专利名称：一种芍药提取物甲氨蝶呤组合物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及芍药提取物甲氨蝶呤组合物、芍药提取物甲 氨蝶呤组合物的制备方法及其应用。
背景技术：
类风湿关节炎为一主要累及关节的全身性系统性风湿病。在人群各种族中均有较 高的发病率和严重的致残率，对人类有极大的危害性。目前临床上治疗类风湿关节炎药物主要包括非留体抗炎药和慢作用抗风湿病药 及生物制剂等，这些药物在临床治疗中发挥了重要作用。但非留体抗炎药物需长期服用不 良反应多，慢作用抗风湿病药需长期使用可造成重要脏器和组织的严重不良反应，生物制 剂经常有引起恶性感染和诱发肿瘤的严重不良反应出现。甲氨蝶呤(Methotrexate，简称MTX)，治疗类风湿关节炎具有疗效显著、严重的副 作用少、长期应用耐受性好等特点，目前已经成为治疗类风湿关节炎的首选药。其作用机制 可能与抑制二氢叶酸还原酶有关，它使细胞内叶酸缺乏，核蛋白合成减少，从而抑制细胞增 殖及复制。治疗时一般每周7.5 15mg(不超过25mg)，可口服、肌注或静脉滴注。不良反 应主要有肝损害、骨髓抑制、胃肠道症状、皮疹，偶发肺纤维化。芍药提取物主要成分为一组糖苷类物质，包括芍药苷、羟基芍药苷、芍药花苷、芍 药内酯苷、苯甲酰芍药苷等，其中芍药苷含量最高，一般以芍药苷含量作为芍药提取物的指 标性成分。芍药提取物可用于治疗类风湿关节炎。《中国现代药物应用》2008年10月第2卷第20期公开了白芍总苷联合甲氨蝶呤 治疗类风湿关节炎的疗效情况，两都联合用药比其单独用药具有疗效好，不良反应减少。但 其疗效还是不尽人意，还存在一定程度的不良反应。
发明内容
本发明的目的是提供一种芍药提取物甲氨蝶呤组合物及其制备方法与应用。上述的目的通过以下的技术方案实现一种芍药提取物甲氨蝶呤组合物，其组成包括芍药提取物和甲氨蝶呤，所述芍药 提取物与甲氨蝶呤的重量份比为芍药提取物甲氨蝶呤=1 8000 1。所述芍药提取物是指由芍药或白芍或赤芍中提取获得。芍药或白芍或赤芍为毛 茛科植物芍药Paeonia IactifloraPall及其任意一种变种植株或任何部位，如跟、根茎、 茎、叶、花穗、果实等，或市售白芍或赤芍饮片，同时包括未经任何炮制处理的原药材及饮 片和各种炮制品，如炒白芍、酒白芍、炒赤芍、酒赤芍等。芍药提取物主要成分为一组糖苷 类物质，包括芍药苷、羟基芍药苷、芍药花苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷等，其中芍药苷含 量最高，一般以芍药苷含量作为芍药提取物的指标性成分，芍药提取物中芍药苷的含量为 30% 100%。所述的甲氨蝶呤为4-氨基-10-甲基叶酸及结构相似物的混合物，主要成分为L-(+)-N-[4-[[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲氨基]苯甲酰基]谷氨酸(C2tlH22N8O5)15 按干燥品计算，含C2tlH22N8O5不得少于90. 0%。上述芍药提取物甲氨蝶呤组合物的制备方法采用等量递增法或等倍递增法。等量 递增法即先用少量芍药提取物饱和用于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，取与甲氨蝶呤等 量的芍药提取物共同研磨混合均勻，再加入与混合粉等量的芍药提取物混勻……如此反复 加入混合，直至量大组分加完，混勻。依照上述芍药提取物甲氨蝶呤组合物的制备方法，可将本发明组合物制成片剂 (包括普通片、分散片、缓释片、控释片、口腔崩解片、含片)或胶囊剂或栓剂或颗粒剂或与 其他药物复方制剂。一种上述的芍药提取物甲氨蝶呤组合物作为药物组合物的活性成分在治疗类风 湿关节炎的应用。这个技术方案有以下有益效果1.本发明的芍药提取物与甲氨蝶呤组成药物组合物，治疗类风湿的效果不仅好于 甲氨蝶呤单用效果，而且好于甲氨蝶呤与白芍总苷联合用药的效果，同时可以大大减轻或 避免甲氨蝶呤引起的肝损害、嗜睡、食欲不振等不良反应。2.本发明可以制成药剂学上的各种制剂，如片剂、胶囊剂、颗粒剂等，并且可以和 其他活性成分组成多组分药物组合物。服药方便。
图1，芍药提取物甲氨蝶呤组合物对大鼠佐剂性关节炎足爪肿胀度的影响(容积 测量)1、对照组，2、模型组，3、组合物组，4、强的松组图2，芍药提取物甲氨蝶呤组合物对大鼠佐剂性关节炎关节指数的影响
具体实施例方式实施例1 取芍药苷含量为50%芍药提取物500g，甲氨蝶呤lg，先用少量芍药提取物饱和用 于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，先取Ig芍药提取物共同研磨混合均勻，再加入2g芍药 提取物混勻，再加入4g芍药提取物混勻，再加入8g芍药提取物混勻，再加入16g芍药提取 物混勻，再加入32g芍药提取物混勻，再加入64g芍药提取物混勻，再加入128g芍药提取物 混勻，再加入剩余的245g芍药提取物混勻，即得本发明的组合物。实施例2 取实施例1制备的芍药提取物甲氨蝶呤组合物100g，直接装入0号空心硬胶囊制 得胶囊剂，每粒装约0. 4g，即得本发明的组合物延伸制剂胶囊。实施例3 取实施例1制备的芍药提取物甲氨蝶呤组合物400g，用干法制粒制备成组合物颗 粒，过24目标准筛，直接装入0号空心硬胶囊制得胶囊剂，每粒装约0. 4g，即得本发明的组 合物延伸制剂胶囊。实施例4
取芍药苷含量为80%芍药提取物200g，甲氨蝶呤20g，先用少量芍药提取物饱和 用于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，先取20g芍药提取物共同研磨混合均勻，再加入40g 芍药提取物混勻，再加入80g芍药提取物混勻，再加入剩余的60g芍药提取物混勻，即得本 发明组合物。实施例5 取实施例4制备的芍药提取物甲氨蝶呤组合物100g，加入淀粉lOOOg，倍他环糊精 IOOOg,混合均勻后，制成颗粒过50目标准筛整粒，加入压片机压制成片剂，每片重约0. 3g， 即得本发明组合物的延伸制剂片剂。实施例6:取实施例4制备的芍药提取物甲氨蝶呤组合物100g，加入可溶性淀粉lOOOg，蔗糖 lOOOg，混合均勻，制成颗粒过24目标准筛整粒，每袋装lg，即得本发明组合物的延伸制剂颗粒。实施例7 取芍药苷含量为90%芍药提取物7000g，甲氨蝶呤lg，先用少量芍药提取物饱和 用于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，先取Ig芍药提取物共同研磨混合均勻，再加入2g芍 药提取物混勻，再加入4g芍药提取物混勻，再加入8g芍药提取物混勻，再加入16g芍药提 取物混勻，再加入32g芍药提取物混勻，再加入64g芍药提取物混勻，再加入128g芍药提取 物混勻，再加入256g芍药提取物混勻，再加入512g芍药提取物混勻，再加入1024g芍药提 取物混勻，再加入2048g芍药提取物混勻，再加入剩余的2905g芍药提取物混勻，即得本发 明组合物。实施例8 取芍药苷含量为35%芍药提取物3500g，甲氨蝶呤lg，先用少量芍药提取物饱和 用于混合的器械，倒出，加入甲氨蝶呤，先取Ig芍药提取物共同研磨混合均勻，再加入2g芍 药提取物混勻，再加入4g芍药提取物混勻，再加入8g芍药提取物混勻，再加入16g芍药提 取物混勻，再加入32g芍药提取物混勻，再加入64g芍药提取物混勻，再加入128g芍药提取 物混勻，再加入256g芍药提取物混勻，再加入512g芍药提取物混勻，再加入1024g芍药提 取物混勻，再加入剩余的1453g芍药提取物混勻，即得本发明组合物。本发明芍药提取物甲氨蝶呤组合物对大鼠佐剂性关节炎的药效试验。以下试验中所用的芍药提取物甲氨蝶呤组合物为实施例1制备的组合物。1、目的芍药提取物甲氨蝶呤组合物对大鼠佐剂性关节炎的药效。2、动物SD大鼠体重180+20g，雄性3.方法3. 1实验分组SD大鼠，随机分为4组，即正常组、模型组、芍药提取物甲氨蝶呤组 合物组和阳性对照药强的组。每组12只。3. 2AA模型诱导大鼠足爪皮内注射福氏佐剂(CFA)O. Iml,同时设生理盐水对照 组。炎症出现后用药，用药10天。CFA的配制方法将IOmg卡介苗加入Iml石蜡油中，充 分混勻后置4°C冰箱中过夜，注射前再进行充分混勻。3. 3给药时间及用药方法诱导后，每天观察足爪肿胀，足爪评分，足爪出现红肿， 开始用药。灌胃给药，每天一次，用药12天。d28，处死大鼠，观察药效指标。
3. 4检测指标(1)足爪肿胀度的测定用足爪容积测量仪于致炎前，致炎后dl2、dl6、d20、d24、 d28定期检测大鼠足爪肿胀度。(2)全身病变体重变化，前肢、耳和尾部病变的发生率和严重度。(3)关节指数按0-4五级评分，0 =无红肿；1 =小趾关节稍肿；2 =趾关节和足 跖肿胀；3 =踝关节以下的足爪肿胀；4 =包括踝关节在内的全部足爪肿胀。4、结果4. 1对足爪肿胀度的影响1)大鼠足爪皮内注射CFA(10g/L)0. 1ml，用足爪容积测量仪于致炎后dl2、dl6、 d20、d24、d28定期检测大鼠足爪肿胀度。结果显示足爪肿胀度定期检测值模型组均较正 常对照组明显增加(P <0.05)，见图1。2)阳性对照药强的松10mg/kg灌胃给药(ig)后第3天(d3)、(！7、dll测量足爪容 积，与模型组比较，足爪肿胀度均明显减轻(P < 0. 05-0. 01)，见图1。3)芍药提取物甲氨蝶呤组合物100mg/kg灌胃给药(ig)后d3、d7、dll测量 足爪容积，与模型组比较，可见芍药提取物甲氨蝶呤组合物组足爪肿胀度均明显减轻(P
<0. 05-0. 01)，见图 1。4. 2对全身病变体重变化，前肢、耳和尾部病变的发生率和严重度1)分别于注射佐剂致炎后dl6(给药前)、致炎后d20(给药d3)、致炎后d24(给 药d7)和致炎后d28(给药dll)称体重，计算体重增量。增量(g)=给药后体重-给药前 体重。结果显示，模型组与对照组比较，体重明显下降；与模型组相同，芍药提取物甲氨蝶呤 组合物组体重也明显下降，但没有明显的规律。2)观察记录前肢、耳和尾部病变的发生率和严重度，除对照组，模型组和各受试药 物组在致炎后随时间而发生后肢被注射部位不同程度的肿胀，部分发生溃疡或溃烂，前肢 和耳发生轻度肿胀、部分大鼠尾巴发生结节，其发生率和严重度在给药前基本是一致的。在 开始给药后，芍药提取物甲氨蝶呤组合物组全身病变的没有发生进一步的恶化，开始减轻。4. 3对关节指数的影响1)大鼠足爪皮内注射CFA(10g/L)0. 1ml，按0-4五级评分，于给药后d3、d7、dll 定期评估关节指数。结果显示关节指数评估积分模型组均较正常对照组明显增加(P
<0.01)，见图 2。2)阳性对照药强的松10mg/kg灌胃给药(ig)后d3、d7、dll评估关节指数，与模 型组比较，关节指数评估积分均明显减少(P < 0. 05-0. 01)，见图2。3)芍药提取物甲氨蝶呤组合物100mg/kg灌胃给药(ig)后d3、d7、dll评估关节 指数，与模型组比较，可见芍药提取物甲氨蝶呤组合物组呈剂量依赖减少关节指数积分(P
<0. 05-0. 01)，见图 2。本发明芍药提取物甲氨蝶呤组合物志愿者药物试验。试验药物为实施例5制备的芍药提取物甲氨蝶呤组合物片剂，以及同法制备的甲 氨蝶呤片剂和芍药提取物片剂。选取了 70位患类风湿关节炎志愿者进行临床观察，70位类 风湿关节炎完全出于自愿，均签订了知情同意书，都符合美国风湿病协会类风湿关节炎修 订分类标准(1987)和活动性类风湿关节炎标准，近期未接受糖皮质激素或抗类风湿关节炎药物治疗，无心、肝、肾等重要脏器疾病。随机分为两组，每组组35例。试验组(芍药提 取物甲氨蝶呤组合物片剂组)每人每天一次，每次两片芍药提取物甲氨蝶呤组合物片；对 照组(甲氨蝶呤片与芍药提取物片联合用药组)每人每天一次，每次2片甲氨蝶呤片、2片 芍药提取物；连续服用12周。观察指标晨僵时间；双手握力；关节压痛数；关节肿胀数；血沉(ESR，魏氏法)及 C-反应蛋白(CRP，火箭电泳法)；肝功能检测谷丙转氨酶(ALT)；血液白细胞检测；观察不 良反应等。于治疗前及治疗期间每隔4周重复检查并记录。疗效标准主要以晨僵、握力、关节压痛数、肿胀数、ESR、CRP指标作为评价指标， 以下降(握力为增加)50%作为有效计。评定级别晨僵时间< 15min ；握力改善；无关节 压痛；无关节肿胀；ESR < 20mm/h或30mm/h (女性)。上述5项中至少具备4项者为临床缓 解；5项中至少3项达到上述有效者为显效；5项中至少2项达到上述有效者为有效；5项中 不足2项达到“有效”者为无效。分别于治疗前和治疗后4、8、12周观察并记录检测结果，其结果如下表表1患者疗效比较 从以上患者疗效比较可以看出，芍药提取物甲氨蝶呤组合物治疗类风湿关节炎的 效果要好于芍药提取物与甲氨喋呤联合用药效果。经过12周治疗后，不良反应观察情况如下表2不良反应情况观察表 从不良反应对比可以看出，芍药提取物甲氨蝶呤组合物治出现不良反应的人数比 芍药提取物与甲氨喋呤联合用药要少，组合物未出现白细胞减少与谷丙转氨酶升高等较为 严重的不良反应。
权利要求
一种芍药提取物甲氨蝶呤组合物，其特征是由芍药提取物与甲氨蝶呤按重量份比为芍药提取物∶甲氨蝶呤＝1～8000∶1的比例制成的组合物。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征是所述芍药提取物是指由芍药或白芍或赤芍 中提取获得，其中指标性成分芍药苷的含量为30% 100%。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征是甲氨蝶呤为4-氨基-10-甲基叶酸及结构 相似物的混合物，主要成分为L-(+)-N-[4-[[(2，4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲氨基]苯 甲酰基]谷氨酸(C2QH22N805)，按干燥品计算，含C2QH22N805不得少于90. 0%。
4.根据权利要求1所述的组合物，其特征是该组合物可制成片剂或胶囊剂或栓剂或颗 粒剂或与其他药物复方制剂。
5.一种制备权利要求1所述的芍药提取物甲氨蝶呤组合物的制备方法，其特征是采用 等量递增法或等倍递增法混合方法，即先用少量芍药提取物饱和用于混合的器械，倒出，加 入甲氨蝶呤，取与甲氨蝶呤等量的芍药提取物共同研磨混合均勻，再加入与混合粉等量的 芍药提取物混勻，如此反复加入混合，直至量大组分加完，混勻。
6.一种芍药提取物甲氨蝶呤组合物在治疗类风湿中的应用。
全文摘要
本发明提供一种芍药提取物甲氨蝶呤组合物及其制备方法与应用，由芍药提取物与甲氨蝶呤配制而成，其治疗类风湿的效果不仅好于甲氨蝶呤单用效果，而且好于甲氨蝶呤与白芍总苷联合用药的效果，同时可以大大减轻或避免甲氨蝶呤引起的肝损害、嗜睡、食欲不振等不良反应。
文档编号A61K36/71GK101926860SQ20101016794
公开日2010年12月29日 申请日期2010年5月7日 优先权日2010年5月7日
发明者周海滨, 张新明, 杨海玲, 江海龙 申请人:宁波立华制药有限公司