专利名称：一种中药制剂补中益气合剂的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种中药制剂的检测方法，具体的说，本发明涉及中成药补中益气合剂的检测方法。
背景技术：
补中益气合剂是由黄芪(蜜炙)、党参、甘草(蜜炙)、白术、当归、升麻、柴胡、陈皮、生姜、大枣等十味中药组成，国内有多种剂型上市。但经我们研究发现，现有的补中益气合剂存在质量控制方法落后，产品质量不易控制的缺点。现有质量控制方法中并没有对甘草、当归和陈皮进行鉴别，或对黄芪甲苷成分进行含量测定。故现有质量控制方法不能有效控制补中益气合剂的质量，从而将影响产品的生产和保证质量。为有效控制产品质量，我们建立了补中益气合剂的新的质量控制方法，该方法采用薄层色谱法对甘草、当归和陈皮进行鉴别，采用高效液相色谱法对黄芪甲苷进行含量测定。该质量控制方法专属性、稳定性、准确性均较好，能确保产品质量的安全稳定、有效可控。
发明内容
本发明的目的在于提供一种补中益气合剂的检测方法。本发明所述的补中益气合剂是由如下重量份的中药原料药制成的黄芪(蜜炙)280g、党参84g、甘草(蜜炙)140g、白术84g、当归84g、升麻84g、柴胡84g、陈皮84g、生姜^g、大枣56g以上组成制成的药物制剂为液体制剂1000ml，以上组成是按重量份作为配比的， 在生产时可按照相应比例增大或减少。本发明补中益气合剂的制备方法可以采用以下方法白术、陈皮、当归提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣和生姜照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用50%乙醇作溶剂，渐渍M小时，进行渗漉，漉液回收乙醇；黄芪、 党参、甘草、升麻、柴胡、大枣等六味加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至1000ml，与上述水溶液、漉液合并，静置，滤过，浓缩至约1000ml，加入苯甲酸钠3g，放冷， 加入上述挥发油，调整总量至1000ml，搅勻，即得。本发明提供的是针对以上补中益气合剂的检测方法，为控制补中益气合剂的质量，我们提供了如下检测方法本发明所述检测方法包括以下主要步骤(1)对本发明药物制剂中的甘草、当归和陈皮进行鉴别；(2)测定本发明药物制剂中黄芪甲苷成分的含量。本发明的鉴别方法是以下方法的一种或几种1)取本品30ml，加盐酸1ml，用氯仿振摇提取3次，每次10ml，氯仿液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成每Iml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30 60°C )-甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸(10 20 7 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的磷钼酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2)取本品30ml，加等量的石油醚(30 60°C )，振摇提取，分取石油醚提取液，自然挥散至约1ml，作为供试品溶液。另取当归对照药材0. 5g，置具塞试管中，加石油醚(30 60°C)aiil，振摇，浸渍2小时，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各20μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯(3 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。3)取本品30ml，用石油醚(30 60°C )振摇提取2次，每次25ml，石油醚液备用； 水溶液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(32 17 幻的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。本发明的含量测定方法为以下的方法照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 (35 65)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0. 4mg 的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次 25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，离心，取上清液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液5 μ 1、20 μ 1及供试品溶液10μ 1，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。本品每Iml含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0. 05mg。本发明提供了甘草、当归和陈皮的薄层色谱鉴别，选择了君药黄芪中有效成分黄芪甲苷作为含量测定指标，建立了补中益气合剂的含量测定方法；经过多次重复试验，确认方法简便、重复性良好，可以作为补中益气合剂的质量控制指标。
具体实施例方式通过下面的实施例对本发明作更加详细的说明，但不作为限制作用。实施例1 取白术84g、陈皮84g、当归8 提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集； 药渣和生姜^g照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用50%乙醇作溶剂，渐渍M小时，进行渗漉，漉液回收乙醇；取黄芪(蜜炙)280g、党参84g、甘草(蜜炙)140g、升麻84g、柴胡84g、 大枣56g等六味加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至1000ml，与上述水溶液、漉液合并，静置，滤过，浓缩至约IOOOml，加入苯甲酸钠3g，放冷，加入上述挥发油，调整总量至1000ml，搅勻，即得。同法分批制备，共制得药物共计十个批次，分别为080901、080902、080903、 080904、081001、081002、081003、081004、081101和 081102。以上十批药物的检测方法包括以下方法1)取本品30ml，加盐酸1ml，用氯仿振摇提取3次，每次10ml，氯仿液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取甘草次酸对照品，加乙醇制成每Iml 含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(30 60°C )_甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸(10 20 7 0.5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的磷钼酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2)取本品30ml，加等量的石油醚(30 60°C )，振摇提取，分取石油醚提取液，自然挥散至约1ml，作为供试品溶液。另取当归对照药材0. 5g，置具塞试管中，加石油醚(30 60°C)aiil，振摇，浸渍2小时，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各20μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯(3 1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。3)取本品30ml，用石油醚(30 60°C )振摇提取2次，每次25ml，石油醚液备用； 水溶液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水(32 17 幻的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。含量测定照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水 (35 65)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0. 4mg 的溶液，即得。供试品溶液的制备精密量取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次 25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，离心，取上清液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液5 μ 1、20 μ 1及供试品溶液10μ 1，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。
本品每Iml含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0. 05mg。药物检测结果为
表1十批生产药物样品检测结果
权利要求
1.一种补中益气合剂的检测方法，所述合剂由黄芪^0g、党参84g、甘草140g、白术 84g、当归84g、升麻84g、柴胡84g、陈皮84g、生姜28g和大枣56g加工制成，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤(1)对合剂中的甘草、当归和陈皮进行鉴别；(2)测定合剂中黄芪甲苷成分的含量。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，合剂中的甘草鉴别过程取合剂30ml，加盐酸1ml，用氯仿振摇提取3次，每次10ml，氯仿液蒸干，残渣加乙醇 2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取甘草次酸对照品，加乙醇制成每Iml含0. 2mg 的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，30 60°C以体积比为10 20 7 0. 5 石油醚-甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的磷钼酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.根据权利要求1所棕的检测方法，其特征在于，合剂中的当归鉴别过程取合剂30ml，30 60°C加等量的石油醚，振摇提取，分取石油醚提取液，自然挥散至约 lml，作为供试品溶液；另取当归对照药材0. 5g，置具塞试管中，30 60°C加石油醚^il,振摇，浸渍2小时，取上清液作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VIB薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各20 μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以体积比3 1环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，合剂中的陈皮鉴别过程取合剂30ml，用30 60°C石油醚振摇提取2次，每次25ml，石油醚液备用；水溶液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比32 17 5三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述含量测定方法包括以下步骤照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比35 65乙腈-水为流动相；蒸发光散射检测器检测，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含0. 4mg的溶液，即得；供试品溶液的制备精密量取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次25ml， 合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，离心，取上清液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液5 μ 1、20 μ 1及供试品溶液10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得；本品每Iml含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0. 05mg。
6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述合剂的制备方法为白术、陈皮、当归提取挥发油，蒸馏后的水溶液另器收集；药渣和生姜照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用50%乙醇作溶剂，渐渍M小时，进行渗漉，漉液回收乙醇；黄芪、党参、甘草、升麻、柴胡、大枣等六味加水煎煮三次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至 1000ml，与上述水溶液、漉液合并，静置，滤过，浓缩至约1000ml，加入苯甲酸钠3g，放冷，加入上述挥发油，调整总量至1000ml，搅勻，即得。
7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括以下步骤取合剂30ml，加盐酸1ml，用氯仿振摇提取3次，每次10ml，氯仿液蒸干，残渣加乙醇 2ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；另取甘草次酸对照品，加乙醇制成每Iml含0. 2mg 的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，30 60°C以体积比为10 20 7 0. 5 石油醚-甲苯-醋酸乙酯-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%的磷钼酸乙醇溶液，在105°C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。取合剂30ml，30 60°C加等量的石油醚，振摇提取，分取石油醚提取液，自然挥散至约 lml，作为供试品溶液；另取当归对照药材0. 5g，置具塞试管中，30 60°C加石油醚anl，振摇，浸渍2小时，取上清液作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各20μ 1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G 薄层板上，以体积比3 1环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。取合剂30ml，用30 60°C石油醚振摇提取2次，每次25ml，石油醚液备用；水溶液用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比32 17 5三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%三氯化铝乙醇溶液，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。所述含量测定方法包括以下步骤照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比35 65 乙腈-水为流动相；蒸发光散射检测器检测，理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含Ojmg的溶液，即得；供试品溶液的制备精密量取本品20ml，用水饱和的正丁醇振摇提取5次，每次25ml， 合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，正丁醇提取液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至IOml量瓶中，加甲醇至刻度，摇勻，离心，取上清液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液5 μ 1、20 μ 1及供试品溶液10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得；本品每Iml含黄芪以黄芪甲苷(C41H68O14)计，不得少于0. 05mg。
全文摘要
本发明涉及一种中药制剂补中益气合剂的检测方法，所述合剂由黄芪280g、党参84g、甘草140g、白术84g、当归84g、升麻84g、柴胡84g、陈皮84g、生姜28g和大枣56g加工制成，所述检测方法包括以下步骤对合剂中的甘草、当归和陈皮进行鉴别；测定合剂中黄芪甲苷成分的含量。
文档编号A61K36/9068GK102335402SQ20101023408
公开日2012年2月1日 申请日期2010年7月22日 优先权日2010年7月22日
发明者刘艳阳, 黎家检 申请人:江西济民可信药业有限公司, 江西济民可信集团有限公司