶，得到阿魏 Ife粗品 1.1go[0028]四、纯化:上述1.1g粗品，加入5%的活性炭及5倍量水，96度回流半小时，过滤， 滤液放凉结晶，得到0.86g含量99%的阿魏酸。[0029]实施例2:[0030]一、提取:取500g米糠，加入2.5g纤维素酶、2.5g蛋白酶、及5g黑曲霉，加5升水， 调节ph4.5-5，45度条件下，酶解反应8小时。[0031]二、过滤:酶解液用`板框压滤机初步过滤，初滤液经超滤仪过滤，得到精滤液。[0032]三、富集:精滤液过反相填料色谱柱，监测流出液，至流出液有阿魏酸时停止上样， 2Bv自来水洗杂，然后用70%乙醇水洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，放置结晶，得到阿魏 Ife粗品 1.16g。[0033]四、纯化:上述1.16g粗品，加入5%的活性炭及5倍量水，96度回流半小时，过滤， 滤液放凉结晶，得到0.89g含量99%的阿魏酸。[0034]实施例3:[0035]一、提取:取1000g米糠，加入适量纤维素酶、蛋白酶、及黑曲霉，加10升水，调节 ph4.5-5，40度条件下，酶解反应7小时。[0036]二、过滤:酶解液用板框压滤机初步过滤，初滤液经超滤仪过滤，得到精滤液。[0037]三、富集:精滤液过反相填料色谱柱，监测流出液，至流出液有阿魏酸时停止上样， 2Bv自来水洗杂，然后用70%乙醇水洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，放置结晶，得到阿魏酸粗品2.16g。[0038]四、纯化:上述2.1g粗品，加入5%的活性炭及5倍量水，95度回流半小时，过滤， 滤液放凉结晶，得 到1.64g含量99%的阿魏酸。
【权利要求】
1.一种米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，主要包括以下步骤:(1)提取:以脱脂米糠为原料，利用包含有纤维素酶、蛋白酶和黑曲酶的复合酶，进行发酵酶解；(2)过滤:酶解完成后，将酶解液进行初步固液分离，初滤液利用超滤仪进行精滤，得到精滤液备用；(3)富集:精滤液通过反相树脂进行富集，然后用含水醇进行洗脱；收集洗脱液，浓缩， 结晶得到阿魏酸粗品；(4)纯化:阿魏酸粗品加入活性炭，用90-100度热水回流，然后过滤，滤液放凉结晶，得到阿魏酸产品。
2.根据权利要求1所述的米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，其特征在于:步骤(1) 中，纤维素酶、蛋白酶、黑曲霉量分别为脱脂米糠质量的0.3-0.5%、0.3-0.5%、0.9-1%。
3.根据权利要求2所述的米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，其特征在于:步骤(1)是在40-45°C、pH为4.5-5条件下酶解反应6_8小时。
4.根据权利要求3所述的米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，其特征在于:步骤(3) 中，所述含水醇采用60-75%甲醇或乙醇。
5.根据权利要求4所述的米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，其特征在于:步骤(4) 中，加入阿魏酸粗品质量5%的活性炭，96度热水回流半小时。
6.根据权利要求5所述`的米糠来源的天然阿魏酸的制备方法，其特征在于:步骤(3)中在洗脱前，先米用2Bv自来水洗杂。
【文档编号】C07C59/64GK103553902SQ201310508184
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年10月24日 优先权日:2013年10月24日
【发明者】张永利, 张文雪, 赵江, 李艳, 寇玉锋 申请人:陕西源邦生物技术有限公司